北京地区汉坦病毒感染的流行病学调查研究

 目的了解北京地区啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染状况、HV基因型及其与宿主动物的关系.方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成.针对HV基因M片段部分序列设计两种型特异性引物,应用RT-PCR法检测宿主动物带毒情况,并用clustalX(5.0)和DNAClub软件对序列进行分析.利用SPSS软件分析宿主动物HV感染的流行病学特征.结果共捕获宿主动物159只,褐家鼠为优势鼠种,占79.25%.其次为小家鼠,占17.61%.RT-PCR检测宿主带病毒率,其中褐家鼠阳性率为17.46%,小家鼠为3.57%.对2份扩增阳性标本进行序列测定并对其核苷酸序列进行分析显示,它们均为汉城型(SEO)汉坦病毒.不同性别的褐家鼠HV感染率之间比较差异有统计学意义(x2=5.216,P＜0.05),不同体重的褐家鼠HV感染率之间比较差异有统计学意义(x2=16.094,P＜0.01),体表有疤痕和无疤痕褐家鼠之间的HV感染比较差异有统计学意义(x2=7.445,P＜0.01).结论北京地区存在较为广泛的汉城型HV感染,目前尚未发现汉滩型HV疫源地.褐家鼠为北京地区HV优势宿主和主要带毒鼠,宿主动物种群特征与HV感染具有不同程度的关联.     

阿勒泰地区土拉弗氏菌病调查报告

土拉弗氏菌病是一种多宿主、多媒介、多传播途径的自然疫源性疾病,全世界分布很广.在我国已确定有土拉弗氏菌病自然疫源地的地区有内蒙通辽地区、黑龙江嫩江地区、西藏及新疆塔城地区.为进一步查明本病在新疆的疫源地存在情况,我们对阿勒泰地区进行了调查,结果在9460只蜱中未分离出本病病原体.现仅就血清学结果报告如下:     

人类流感病毒多重PCR分型方法的建立

目的建立一种可以同时检测人类A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亚型的多重RT-PCR方法。方法根据人类流感病毒的特异性基因设计并合成多对特异性引物,建立可同时扩增出人类流感病毒亚型特异性片段的多重PCR的方法。同时,对该方法的特异性和敏感性进行了评价,并利用该方法对39份疑似swineH1N1的临床标本进行检测。结果该方法可同时扩增出A型流感病毒M基因203bp,B型流感病毒M基因296bp,A型流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为362bp（H1）,112bp（H3）,188bp（H5）,494bp（swineH1）。该实验最低可检测新甲型H1N1（A/Beijing/501/2009）病毒RNA0.5TCID50。该方法的特异性实验结果显示,在多重PCR检测中未检出非特异扩增的PCR产物。同时,使用该方法从39份疑似新甲型H1N1的临床咽拭子标本中检测出新甲型H1N1阳性的标本4份（10.2%）,季节性H1N1亚型2份（5.1%）,H3N2亚型12份30.7%,本次实验结果与WHO通过实时PCR方法检测的结果一致。结论本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特异性强,可用于人类流感病毒的分型检测。     

2014年兵团部分地区手足口病病毒分子流行病学分析

目的:通过对兵团部分地区手足口病病例标本的核酸检测结果进行分析,了解这些地区手足口病的病原学流行情况,为手足口病的预防控制提供参考依据.方法:采用荧光定量RT-PCR方法,对2014年我实验室收到标本进行检测,并对部分标本的VP1序列进行扩增测序,确定其基因型及突变情况.结果:150例被检患儿的粪便标本中有136例肠道通用型病毒阳性,核酸检测阳性率为90.67％.其中EV71型阳性者25例,占18.38％,Cox A16型阳性者95例,占69.85％,其他肠道病毒阳性者16例,占11.76％,其中EV71型的基因型为C4a,Cox A16型的基因型为B1b.结论:兵团这些地区的手足口病的发生有明确的季节与年龄特征,病原学分型也是以EV71型和Cox A16型为主,基因型分别为C4a和B1b,与全国其他地区的分子流行病学特征一致.     

