火把花根片对哮喘豚鼠抗炎机制及其对肺泡灌洗液IL-5受体mRNA表达的影响

目的　探讨火把花根片对哮喘豚鼠抗炎作用机制及其对肺泡灌洗液 (BALF)白介素 5(IL 5)受体mRNA表达的影响。方法　 3 2只健康豚鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,哮喘组 ,地塞米松治疗组 ,火把花根片治疗组。后 3组制作成哮喘豚鼠模型 ,再激发用药。测定肺泡灌洗液的细胞总数和细胞分类 ,观察肺组织的病理改变 ,进行BALF的IL 5受体mRNART PCR半定量分析。结果　火把花根片治疗组BALF的嗜酸性粒细胞 (Eos)数较正常组和哮喘组 ,差异均有显著性 ,分别为P <0 0 5和P <0 0 1。肺组织病理切片 ,火把花根片组充血水肿明显 ,但Eos肺组织浸润较哮喘组有明显减少。BALF的IL 5受体mRNART PCR半定量分析显示 ,火把花根片治疗组与地塞米松治疗组差异无显著性 ,P >0 0 5,但和正常组与哮喘组比较差异有显著性 ,P <0 0 1。结论　火把花根片能抑制哮喘豚鼠的气道炎症 ,为临床治疗哮喘提供初步的理论基础     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸粒细胞炎症的抑制作用

目的　研究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特 (mon telukast,MK )对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞 (Eosinophil,Eos)炎症的影响 ,探讨孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的可能机制。方法　以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度分离法分离并计数支气管肺泡灌洗液 (BALF)中不同密度的嗜酸性粒细胞 ;采用TUNEL技术原位检测嗜酸性粒细胞凋亡 ;通过ELISA法检测BALF中IL 5的含量 ;采用荧光酶标记法在PharmaciaUnicap 10 0System中测定BALF中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)的水平。结果　孟鲁司特能降低哮喘豚鼠BALF中Eos的数量 ;在孟鲁司特治疗组 ,嗜酸性粒细胞凋亡指数明显升高 ,BALF中IL 5和ECP的含量降低 ,与模型组比较差异均有显著性。结论　降低气道IL 5和ECP的水平 ,促进嗜酸性粒细胞凋亡 ,减少嗜酸性粒细胞浸润 ,可能是白三烯受体拮抗剂孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的一个重要机制。     

母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的 研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡的影响。方法30只豚鼠随机分为对照组、哮喘组及母牛分枝杆菌菌苗组各10只，应用卵清蛋白建立哮喘模型。最后一次激发豚鼠后，计数支气管肺泡灌洗液中炎症细胞，观察肺组织病理改变，应用末端标记法研究肺组织嗜酸性粒细胞的凋亡。结果母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量为(0.22±0.12)×108·L^-1，显著低于哮喘组的(1.18±036)×108·L^-1 (P＜0.01)；肺组织哮喘炎症反应明显轻于哮喘组；肺组织嗜酸性粒细胞凋亡指数为(23.8±5.4)%，显著高于哮喘组的(4.6±0.7)%( P＜0.01)。结论母牛分枝杆菌菌苗能减少哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量，减轻气道哮喘炎症反应，与其诱导哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡有关。     

罗红霉素对哮喘大鼠髓样相关蛋白-8表达的影响

目的探讨罗红霉素对哮喘大鼠髓样相关蛋白-8(MRP8)表达水平及哮喘气道炎症的影响。方法将18只雄性SPF级Brown Norway(BN)大鼠,按照随机数字表法分为正常对照组(C组)6只、哮喘组(A组)6只及罗红霉素治疗组(R组)6只。分别通过卵清白蛋白(OVA)+弗式完全佐剂(FCA)联合致敏,OVA雾化激发构建大鼠哮喘模型,R组用罗红霉素干预。观察各组大鼠肺组织病理结构变化,分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠BALF MRP8水平;蛋白质印迹法测定肺组织MRP8的表达,Pearson相关性分析MRP8与各细胞分类计数的关系。结果 R组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)及中性粒细胞百分比(NEU%)明显高于C组,但低于A组(P均<0.05);R组BALF中白细胞介素(IL)-17、MRP8及肺组织MRP8均高于C组,但低于A组(P均<0.05);Pearson相关性分析显示BALF及肺组织的MRP8水平与BALF细胞总数、EOS%、NEU%、IL-17比例均呈正相关(P均<0.01)。结论急性哮喘大鼠BALF及肺组织MRP8水平升高,并与气道炎症呈正相关,罗红霉素可以通过降低哮喘大鼠MRP8的表达改善哮喘症状。     

