榄香烯乳注射液抗癌作用的研究

目的探讨榄香烯乳注射液对小鼠移植性肿瘤及肿瘤细胞株的抗癌作用.方法体内抑瘤试验:选肝癌H22、肉瘤S-180、艾氏腹水癌等瘤株.腹腔注射给药,观察记录对腹水癌的生命延长作用及对实体瘤的抑制作用.体外细胞毒试验:选用K562白血病、Hela宫颈癌细胞株,采用MTT法,计算对肿瘤细胞株平均细胞生长抑制率.结果榄香烯乳注射液能明显延长腹水型荷瘤小鼠的生存时间.对K562白血病、Hela宫颈癌细胞株有一定的抑制作用.结论榄香烯乳注射液对肿瘤细胞体内抑瘤试验、体外细胞毒试验均有明显的抑制作用.     

榄香烯对LAK细胞的增殖功能和抑瘤活性的影响

榄香烯作为一种新型的抗癌中药制剂已广泛应用于临床，并取得了可喜的疗效。而肿瘤的生物免疫疗法亦是近年来研究的热点。本文通过将一定浓度的榄香烯加入到生物治疗中的效应细胞一LAK细胞的培养体系中，以期了解榄香烯对LAK细胞的影响，旨在寻求榄香烯新的应用领地，同时可望以此来提高肿瘤生物免疫治疗的疗效。材料和方法1材料：榄香烯乳注射液为大连金港制药有限公司生产，LoVo细胞株来自本校病理教研室，培养基选用GIBCO公司生产的RPMI1640，人血清购自本市中心血站，重组IL－2由北京中化生物技术研究所提供，MTT为Sigma公司…     

榄香烯乳对人肺腺癌 A549 细胞株凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株凋亡蛋白表达的影响.方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株,四甲基偶氮唑蓝比色试验法(MTT法)测定不同浓度榄香烯乳在不同作用时间下对A549细胞株的生长抑制作用.IC软件计算10％的细胞抑制浓度(IC10).免疫细胞化学染色观察榄香烯乳作用24h后A549细胞的Bcl-2、Bax、Survivin及VEGF蛋白的表达变化.结果:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性.榄香烯乳作用24h后IC10为43.49μg/ml,Bax蛋白表达增加,细胞质着色增强;Bcl-2蛋白表达下降,细胞质着色减弱;增殖蛋白Survivin和VEGF的表达下降,且具有药物浓度相关性.结论:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株有明显的抑制作用,榄香烯乳可上调凋亡相关蛋白表达、诱导凋亡.     

榄香烯乳对体外培养人肺癌细胞株超微结构的影响

榄香烯乳(Elemene emulsion)是从中药温莪术(Gurcurma Wenyujin Y.HCHEN)的挥发油中提取的抗癌活性成分,经乳化处理而制成的乳剂注射液。体内、体外实验研究均证实该药对肿瘤细胞有直接及间接的抑制作用。临床上显示对多种肿瘤有效,并能改善病人症状,提高生活质量。为进一步了解榄香烯乳的作用机理,我们从超微结构上观察了其对人肺癌细胞株的影响。 1 材料与方法 1.1 细胞培养 选取体外人小细胞肺癌细胞株H128、SPC,人肺腺癌细胞株Anip-937、A549、Spc-A1,在含15％小牛血清的RPMI-1640培养液中常规培养传代。     

榄香烯增强恶性渗出液相关淋巴细胞抗肿瘤活性实验研究

榄香烯是从中药莪术中提取的抗肿瘤活性物质,对恶性积液具有较好临床疗效,但其抗肿瘤作用机理尚不十分清楚.本文就榄香烯对恶性渗出液相关淋巴细胞(EAL)的作用以及对IL-2诱导EAL增殖和产生抗肿瘤活性的影响进行了实验研究.EAL取自8例病人的恶性胸水,原发灶为肺癌6例,卵巢癌2例,治疗方法为:榄香烯400mg胸腔灌注每周2次,连用3周,疗效为62%(5/8).实验方法为:取治疗前、后的胸水200ml离心沉淀,取细胞沉淀做细胞涂片、HE染色进行细胞学观察,确定治疗前、后胸水中EAL及癌细胞数量变化;以Ficoll-Hypague密度梯度离心法分离EAL,然后用含500U/ml IL-2的培养液将EAL培养72小时,收集EAL用于LAK活性检测.LAK活性检测采用MTT法,靶细胞为Hela细胞,效应细胞取自榄香烯治疗前、后胸水中的EAL,这2种     

榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27的体内外作用的初步研究

背景与目的：近年来,许多研究表明榄香烯脂质体在临床治疗消化道肿瘤及其恶性胸腹水中应用广泛。本研究结合体内和体外实验旨在观察榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27生长的抑制作用。方法：在体外实验中,应用机器视觉-全自动活细胞观测分析系统(Cell-IQ)对不同浓度下的榄香烯脂质体进行观测,以筛选出对人胃癌HGC-27细胞产生抑制作用的最佳浓度,并通过流式细胞术分析在最佳浓度下,榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27凋亡的影响。在胃癌腹膜转移的裸鼠模型中,观察榄香烯脂质体、顺铂(cisplatin,DDP)等药物对裸鼠腹膜肿瘤指数(peritoneal cancer index,PCI)的影响,并用免疫组化检测CD31标记的肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肿瘤中的表达,以期对榄香烯脂质体抑制胃癌HGC-27细胞腹膜转移的机制进行探讨。结果：榄香烯脂质体作用于人胃癌细胞HGC-27后,Cell-IQ分析抑制作用随浓度增加,逐渐增强,以100 μg/mL为最佳,榄香烯脂质体浓度再增高,其抑制肿瘤作用不再增强。最佳作用时间为4~19 h。应用流式细胞术检测,100 μg/mL榄香烯脂质体作用于人胃癌HGC-27细胞24 h后,肿瘤细胞凋亡率为45%,对照组仅有0.019%。处理组的细胞凋亡率明显高于对照组。人胃癌腹膜转移裸鼠模型建立后给予榄香烯脂质体等药物干预,腹膜转移瘤PCI指数有明显差异,其中以联合治疗组下降明显,免疫组化检测发现CD31-MVD及VEGF蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论：榄香烯脂质体对于人胃癌细胞有明确抑制作用,最佳质量浓度为100 μg/mL,最佳作用时间为4~19 h;榄香烯脂质体对人胃癌裸鼠腹腔转移有明确预防作用;榄香烯脂质体对人胃癌细胞抑制作用的主要机制可能为诱导凋亡。     

榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达及其影响细胞凋亡机制的研究

目的:探讨榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达及其影响细胞凋亡的机制.方法:应用榄香烯处理人脑胶质瘤U251细胞株,应用MTT法检测细胞增殖抑制试验,并求出半数致死浓度(IC50),倒置显微镜和电镜观察经榄香烯处理的U251细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期的变化,凝胶电泳检测凋亡梯度,免疫荧光技术观察凋亡小体,免疫组织化学检测c-myc蛋白和RT-PCR检测c-myc基因的表达.结果:榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用,呈剂量和作用时间的依赖性,IC50为0.062mg/ml,倒置显微镜下可见榄香烯组细胞皱缩、变小,电镜下可见具有典型新月形核的凋亡细胞和凋亡小体,流式细胞仪检测榄香烯阻滞U251细胞株周期中S期向G2/M期的转变过程,减少有丝分裂,并引起细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳获得清晰的凋亡特征性梯形条带,免疫荧光技术观察凋亡小体,免疫组织化学和RT-PCR分别证实榄香烯抑制c-myc蛋白和c-myc基因的表达.结论:榄香烯可抑制人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达,并通过下调U251细胞株的凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

细胞周期对肿瘤坏死因子诱导Hela 细胞凋亡的影响

 目的　研究细胞周期对肿瘤坏死因子 ( TNF)诱导 Hela细胞凋亡的影响。方法　通过胸腺嘧啶核苷酸 ( Td R)阻断法阻滞 Hela细胞的细胞周期 ,以 MTT法、流式细胞术和荧光染色分析 Td R阻滞细胞和周期化的 Hela细胞对 TNF诱导凋亡的敏感性。结果　Td R阻滞细胞周期较周期化的 Hela细胞对 TNF诱导的凋亡的敏感性降低。结论　揭示 TNF诱导 Hela细胞凋亡与细胞周期有关.     

