复方雷公藤颗粒对再障小鼠骨髓T细胞亚群的影响

目的:观察复方雷公藤颗粒对再生障碍性贫血(简称再障)小鼠的疗效及对骨髓CD4+,CD8+,CD4+/CD8+T淋巴细胞表达的影响.方法:建立再障小鼠模型,分为5组,正常组及模型组小鼠(给予同体积的生理盐水ig),复方雷公藤低、高剂量组(分别为生药10.63,13.29 g·kg-1,ig)、十一酸睾酮(22 mg·kg-1,ig),连续给药35 d,取骨髓单个核细胞培养24 h后,流式细胞术检测CD4+,CD8+,CD4 +/CD8+T淋巴细胞的表达水平.结果:模型组CD4+,CD8+,CD4 +/CD8+各指标均较正常组下降,其中CD4+,CD4 +/CD8+T淋巴细胞明显低于正常组(P＜0.05);十一酸睾酮组与模型组相比,CD4+,CD8+均有所下降,但CD4 +/CD8+T细胞较之上升,但统计学均无明显差异,复方雷公藤颗粒低、高剂量组与模型组相比,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+均升高,其中CD4+,CD4+/CD8+升高有统计学意义(P＜0.05),与十一酸睾酮组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:复方雷公藤颗粒能调节骨髓T细胞的异常状态,恢复T细胞及其亚群之间的平衡,促进骨髓造血功能的恢复.     

不同剂量雷公藤多甙对ITP小鼠T细胞亚群的影响

特发性血小板减少性紫癜（ITP）是临床常见的出血性疾病,发病率高。目前认为ITP属自身免疫性疾病,与机体免疫功能紊乱有关。有研究表明,ITP患者T淋巴细胞比例失调,CD4^＋减少,CD8^＋明显增多,CD4^＋／CD8^＋显著降低。雷公藤多甙是一种免疫抑制剂,其免疫抑制是通过激活Ts而实现的。笔者通过动物实验研究,探讨不同剂量雷公藤多甙对ITP小鼠T淋巴细胞亚群的作用,为不同剂量雷公藤多甙治疗ITP提供理论依据,现将其实验方法介绍如下。     

雷公藤多甙对大鼠胶原免疫性关节炎及佐剂性关节炎黏膜免疫功能影响的对比研究

目的观察雷公藤多甙对大鼠胶原免疫性关节炎（collagen-Ⅱ induced arthritis,CIA）及佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）黏膜免疫功能的影响。方法分别以Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂单独致炎免疫大鼠造成CIA和AA模型,以雷公藤多甙治疗,观察大鼠黏膜、全身免疫指标（外周血T细胞亚群）以及关节局部炎症因子（IL-6、TNF—α、COX-2和NF-κB等）的变化。结果CIA模型组派伊尔结（Peyer’s patch,PP）CD4^＋、血中CD4^＋、CD8^＋均升高;AA模型组PPCD4^＋降低,CD8^＋升高,血中的CD4^＋,CD8^＋均升高。雷公藤对两模型组的PP和血中T细胞亚群存在不同影响。两种模型大鼠关节可见高水平IL-6、TNF—α、COX-2和NF—κB表达,雷公藤多甙可以抑制这些炎症介质的表达。结论两种关节炎模型在黏膜免疫反应方面及雷公藤多甙对这两种模型的影响存在异同。     

火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的效果及可能的作用机制。方法建立小鼠异基因骨髓移植GVHD模型,预处理为放疗8．0Gy,分为：对照组(n=10)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植组；火把花根片组(n=20)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植加火把花根片预防组。比较受鼠生存时间和GVHD发生情况,受鼠外周血象中白细胞、血球压积等恢复情况和骨髓细胞中嵌合体H-2D~b阳性细胞百分比以评价造血重建。在移植后不同时间点分别采用流式细胞仪检测受鼠的脾细胞中CD4~+和CD8~+以及CD25和CD69的表达。结果移植后对照组受鼠均于25天内死于GVHD,火把花根片组GVHD的发生率为20%(4/20),与对照组小鼠相比,存活率和时间明显增高和延长(P＜0．01)；存活的火把花根片组小鼠(n=4)40天时骨髓细胞中的H-2D~b阳性细胞百分比达(93．38±4．32)%。移植后10天开始,火把花根片组小鼠CD4~+和CD8~+T细胞比例明显低于对照组(P＜0．...     

