脑缺血再灌注恢复期大鼠梗死周围组织GFAP、NSE、SYN、Nogo-A表达与神经功能转归的相关性

目的 探讨脑缺血再灌注恢复期大鼠梗死周围组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、突触素(synaptophysin,SYN)、神经突生长抑制因子-A(neurite outgowth...     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,探讨星形胶质细胞活化在脑缺血耐受中的意义.方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为缺血预处理再缺血组、缺血组和对照组,每组12只,前2组分别在2 h大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)前3 d给予10 min的MCAO预处理或假手术,第2次MCAO后24 h处死,对照组仅给予2次间隔3 d的假手术.比较各组脑梗死体积、组织病理学变化和GFAP表达.结果 缺血预处理后再缺血组和缺血组梗死体积分别为(136.85±14.51)mm3和(281.37±29.93)mm3,前者较后者显著缩小53.15%(P=0.007);同时,缺血预处理再缺血组神经元变性坏死显著减轻,并伴有GFAP表达显著上调(2组免疫组化染色平均吸光度分别为102.66±8.39和86.28±6.19,P=0.009).结论 缺血预处理可诱导脑缺血耐受,促进GFAP表达,星形胶质细胞活化可能是脑缺血耐受产生的机制之一.     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

Objective To observe the effect of focal cerebral ischemic preconditioning on the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and to investigate the significance of astrocyte activation in cerebral ischemic tolerance.Methods Thirty-six healthy male SpragueDawley rats were randomly divided into reischenmic,ischemic and control groups (n = 12 in each group) after ischemic preconditioning.The former two groups received 10 minutes middle cerebral artery occlusion (MCAO) preconditioning or sham operation 3 days before the 2-hour MCAO.The rats were killed 24 hours after the second MCAO.The control group only receivedthe two sham operations with an interval of three days.The infarct volume,histopathological changes,and GFAP expression in each group were compared.Results The infarct volume after ischemic preconditioning in the reischenmic and ischemic groups was 136.85 ± 14.51 mm3and 281.37 ± 29.93 mm3 respectively.The former was significantly reduced 53.15%compared to the latter (P =0.007).At the same time,neuronal degeneration and necrosis was reduced significantly,and GFAP expression was upregulated significantly (the mean absorbance for immunohistochemical staining in both groups was 102.66 ± 8.39 and 86.28 ± 6.19respectively,P = 0.009) after ischemic preconditioning in the reischemic group.Conclusions Focal ischemic preconditioning may induce brain ischemic tolerance and promote GFAP expression.The activation of astrocytes may be one of the mechanisms of cerebral ischemic tolerance.     

局灶性脑缺血预处理大鼠星形胶质细胞GFAP表达的变化

目的观察GFAP在大鼠局灶脑缺血和局灶脑缺血预处理(IPC)中的表达水平。方法线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将大鼠分为正常组、MCAO组、IPC+MCAO组,按缺血时间不同各组又分为3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d组,观察1 d时间点大鼠神经功能、梗死体积,观察不同时间星形胶质细胞变化及其标志物GFAP表达水平。结果 101 min IPC可使大鼠神经功能增加并减少梗死体积,MCAO和IPC+MCAO后星形胶质细胞标志物GFAP表达随缺血时间延长阳性表达增多,10 min IPC随缺血时间延长,星形胶质细胞阳性细胞数增多,在缺血1 d、3 d、7 d明显增加,与MCAO相比差异显著。结论 IPC可能通过激活星形胶质细胞产生缺血耐受作用。     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠脑内Nogo—A表达的影响

制作慢性脑缺血大鼠模型,观察丁基苯酞（NBP）干预治疗对大脑皮层和海马中Nogo-A表达的影响。发现单纯缺血组皮质和海马Nogo—A表达较对照组明显增多;而低剂量和高剂量NBP组较单纯缺血组明显减少,高剂量NBP组更加明显。提示NBP对慢性脑缺血的保护作用可能通过下调脑组织中的Nogo—A而实现。     

瑞香素对脑缺血再灌注大鼠模型胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨瑞香素对大鼠前脑缺血再灌注后海马和皮层胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响.方法反复夹闭大鼠双侧颈总动脉模仿人类脑缺血制备前脑缺血再灌注模型,术后给予瑞香素灌胃治疗,免疫组化法检测脑缺血再灌注后2、4、6 w海马和皮层GFAP的表达.结果瑞香素治疗后,海马和皮层GFAP的表达在2 w时较假手术组和缺血再灌注组高,然后开始下降,4 w时低于缺血再灌注组但高于假手术组,6 w时已低于假手术组;瑞香素治疗组中,随着时间延长,GFAP的表达进行性下降,差异显著.结论大鼠前脑缺血再灌注后应用瑞香素治疗对海马和皮层GFAP表达的影响呈动态变化过程,表现为早期促进表达,后期抑制表达,这种调节作用可能与脑缺血性损伤后神经保护有关.     