榄香烯预防浅表性膀胱尿路上皮癌术后复发的回顾性分析

背景与目的:榄香烯可用于各种肿瘤的治疗,并可诱导人膀胱癌细胞凋亡.本研究旨在观察榄香烯膀胱内灌注预防浅表性膀胱尿路上皮癌术后复发的疗效及不良反应.方法:膀胱尿路上皮癌术后患者188例,均为单发浅表性膀胱癌(Tis、Ta和T1),随机分为3组,分别采用榄香烯、丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)及羟基喜树碱行膀胱内灌注,观察3组肿瘤复发情况及不良反应.结果:榄香烯组平均随访29.7个月,复发率为11.1%;MMC组平均随访28.4个月,复发率为26.7%;羟基喜树碱组平均随访31.5个月,复发率为21.5%.术后应用榄香烯膀胱内灌注治疗患者膀胱尿路上皮癌,复发率明显低于MMC及羟基喜树碱组(P＜0.05),且不良反应少.结论:榄香烯膀胱内灌注预防浅表性膀胱癌术后复发有良好疗效,不良反应少,是一种值得推广的新方法.     

三氧化二砷等中药联合CTX对K562细胞株端粒酶的抑制作用

目的　研究三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺 (CTX )等几种药物 ,在不同浓度时对K5 62细胞株端粒酶活性的调节作用 ,研究上述中西药的作用机制 ,为寻求治疗急性白血病的中西药联合新方法提供参考。方法　用 3组不同浓度的三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及CTX与人红白血病细胞株K 5 62共同培养 ,分别于作用 2 4、48、72h后收集细胞并采用PCR ELISA法检测K 5 62细胞端粒酶活性。结果　①人参皂甙、三氧化二砷、β榄香烯及CTX作用后 ,K5 62细胞株端粒酶活性下降 ,下降程度呈浓度时间依赖性 ,在一定浓度及作用时间后端粒酶呈阴性。当三氧化二砷、人参皂甙、β 榄香烯与CTX联合应用时 ,对端粒酶活性的抑制作用增强。②上述药物作用后K 5 62细胞的存活率下降 ,且抑制作用呈浓度、时间依赖性。当三氧化二砷、人参皂甙、β 榄香烯与CTX联合应用时 ,抑制作用增强。 结论　①三氧化二砷、人参皂甙、β 榄香烯及CTX均能完全抑制K5 62细胞株的端粒酶活性 ,抑制端粒酶活性可能是其抗肿瘤作用的机制之一。当三氧化二砷、人参皂甙、β 榄香烯与CTX联合应用时 ,对端粒酶活性的抑制作用被增强。②上述药物能抑制K 5 62细胞的生长 ,当三氧化二砷、人参皂甙、β 榄香烯与CTX联合应用时 ,抑制作用增强。     

榄香烯注射液对脑胶质细胞瘤SHG-44细胞株放射增敏作用的研究

脑胶质细胞瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤之一.手术是大多数脑胶质细胞瘤治疗的首选手段,放射治疗是有效的辅助治疗手段之一,但疗效仍不理想.本研究旨在探讨榄香烯对SHG-44细胞株是否有放射增敏作用,并初步探讨榄香烯对SHG-44细胞株放射增敏作用的机制.     

榄香烯对肿瘤细胞生物学特性的影响及其瘤苗免疫效应机制的研究

为研究我们创制的榄香烯(elemene,E)复合瘤苗主动免疫抗瘤效应的分子机制及其与热休克蛋白(heat shock protein,HSP)的可能关系,本文通过光镜、电镜和流式细胞术(FCM)以热休克为比照,研究了抗癌中药有效组分榄香烯对小鼠H22腹水型肝癌(H-2~-)和L615白血病(H-2~k)细胞某些生物学特性(生存率、形态结构、坏死、凋亡、细胞周期等)的影响;在此基础上着重观察比较了:1.榄香烯或/和热休克H22和L615瘤苗的主动免疫保护效应.2.榄香烯复合瘤苗诸因素(榄香烯、MMC、戊二醛)与热休克对两种肿瘤细胞膜HSP70和HSP90表达的影响.3.分离纯化榄香烯、MMC诱导的H22肿瘤细胞的HSP70-肽复合物体内验证其主动免疫预防效应.     