99Tcm-octreotide在荷H22肝癌小鼠体内的分布和显像

^111In-DTPA-octreotide已被临床常规用于探测生长抑素受体（SSTR）阳性肿瘤,但其受核素费用高的限制.本研究拟评价^99Tc^m-octreotide在荷H22肝癌小鼠体内的分布特性,探讨其作为临床SSTR阳性肿瘤显像剂的可能性.     

天津地区产质粒Amp C酶和超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的耐药酶基因研究

 目的 了解天津地区产质粒Anlp C 酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠杆菌的流行情况及其耐药酶的基因型分布.方法 收集2006年3～12月天津地区两家三级甲等医院临床分离的对三代头孢菌素耐药的大肠杆菌,采用三维试验法检测Amp C 酶;纸片确认试验法检测超广谱酶;质粒接合试验定位耐药酶基因;PCR通用引物扩增Amp C 酶与超广谱酶基因以确定其基因型.结果 在86株受试菌中,表型确认法的Amp C 酶检出率为13.95%;超广谱酶检出率为63.95%;同时阳性者为8.14%.8株Amp C 酶基因扩增阳性菌中有6株扩增出CIT 型片段,3株扩增出.DHA型片段.3株 Amp C 酶基因扩增阳性同时合并超广谱酶阳性菌中:1株扩增出TEM 型和CTX-M-3 型片段,1株扩增出TEM型和CIX-M-14型片段,1株同时扩增出TEM 型、CTX-M-3和CTX-M-14 型片段.结论 天津地区存在同时产质粒Amp C 酶和超广谱酶的大肠杆菌流行株,且某些菌株的耐药酶基因型组合在国内其他地区尚未见报道.     

339例疑似外生殖器人乳头瘤病毒感染基因分型检测及分析

目的：探讨疑似外生殖器人乳头瘤病毒（HPV）感染患者中基因型分布情况及临床意义。方法采用基因芯片分型技术检测339例疑似HPV感染者外生殖器皮损HPV21种亚型感染情况。结果共检出217例HPV阳性者。21种HPV亚型均有检出,共检出363例次。检出前三位的基因型为6型、11型、16型。不同性别患者HPV检测阳性率差异无统计学意义。单一HPV感染占62.67%,多重感染占37.33%,高危型以多重感染形式为主。女性多重感染率高于男性。21~50岁年龄段患者检出阳性者最多。结论疑似外生殖器HPV感染患者中HPV型别主要是低危型,高危型多以多重感染形式存在,性活跃人群阳性检出者最多。     

GLI1在乳腺癌各分子亚型中的表达及意义

目的探讨Hedgehog信号通路的下游转录因子Gli1与乳腺癌分子标志物的关系及Gli1在乳腺癌各分子亚型中的表达和意义。方法应用免疫组化Envison法检测90例乳腺癌石蜡包埋标本中Gli1的表达,结合标本ERα、Her-2的表达情况,分析Gli1与上述分子标志物的关系及GLI1在分子亚型中表达的差异及意义。结果根据Gli1、ERα、Her-2的不同表达,90例乳腺癌标本中,Gli1阳性38例,ERα阳性60例,Her-2阳性23例。Gli1的表达与ER表达成负相关性,与Her-2表达无明显相关性。各分子亚型标本Gli1阳性率为Basal-like型（66.7%）,Her-2过表达型（55.6%）l,uminal B型（35.7%）l,u-minal A型（30.4%）。但luminal A型l、uminal B型与Her-2过表达型之间l,uminal B型、Her-2过表达型与Basal-like型之间Gli1表达差异无统计学意义（P〉0.05）。Basal-like型Gli1阳性率高于luminal A型,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Gli1的过表达与乳癌雌激素非依赖性增殖有关,将成为ER阴性乳癌新的治疗靶点。部分basal-like型乳癌增殖可能与HH/Gli1通路激活有关,分子分型法中有必要加入Gli1指标,细化个体化治疗方案及预后判断。     

川南地区乙型肝炎病毒基因型的分布及临床意义

目的:初步了解乙型肝炎病毒基因型的分布及临床意义.方法:用特异性引物 - 聚合酶链反应的方法,对80例来自川南地区HBV - DNA阳性慢性乙型肝炎病毒感染者血清进行HBV基因分型,其中无症状携带者26例,轻、中度慢性肝炎35例,重型肝炎、肝硬化13例及肝癌6例.结果:80例血清标本中,B型64例(80%),C型12例(15%),B+C混合基因型4例(5%).B型平均年龄低于C型(P＜0.01);B型的HBeAg阳性率高于C型(P＜0.01),HBV - DNA水平也高于C型(P＜0.05);B、C型在肝功能损伤程度指标的比较无统计学意义(P＞0.05).结论:川南地区主要的HBV基因型为B型和C型,B型为优势基因型,还有少量的B+C混合型;HBV基因型与其致病性有一定的相关性.     

