银杏叶提取物对失神经骨骼肌酶活性的影响

延缓失神经肌萎是周围神经外科的重要任务之一。我们通过对大鼠坐骨神经损失后，银杏叶提取物(EGb761)对失神经骨骼肌Na^ -K^ -ATP酶及Ca^2 -ATP酶活性影响的观察，研究其对失神经骨骼肌萎缩的保护作用。     

七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

目的 评价七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响,探讨其减轻心肌缺血再灌注损伤的机制.方法 健康雄性Wistar大鼠45只,体重250～280 g,随机分为3组(n=15):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚后处理组(Spo组).I/R组和Spo组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注模型,S组仅在左冠状动脉前降支下穿线.Spo组再灌注前1 min开始吸入2.5%七氟醚持续5 min.于再灌注2 h时取心肌组织,测定心肌梗死体积、Na+-K+-ATP酶活性和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与S组比较,I/R组心肌梗死体积扩大,心肌组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性降低(P＜0.05);与I/R组比较,Spo组心肌梗死体积缩小,心肌组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性升高(P＜0.05).结论七氟醚后处理可提高Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

严重烧伤大鼠胃粘膜血流量和Na^＋—K^＋—ATP酶活性的改变及对胃粘膜电位差的影响

目的观察大鼠严重烧伤后胃粘膜血流量(GMBF)和Na+-K+-ATP酶活性的变化,探讨其对胃粘膜电位差(GTPD)的影响. 方法制作烧伤大鼠模型,分别采用激光多普勒微循环血流计、电生理记录仪和生化法,检测大鼠伤前及伤后3、6、12、24、48 h时GMBF、GTPD和胃粘膜Na+-K+-ATP酶活性的改变;另设正常大鼠为对照组,于相同时相点检测以上指标.随后对各指标进行相关性分析. 结果与对照组比较,大鼠烧伤后3 ～24 h GMBF与Na+-K+-ATP酶活性均明显降低(P<0.05～0.01),GTPD于伤后6～48 h明显下降(P<0.05～0.01),3项指标均于12 h时降至最低.相关性分析结果显示Na+-K+-ATP酶活性随GMBF的降低而下降(r=0.417,P<0.01);GMBF的减少或Na+-K+-ATP酶活性的降低,均可引起GTPD降低(r=0.453或0.527,P<0.01). 结论大鼠严重烧伤后,GMBF减少,Na+-K+-ATP酶活性降低,二者均为引起胃粘膜屏障功能受损的主要原因.     

氯胺酮对大鼠大脑皮质和丘脑突触体ATP酶活性的影响

目的 动态观察氯胺酮对大鼠大脑皮质和丘脑Na+-K+ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响。方法 SD大鼠32只,随机分为四组:对照组、麻醉组、恢复I组和恢复Ⅱ组。对照组给予腹腔注射生理盐水10 ml·kg-1,10 min后断头;其它三组均为腹腔注射氯胺酮100 mg·kg-1。其中麻醉组在大鼠翻正反射消失后断头;恢复I组在大鼠翻正反射恢复后断头;恢复Ⅱ组在大鼠完全清醒后断头。在生理盐水冰面上分离双侧大脑皮质和丘脑,以分光光度法测大脑皮质和丘脑Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性。结果大鼠腹腔注射氯胺酮后,其大脑皮质的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性分别较对照组降低32.8％和26.2％(P<0.05);丘脑的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性也分别较对照组降低31.4％和24.5％(P<0.05);大鼠翻正反射恢复后和动物完全清醒后两种ATP酶活性的变化与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的改变在氯胺酮全麻作用机制中可能起重要作用。     

地氟醚对大鼠肺泡Ⅱ型细胞Na+-K+-ATP酶活性的影响

地氟醚(Desflurane,Des)作为一种新型的氟化麻醉剂,是否对Ⅱ型细胞Na+ -K+ -ATP酶产生同样的影响尚不清楚。本实验采用分离培养的大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(ATⅡ细胞),观察地氟醚对Ⅱ型细胞Na+ -K+ -ATP酶活性的影响,并探讨其可能机制。     

