产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因型研究

目的 了解本地区血液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分离率、耐药性和基因型.方法 收集临床血液标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌26株,应用PCR基因扩增技术分别检测SHV、TEM、CTX-M、PER、CTX-M-2、Ampc、GES基因,DNA测序确定CTX-M、TEM基因型.结果 在26株菌株中15株为CTX-M型,占57.69%,11株为TEM型,占42.31%.结论 本地区临床血液标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型.     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。     

ICU产ESBLs大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的了解医院重症监护病房(ICU)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、CTX-M-1群、DHA、SHV、oprD2、GES、OXA和VIM。结果 51株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为2.0%、8.0%和11.8%,其余14种抗生素的耐药率为54.9%~100.0%。51株产ESBLs大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群、SHV和oprD2等4种β-内酰胺酶基因,其阳性率分别为76.50%、37.3%、5.9%和31.4%。结论 ICU分离的产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。     

泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药表型和基因分型

目的:了解本地区泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药表型及其基因型分布.方法:收集2003-03/2004-06间临床分离的尿培养阳性大肠埃希菌共258株,ESBLs的检测采用NCCLs规定的ESBLs型筛选和确定实验,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性检测,并应用聚合酶链反应(PCR)方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV,CTX-M基因型检测.结果:产ESBLs大肠埃希菌检出率为24.0%(62株),67.7%(42株)携带CTX-M基因,14.5%(9株)的菌株携带SHV型基因,并有1.6%(1株)同时携带CTX-M基因和SHV型基因.结论:本地区泌尿系感染产ESBLs大肠埃希菌以耐头孢曲松和头孢噻肟为主;CTX-M型的ESBLs最为常见.     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

目的 了解我院临床分离大肠埃希茼产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况.方法 确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR.RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型.结果 确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性.PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因.测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型.结论 大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主.     

基于MALDI-TOFMS鉴别产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的应用研究

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）快速区分不同基因型产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的可行性。方法收集2019年1至12月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院各类无污染体液标本中分离的肠杆菌目菌株共368株。采用MALDI-TOFMS进行菌种鉴定,通过VITEKIICompact进行常规药敏试验及ESBLs筛查试验,筛选产ESBLs以及产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌（CRE）。采用PCR检测CTX-M-1、CTX-M-9、TEM、SHV基因,同时利用ClinProTools3.0软件对各基因型菌株的质谱峰图进行分析。结果368株肠杆菌目细菌中共有169株产ESBLs,其中CTX-M型130株,以CTX-M-1型的CTX-M-55亚型（39株,占30.0%）、CTX-M-15亚型（34株,占26.2%）和CTX-M-9型的CTX-M-14亚型（38株,占29.2%）为主。共检出大肠埃希菌255株,其中产ESBLs大肠埃希菌152株,以CTX-M-1型（75株,占49.3%）和CTX-M-9型（58株,占38.2%）为主。通过ClinProTools3.0软件分析发现产CTX-M-9型大肠埃希菌在质荷比为6415m/z和13664m/z处具有特征性蛋白峰。结论产ESBLs菌株主要为大肠埃希菌,基因型主要为CTX-M-1型与CTX-M-9型。MALDI-TOFMS可以快速鉴别CTX-M-9型大肠埃希菌,对尽早指导临床用药具有一定意义。     

儿童患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区儿童患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集自儿童患者分离鉴定的大肠埃希菌株1327株，通过K-B法作药敏试验，采用美国NCCLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株，并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株，检出率为52．9％，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为55．5％。95．0％；PCR初步分型结果，单独携带TEM型基因的占56．7％，单独携带SHV型基因的占15．0％，携带两种基因的占25．8％。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升，具有多重耐药的特点；产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因，其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌耐药性及基因型检测

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠埃希菌的分子流行病学及对常用抗菌药物的耐药情况.方法 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的初筛试验采用纸片法,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其ESBLs基因片段;用K-B琼脂扩散法进行菌株的药敏试验.结果 124株大肠埃希菌中共检出54株产ESBLs (43.5%).在耐药性检测中,其对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为3.7%、0.0%和5.6%,PCR扩增基因型阳性结果为TEM型23株、SHV型13株、CTX-M型41株、OXA型8株,其基因型以CTX-M型为主.结论 本院大肠埃希菌产ESBLs率显著升高,应引起重视;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带两种或两种以上耐药基因;其治疗首选药物建议使用亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦和哌拉西林/ 他唑巴坦.     