应用PCR-SSP方法快速检测基因HLA-B＊ 1502

目的通过序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）方法检测等位基因HLA-B＊1502,并对检测结果进行讨论。方法根据HLA核苷酸碱基序列的多态性和已知的DNA序列,设计一系列等位基因型特异性引物,通过特定PCR反应体系扩增各等位基因型特异性DNA片段,产生相对应的特异性扩增产物条带,并用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果运用4对等位基因型特异性引物,用PCR仪扩增出2份样本等位基因型HLA-B＊1502,并与阴性和空白样本平行对照。结论应用PCR-SSP方法检测基因HLA-B＊1502,快速、简便、安全、有效。     

宁夏地区乙型肝炎病毒基因型分布及D基因型的测序鉴定

为确定乙型肝炎病毒Ｄ基因型在我国的存在,建立我国ＨＢＶ Ｄ基因型的参照序列,作者用聚合酶链式反应结合限制性片段长度多态性分析技术,调查了可能存在Ｄ基因型的我国宁夏地区ＨＢＶ基因型分布。对９０例ＨＢｅＡｇ阳性ＨＢＶ感染者的血清进行前Ｓ区ＲＦＬＰ基因型分型。结果发现：Ｃ基因型８６．７％（７８／９０）‘;Ｄ基因型１０％（９／９０）无Ａ、Ｂ、Ｅ和Ｆ型不能明确分型者３．３％（３／９０）。２例ＲＦＬＰ分型为Ｄ     

西藏樟木地区啮齿动物调查

目的了解西藏樟木地区啮齿动物和寄生节肢动物的种类及分布特点。方法于2012年5月和2013年6～7月,选取宿舍、厨房、防空洞、灌木丛等各2个不同生态景观,采用粘鼠板法、夹捕法、笼捕法,对这一地区啮齿动物的种类及分布进行调查,并采集捕获啮齿动物体表寄生节肢动物在解剖镜下鉴定种类。结果捕获啮齿动物98只,捕获率9.46%,脱逃率13.27%,共有9种：黑家鼠（Rattus rattus）10只,小家鼠（Mus musculus）12只,针毛鼠（Rattus fulvesces）2只,褐家鼠（Rattus norvegicus）19只,大林姬鼠（Apodemus peninsulae）5只,臭鼩鼱（Suneus murinus）14只,普通鼩鼱（Sorex radulus）7只,黑唇鼠兔（Ochotona daurica）28只和黄胸鼠（Rattus flavipectus）1只。其中褐家鼠占室内种的42.86%,黑唇鼠兔占野外种的44.44%。黑家鼠和针毛鼠上发现多毛蚤科新蚤属的特新蚤（Neopsylla specialis）21头,染蚤率为5.10%,蚤指数为0.21。结论褐家鼠是樟木地区室内优势种,黑唇鼠兔是野外优势种,啮齿动物染蚤率较低,其流行病学意义有待进一步研究。     

铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA法基因分型及应用

目的：对铜绿假单胞菌（PA）进行随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型。方法：以优化的反应体系和扩增条件对临床分离的274株PA进行用RAPD法的分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制全部基因分型图谱,同时对8例个体感染PA的连续性或跳跃性进行观察与分析。结果：274株PA共得RAPD型133种;8例个体感染PA的RAPD指纹图有7例完全一致而1例出现跳跃性。结论：RAPD法可将PA分型133种;个体可能存在感染两株基因型不同的PA。     

