CEP55和PLK1在卵巢浆液性癌中的表达及其临床意义

目的 探讨CEP55和PLK1在卵巢浆液性癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集50例卵巢浆液性癌组织和50例正常输卵管伞端上皮组织,采用免疫组化联合Western blot法检测CEP55和PLK1的表达水平,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。结果 CEP55和PLK1在卵巢浆液性癌组织中表达高于正常输卵管伞端上皮组织(P<0.05)。CEP55和PLK1在卵巢浆液性癌组织中表达率分别为60%和64%,两者在正常输卵管伞端上皮组织中表达率分别为14%和10%。CEP55蛋白表达在组织学分级、FIGO分期和淋巴结转移具有显著相关性(P<0.05),PLK1蛋白表达与组织学分级有关(P<0.05)。Spearman分析显示,CEP55和PLK1之间的表达呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论 CEP55和PLK1在卵巢浆液性癌组织中过表达,与较差的生物学行为有关,为探索卵巢浆液性癌的靶向治疗和预后监测指标提供了依据。     

Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究

目的 探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用.方法 Western blot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个Rapl shRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western blot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化.结果 与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P＜0.05).经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50％、66％、19％,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70％和48％,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P＜0.05).结论 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖.     

MeCP2在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义

目的 探究甲基化CpG结合蛋白（Methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2）表达对卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞增殖的作用。方法 在TCGA数据库中获取卵巢浆液性囊腺癌患者组织的RNA测序数据与临床病理学信息,利用生物信息学方法分析MeCP2在健康者和卵巢浆液性囊腺癌患者中的表达及其与卵巢浆液性囊腺癌临床病理学分期、生存期的相关性;分别利用MTT实验、细胞克隆实验、细胞周期及细胞凋亡实验分析MeCP2表达对SKOV3细胞增殖的影响。基因集富集分析（Gene set enrichment analysis,GSEA）获取MeCP2表达调节的关键信号通路,利用Western blot进行相关蛋白的检测。结果 MeCP2在卵巢浆液性囊腺癌患者中的表达显著降低;MeCP2的表达与卵巢浆液性囊腺癌的病理学分期相关,而与组织学分级无关;生存期分析显示,MeCP2高表达患者的无病生存期显著长于低表达患者,而MeCP2的表达对于患者整体生存期、疾病特异性生存期、无进展间隔生存期没有影响;细胞功能实验显示过表达MeCP2能够抑制细胞增殖活性、细胞克隆形成能力及阻滞细胞周期G₁/S期的转化并诱导细胞发生凋亡。MeCP2表达调节的信号通路分析显示,MeCP2能够抑制ERBB信号通路相关蛋白（EGFR、AKT）、细胞周期相关蛋白CDK4表达,促进细胞凋亡蛋白BAX表达。结论 MeCP2在卵巢浆液性囊腺癌组织中低表达且与患者无病生存期相关,过表达MeCP2能够抑制卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞的增殖。     

ACAP1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及其意义

目的检测ACAP1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况,明确其与卵巢浆液性囊腺癌发生发展的关系。方法通过Oncomine网站分析ACAP1 mRNA表达水平与卵巢癌发生的相关性,通过c Bioportal网站分析卵巢癌组织中ACAP1基因突变的类型,通过GeneMANIA网站分析ACAP1相关信号通路以及相互作用的蛋白。采用免疫组化方法检测ACAP1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况。结果 ACAP1 mRNA在卵巢癌组织中的表达水平高于正常卵巢组织;ACAP家族在卵巢癌组织中存在多种基因突变。应用GeneMANIA网站构建ACAP家族基因互作网络,其中与ACAP家族关系最密切的5个基因为GULP1、ARF6、RAB11FIP3、SLC2A4、VAMP3; ACAP1在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达水平高于正常卵巢组织(P <0.001); ACAP1在卵巢癌原发灶中的高表达与患者的不良预后相关(P=0.037); ACAP1在卵巢癌转移灶中的表达高于卵巢癌原发灶(P <0.001)。结论 ACAP1在卵巢浆液性囊腺癌中高表达,在卵巢癌转移灶中的表达高于原发灶。ACAP1在原发灶中的高...     