银杏叶提取物对周围神经损伤后运动神经元的保护作用

目的　研究银杏叶提取物在大鼠坐骨神经损伤后对运动神经元的保护作用。方法　SD大鼠 3 6只 ,按手术先后随机平分为银杏叶提取物 (EGb 761)组和生理盐水 (SAL)组。大鼠均制成坐骨神经部分切除后结扎断端的模型 ,术后每天经腹腔分别注射EGb 761(10 0mg/kg-1·d-1)和同体积的生理盐水直到取材。术后 2、4、6周取材 ,大鼠处死后取L4～ 6节段脊髓 ,经酶组化染色后观察乙酰胆碱脂酶 (AChE)及酸性磷酸酶 (ACP)的活性变化 ;冰冻切片硫槿染色后对前角大型运动神经元计数 ;电镜观察脊髓前角运动神经元超微结构的变化。结果　与对照组相比 ,银杏叶提取物组的乙酰胆碱脂酶、酸性磷酸酶活性、损伤侧前角运动神经元数目及前角运动神经元超微结构 ,均有明显的改善。结论　银杏叶提取物对周围神经损伤后的脊髓前角运动神经元损害有保护作用     

外源性促红细胞生成素对失神经骨骼肌萎缩的影响

目的 探讨外源性促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对失神经骨骼肌萎缩的影响.方法 取雄性SD大鼠24只,体重200～220 g,于右侧梨状肌下缘切断坐骨神经,制备小腿三头肌失神经支配模型.模型制备后随机分为两组(n=12),EPO组:术后每天右小腿腓肠肌注射rhEPO(2 500 U/kg);对照组:注射等体积生理盐水.术后观察动物一般情况,于第2、4周检测肌湿重、肌肉蛋白含量,行HE及TUNEL染色,测量肌细胞直径、横切面积及细胞凋亡率,并测定肌肉Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性.结果 术后两组动物右后肢均拖膝行走,切口无感染,动物均存活至实验完成,4周时对照组5只及EPO组2只大鼠发生足跟溃疡.术后2、4周EPO组肌湿重分别为(885.2.35)、(697.62±94.74)g,均明显重于对照组(760.63±109.05)、(458.71±58.76)g(P<0.01);肌肉蛋白含量分别为(77.37±5.24)、(66.37±4.87)mg/mL,明显高于对照组(65.39±4.97)、(54.62±6.32)mg/mL(P<0.01).术后2、4周EPO组肌纤维形态基本正常;对照组肌纤维萎缩变细,部分断裂,肌束问结缔组织增生较明显;EPO组肌细胞直径和横切面积明显大于对照组(P<0.01).术后2、4周,EPO组骨骼肌细胞凋亡数明显少于对照组,EPO组腓肠肌细胞凋亡率分别为11.80%±1.74%、28.47%±1.81%,明显低于对照组21.48%±2.21%、55.89%±2.88%(P<0.01).术后2、4周EPO组Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性均高于对照组(P<0.01).结论 EPO具有明显延缓大鼠失神经骨骼肌萎缩的作用.     

复方电解质注射液对回收红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性和血液流变学的影响

目的比较复方电解质注射液和复方乳酸钠注射液对回收红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性和血液流变学的影响,旨在探讨影响回收血液质量的原因,改良血液回收技术。方法选择骨科或脑外科手术中需行血液回收的患者40例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机均分为复方电解质注射液组(A组)和复方乳酸钠注射液组(L组)。检测两组血液回收前、回收后红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、红细胞刚性指数(TK)、红细胞聚集指数(Arbc)、红细胞电泳时间(EPT),检测输注后机体红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。结果与回收前比较,两组回收后、输注后红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均显著降低(P<0.01)。与A组比较,L组回收后红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性显著降低(P<0.01),而输注后两组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性差异无统计学意义。与回收前比较,两组回收后红细胞TK均显著升高(P<0.01)。与L组比较,A组回收后红细胞TK明显降低(P<0.05);两组回收前、回收后Arbc值差异无统计学意义。与回收前比较,两组回收后EPT值均缩短,但差异无统计学意义。直线相关分析显示,回收前和回收后红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、TK的变化无显著相关性(L组:r=0.382;A组:r=0.0081)。结论采用复方电解质注射液冲洗回收红细胞可减轻血液回收过程中Na+-K+-ATP酶活性的损害、改善红细胞变形力。改良血液回收冲洗液可能改善回收红细胞质量和血液流变学,促进组织氧供,稳定机体生理环境。     

