外周血T淋巴细胞亚群在EV71型手足口病患者病情判断中的价值

目的探讨肠道病毒71(EV71)型手足口病(HFMD)患儿外周血淋巴细胞亚群与病情严重程度的相关性。方法选取2011年5月~2014年5月在深圳市龙岗中心医院儿科住院的EV71型HFMD患儿150例,根据《手足口病诊治指南(2013年版)》分为普通组100例、重症组50例,两组患儿年龄均为2~5岁;选择同年龄段的90例健康儿童作为对照组。采用流式细胞术检测EV71型HFMD患儿病程第3天及对照组儿童外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分数。重症组患儿按手足口病诊治指南规范治疗5 d后再次检测上述相关指标,并与治疗前进行比较。结果重症组外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分数较对照组及普通组显著降低,差异均有高度统计学意义(P<0.01),重症组CD4+/CD8+比值低于普通组及对照组,差异均有高度统计学意义(P<0.01);重症组患儿经过规范治疗后外周血T淋巴细胞亚群百分数上升,但与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论EV71型HFMD患儿存在细胞免疫功能紊乱,外周血T细胞亚群水平变化可能与患儿病情严重程度存在一定程度的相关性。     

EV71型手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群与血小板相关性研究

目的探讨肠道病毒71型(EV71)手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群与血小板之间的相关性。方法选取2012年3~8月徐州市儿童医院感染性疾病科确诊为手足口病且大便反转录聚合酶链反应检测EV71核糖核酸阳性的患儿77例,根据卫生部《手足口病诊疗指南(2010~年版)》诊断指标分为普通组(不合并中枢神经系统感染)25例和重症组(合并中枢神经系统感染)52例。检测血小板、淋巴细胞总数以及CD_3~+T、CD_4~+T、CD_8~+T、CD_4~+/CD_8~+、自然杀伤细胞(NK)、B淋巴细胞亚群比例。结果重症组手足口病患儿外周血血小板、淋巴细胞计数均高于普通组[(347±101)×10~9/L比(273±87)×10~9/L;3.6(2.7,4.8)×10~9/L比2.9(1.9,3.5)×10~9/L];重症组患儿外周血CD_3~+T细胞、CD_8~+T细胞比例均低于普通组[(47.09±11.06)%比(56.42±11.59)%;22.96(19.77,28.65)%比30.67(22.15,37.97)%],差异有统计学意义(P<0.05)。重症组B细胞比例高于普通组[41.62(27.27,50.44)%比24.10~(21.17,35.15)%],差异有统计学意义(P<0.05)。两组外周血白细胞计数和NK、CD_4~+T、CD_4~+/CD+8细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。77例手足口病患儿血小板计数与CD_3~+T细胞比例呈负相关(r=-0.475,P<0.05),与B细胞比例呈正相关(rs=0.483,P<0.05)。结论血小板影响手足口病患儿免疫功能,血小板与重症手足口病的发病有关。     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群变化

目的探讨手足口病患儿T淋巴细胞亚群变化。方法收集2011年7月至2016年3月我院手足口病患儿资料采用流式细胞术进行T淋巴细胞亚群(CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+)水平测定。结果 327例手足口患儿总T淋巴细胞CD3~+、辅助/诱导T淋巴细胞CD3~+CD4~+、抑制/细胞毒性T淋巴细胞CD3~+CD8~+、CD4~+/CD8~+比值水平均低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论手足口患儿具有明显的免疫功能下降及免疫调节紊乱。     

手足口病并发脑炎患儿T淋巴细胞亚群的变化

目的探讨手足口病(HFMD)并发脑炎患儿T淋巴细胞亚群的变化及诊断意义。方法 40例HFMD患儿根据是否并发脑炎分为HFMD组和HFMD并发脑炎组,每组20例;另选择健康儿童20例作为健康对照组;比较3组受试者外周血T淋巴细胞亚群水平。结果 HFMD组和HFMD并发脑炎组患儿外周血CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+显著低于健康对照(P<0.05);HFMD并发脑炎组患儿外周血CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+显著低于HFMD组(P<0.05)。结论 HFMD并发脑炎患儿T淋巴细胞亚群水平低下,免疫功能差,监测T淋巴细胞亚群水平有助于HFMD并发脑炎的诊断及病情严重程度评估。     