泡桐花挥发油抗支气管哮喘变应性炎症的实验研究

目的通过豚鼠哮喘模型研究泡桐花挥发油抗哮喘气道变应性炎症的作用。方法以卵蛋白致敏豚鼠为动物模型,灌胃途径予以泡桐花挥发油大、小剂量,观察各组豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞和嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)的改变。结果泡桐花挥发油大剂量[1.2g/(kg.d)]及小剂量[0.6g/(kg.d)]均可不同程度地抑制BALF中的EOS和炎性细胞总数及气道Eotaxin的过度表达。结论泡桐花挥发油可能通过抑制哮喘动物气道中EOS的趋化、聚集而具有一定的抗哮喘气道变应性炎症的作用。     

秦氏循经敷贴对实验性哮喘豚鼠的作用

目的：探讨中药秦氏循经敷贴对哮喘豚鼠的作用。方法：30只健康豚鼠随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和秦氏循经敷贴组（C组）,每组10只。以鸡卵蛋白攻击致敏。C组敷贴秦氏循经敷贴;B组敷贴含生理盐水的医用纱布。于末次敷药后检测豚鼠外周血嗜酸性粒细胞百分比、中性粒细胞百分比和白细胞总数,肺组织和支气管HE染色后观察病理改变。结果：与A组相比,B组外周血嗜酸性粒细胞百分比显著升高（P〈0.05）,C组较B组显著降低（P〈0.05）;中性粒细胞百分比和白细胞总数3组间无显著性差异（P〉0.05）。B组肺组织大量炎症细胞浸润,部分肺泡腔阻塞、实变,肺泡间隔明显增宽,支气管管壁血管扩张、管壁增厚;C组炎症细胞浸润较少,肺泡充气,无间隔增宽;A组炎症细胞浸润程度较轻,无支气管壁增厚。结论：秦氏循经敷贴能改善实验性哮喘豚鼠的肺及支气管的炎症反应,减少外周血嗜酸性粒细胞百分比,对哮喘豚鼠具有治疗作用。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的研究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特(montelukast,MK)对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)凋亡和Fas mRNA表达的影响。方法以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度离心法分离并计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞；采用TUNEL技术原位检测嗜酸性粒细胞凋亡；通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达。结果孟鲁司特能显著降低哮喘豚鼠BALF中Eos的数量；在孟鲁司特治疗组，嗜酸性粒细胞凋亡指数明显升高，Fas mRNA的表达显著增强，与模型组比较均有显著性差异。结论嗜酸性粒细胞凋亡与Fas mRNA表达增加高度相关；增强气道嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达，促进其凋亡，可能是孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的一个重要机制。     

罗红霉素通过诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮途径抑制哮喘大鼠气道炎症

目的探讨罗红霉素对哮喘大鼠支气管诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的影响。方法24只成年哮喘大鼠随机分成对照组、哮喘组以及罗红霉素组。对支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及嗜酸性粒细胞计数,免疫组织化学检测大鼠支气管上皮细胞iNOS蛋白表达,RT-PCR检测肺组织iNOS mRNA表达,分光光度计检测肺组织iNOS活性及NO含量。双抗体夹心法检测肺组织白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)。结果哮喘组大鼠BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞分类分别为(7.28±1.65)×108.L-1、(7.73±1.54)%,均高于对照组(3.76±0.97)×108.L-1、(1.27±0.60)%;罗红霉素组BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞分类分别为(5.68±0.95)×108.L-1、(5.54±1.53)%,明显低于哮喘组,差异有统计学意义。哮喘组肺组织IL-4浓度、iNOS活性及NO含量高于对照组,罗红霉素组肺组织IL-4浓度、iNOS活性及NO含量低于哮喘组。哮喘组肺组织IFN-γ浓度低于对照组,罗红霉素组肺组织IFN-γ浓度高于哮喘组。哮喘大鼠支气管上皮细胞iNOS蛋白及肺组织iN-OSmRNA表达分布吸光度值分别为(0.25±0.06)、(0.52±0.14),较对照组[(0.14±0.05),(0.33±0.05)]明显增强;但罗红霉素组iNOS蛋白及mRNA表达为(0.15±0.03)、(0.35±0.07),均明显较哮喘组减弱。结论罗红霉素通过干预哮喘大鼠气道IL-4、IFN-γ以及iNOS/NO体系,抑制哮喘气道炎症反应。     