澳门地区产超广谱内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

 【目的】 了解澳门地区医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌的临床分布特点和基因型特征。【方法】 收集2007年12月至2008年2月期间从澳门地区两家医院的临床患者中分离到的大肠埃希菌158株,用表型确定试验确定产ESBL大肠埃希菌。应用PCR方法分别扩增产酶菌株的CTX-M-3、CTX-M-9、TEM和SHV等常见的β-内酰胺酶基因,并结合临床分离菌株的分布特点对PCR扩增结果作进一步的分析。【结果】 澳门地区临床分离的158株大肠埃希菌中,有54株产ESBL,产酶率为34.2%。PCR 扩增结果显示,所有产酶菌株均携带TEM基因;其中有47株(87%)同时携带CTX-M-9、TEM两个基因;没有菌株携带CTX-M-3和SHV 基因。产ESBL大肠埃希菌广泛分布于临床各科室,其中普外科占40.7%,内科占27.8%,心脏科占16.7%。标本分布较为集中,尿液占55.6%,分泌物或脓液标本占22.2%,血液和呼吸道标本各占11.1%。【结论】 澳门地区医院感染中,产ESBL大肠埃希菌在临床各科室分布广泛,主要分离自尿液、分泌物或脓液标本;所有菌株均携带TEM基因,并有87%的菌株同时携带CTX-M-9基因。     

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 :了解产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)肺炎克雷白杆菌、大肠埃希氏杆菌、阴沟肠杆菌的发生率、耐药性及耐药特点 ,指导用药。方法 :应用双纸片协同试验法对从临床感染标本中分离出的 2 1 5株革兰氏阴性菌作 ESBL的检测 ,比较亚胺培南等 1 4种抗生素对产 ESBL耐药菌体外抗菌作用。结果 :产 ESBL耐药菌占全部分离菌的 3 4.4% ,其中 ,大肠埃希氏杆菌占 47.3 % ,肺炎克雷白杆菌占 2 8.4% ,阴沟肠杆菌占 2 4.3 %。各类细菌中产 ESBL所占的比例分别是 ,大肠埃希氏杆菌为 3 1 .8% (3 5 /1 1 0 ) ,肺炎克雷白杆菌为 3 9.6% (2 1 /5 3 ) ,阴沟肠杆菌为 3 4.6% (1 8/5 2 )。在产 ESBL菌中 ,有 3株大肠埃希氏杆菌及 2株肺炎克雷白杆菌均同时对头孢噻肟和头孢他啶敏感。亚胺培南对产 ESBL耐药菌均表现出最强的抗菌作用 ;头孢西丁对产 ESBL肺炎克雷白杆菌及大肠埃希氏杆菌呈现出较好的抗菌作用。产 ESBL耐药阴沟肠杆菌对头孢西丁全部耐药 ;氨基糖苷类、氟喹诺酮类及磺胺类药物对产 ESBL肺炎克雷白杆菌、大肠埃希氏杆菌、阴沟肠杆菌有较高的交叉耐药性。结论 :对产 ESBL耐药菌感染不容忽视 ,对此类感染的治疗亚胺培南可作为首选。     

Extended spectrum beta-lactamase producing organisms at the University Hospital of the West Indies

Extended spectrum beta-lactamases (ESBL) represent a major group of beta-lactamases that have the ability to inactivate beta-lactam antibiotics containing an oxyimino group such as third generation cephalosporins and monobactams. These enzymes are produced by gram negative organisms, especially members of the Enterobacteriaceae family such as Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. The prevalence of these organisms varies widely internationally, as well as within the same country. This is the first study on ESBL production in K pneumoniae and E coli at the University Hospital of the West Indies, a tertiary care hospital in Jamaica. Two-hundred and sixty-four isolates of K pneumoniae and 300 isolates of E coli were collected over the study period January 2002 to December 2002. Forty-eight (18.2%) K pneumoniae isolates were confirmed to be ESBL producers, while there was no ESBL producing E coli. Infections with ESBL producing organisms can pose a therapeutic challenge, leading to treatment failure if the wrong class of antibiotics is used. With increasing resistance to all classes of antibiotics, there is a narrowing of available treatment options. It is very important that these organisms be monitored and antibiotic policies as well as infection control policies be in place to curtail their spread.     