676例手足口病患儿T淋巴细胞亚群的临床分析

目的 总结手足口病(HFMD)患儿T淋巴细胞亚群的变化趋势,为临床治疗及预后评估提供依据.方法 采用流式细胞仪检测2009年3月1日至2011年12月31日,在南宁市第四人民医院住院的676例手足口病患儿急性期的T淋巴细胞亚群;对其中106例重症及危重症患儿咽拭子和肛试子标本进行RT-PCR以确定病原.对不同样本行独立样本,t检验、配对t检验或方差分析.结果 570例普通病例患儿中555例的急性期T淋巴细胞亚群均数与同龄婴幼儿及儿童正常参考水平一致,仅有15例低于正常均数;106例重症及危重症患儿T淋巴细胞亚群计数较普通病例患儿明显降低,差异有统计学意义.结论 HFMD患儿细胞免疫功能普通组与正常儿童比较没有明显变化,而重症和危重症组明显降低,细胞免疫功能状况可作为判断病情和预后的重要指标,同时对重症及危重症病例临床治疗具有重要指导意义.     

手足口病患儿淋巴细胞亚群和免疫球蛋白检测的临床意义

目的 研究HFMD外周血淋巴细胞亚群以及血清免疫球蛋白的变化及临床意义.方法 采用流式细胞术检测56例HFMD和53例健康对照组外周血CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T、CD16＋56＋NK、CD19＋B细胞的百分率;免疫比浊法检测血清IgG、IgA及IgM含量.结果 HFMD与正常对照组比较,CD4＋/CD8＋比值、CD4＋T淋巴细胞百分率及CD19＋B淋巴细胞百分率均明显增高（P 〈0.05）;血清IgG水平升高（P〈0.001）;CD15＋56＋NK细胞百分率明显降低（P〈0.02）;CD3＋T、CD8＋T淋巴细胞的百分率及血清IgM、IgA含量与正常对照组相比差异无统计学意义.结论 HFMD体内细胞和体液免疫功能紊乱,监测HFMD体内淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平,对于HFMD的治疗具有重要的临床意义.     

手足口病脑炎患儿T淋巴细胞亚群研究

目的 探讨手足口病(hand-foot-and-mouth disease,HFMD)脑炎患儿的T淋巴细胞亚群与普通HFMD患儿的区别.方法 回顾性分析2010年1～10月北京佑安医院收治的21例普通HFMD患儿和17例HFMD脑炎患儿的临床资料及T淋巴细胞亚群检测结果.结果 普通HFMD组的住院天数、最高体温较脑炎组显著降低[(6.86±3.34)d vs.(9.47±1.84)d,(38.66±0.50)℃vs.(39.05±0.55)℃;P均＜0.05].普通HFMD患儿的外周血T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞计数分别为(2829±1463)个/μl、(1700±880)个/μl和(939±624)个/μl;脑炎HFMD患儿分别为(2453±990)个/μl(t=0.902,P=0.373)、(1296±566)个/μl(t =1.635,P=0.111)和(995±550)个/μl(t =0.292,P=0.772).结论 T淋巴细胞及其亚群检测对于HFMD脑炎的辅助诊断价值有限.     

2例EV71死亡病例的病理特征及EV71宁波分离株全基因组序列分析

目的探讨2例感染EV71手足口病(HFMD)死亡病例的病理特征及其病原体的分子生物学特征。方法系统分析2例HFMD病例的临床资料及尸检病理结果,并对EV71的PCR结果进行序列分析。结果死者年龄均<3岁,病情进展快,最终出现肺水肿和肺出血死亡。尸检显示:病变主要在中枢神经系统、肺脏以及肠道。大脑及脑干可见明显充血、水肿、炎症、坏死及软化灶等,脑脊膜炎症明显;肺脏显著充血,主要为水肿和出血,肺间质及小血管周围少量炎细胞浸润;肠黏膜充血,空肠及回肠部分区域肠黏膜、黏膜下层、平滑肌层、浆膜均坏死,细胞核消失,胞质及间质溶解,肠壁变薄,肠系膜淋巴结肿大,肠系膜及肠黏膜下淋巴滤泡增生,生发中心坏死;心肌纤维细胞结构正常,心肌间质充血,心肌细胞水肿,心外膜少量炎性细胞浸润;肝、脾、肾、胰腺病理改变不明显。肠内容物及总肠道组织EV 71病毒核酸检测均为阳性。EV 71病毒全基因共7414个碱基,该2株EV71均为C4亚型。结论危重型HFMD(EV 71感染)患者神经系统、呼吸系统病变明显,严重的脑干脑炎、脑膜炎和神经源性肺水肿、肺出血是死亡的主要原因;C4亚型EV71感染的重症HFMD患儿肠道的损害亦极为显著,肠道功能保护不容忽视。     