雷公藤多甙对大鼠胶原免疫性关节炎黏膜免疫的影响

目的:观察雷公藤多甙对于大鼠胶原免疫性关节炎黏膜免疫的影响.方法:Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂免疫大鼠,以雷公藤多甙治疗,观察大鼠黏膜免疫各项指标.结果:雷公藤多甙可以改善CIA大鼠病理改变,降低肠道PP结中CD4/CD8比值,对脾中T细胞亚群有调节作用,并可降低关节中致炎细胞因子的表达.结论:雷公藤多甙对CIA模型大鼠有抗炎和免疫抑制的作用.     

雷公藤甲素对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠免疫功能的影响

目的研究雷公藤甲素对CIA小鼠免疫功能的影响.方法分离和培养原代小鼠脾T、B淋巴细胞测定细胞增殖活性(MTT法);流式细胞技术(FCM)检测外周血中CD4 、CD8 T细胞亚群含量;放射免疫分析法(RIA)测定脾细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6含量.结果雷公藤甲素能抑制ConA、LPS诱导刺激的脾T、B淋巴细胞增殖活性;抑制CD3 、CD4 T细胞和降低CD4 /CD8 比值,但对CD8 T细胞有增强作用;降低脾细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6水平.结论雷公藤甲素能抑制CIA小鼠的免疫功能,其作用机制可能是通过调节CD4 /CD8 比值平衡失调、抑制T、B细胞的增殖活性和内源性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的水平而实现的.     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

CD+4 CD+8在肺气虚证大鼠肺和皮肤中的表达及其生物学意义

研究CD4^＋CD8^＋在肺气虚证大鼠肺和皮肤中的表达，旨在探讨“肺主皮毛”的免疫学基础。采用气熏法制造肺气虚证模型，实验设为模型组和正常对照组。采用S-P免疫组化方法检测皮肤和肺组织中CD4和CD8的表达。结果表明肺气虚证大鼠肺脏和皮肤CD8^＋细胞均升高（P〈0．05）；皮肤CD4^＋细胞发生迁移，但数量没有变化（P〉0．05），肺CD4^＋细胞数量没有变化，二者免疫功能均下降，从免疫学角度证实肺主皮毛理论具有一致性。     

雷公藤多甙治疗寻常型银屑病的疗效及对T细胞亚群的影响

目的观察雷公藤多甙治疗寻常型银屑病的临床疗效及对T细胞亚群水平的影响。方法将110例寻常型银屑病患者按照随机平行分组法分为2组,治疗组给予雷公藤多甙片口服,对照组给予环孢菌素A口服,同时2组均给予蒽林软膏皮损处外涂,均连续治疗12周,观察2组治疗效果及治疗前后T细胞亚群水平。结果治疗后治疗组愈显率明显高于对照组(2=7.519,P=0.031);治疗后2组CD4+、CD4+/CD8+及CD3+水平均较治疗前明显升高(P均<0.05),CD8+水平与治疗前比较无明显变化(P>0.05),治疗后治疗组CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组升高更明显(P均<0.05)。结论 T淋巴细胞亚群参与了寻常型银屑病病理过程,雷公藤多甙可通过抑制T细胞活化而发挥治疗作用,临床疗效较佳,值得推广应用。     