榄香烯抗癌作用与诱发肿瘤细胞凋亡

榄香烯是从中药莪术中提取的抗癌有效成分，实验药理学和临床试验都证实该制剂对肿瘤有确切疗效。作者应用ＭＴＴ方法，分析了榄香烯对白血病细胞生长的影响。结果显示：榄香烯明显抑制白血病ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的生长，对ＨＬ－６０细胞的半数生长的抑制剂量（ＩＣ５０）为２７．５μｇ／ｍｌ，对Ｋ５６２细胞的ＩＣ５０为８１μｇ／ｍｌ，而对正常人外周血白细胞（ＰＢＬ）的ＩＣ５０为２５４．３μｇ／ｍｌ。流式细胞术证实，榄香烯能阻滞肿瘤细胞从Ｓ期进入Ｇ２Ｍ期，并诱发其细胞凋亡。ＤＮＡ凝胶电泳及透射电镜超微结构观察都发现了榄香烯诱发肿瘤细胞凋亡所导致的生化与形态变化。结果表明，榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。     

榄香烯联合化疗治疗恶性肿瘤的疗效与不良反应观察

目的 观察榄香烯联合化疗与单纯化疗治疗恶性肿瘤的血常规、肝肾功能变化、疗效及不良反应.方法 62例恶性肿瘤患者分为两组,榄香烯联合化疗组(28例)采用榄香烯注射液400 mg/d,同时联合化疗;单纯化疗组(34例).各组中相同肿瘤类型采取相同的化疗方案.结果 榄香烯联合化疗组与单纯化疗组治疗总有效率分别是60.7％和41.2％ (P ＜0.05).榄香烯联合化疗组治疗后白细胞、血小板计数明显高于单纯化疗组(P＜0.05);与治疗前比较,联合化疗组的白细胞、血红蛋白和血小板差异均无统计学意义(P＞0.05),单纯化疗组则差异均有统计学意义(P＜0.05).联合化疗组ALT、AST、Cr、BUN治疗前后无明显变化,单纯化疗组ALT、Cr治疗后有所升高,与联合化疗组比较差异有统计学意义(P＜0.05).在生活质量改善及不良反应方面,联合化疗组优于单纯化疗组(P＜0.05).结论 榄香烯联合化疗可以提高抗肿瘤疗效,减轻化疗不良反应,改善生活质量.     

术前经肱动脉插管持续灌注β-榄香烯乳治疗局部晚期乳腺癌

目的:探讨β-榄香烯在乳腺癌临床治疗中的作用。方法:采用手术切取的乳腺癌组织制备原代乳腺癌细胞悬液, MTT法体外药敏实验检测原代乳腺癌细胞对β-榄香烯及数种临床常用化疗药的不同敏感性, 并进行比较分析。结果:原代乳腺癌细胞对β-榄香烯的敏感性低于5-FU、ADM及MMC, 且有显著性差异(P<0.01);乳腺癌细胞对β-榄香烯具有中度敏感性而与常用化疗药物相近, 且无显著性差异(P>0.05)。结论:β-榄香烯对乳腺癌的临床治疗具有中度敏感性可作为二线药。     

原代乳腺癌细胞对β-榄香烯体外敏感性研究

目的:探讨β-榄香烯在乳腺癌临床治疗中的作用。方法:采用手术切取的乳腺癌组织制备原代乳腺癌细胞悬液,MTT法体外药敏实验检测原代乳腺癌细胞对β-榄香烯及数种临床常用化疗药的不同敏感性,并进行比较分析。结果:原代乳腺癌细胞对β-榄香烯的敏感性低于5-FU、ADM及MMC,且有显著性差异(P<0.01);乳腺癌细胞对β-榄香烯具有中度敏感性而与常用化疗药物相近,且无显著性差异(P>0.05)。结论:β-榄香烯对乳腺癌的临床治疗具有中度敏感性可作为二线药。     