康脑液1号预处理对大鼠脑缺血再灌注病灶和GFAP表达的影响

目的观察康脑液1号预处理对SD大鼠脑缺血再灌注后病灶和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法将180只大鼠随机分为5组(各36只),假手术组、模型(缺血再灌注)组、盐酸法舒地尔注射液组、康脑液1号A组、康脑液1号B组。采用线栓法复制SD大鼠大脑中动脉梗死模型(MCAO),分别于缺血2h后再灌注1d、7d、14d。观察康脑液1号预处理对大鼠脑缺血再灌注神经功能、梗死面积和病理形态学的影响。采用免疫组化法检测缺血半暗带和病灶中心区星形胶质细胞GFAP表达的变化。结果模型组与假手术组相比,GFAP表达阳性细胞数增多;康脑液1号预处理可不同程度地降低实验性脑缺血大鼠的神经功能评分、减小梗死面积和减轻病理形态改变(P0.05);康脑液1号各组大鼠脑组织缺血半暗带GFAP表达减少,而梗死灶中心GFAP表达却增多;康脑液1号A组与康脑液1号B组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论康脑液1号预处理可能通过调节脑缺血再灌注后GFAP表达而促进脑损伤修复及重塑,从而发挥脑保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素与胶质纤维酸性蛋白的共表达

目的观察大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素(ANG)表达水平的变化及其与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共表达现象。方法将成年雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、缺血2h后再灌注1、3、7及14d组,每组6只大鼠。线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。采用免疫荧光双标法结合激光共聚焦显微镜检测脑缺血-再灌注不同时间点ANG、GFAP的表达水平及其二者的共表达情况。结果脑缺血-再灌注1、3、7d脑缺血区ANG表达水平(ANG荧光强度)分别为56±21、73±22和76±21,对照组为35±17;GFAP表达水平(GFAP荧光强度)分别为94±32、115±35和74±31,对照组为62±22。缺血各时间点ANG及GFAP表达与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。激光共聚焦显微镜观察到部分ANG与GFAP共表达现象。结论脑缺血可诱导缺血脑区ANG和GFAP的表达上调。     

阿魏酸钠对反复前脑缺血再灌注大鼠海马及额叶胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨内皮素(ET)受体拮抗剂阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注后海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑缺血再灌注模型,HE染色观察阿魏酸钠治疗前后海马CA1区神经元形态学改变,免疫组化法检测缺血再灌注后2、4、6 w海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 阿魏酸钠治疗组海马神经元缺失、变性、坏死较对照组轻,缺血再灌注后海马和额叶GFAP的表达随时间延长逐渐增多,阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多,较缺血再灌注组减少,差异显著(P<0.05).结论 大鼠前脑缺血再灌注后GFAP表达增多,阿魏酸钠能够降低其表达,对脑缺血性损伤具有保护作用.     