雷公藤多甙联合阿维A治疗寻常型银屑病的疗效及对T细胞亚群水平的影响

目的:观察雷公藤多甙联合阿维A治疗寻常型银屑病的临床疗效及对外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)水平的影响。方法:将60例寻常型银屑病患者随机分为治疗组和对照组。两组患者均给予阿维A常规治疗,治疗组在阿维A常规治疗的基础上给予雷公藤多甙治疗。治疗前后测定患者血清T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)水平,连续治疗8周后评价疗效。结果:治疗组临床疗效总有效率为93.3%,显著高于对照组的70.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组和对照组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著上升,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01),且治疗组较对照组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后,治疗组和对照组CD8+水平均显著下降,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01),而治疗后组间CD8+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组均无严重不良反应发生。结论:雷公藤多甙联合阿维A治疗寻常型银屑病能显著提高临床疗效,且安全可靠,并能抑制T细胞活化及增殖,可以通过调节CD4+/CD8的比值来达到调节机体免疫功能的作用。     

穴位注射配合艾灸治疗化疗后白细胞减少症的临床研究

目的 :研究以黄芪注射液穴位注射配合艾灸疗法对化疗后白细胞减少症患者白细胞数量及细胞免疫的影响。方法 :将恶性肿瘤化疗后白细胞减少症 86例 ,随机分为黄芪注射液穴位注射配合艾条温和灸治疗组 (治疗组 )、升白药口服组 (对照组 ) ,分别进行对照治疗 ,以治疗前后临床症状、外周血白细胞数量、T淋巴细胞亚群CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 含量的变化为指标进行实验观察。结果 :①治疗组较对照组有明显提高外周血白细胞数的作用 ;②治疗组能提高肿瘤患者外周血T细胞亚群CD3+ 、CD4 + 含量、使CD4 + /CD8+ 比值升高 ,两组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ;③治疗组能明显改善全身虚损症状。     

补肾解毒方与健脾解毒方对慢性乙肝患者不同阶段的T淋巴细胞功能影响的研究

目的:比较补肾解毒方和健脾解毒方对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)慢性感染患者在不同免疫状态下外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响。方法:选取本院感染科2013年9月至2014年5月门诊慢性HBV感染患者40例,据患者不同免疫状态分为清除组和耐受组,另选本院健康职工10例作为对照组。采用大鼠补肾解毒药物血浆和健脾解毒药物血浆进行干预。以T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD28+分子的表达及干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的水平作为研究指标,判断干预对外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响情况。结果:各组健脾组和补肾组血浆在干预后CD3+、CD4+、CD8+、CD28+的表达均显著升高,耐受组中P<0.05,补肾组血浆干预后CD28+及CD8+分子显著高于健脾组,P<0.05;两种药物血浆分别干预后,CD28+分子表达均显著高于清除组同期,P<0.05。结论:健脾解毒法和补肾解毒法均能促进慢性HBV感染患者T细胞功能的恢复,免疫耐受期可能是中医药治疗的一个重要时期,补肾解毒药物效果优于健脾毒药物,需要分子实验和临床实验提供更多循证依据。     

吉非替尼对非小细胞肺癌的疗效与T细胞亚群变化分析

目的观察吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)临床疗效与外周T淋巴细胞亚群变化的关系。方法对组织或细胞病理证实的35例晚期NSCLC患者口服吉非替尼250 mg/d。采集全部患者治疗前及治疗后外周血标本,三色染色后流式细胞仪分析CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群变化。结果35例患者中部分缓解13例,稳定13例,进展9例,疾病控制率为74.2%。治疗前后T淋巴细胞亚群无显著差异。结论吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效较好,毒副反应轻微。治疗后T淋巴细胞可以恢复到治疗前水平。     

通利大肠对慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察"通利大肠"对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的外周血T淋巴细胞亚群的影响,从炎症调控角度探讨COPD"从肠论治"的效应机制。方法:用气管注射脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型,宣白承气汤及其拆方作为实验用药随机分为正常组、模型组、治肠组、治肺组及肺肠同治组。正常组、模型组灌胃纯净水,各给药组灌胃相应中药,连续14d。流式细胞检测法检测外周血T淋巴细胞总数、辅助性T淋巴细胞(CD+3CD+4细胞)百分比、细胞毒性T淋巴细胞(CD+3CD+8细胞)百分比以及CD+4/CD+8水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠T淋巴细胞总数减少,CD+3/CD+8升高,CD+4/CD+8水平降低(P0.01),CD+3/CD+4有降低的趋势。与模型组比较,治肠组CD+4/CD8+升高(P0.05)。与治肺组比较,肺肠同治组的T淋巴细胞总数增加,CD+4/CD8+升高(P0.05)。结论:通利大肠,或在治肺的基础上增加通利大肠,可影响COPD模型大鼠外周血T淋巴细胞的亚群分布,减少CD3+CD+8细胞的百分比,调节T淋巴细胞总数和CD3+CD+4细胞与CD+3CD+8细胞比例,这可能是COPD"从肠论治"效应产生的作用环节之一。     