肠道病毒71感染的手足口病患儿体液免疫检濒及应用价值

目的通过测定手足口病（HFMD）患儿机体血清炎症细胞因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-01）、白细胞介素-6（IL-6）．免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）及补体C3、C4水平,以探讨HFMD患儿体液免疫与HFMD的关系。方法收集舟山医院妇幼保健院区2010年6月-2012年12月HFMD患儿50例,其中30例肠道病毒71（EV71）感染呈阳性,20例呈阴性。另选取同期20例健康体检儿为对照。血清免疫球蛋白如IgA、IgG,IgM和补体C3、C4水平采用放射性免疫扩散法测定,血清TNF-α、IL-6采用化学发光免疫分析法进行测定。结果EV71阳性感染的HFMD患儿血清TNF-α、IL-6、IgA、IgG、IgM及补体C3、C4水平依次为（66．0±11．2）ng／L、（44．3±7．7）ng／L、（0．50±0．37）g／L、（8．09±3．55）g／L、（1．47±0．70）g／L、（0．96±0．51）g／L、（0．21±0．07）g／L,与其他肠道病毒引起HFMD相应指标水平比较,差异无统计学意义（t=0．462、0．734、0．209、0．125、0．259、0．209、0．833,均P〉0．05）,但EV71阳性感染组血清TNF—α、IL-6、IgA、IgG、IgM和补体C3、C4水平与对照组比较,差异均有统计学意义（t=20．398、19．496、4．319、2．756、2．379、2．146、3．148,均P〈0．05）,其中IgA、IgG和补体C3、C4水平较对照组明显降低,而IgM、TNF—α、IL-6则明显升高。结论EV71感染HFMD患儿的体液免疫功能紊乱．TNF—α、IL-6参与了HFMD的病理过程,可为HFMD的临床诊断、疗效观察及预后判断提供一定的理论依据。     

丙种球蛋白对重症EV71感染手足口病患儿细胞因子调节作用的研究

目的 研究静脉注射用丙种球蛋白(IVIG)对重症EV71感染相关手足口病外周血细胞因子的调节作用.方法 根据病情将治疗组患儿分成3组,脑膜脑炎组(ME组)14例、自主神经功能失调组(ANSD组)13例,肺水肿组(PE组)12例,均在入院12h内给予IVIG[lg/(kg ·d),2天]治疗.并设普通手足口病对照组(HFMD组)10例,给予一般治疗.比较治疗组患儿IVIG治疗前后血清中细胞因子TNF-d、IL-2、IL-10、IL-13、IL-6以及INF-γ水平的变化,及各组间年龄、发热时间、血糖、外周血白细胞计数、血清细胞因子水平及T淋巴细胞亚群的差异.结果 在IVIG使用前后,ME组患儿各细胞因子无明显改变,ANSD组患儿IL-13、IL-6明显下降(P＜0.05),PE组患儿IL-10、IL-13、IL-6、INF-γ明显下降(P＜0.05).各组之间比较,随着病情加重,血清中细胞因子IL-10、IL-6、IL-13浓度逐渐升高;血糖、白细胞计数同PE组比较有统计学差异(P＜0.05),同时外周血CD4/CD8比值、NK细胞比例PE组下降最为明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IVIG治疗可调节危重症手足口病患儿的免疫功能,及时使用可改善预后.     