侧脑室注射组胺对大鼠哮喘样反应可能有调节作用

目的观察组胺侧脑室注射对抗原攻击致敏大鼠引起的支气管收缩反应及气道炎症的影响。方法致敏大鼠侧脑室注射组胺后测定抗原激发前后的气道阻力和肺动态顺应性。计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和分类计数。病理切片观察肺组织炎症细胞浸润情况。结果组胺(0.1μg.只-1)侧脑室注射明显抑制抗原攻击致敏大鼠所致的气道阻力升高和肺动态顺应性的降低,也明显降低BALF内的白细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量(P<0.01,P<0.01),减少气道粘膜下和血管周围的嗜酸性粒细胞浸润。结论组胺侧脑室注射能抑制大鼠支气管收缩反应及气道炎症,提示中枢组胺水平升高可能对大鼠哮喘样反应有调节作用。     

银杏内酯吸入剂对哮喘模型豚鼠气管嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的:探讨银杏内酯吸入剂对哮喘模型豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润的影响。方法:将豚鼠随机分为7组,每组8只,分别为哮喘模型组,银杏内酯吸入剂低、中、高剂量组(剂量分别为5、10、20mg·kg-1),银杏内酯腹腔注射(ip)组(剂量为20mg·kg-1),地塞米松组(剂量为10mg·kg-1)和正常对照组,计数肺灌注液(BALF)和支气管中的嗜酸性粒细胞(EOS)数。结果:与正常对照组比较,模型组BALF中的EOS显著增多,银杏内酯吸入剂组可显著减少BALF和支气管中的EOS浸润数(P<0.05)。结论:银杏内酯吸入剂能对抗哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润,可作为治疗支气管哮喘的一种新方法。     

太子健煎剂抗小儿哮喘复发作用机制的实验研究

目的　观察太子健 煎剂对反复诱喘的哮喘豚鼠血和气道内嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润的影响 ,及血中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)含量的影响。方法　将豚鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、太子健 高剂量和低剂量组 5组 ,后 4组分别用卵蛋白致敏 15 d后 ,再用卵蛋白反复诱喘 ,正常组用生理盐水代替 ,同时 ,正常组和模型组灌服生理盐水 ,其余 3组分别灌服地塞米松、太子健 高剂量和低剂量 ,予以治疗 ,连续 15 d。结果　太子健 煎剂可减少血及气道内 EOS浸润并降低 EOS的活性 ,抑制其脱颗粒释放 ECP等炎症介质 ,减轻 EOS对气道上皮的毒性作用。结论　太子健 煎剂可以减轻气道慢性变应性炎症 ,具有一定的抗哮喘复发的作用。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠肺血管通透性的影响

目的 研究孟鲁司特（montelukast,MK）对哮喘豚鼠肺血管通透性和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）水平的影响,探讨MK拮抗哮喘气道炎症的机制。方法 制备卵白蛋白致敏豚鼠哮喘模型。通过豚鼠引喘潜伏期和跌倒率的变化评价MK对哮喘的拮抗作用;苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织炎症的改变;伊文思蓝分光光度法测定哮喘豚鼠肺血管的通透性;硝酸还原酶法测定BALF中NO的含量。结果 MK治疗组致敏豚鼠引喘潜伏期延长,跌倒率降低,肺组织炎症减轻;肺组织提取液中伊文思蓝含量及BALF中NO含量显著降低,与模型组相比差异有显著性。结论 降低BALF中NO水平和肺毛细血管通透性,是MK拮抗哮喘气道炎症的重要机制。     