276例HIV/AIDS淋巴细胞亚群与中医证型的相关性研究

目的：探讨HIV/AIDS淋巴细胞亚群与中医证型的关系。方法：选择HIV/AIDS患者276例作为观察组,健康者11例作为对照组,进行淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD14＋、CD19＋、CD56＋T淋巴细胞亚群）检测并对HIV/AIDS患者进行中医辨证分型。结果：观察组各证型与对照组比较,除痰湿内蕴型外,其余各证型CD3＋、CD4＋T细胞水平均明显下降（P〈0.05）。观察组各证型之间比较,CD3＋T细胞水平气血亏虚兼痰湿型最低,与气血亏虚兼血瘀型、气血亏虚型比较,差异均有显著性意义（P〈0.05）;CD4＋T细胞水平痰湿内蕴型最低,与气血亏虚型、气血亏虚兼血瘀型比较,差异均有显著性意义（P〈0.05）;痰湿内蕴型CD14＋T、CD19＋T细胞水平较低,CD56＋T细胞水平较高,与其它各证型及对照组比较,差异均有显著性意义（P〈0.05）。结论：HIV/AIDS淋巴细胞亚群与中医证型有一定的关系,可为进一步研究HIV/AIDS中医证型及病机演变规律提供参考。     

小半夏加茯苓颗粒对荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用的研究

目的研究小半夏加茯苓颗粒对小鼠S180、H22实体瘤的抑制作用以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法建立S180、H22荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓颗粒的抑瘤作用,并检测各组小鼠的脾T淋巴细胞亚群的分布、CoA诱导的脾淋巴细胞增殖活性以及血清中TNF-α的含量。结果小半夏加茯苓颗粒对S180和H22荷瘤小鼠的肿瘤均具有明显抑制作用,抑瘤率分别为11.5%和9.3%;同时小半夏加茯苓颗粒可明显上调荷瘤小鼠CD4+、CD8+T细胞数量(P<0.01)及CD4+/CD8+比值(P<0.05);小半夏加茯苓颗粒可明显增强CoA诱导的荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力(P<0.01)以及血清中TNF-α的含量(P<0.05)。结论小半夏加茯苓颗粒可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制模型鼠肿瘤的生长。     

益气补肾法对自然流产模型小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响

目的:将中医的益气补肾法应用于小鼠自然流产模型,观察其对自然流产模型小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响。方法:性成熟的雌性CBA小鼠40只、雄性DBA/2小鼠20只8,～10周龄,建立自然流产小鼠模型,分四组:阴性对照组、中药组、环孢素组、中西医结合组。于孕第9天1、4天,用颈椎脱臼法分批处死小鼠,用75%的乙醇消毒后,钝性分离皮肤及腹膜,取脾脏,制成单细胞悬液,采用流式细胞术分析T淋巴细胞亚群的表达情况。结果:实验方对孕早期脾脏CD4+T细胞表达具有下调作用,且具有统计学上意义(P0.05),对孕早期脾脏CD8+T细胞表达具有上调作用趋势,但不具有统计学上意义(P0.05),对孕早期脾脏CD4+T/CD8+T表达具有下调作用趋势,但不具有统计学上意义(P0.05),对孕中晚期脾脏CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T无明显调节趋势。结论:益气补肾中药在免疫细胞分子学水平对母胎免疫具有一定的调节作用。     