高压氧保存对离断肢体保护作用实验研究

目的 :探讨高压氧 (HBO)保存对离断肢体的影响。方法 :大鼠右后肢离断后 ,分别放在HBO下和室内空气中保存 ,测定骨骼肌Na+ -K+ -ATP酶和Ca2 + -ATP酶活性并观察骨骼肌超微结构改变。再选用大鼠 30只进行肢体离断后原位再植 ,随机分为对照组、HBO组、室内空气组。于再植术后 2 4h测定每份血清肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶的含量。到术后第 10d评价肢体成活率。结果 :HBO中保存对酶活性和超微结构的影响皆明显优于室内空气中保存。再植术后 2 4h血清酶含量 ,高压氧组较室内空气组低 (P <0 .0 1)。HBO组成活率为 10 0 % ,而室内空气组为5 0 % ,有显著差异 (x2 =6 .6 7,P <0 .0 5 )。结论 :HBO保存对大鼠离断肢体具有保护作用。     

丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性的影响

目的 研究丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性及心肌组织形态学的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分成五组,每组8只:对照组(C组),缺血-再灌注组(IR组),丙泊酚1组(P1组),丙泊酚2组(P2组),丙泊酚3组(P3组).各组于再灌注60 min后立即取左室心尖部心肌,检测心肌匀浆中心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性;光镜下观察心肌组织形态学变化.结果 IR时心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与C组相比明显下降(P<0.01);O1、P2、P3组心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与IR组相比明显升高,但仍低于C组(P<0.05).结论 丙泊酚可以减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与恢复心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性有关.     

CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用

目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8+T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例较正常人明显升高,分别为(10.15±1.00)%、(5.30±1.64)%和(3.20±1.18)%,P<0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4+CD25+FOXP3+T比例明显升高,分别为(15.15±1.50)%和(6.80±1.50)%,P<0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3+T细胞增多,CD8+T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8+T细胞浸润,加速肿瘤复发.     

CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤免疫中的作用研究

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在自身免疫耐受、免疫自稳、肿瘤免疫中发挥着重要作用,它可以抑制自身抗原或者非自身抗原如肿瘤抗原引起的免疫反应.人们对Treg细胞的免疫抑制作用已进行了相关的研究和临床应用,最新研究表明其能够诱导肿瘤特异性抗原和局部的免疫反应.此综述将讨论Treg细胞的相关表面分子及其在肿瘤免疫...     

慢性肾炎患者血浆海蟾蜍毒素水平及其肾脏受体表达变化

目的 了解慢性肾小球肾炎（CGN）患者血浆海蟾蜍毒素（MBG）水平及其受体Na+-K+-ATP酶（NKA）在肾组织中的表达情况。 方法 竞争抑制ELISA法测定28例CGN患者和14例健康人血浆MBG浓度。应用免疫荧光共聚焦、免疫组化和图像分析技术检测CGN患者肾组织内NKA的表达部位及表达量。 结果 CGN患者血浆MBG浓度低于健康对照组[（0.579±0.214） nmol/L比（0.715±0.154） nmol/L,P < 0.05],其中高血压者与血压正常者血浆MBG浓度差异无统计学意义[（0.595±0.231） nmol/L比（0.557±0.197） nmol/L,P > 0.05]。血浆MBG浓度与24 h尿钠排泄量无相关（r = -0.022,P > 0.05）。与正常肾组织比较,CGN患者近端肾小管NKA表达下降,肾小管NKA表达阳性面积百分比明显减少[2.1%（0.5%~6.2%）比 5.6%（3.5%~10.8%）,P < 0.01],且与24 h尿钠排泄量呈正相关（r = 0.551,P < 0.01）。 结论 CGN患者血浆MBG水平及其受体NKA在近端肾小管表达的下降可能参与CGN患者钠代谢调节。     

大电导钙激活钾通道与心血管保护

背景 大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+ channels,BKCa)可能是各类心脏疾病的重要治疗靶点. 目的 主要阐述如何通过调节心肌及血管平滑肌的BKCa通道而发挥保护心肌作用及其相关机制. 内容 在心肌细胞的线粒体上,BKCa通道能够有效地调节线粒体的活性氧、Ca2+和呼吸作用.在血管平滑肌细胞,BKCa通道能调节血管紧张度,促进血管扩张. 趋向 BKCa通道在心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤中有着重要的作用,包括改善心肌功能和减少梗死面积.     