重症71型肠道病毒感染手足口病患儿的免疫指标分析

目的 探讨71型肠道病毒感染手足口病患儿的免疫指标变化情况,分析其临床意义.方法 选取2013年5月至2016年5月我院收治的71型肠道病毒感染所致的手足口病患儿170例为研究对象,按照疾病程度的不同将其分为轻症组80例以及重症组90例,另取同期于我院进行体检的同龄健康儿童70例作为对照组.对三组儿童细胞免疫(免疫表型及炎性因子)以及体液免疫(免疫球蛋白及补体)各指标检测结果进行回顾性分析与比较.结果 重症组患儿CD3+T细胞数量为(59.41±6.08)％、CD3+ CD4+T细胞数量为(17.44±4.20)％,CD3+ CD8+T细胞数量为(26.25±4.58)％;均低于轻症组[分别为(66.33±7.52)％、(20.01±3.86)％、(39.66±4.93％]及对照组[(73.58±7.94)％、(23.75±3.11)％、(51.32±5.07)％]差异有统计学意义(P＜0.05),重症组CD19+B细胞数量为(19.24±8.05)％,高于轻症组(14.68±6.71)％及对照组(12.03±5.22)％,差异均有统计学意义(P＜0.05).三组儿童CD4+/CD8+以及CD16+ CD56+ NK细胞数量相比差异无统计学意义(P＞0.05).重症组患儿IL-6、IL-10以及TNF-α表达水平均高于轻症组及对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).重症组患儿免疫球蛋白及补体表达水平高于轻症组及对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重症71型肠道病毒感染手足口病患儿存在明显的细胞免疫及体液免疫功能紊乱,临床应根据患儿具体情况适当开展免疫治疗.     

病毒唑联合炎琥宁治疗手足口病患儿的效果及其对T淋巴细胞亚群水平的影响

目的观察病毒唑联合炎琥宁治疗手足口病患儿效果及其对T淋巴细胞亚群水平的影响。方法选取2018年3月-2019年3月湖南省儿童医院感染科治疗手足口病患儿110例作为研究对象,随机数字表法分为2组各55例,炎琥宁组使用炎琥宁进行治疗,联合组使用病毒唑联合炎琥宁进行治疗,治疗5 d后,比较2组患儿临床症状消退时间,酶法速率法检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,酶联免疫吸附试验法检测血清白细胞介素-4(IL-4)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,使用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群水平,比较2组治疗效果及不良反应发生情况。结果联合组患儿治疗总有效率显著高于炎琥宁组(94.55%vs.81.82%,χ~2/P=4.274/0.039);治疗后,联合组患儿发热、手足疱疹、口腔溃疡消退时间均短于炎琥宁组(t=9.424、7.806、6.523,P均=0.001);血清CK、LDH、CK-MB、IL-4、hs-CRP、TNF-α、CD8^+水平均低于炎琥宁组(t=3.698、2.894、5.445、4.233、6.882、5.672、5.161,P<0.01),CD4^+、CD3^+水平高于炎琥宁组(t/P=5.444/0.001、4.079/0.001);不良反应发生率略高于炎琥宁组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论病毒唑联合炎琥宁治疗手足口病,可加快患儿临床症状消退速度,改善心肌酶水平,抑制炎性反应,提升免疫功能,治疗效果显著。     

EV71动物模型及其在疫苗研究中的应用

人肠道病毒71型(EV71)是引起手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的主要病原体之一,主要引起5岁以下婴幼儿手-足-口部疱疹,一般症状轻,但少数患儿出现无菌性脑膜炎、脑干脑炎等多种重症中枢神经症状,病程进展迅速,病死率     