自体骨髓来源内皮祖细胞移植改善脑缺血再灌注大鼠神经功能转归

目的 探讨目体骨髓米源内皮祖细肥(endothehalprogenitor cell,EPC)移植对脑缺血大鼠神经功能转归的影响及其可能机制.方法 体外分离培养自体骨髓来源EPC并用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5 -bromodeoxyuridine,BrdU)标记.线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral arteryocclusion,MCAO)模型.EPC组大鼠经颈外静脉移植自体EPC[ 106/ml·kg)],对照组注射磷酸盐缓冲液(1 ml/kg),假手术组不进行任何处理(n=15).改良神经功能缺损严重程度评分(modifiedneurological severity score,mNSS)观察大鼠神经功能变化情况.BrdU免疫组化染色评价EPC增殖和分化.三维共聚焦图像分析检测脑缺血区血管结构和密度.TUNEL染色检测缺血脑组织凋亡细胞.酶联免疫吸附法检测血浆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度.结果 EPC组mNSS评分显著低于对照组[第8天时;(6.43±0.69)分对(8.86±0.95)分;q=2.673,P=0.035;第14天时:(4.55±0.89)分对(6.73±1.06)分;q=5.360,P=0.035].EPC组BrdU阳性细胞数量显著多于对照组[(42.2±5.76)对(25.67±5.49);q=4.020,P=0.030].EPC组毛细血管直径显著小于对照组[(4.51±0.21)μm对(6.34±0.24) μm;q=3.980,P =0.003];血管密度[(212.64±8.02)/0.002 mm3对(153.60±7.21 )/0.002 mn3;q =9.670,P=0.001]和微血管总表面积[(92 013±5 132)μm3/0.002 mm3对(71 366±4 538) μm2/0.002 mm3;q=4.180,P=0.014]显著高于和大于对照组;EPC组凋亡细胞数量显著少于对照组[(36.26±6.91)对(78.34±7.21);t=-4.834,P=0.003];EPC组血浆VEGF浓度显著高于对照组[(54.91±5.71)pg/ml对(13.81±4.25)pg/ml;q=12.300,P=0.002].结论 自体EPC移植对大鼠缺血脑组织具有保护作用,可能与VEGF相关联的血管再生和神经保护有关,其在治疗缺血性脑血管病中具有重要的应用前景.     

局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体的动态表达

目的 探讨局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体(Nogo-recepter,NgR)的动态表达.方法 电凝右侧大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血模型,免疫组织化学染色检测脑缺血后不同时间点缺血侧海马CA1、CA2和CA3区NgR表达.结果 缺血侧海马CA1和CA2区在脑缺血后第1天NgR表达上调,CA3区在第2天表达上调；第5天CA1、CA2和CA3区NgR表达均降至最低；第28天CA1、CA2和CA3区NgR表达再次上调.结论 缺血侧海马NgR表达在不同区域呈现不同的变化特点,但总体变化趋势呈现出“两峰一谷”的现象,提示NgR在脑缺血后不同时期可能具备不同的功能.     

松龄血脉康预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨松龄血脉康预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 45只雄性SD大鼠,随机分为松龄血脉康(SL-xmk)预处理组、假手术组和生理盐水对照组.SL-xmk预处理组采用SL-xmk悬浮液(937.5 mg/kg)对大鼠...     

红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿和神经功能的影响

目的 探讨红景天苷原料药对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿和神经功能的影响.方法 100只Sp rague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组以及红景天苷12、24和48 mg/kg组,每组20只;各组再分为6h、24 h、72 h和7 d组,每组5只.四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型.各组均在模型制作后即刻开始灌...     

永久性大脑中动脉闭塞大鼠纹状体P-SAPK/JNK表达与神经元凋亡的相关性

目的 探讨永久性大脑中动脉闭塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)大鼠纹状体P-SAPK/JNK表达与神经元凋亡的相关性.方法 54只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为假手术组以及pMCAO 1 h、3h、6h、12 h和24 h组,每组9只.应...     

永久性大脑中动脉闭塞大鼠纹状体P—SAPK/JNK表达与神经元凋亡的相关性

目的探讨永久性大脑中动脉闭塞（permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO）大鼠纹状体P-SAPK／JNK表达与神经元凋亡的相关性。方法54只Sprague—Dawley雄性大鼠随机分为假手术组以及pMCAO1h、3h、6h、12h和24h组,每组9只。应用TUNEL法检测纹状体凋亡神经元,免疫组织化学染色法检测纹状体P—SAPK／JNK核转位,Western印迹法检测P-SAPK／JNK蛋白表达。结果pMCAO 1h纹状体TUNEL和P—SAPK／JNK阳性细胞数量显著增多（P=0．0001）,6h达高峰,12h时TUNEL阳性细胞减少,但仍高于假手术组（P=0．0002）。Western印迹分析显示,pMCAO后纹状体P—SAPK／JNK蛋白表达水平显著增高,且时程变化与免疫组化染色结果一致。纹状体神经元凋亡与P—SAPK／JNK蛋白表达呈显著正相关（r=0．984,P=0．0004）。结论脑缺血可能通过激活P-SAPK／JNK诱导纹状体神经元凋亡。     

槐果碱拮抗酸敏感离子通道及其在大鼠缺血性脑损伤中的保护作用

目的 探讨槐果碱对酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel,ASIC)的影响及其在缺血性脑损伤大鼠中的神经保护作用.方法 25只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组以及槐果碱5、10和20 mg/kg预处理组,每组5只.采用线栓法建立局灶性大鼠缺血模型,5、10和20 mg/kg槐果碱腹腔注...