β-榄香烯联合照射对肺腺癌A549细胞凋亡及Livin基因表达的影响

目的:检测β-榄香烯乳对肺腺癌A549细胞株放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法:四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对A549细胞增殖的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为对照组(C)、照射组(R)、β-榄香烯乳组(0.1×IC50、0.2×IC50)及β-榄香烯乳联合照射组(0.1×IC50+R、0.2×IC50+R),用不同浓度的β-榄香烯乳处理细胞24h后照射,流式细胞仪检测细胞凋亡率。实时定量PCR技术(real-time PCR)检测细胞Livin基因mRNA表达量。结果:MTT法测得β-榄香烯乳对A549细胞增殖的IC50值为115μg/ml;流式细胞仪检测β-榄香烯乳联合照射组细胞凋亡率明显高于单纯照射组及β-榄香烯乳组(P<0.05);β-榄香烯乳联合照射组细胞Livin基因mRNA表达量较照射组明显下降(P<0.01)。结论:β-榄香烯乳可抑制A549细胞增殖,促进A549细胞凋亡和抑制Livin基因mRNA表达,其放射增敏机制可能与这些作用有关。     

榄香烯乳配合化疗对中晚期胃癌患者免疫功能的影响

目的:探讨榄香烯乳对胃癌患者免疫功能的影响。方法:采用榄香烯乳配合化疗药物治疗中晚期胃癌52例,观察其白细胞及淋巴细胞总数和红细胞免疫功能的改变。结果:对照组治疗前后白细咆及淋巴细胞总数和红细胞免疫功能均有显著性改变(P<0.05或0.01),而治疗组则无明显变化(P>0.05),差值(d)两组比较差异显著(P<0.05或0.01)。结论:榄香烯乳配合化疗药物治疗胃癌,可使患者外周血中的白细咆和淋巴细咆总数以及红细胞免疫功能无明显下降,保护了机体的免疫机制,为机体抑制肿瘤的发生发展起积极作用。     

榄香烯或／和热休克对肿瘤细胞凋亡的影响

为了进一步研究榄香烯的抗癌和诱导肿瘤主动免疫效应及其分子机制 ,我们设想它可能与榄香烯作为一种应激原(stressor)诱导肿瘤细胞产生热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP)及HSP -肿瘤肽之间有一定的关系。因此我们对小鼠H2 2腹水型肝癌细胞和L6 15白血病细胞进行不同浓度的榄香烯 (elemene)或 /和不同时间的热休克 (4 2℃ )处理 ,用光镜和透射电镜观察其对形态结构变化的影响 ,并分别采用直接免疫荧光法流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡百分率。结果表明 ,不同浓度的榄香烯和不同温度、不同时间的热休克处理对肿瘤细胞的形态、结构的影响不…     

榄香烯乳注射液对化疗引起的易栓状态干预作用观察

目的 (1)从改善化疗后易栓状态的角度,揭示活血化瘀治法减轻化疗引起不良反应新的内涵.(2)以榄香烯乳注射液防治化疗引起的易栓状态为切入口,为从祖国传统医学中寻找有效、经济、安全的抗栓药物提供实验依据,为预防和治疗化疗引起易栓状态提供新的方法.方法 采用前瞻性、平行对照、分层区组随机临床试验设计方法,共临床观察60例肿瘤患者,其中治疗组30例予化疗+健脾益肾方+榄香烯乳注射液;对照组30例予化疗+健脾益肾方.两组分别于治疗前后进行血瘀证症状和体征评分,并进行易栓状态指标相关检查.结果 (1)对照组中肿瘤患者化疗后的血瘀证症状加重,体征较前明显,凝血及纤溶指标均上升,差异具有统计学意义(P＜0.05),其中1例患者有血栓的形成.(2)治疗组恶性肿瘤患者化疗后的血瘀证症状减轻,血小板数量、血小板比容、纤维蛋白原均较化疗前各项指标明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)化疗是造成肿瘤易栓状态的重要因素之一.(2)榄香烯乳注射液可防治化疗引起的易栓状态.