EV71型手足口病疫苗的效果评价

目的了解EV71型手足口病疫苗的效果。方法收集2009～2018年手足口病疫情资料,资料来源于国家疾病监测信息管理系统。2016年8月开始购进疫苗,2016～2018年疫苗接种数由各县区上报,病原学结果自2012年开始检测,收集2012～2018年病原学结果。回顾性分析手足口病资料。通过观察2016～2018年EV71型手足口病疫苗的接种数与发病情况的关系,评价疫苗的效果。结果发病年龄主要集中在1岁组和2岁组,分别占40.44%和25.72%。2012年EV71构成比为24.42%,2013年65.57%,2014年22.03%,2015年59.29%,2016年18.70%,2017年32.20%,2018年10.29%,2013年、2015年、2017年EV71是优势菌株。2016年病例数5333例,发病率62.74/10万,2017年病例数是3991例,发病率46.29/10万,2018年病例数4823例,发病率55.21/10万。2017年EV71型重症病例仅有5例,比2013年15例下降66.7%,比2015年19例下降73.68%。2012～2018年手足口病重症病例中EV71型平均阳性率是81.67%。结论 5岁以内特别是1～2岁组是发病的高峰期,2017年EV71是优势菌株。2017年发病率和发病数均低于2016年和2018年。EV71病毒易致重症,2017年EV71流行强度和重症数低于2013年和2015年。虽然接种EV71型手足口病疫苗不能预防所有类型的手足口病,只对EV71型手足口病有效,但能降低发病率和重症率,是目前最经济、最有效的预防手段。     

肠道病毒71型致轻症手足口病患儿血清蛋白质组分析

目的探讨肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV-71)感染致轻症手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的致病机制,筛选相关的血清蛋白生物标志物。方法应用差异荧光双向电泳(Two-dimensional difference ingel electrophoresis,2D-DIGE)分析比较8例轻症手足口病儿童和8名健康儿童血清蛋白表达谱,以DeCyder V6.5软件分析得到有显著差异的蛋白质点,以基质辅助激光解吸离子飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定差异蛋白质。结果建立了轻症手足口病与正常对照的2D-DIGE图谱,经MALDI-TOF-MS/MS鉴定得到14个差异蛋白。与对照组相比,在轻症手足口病组中表达下调的是:Alpha-2-antiplasmin、Antithrombin-III、Vitamin D-binding protein、Fibrinogengamma chain、Apolipoprotein A-IV、Clusterin、Ig lambda chain C regions、Apolipoprotein A-I、Transthyretin、ApolipoproteinC-III、Apolipoprotein A-II;表达上调的是:Leucine-rich alpha-2-glycoprotein、Haptoglobin、Serum amyloid A protein。结论鉴定得到EV-71感染后轻症手足口病患者血清中差异表达的多种蛋白,这些与炎症反应、免疫应答和神经系统相关蛋白质的差异表达与病毒的感染和宿主的防御过程有关,为进一步研究EV-71致病机理提供一定的理论基础,也为寻找潜在的治疗靶点提供了思路。     

ELISA方法检测肠道病毒71型抗体效果分析

目的分析酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对肠道病毒71型（EV71）的检测效果。方法以52份EV71型手足口病阳性患儿和55份正常儿童的血清为样本,用ELISA试剂盒和中和抗体方法分别检测,结果进行对比。结果与中和抗体方法相比较,ELISA方法敏感性为96．2％,特异性为92．7％,总符合率为94．4％。两种检测方法差异无统计学意义（χ^2=0．075,P〉0．05）。结论ELISA方法适用于EV71型手足口病常规诊断。     

肠道病毒71型与柯萨奇A组16型混合感染致手足口病并发中枢神经系统感染临床分析

目的 分析6例肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇A组16型(CoxA16)混合感染所致手足口病并发中枢神经系统感染患者的流行病学及临床特征.方法 回顾性分析6例EV71与CoxA16混合感染(混合感染组)所致手足口病并发中枢神经系统感染的临床特征、实验室检查、预后等,并与单纯EV71(EV71组)、CoxA16(CoxA16组)感染所致手足口病并发中枢神经系统感染患者进行比较.结果 6例EV71与CoxA16混合感染中5例为院外原发混合感染,1例不除外院内交叉感染.EV71与CoxA16混合感染致手足口病并发中枢神经系统感染的临床表现包括发热,手、足、口腔、臀部皮疹,肢体易惊、抖动,颈项强直,呕吐等.EV71组、CoxA16组、混合感染组患者的病情稳定时间分别为(59.0±38.1)h、(58.3±47.9)h、(86.4±44.4)h,体温稳定时间分别为(39.7±26.3)h、(28.3±17.9)h、(54.0±12.0)h,转危重型率分别为7.1%、0、1/6.结论 混合感染所致手足口病并发中枢神经系统感染的临床表现与EV71与CoxA16感染所致的手足口病无明显差别,但病情更重、病程较长,危重型的发生率较高.