咳嗽变异性哮喘患者外周血细胞计数及基质金属蛋白酶-9的变化分析

目的探讨咳嗽变异性哮喘（CVA）患者血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况。方法选择典型哮喘30例,咳嗽变异性哮喘40例,正常对照组20例,用ELISA法分别测定各组病例血清中MMP-9水平并测定各病例外周血嗜酸性粒细胞计数（Eos）、淋巴细胞计数（Lym）。结果CVA组与典型哮喘组血清中MMP-9水平显著高于健康对照组（P〈0.01）,CVA组与典型哮喘组之间无显著性差异（P〉0.05）。嗜酸性粒细胞计数CVA组与典型支气管哮喘组显著高于健康对照组（P〈0.05）,CVA组与典型支气管哮喘组无明显差异（P〉0.05）;淋巴细胞计数CVA组显著高于典型哮喘组与健康对照组（P〈0.05）,典型哮喘组与健康对照组无明显差异（P〉0.05）;CVA组MMP-9水平与外周血嗜酸细胞计数、淋巴细胞计数皆呈显著正相关关系（r=0.581,P〈0.05;r=0.627,P〈0.05）。结论CVA是以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润为主的慢性气道炎症,MMP-9参与了CVA的气道炎症及气道重塑。     

雷公藤多甙对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的　探讨雷公藤多甙治疗哮喘的机制。方法　应用原位末端标记技术 (TUNEL)、形态学观察 ,观察雷公藤多甙对哮喘豚鼠体内嗜酸性粒细胞 (Eos)凋亡的影响。结果　 (1)哮喘豚鼠体内Eos凋亡率显著低于正常豚鼠 (P <0 0 5 )。 (2 )哮喘豚鼠应用雷公藤多甙治疗后 ,体内Eos凋亡率显著增加 (P <0 0 1) ,并伴随气道炎症和哮喘反应的减轻。结论　诱导哮喘体内Eos凋亡是雷公藤多甙治疗哮喘的重要机制     

1,8-桉油精对卵白蛋白致哮喘豚鼠的气道高反应性和炎症的抑制作用

目的探讨1,8-桉油精(1,8-cineol)对哮喘豚鼠肺功能的改善作用及其机制。方法豚鼠第0天和第7天ip给予0.5ml含卵白蛋白(OVA)20μg的氢氧化铝凝胶致敏,28d后OVA攻击制备哮喘模型。观察豚鼠OVA攻击后1h,1,8-桉油精10,30和100mg.kg-1对豚鼠吸入OVA后1,2,3,4,10,20和30min时气道阻力(Raw)和肺顺应性(Cdyn)变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数和细胞分类的影响,并测量豚鼠肺组织中嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)、白细胞介素4(IL-4)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。观察豚鼠OVA攻击后17h再吸入乙酰甲胆碱(MCh)后,1,8-桉油精10,30和100mg.kg-1对Raw和Cdyn及BALF中白细胞数和细胞分类的影响,并测量豚鼠肺组织中ECP,IL-4,IL-8和TNF-α的含量。结果与正常对照组比较,豚鼠OVA攻击后1h,在4min时模型组Raw达到高峰;与模型组比较,1,8-桉油精30和100mg.kg-1明显抑制Raw增加(P<0.05);在3min时模型组Cdyn达到高峰,与模型组比较,1,8-桉油精10,30和100mg.kg-1均能明显抑制Cdyn降低(P<0.05);模型组豚鼠肺组织ECP,IL-4和TNF-α含量明显高于正常对照组(P<0.05);1,8-桉油精100mg.kg-1组ECP,IL-4和TNF-α含量均明显低于模型组(P<0.05),模型组与正常对照组豚鼠肺组织IL-8含量无明显差异。与模型组比较,1,8-桉油精100mg.kg-1能明显减少BALF中白细胞数和嗜酸性粒细胞比例(P<0.05)。致敏豚鼠OVA攻击17h后,模型组豚鼠Raw与正常对照组比较显著升高(P<0.05),模型组豚鼠Cdyn与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01),1,8-桉油精100mg.kg-1对MCh引起的Raw的增加有明显的抑制作用,1,8-桉油精10,30和100mg.kg-1对MCh引起的Cdyn降低有明显的改善作用;与模型组相比,1,8-桉油精100mg.kg-1能明显减少BALF中白细胞数和中性粒细胞比例,降低肺组织ECP,IL-8和TNF-α含量(P<0.01);模型组与正常对照组豚鼠肺组织IL-4含量无明显差异;1,8-桉油精30mg.kg-1也能降低哮喘豚鼠肺组织中ECP和TNF-α含量(P<0.01)。结论在哮喘急性发作时,1,8-桉油精通过减少嗜酸性粒细胞,下调嗜酸性粒细胞的活性,从而抑制了哮喘的急性发作。在哮喘迟发相阶段,1,8-桉油精可通过下调IL-8水平,降低TNF-α活性,从而抑制或改善由IL-8水平升高导致的中性粒细胞聚集于支气管肺泡而直接引起的哮喘加重和持续状态。     