转铁蛋白受体1表达在弗朗西斯菌入侵巨噬细胞中的作用

目的 评估土拉弗朗西斯菌LVS感染鼠巨噬细胞期间获取铁的影响因素.方法 用表达绿色荧光蛋白(GFP)的土拉弗朗西斯菌LVS感染鼠巨噬细胞J774A.1.结合单抗的转铁蛋白受体-1用键合了Alexa594的羊抗鼠二抗显色.用实时定量PCR法检测5个铁代谢相关基凶在土拉弗朗西斯菌LVS感染或未感染J774A.1鼠巨噬细胞中的表达.用活的弗朗西斯菌和灭活菌分别感染巨噬细胞,免疫印迹分析比较Tfr1表达水平.用小十扰RNA下调转铁蛋白受体-1的表达,进而用土拉弗朗西斯菌LVS分别感染转铁蛋白受体-1表达下调的细胞和转染无关siRNA的细胞,并进行细菌计数.结果 土拉弗朗西斯菌疫苗株可以诱导转铁蛋白受体-1在宿主巨噬细胞中表达.基因表达分析显示土拉弗朗西斯菌LVS随着时间的增加通过诱导转铁蛋白受体1(Tfr1)~.节蛋白(Irp1和IRP2)主动获取铁.免疫印迹结果表明小干扰RNA对转铁蛋白受体-1的表达下调了大约75%.细菌入侵试验显示,在感染1h时,转铁蛋白受体-1表达下调的细胞内细菌数量等同于对照(F=1.06,P=0.326 5);而在感染24h时,Tfr1下调样本中的细菌数量明显低于对照样本(F=24.12,P=0.000 6).结论 在感染早期Tfr1的上调是由翻译后调节介导的,并随着Irp1和IRP2表达的增加而增加.Tfr1表达的增加通过转铁蛋白介导的铁运输扩充了细胞内动态铁池,使弗朗西斯菌易于获取铁.转铁蛋白受体-1的下调不影响细菌与其他膜蛋白的结合而入侵,但抑制细菌在细胞内的增殖.     

肺结核伴其他肺部感染患者病原微生物分布特征及IL-17、HMGB1、sCD14对疾病病情的评估意义

目的 探究肺结核伴其他肺部感染患者体内病原微生物分布特征,并分析白介素-17（interleukin-17,IL-17）、高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1,HMGB1）、可溶性白细胞分化抗原14（soluble leukocyte differentiation antigen 14,sCD14）表达对疾病病情的评估意义。方法 选取成都市龙泉驿区第一人民医院/四川大学华西医院龙泉医院2018年3月-2020年3月收治的543例肺结核患者为研究对象,根据是否发生其他肺部感染分为研究组（n=330）和对照组（n=213）。分析感染患者病原菌的分布特征,并对比两组患者的肺功能、IL-17、HMGB1、sCD14水平,探究以上指标对于感染患者病情的评估效果。结果 330份痰液标本培养出病原菌368株,其中革兰氏阴性菌217株（58.97%）,革兰氏阳性菌98株（26.63%）,真菌53株（14.40%）。研究组患者肺功能指标第一秒用力呼气容积（Forced expiratory volume in the first second,FEV1）、最大呼气中段流量（Maximum middle expiratory flow,MMF）、分钟最大通气量（Min maximum ventilation,MVV）均低于对照组（t1=16.3952,t2=42.2180,t3=6.1815,均P<0.05）,血清指标IL-17、HMGB1、sCD14均高于对照组（t4=59.4263,t5=20.1960,t6=13.3835,均P<0.05）。按照肺部感染评分（clinical pulmonary infection score,CPIS）标准将研究组患者分为轻度感染患者131例（39.70%）,中度感染患者113例（34.24%）,重度感染患者86例（26.06%）,比较发现三组患者肺功能与血清指标之间均有明显差异,其中肺功能指标FEV1、MMF、MVV轻度感染>中度感染组>重度感染组（F1=68.77,F2=87.65,F3=14.83,均P<0.05）,血清指标IL-17、HMGB1、sCD14轻度感染<中度感染组<重度感染组（F4=465.63,F5=67.89,F6=56.09,均P<0.05）。按照不同生存结局将研究组患者分为生存组患者293例（88.79%）,死亡组患者37例（11.21%）,比较发现生存组患者肺功能指标FEV1、MMF、MVV均高于死亡组（t1=15.7970,t2=6.5952,t3=6.1373,均P<0.05）,血清指标IL-17、HMGB1、sCD14均低于死亡组（t4=29.7796,t5=9.4618,t6=10.6096,均P<0.05）。结论 肺结核伴其他肺部感染病原菌多为革兰氏阴性菌,其次为革兰氏阳性菌。感染患者肺功能损伤较严重,血清中IL-17、HMGB1、sCD14均呈异常高表达,随着感染程度的加重,肺功能损伤更重,血清IL-17、HMGB1、sCD14表达更高。     