重组葡萄球菌肠毒素A及其突变体蛋白促淋巴细胞增殖作用的研究

 目的 观察重组葡萄球菌肠毒素A（rSEA）及其突变体蛋白对淋巴细胞增殖、活化作用及对淋巴细胞亚群分群的影响。方法 分离健康人外周血单个核细胞（PBMC）及小鼠脾淋巴细胞悬液,体外经rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白刺激后,采用噻唑蓝法（MTT）检测人和小鼠脾淋巴细胞增殖水平,采用流式细胞术检测人外周血中T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞）及活化CD4⁺、CD8⁺ T细胞和自然杀伤细胞（NK）的含量。结果 5~20 mg·L^-1的rSEA及其3个突变体蛋白对人PBMC和小鼠脾淋巴细胞均有明显促增殖作用（P<0.05）;经rSEA、rSEA/H225A刺激后的人PBMC中,CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞的含量明显高于对照组,rSEA/H187A能上调CD3⁺和CD8⁺T细胞,而rSEA/D227A只上调CD8⁺T细胞（P<0.05）;rSEA及3种突变体蛋白均能上调活化CD4⁺和CD8⁺T细胞,rSEA、rSEA/H187A、rSEA/H225A能上调NK细胞含量（P<0.05）。结论 rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白对淋巴细胞均有明显促增殖和活化作用,并可不同程度地上调T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ 及NK细胞的含量,为筛选出低毒、高效的升白细胞相关药物候选突变体奠定基础。
     

加减生脉陷胸汤对病毒性心肌炎患者cTnⅠ及免疫功能的影响

目的:观察加减生脉陷胸汤治疗病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)的临床疗效及其对cTnⅠ、免疫功能的影响.方法:60例病毒性心肌炎患者随机分为中药组(30例)和西药组(30例),中药组给予加减生脉陷胸汤治疗,西药组用西药常规治疗.分别观察两组患者治疗前和治疗1个疗程后的临床疗效、心肌钙蛋白Ⅰ及T淋巴细胞亚群的变化.同时选20例健康献血者为正常组检测心肌钙蛋白Ⅰ及T淋巴细胞亚群.结果:治疗前,患者的心肌钙蛋白Ⅰ含量均高于正常组(P＜0.01),CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均低于正常组(P＜0.01).治疗1个疗程后,中药组和西药组心肌钙蛋白Ⅰ含量均明显下降(P＜0.01),CD4+、CD8+、CD4 +/CD8+明显高于治疗前(P＜0.01,P＜0.05);但中药组cTnⅠ含量明显低于西药组(P＜0.01),CD4+、CD8+、CD4+/CD8+明显高于西药组治疗后(P＜0.05);中药组有效率高于西药组(P＜0.05).结论:加减生脉陷胸汤能提高治疗VMC的疗效,同时能保护心肌,调节T淋巴细胞亚群.     

四君子汤总多糖对化疗荷瘤小鼠脾脏和派氏结及肠系膜淋巴细胞的影响

目的研究四君子汤总多糖(SJZPS)对化疗荷瘤小鼠脾脏、派氏结(PPs)、肠系膜淋巴结(MLNs)淋巴细胞的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为对照组、肿瘤模型组,环磷酰胺(CY)化疗组和四君子汤总多糖治疗(CY+SJZPS)组。CY组和CY+SJZPS组每天腹腔注射CY20 mg.kg-1,CY+SJZPS组同时灌胃SJZPS 1g.kg-1,连续给药9 d。应用流式细胞术检测脾脏、小肠PPs和MLNs中T、B淋巴细胞比例、活化水平以及T细胞亚群的变化。结果 SJZPS能提高肠道PPs中B淋巴细胞的比例和活化水平,降低MLNs中CD4+/CD8+的比值,改善化疗所致的肠道黏膜免疫损伤;SJZPS能提高化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞中B淋巴细胞的比例,及T、B淋巴细胞的活化水平,同时降低CD4+/CD8+的比值以改善化疗荷瘤小鼠系统免疫功能,其中SJZPS对B细胞的作用更加明显。结论 SJZPS能有效拮抗化疗药物所致的小鼠肠黏膜免疫功能损伤,同时对整体免疫功能具有改善作用。