Biocompatibility Study Based on Differential Sequestration Kinetics of CD14+CD16+ Blood Monocyte Subsets with Different Dialyzers

The immune defect in hemodialysis (HD) patients is associated with a monocyte dysfunction, including an increase in the production of proinflammatory cytokines. Blood membrane contact leads to an increase in cellular activation and sequestration into the capillary bed of the lung. The influence of the sequestration on the number of mature monocytes was studied by analyzing the fate of monocytes, particularly, the CD14+CD16+ subpopulation, during HD treatment.

In thirty stable HD patients, the distinct cell populations were determined by differential blood counts and flow cytometry. Patients with diabetes or systemic vasculitis, those showing evidence of infectious complications or malignancy, or those taking immunosuppressive medications were excluded from the study. Cells from this study population were analyzed before the start, 30 min thereafter, and at the end of HD treatment, each time using a different dialyzer: hemophan, methylmethacrylate (PMMA), triacetate membrane, cuprophane/vitamin E, acrylonitrile, and sodium methallylsulfonate polymer (AN69).

The CD14+CD16+ subset decreased at 30 min and remained suppressed for the course of dialysis. To examine whether currently used biocompatible membranes differ in their effect on the sequestration of monocyte subpopulations, temporal monocytic changes were comparatively analyzed during HD with a different dialyzer. The drop in the first 30 min until the end of HD treatment was significant (p<0.05), very uniform, and sharp in all patients, and was independent upon membrane type.

The CD14+CD16+ monocyte subpopulation showed increased and longer margination from the blood circulation during HD. Given the fact that CD14+CD16+ monocytes represent a sensitive marker for inflammation or cellular activation, the depletion of these cells may offer an easily accessible parameter that is more sensitive than complement activation for biocompatibility studies on forthcoming, improved dialyzer membranes.     

Na^＋-H^＋换泵1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中Na^＋-H^＋交换泵1（NHE1）的表达水平及其与临床病理资料的关系.方法 分别应用RT-PCR和Western blot方法检测60例胃癌组织及其相匹配的癌旁胃黏膜组织中NHE1 mRNA及蛋白的表达情况,并进一步分析其表达与胃癌临床病理资料的关系.结果 本组60例患者胃癌组织中NHE1 mRNA及蛋白表达的相对表达量分别为0.786±0.291和1.442±0.175,高于癌旁组织的0.369±0.052和0.348±0.029,差异均有统计学意义（均P〈0.01）.胃癌组织中NHE1 mRNA表达和NHE1蛋白表达显著相关（r=0.264,P〈0.05）.NHE1 mRNA和蛋白表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（均P〈0.05）,而与年龄、性别及分化程度无关（P〉0.05）.结论 胃癌组织中的NHE1 mRNA及蛋白的表达水平均显著升高,可能参与了胃癌的发生发展进程.     

CD4+CD25+调节性T细胞对小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的影响

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞在诱导自发性肝脏免疫耐受中的作用.方法 向受体和供体注射抗CD25抗体(PC61)后进行小鼠原位肝脏移植,观测其生存时间.术后20～30 d切取移植肝脏行HE染色,同时观察CD4+CD25+T细胞对CD4+T细胞和CD8+T细胞功能的影响.结果 去除受体而不是供体小鼠的CD4+CD25+T细胞可以导致肝移植排斥反应.而且,去除CD4+CD25+T细胞使移植物的白细胞浸润明显增多,组织损伤加重.同时,去除CD4+CD25+T细胞导致CD4+T细胞的增殖活性和CD8+T细胞的细胞毒活性明显增强.结论 受体来源的CD4+CD25+调节性T细胞在小鼠肝脏移植免疫耐受诱导中起重要作用.

Abstract：

Objective To examine the contribution of CD4+ CD25+ regulatory T cells to liver transplant tolerance. Methods After injection of anti-CD25 monoclonal antibody (mAb, PC61), mouse orthotopic liver transplantation was performed and survivals were determined. The paraffin-embedded sections of hepatic allografts were cut and stained with hematoxylin and eosin (HE). Furthermore, the effect of CD4+ CD25+ regulatory T cells on proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells was examined by depleting these regulatory T cells. Results Depletion of these cells in the recipients but not in the donors before liver transplantation caused rejection. Histological analyses of hepatic allografts with PC61 treatment showed extensive leukocyte infiltration and tissue destruction, whereas those in the control group showed minimal changes. Moreover, elimination of CD4+CD25+ T cells resulted in the enhancement of both proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells against donor-type alloantigen. Conclusions These results suggest that CD4+CD25+ regulatory T cells were important for tolerance induction to hepatic allografts.