肾综合征出血热鼠间传播规律的探讨

本文通过对总后嫩江基地某场肾综合征出血热(HFRS)疫源地的调查,综合鼠龄、性别、活动特点及HFRS抗体阳转情况等因素分析HFRS在鼠间传播的规律.经调查分析得出以下结果:不同鼠种对HFRS病毒普遍易感;鼠生后活动在传播中起重要作用,而体外寄生虫的叮咬对鼠间传播不起主要作用.黑线姬鼠为当地的优势鼠种,褐家鼠的活动与人类接触密切,在人类HFRS的流行中,两者作用都不能忽视.     

Epidemiological importance of humans and domestic animals as reservoirs of verocytotoxin-producing Escherichia coli

BACKGROUND/AIM: A "new" pathogenic agent, verocytotoxin--producing Escherichia coli (VTEC) emerged in the last 20 years, causing an increased number of sporadic cases, as well as of outbreaks of diarrhoeal diseases. Humans and animals can be infected with VTEC, but their epidemiological importance as a reservoir of this agent is not quite clear, especially in the Balkan region. Therefore, the aim of this study was to investigate the frequency of isolation of VTEC from the intestinal tract of humans and animals and to determine the serogroups of the isolated strains. METHODS: A total of, 3 401 stool samples from humans and 2 660 samples from five different species of domestic animals were tested for the presence of this pathogen. RESULTS: VTEC was isolated from 20 (0.6%) humans stools and from 431 (16.2%) animal fecal samples (p < 0.001). Only 15 (3.3%) VTEC strains belonged to human infection-associated serogroups (O26, O55, O111, O128 and O157), designated as enterohaemorrhagic E. coli (EHEC). The most known serogroup-O157 was identified in 6 (1.3%) of the isolated VTEC strains; of them, 1 (5%) was of human origin and 5 (1.2%) were animal strains. CONCLUSION: This study revealed that domestic animals were a more important reservoir of VTEC than humans, and that the isolated VTEC strains rarely belonged to O157, as well as to other EHEC serogroups that might explain rare sporadic cases and the absence of epidemic occurrence of diarrhoeal diseases caused by VTEC in this geographic region.     

经皮肝穿刺胆道引流术后胆道感染的主要病原菌类型及药敏试验分析

目的：统计行经皮肝穿刺胆道引流术（PTCD）治疗术后发生胆道感染患者胆汁中主要病原菌的分布情况,分析其对不同抗生素的敏感和耐药情况。 方法：选取2014年6月至2016年6月在我院行PTCD术后发生胆道感染的患者219例,采集其胆汁样本进行细菌+真菌培养及药敏试验并分析。 结果：（1）培养219例胆汁样本获得菌株数253株,含20个种类,其中革兰阴性菌194株（76.7%）,革兰阳性菌53株（20.9%）,真菌6株（2.4%）;革兰阴性菌前三位分别为大肠杆菌93株（36.7%）、肺炎克雷伯杆菌39株（15.4%）、铜绿假单胞菌18株（7.1%）,革兰阳性菌排名前两位的分别为屎肠球菌17株（6.7%）、粪肠球菌14株（5.5%）;真菌以白色假丝酵母菌为主,共3株（1.2%）;（2）对革兰阴性菌敏感性较高的抗菌药物包括碳青霉烯类、氨基糖苷类及头孢类抗生素;对革兰阳性菌敏感性较高的抗菌药物包括喹诺酮类、恶唑烷酮类及糖苷类抗生素;真菌对三唑类抗真菌药物均保持敏感。 结论：我院PTCD治疗术后胆道感染患者胆汁中的病原菌以革兰阴性菌为主,其次为革兰阳性菌和真菌,部分病例为混合性感染。