CTX-M-14和CTX-M-24编码基因的检测及其功能表达

目的　了解上海华山医院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生的超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的基因型及其流行情况。方法　双纸片法和美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型确定实验检测产ESBL菌株并对产ESBL菌株进行接合实验 ;提取产ESBL菌株及其转移接合子中的质粒 ,进行电泳分析 ;采用琼脂稀释法 ,测定各种菌株对多种抗菌药物的敏感性 ;TEM、SHV、CTX M 1组、CTX M 13组、Toho 1组通用引物检测产ESBL菌株及其转移接合子 ;编码框以外设计引物、聚合酶链反应 (PCR)扩增转移接合子中的CTX M 13组全编码基因 ,克隆入 pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序 ,分析其基因型 ;对这些产ESBL菌株进行脉冲场电泳 (PFGE)检测。结果　产ESBL菌株对多种 β 内酰胺类和非 β 内酰胺类抗生素耐药 ;产ESBL菌株可通过接合转移方式传递其耐药性 ,转移频率多为 10 -4～ 10 -5,多数非 β 内酰胺类抗生素的耐药性可以和ESBL耐药性发生共转移 ,琼脂糖电泳显示接合子从供体菌得到了一个 >2 3 1kb的质粒 ;转移接合子中仅CTX M 13组通用引物检测为阳性 ;4株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 14编码基因序列的同源性为 10 0 % ,其余 6株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 2 4编码基因序列的同源     

AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶在阴沟肠杆菌中的表达及对其耐药性的影响

目的：研究AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBL）在阴沟肠杆菌中的流行情况及对其耐药性的影响。方法：琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）,三维试验、等电聚焦电泳、接合试验及聚合酶链反应分析耐药菌的产酶情况。结果：106株阴沟肠杆菌中,单纯高产AmpC酶者、单纯产ESBL者、高产AmpC酶并产ESBL者分别占16.0％、10.4％、13.2％。CTX-M型和SHV型ESBL的检出率分别为17.0％（18/106）和6.6％（7/106）。碳青霉烯类抗生素对阴沟肠杆菌均有很好的抗菌活性(MIC90≤2цg/ml)。单纯高产AmpC酶菌对头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素和环丙沙星的敏感率均超过70％;单纯产ESBL菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星和阿米卡星的敏感率均超过60％;高产AmpC酶并产ESBL菌对除碳青霉烯类外的其他抗生素的敏感率均低于25％。结论：CTX-M型ESBL已经在阴沟肠杆菌中流行。产ESBL和高产AmpC酶同样是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因。ESBL在高产AmpC酶菌株中的流行增强了此类菌株的耐药性。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌106株耐药性调查

目的　了解临床产超广谱 β 内酰胺 (ESBLS)酶细菌的检出率 ,并对其耐药性进行探讨。　方法　菌株鉴定采用法国梅里埃公司API系列产品 ,药敏试验采用纸片扩散法 ,根据产ESBLS 酶细菌调查检测结果 ,结合临床 ,分析其发生及发展情况。　结果　 85 8株革兰阴性杆菌中检出产ESBLS 酶菌10 6株 ,检出率 12 35 % ;其中 4 1株来源于医院感染患者的标本 ,其检出率为 34 17% ;6 5株来源于非医院感染患者的标本 ,其检出率为 8 81% ,显著低于医院内感染病人 (P <0 0 1)。产ESBLS 酶菌对氨苄西林的耐药率达 94 34% ,耐药率最低为亚安培南 4 7%。　结论　医院感染病人产ESBLS 酶细菌的发生率明显高于普通住院病人 ,产ESBLS 酶细菌对大多数常用抗生素耐药率超过 5 0 %。     

近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变迁

目的了解我院自2005年以来,近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变化情况,从而为临床合理使用抗生素提供指导。方法对2005～2010年,6年间临床分离的大肠埃希菌共计619株菌进行药敏分析,采用K-B法进行药敏试验,ESBLs筛选试验及确认试验按照美国CLSI相关标准进行,结果用WHONET 5.4软件进行数据统计分析。结果 6年来,大肠埃希菌产ESBLs阳性率从45.5%上升至68.4%。6年分离的大肠埃希菌合计产ESBLs率为56.1%。产ESBLs株对头孢菌素类、氟喹诺酮类等常用抗生素药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,对碳青霉烯类抗菌药物敏感,氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势。结论 6年来,大肠埃希菌中ESBLs阳性率逐年升高,并呈现出多重耐药性,对产ESBLs菌株的治疗应首选碳青霉烯类抗生素药物。虽然这次监测没有发现耐碳青霉烯类的菌株,但是也应引起重视。氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势,这需要我们进一步研究是否有新的耐药机制存在。     

肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析

目的 :了解超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLS)在肠杆菌科细菌中的产生情况及其对部分药物的敏感性 ,以指导临床合理用药。方法 :用双纸片确证试验检测肠杆菌科细菌产ESBLS 的情况 ,用纸片扩散法对 8种抗生素的体外药敏试验结果进行初步分析。结果 :产ESBLS 的肠杆菌科细菌 4 7株 ,其中大肠埃希菌 2 5株、肺炎克雷伯菌 14株、阴沟肠杆菌 5株、催产克雷伯菌 1株、鼻硬结克雷伯菌 1株、液化沙雷菌 1株。在 8种抗生素的体外药敏试验中 ,亚胺培南和美洛培南的敏感率最高 (10 0 % ) ,其次为哌拉西林 /他唑巴坦 (89.4 % )、头孢西丁 (72 .4 % )和头孢替坦 (6 5 .9% )。结论 :产ESBLS 的肠杆菌科细菌主要以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主。对于由产ESBLS 株引起的感染 ,亚胺培南和美洛培南可作为首选治疗用药。哌拉西林 /他唑巴坦优于头霉菌素类药物和其他 β -内酰胺酶抑制剂的复合制剂     

Antimicrobial resistance, genotypic characterization and pulsed-field gel electrophoresis typing of extended spectrum β-lactamases-producing clinical Escherichia coli strains in Macao, China

Background  The rise of the production of CTX-M class extended spectrum β-lactamases (ESBLs) has been well documented in traveling countries but no data are found for Macao, an international travel city. The objectives of this study were to identify the antimicrobial resistance pattern, and determine the prevalence, genotype and clonal relationship of ESBLs in 209 clinical Escherichia coli strains from Macao, China.

Methods  Antimicrobial susceptibility test was performed to determine the resistance patterns of the isolates using the disk diffusion method with 17 antimicrobial agents. Phenotypic detection was screened and confirmed according to the Clinical and Laboratory Standards Institute. Genotypic characterization was detected by isoelectric focusing analysis, polymerase chain reaction and sequencing. The clonal relationship between the different ESBL isolates was studied by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE).

Results  Imipenem and meropenem exhibited 100% susceptible among 209 strains. Overall, 82.3%, 67.3%, 52.9%, 51.2% and 51.0% of the isolates displayed resistance to ampicillin, tetracylcline, ciprofloxacin, sulfamethoxazole trimethoprin and gentamycin. The prevalence rate of ESBLs was 30.1%. Antibiotic resistances were found to be significantly higher among the ESBL producing group compared to non-ESBL producing group. We detected CTX-M-14 to be the major genotypic characterization of ESBLs (76.2%). Two strains showed indistinguishable patterns by PFGE.

Conclusions  The prevalence of antimicrobial resistance is alarming high in Macao. Antimicrobial resistance is significantly higher among the ESBL producing group. This study documented CTX-M-14 as the predominant ESBL type. Although indistinguishable pattern was found between two strains, it was too small to decide whether any of the investigated strains was epidemic. Our findings may be also pertinent for other geographic areas undergoing similar travel characteristics to understand the corresponding effects on bacterial populations.

     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的种类及耐药特性

目的：研究质粒介导的超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬ）细菌的种类和耐药特性。方法：采用Ｅｔｅｓｔ法对可疑细菌行ＥＳＢＬ检测，用ＫＢ法做药物敏感试验，用ＷＨＯＮＥＴ４软件进行分析。结果：在８９０株革兰阴性杆菌中检出产ＥＳＢＬ菌４４株，　阳性率４．９％。对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星、环丙沙星的敏感率分别为１００％、６８．２％、２９．５％、２５．０％。结论：产ＥＳＢＬ细菌分布广泛、阳性率高，易借助耐药质粒传播，具有较高的交叉耐药性和多重耐药性。