Naringin attenuates enhanced cough, airway hyperresponsiveness and airway inflammation in a guinea pig model of chronic bronchitis induced by cigarette smoke

Naringin is a flavanone with various bioactivities including expectorant effect, antitussive effect and inhibitory effects on asthma and acute lung injury. In present study we examined the effects of naringin on enhanced cough, airway hyperresponsiveness (AHR) and airway inflammation in chronic cigarette smoke (CS) exposure-induced chronic bronchitis in guinea pigs. To achieve this, guinea pigs were exposed to CS for 8weeks (10cigarettes/day, 6days/week). Oral administration of naringin (9.2, 18.4 and 36.8mg/kg) significantly attenuated the enhanced cough and AHR in smoke-exposed guinea pigs, reduced the concentrations of interleukin-8 (IL-8), leukotriene B4 (LTB4) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and decreased the myeloperoxidase (MPO) activity in both BALF and lung tissue, but did not significantly decrease the leukocytes in BALF. Naringin also improved superoxidase dismutase (SOD) activity in lung tissue and increased the content of lipoxin A4 (LXA4) in BALF in this guinea pig model of chronic bronchitis. These results suggested that naringin exhibited antitussive, anti-AHR and anti-inflammation effects on chronic CS exposure-induced chronic bronchitis in guinea pigs, and may possess novel therapeutic potential in the treatment of chronic bronchitis.     

罗红霉素对哮喘大鼠NF—κB及气道炎症的影响

目的：观察罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB、气道炎症、气道高反应性的影响。方法：30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组（C组）、哮喘组（A组）、罗红霉素组（R组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）制备哮喘大鼠模型。各组大鼠在末次激发后24h,检测气道反应性后放血处死：ELISA测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-4、IL-5、IFN-γ的浓度;免疫组化检测支气管上皮NF-κB p65活化。结果：哮喘组大鼠气道反应性高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组与哮喘组比较气道反应性下降（P〈0．05）;BALF中IL-4、IL-5,哮喘组含量均高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组均低于哮喘组（P〈0．01）,罗红霉素组BALF中IFN-γ低于对照组（P〈0．01）但高于哮喘组;哮喘组大鼠支气管上皮NF-κB蛋白的活化明显高于对照组,罗红霉素组低于哮喘组（P〈0．01）。支气管上皮NF—κB p65活化与BALF中的IL-4、IL-5的含量呈显著正相关（r=0．856,P〈0．01;r=0．912,P〈0．01）;大鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量与Raw增加25％时（PC25Raw）呈显著负相关（r=-0．713,P〈0．01;r=-0．772,P〈0．01）,与Cdyn下降15％时（PC15Cdyn）呈显著负相关（r=-0．738,P〈0．01;r=-0．818,P〈0．01）。结论：罗红霉素可能部分通过抑制NF-κB活性而纠正哮喘Th1／Th2细胞因子失衡,罗红霉素降低哮喘大鼠的气道反应性可能和减少IL-4、IL-5的表达有关。     

复方麻辛雾化液对哮喘豚鼠气道炎症机制的影响

目的:观察复方麻辛雾化液对哮喘豚鼠气道炎症的影响。方法:实验设正常对照组、模型对照组、复方麻辛组、沙丁胺醇组,选用豚鼠共80只,采用清蛋白造模,并运用巴氏染色法、放射免疫法、MIL型实验动物肺功能测量仪,分别检测肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞(Eos)数、血浆凝血(?)烷(TXB_2)、6-酮-前列腺素(6-K-PGF_(1a))以及清蛋白激发后气道阻力(Ri、Re)和肺顺应性(Cor)。结果:与模型对照组比较,复方麻辛组Eos数目明显降低,6-K-PGF_(1a)含量显著升高,而TXB_2含量无显著差异;复方麻辛组经清蛋白激发后Ri、Re和Cor各值变化不显著,与正常对照组比较无显著差异,与沙丁胺醇组接近,模型对照组清蛋白激发后Ri、Re峰值明显升高,Cor较低,与上述2组比较有显著差异。结论:复方麻辛雾化液能显著抑制哮喘豚鼠的气道炎症反应,改善哮喘豚鼠的肺功能。