昼夜节律基因Bmal1在卵巢浆液性癌发生发展中的作用

目的 探讨节律基因Bmal1在卵巢癌发生、发展的作用。方法 收集2020年9月至2022年2月经山西医科大学第一医院病理确诊的卵巢浆液性癌病例，分为节律异常组和节律正常组，各30例。检测Bmal1、p53(突变型)、Vimentin在卵巢浆液性癌中的表达，采用实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测两组患者肿瘤组织中Bmal1 mRNA和蛋白的表达，用免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)检测患者肿瘤组织中p53(突变型)蛋白、Vimentin蛋白的表达，并运用Image-ProPlus软件分析表达强度。运用χ²检验分析节律和临床病理特征的关系。运用Spearman相关性分析Bmal1蛋白和p53(突变型)蛋白、Bmal1蛋白和Vimentin蛋白的表达相关性。结果 节律异常组患者肿瘤组织中Bmal1 mRNA和蛋白的表达低于节律正常组(P<0.000 1),p53(突变型)MOD值和Vimentin MOD值高于节律正常组(...     

骨膜蛋白调控卵巢浆液性癌细胞增殖和凋亡实验研究

目的:检测卵巢浆液性癌中骨膜蛋白(POSTN)的表达特征,分析其对细胞增殖和凋亡的调控作用。方法:选择41例卵巢浆液性癌患者作为研究对象,选择41例卵巢浆液性囊腺瘤患者作为对照,均留取术后病变组织。应用免疫组化法检测POSTN、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2相关X蛋白(BAX)的表达。选择人卵巢癌细胞株SK-OV-3和OVCAR-3,选择人正常卵巢上皮细胞株IOSE80,基于SK-OV-3和OVCAR-3细胞株转染小干扰RNA-POSTN分别建立si-POSTN组,并设立空白对照组,应用Western blot检测POSTN、PCNA和BAX的表达,应用CCK-8法检测细胞增殖活性,应用流式细胞术观察细胞凋亡。结果:卵巢浆液性癌组织中POSTN、PCNA的阳性率明显高于卵巢浆液性囊腺瘤组织,卵巢浆液性癌组织中BAX的阳性率明显低于卵巢浆液性囊腺瘤组织(均P<0.05)。相关分析显示卵巢浆液性癌组织中POSTN和PCNA呈正相关性(r=0.68,P=0.0241)、POSTN和BAX呈负相关性(r=-0.62,P=0.0348)。SK-OV-3和OVCAR-3细胞株中POS...     

miR-409-3p靶向ZEB1负性调控卵巢浆液性癌HO-8910细胞上皮间质转化

目的 探讨miR-409-3p靶向ZEB1对卵巢浆液性癌HO-8910细胞上皮间质转化的影响及作用机制.方法 利用脂质体分别将对照mimics和miR-409-3p mimics转染入HO-8910细胞中,qRT-PCR检测其转染效率,Western blot检测各组细胞中ZEB1、E-cadherin、N-cadhe...     

SIRT1、p53在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的:探讨SIRT1、p53蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达,分析其在卵巢浆液性癌发生发展中的作用。方法:应用Envision二步免疫组织化学方法检测SIRT1、p53在41例卵巢浆液性囊腺癌,26例卵巢交界性浆液性囊腺瘤,28例卵巢浆液性囊腺瘤中的表达。结果:(1)SIRT1、p53在卵巢浆液性囊腺癌,卵巢交界性浆液性囊腺瘤,卵巢浆液性囊腺瘤中阳性表达差异有统计学意义(P0.05);(2)SIRT1在卵巢浆液性囊腺癌低分化组的表达高于高分化组,在淋巴结阳性组的表达明显高于淋巴结阴性组(P0.05)。(3)SIRT1与p53无明显相关性。结论:SIRT1在卵巢浆液性癌中高表达。且在病理高级别及淋巴结阳性组的患者中的表达较高,提示SIRT1在肿瘤的发生发展中起到了促进作用。     

miR-631的表达与卵巢上皮性癌预后的关系

目的：分析微小RNA-631（miR-631）的表达量与卵巢上皮性癌（EOC）患者临床病理特征和预后的关系,并探讨miR-631对EOC细胞迁移的作用及对成瘤体积的影响。方法：从癌症和肿瘤基因图谱（TCGA）数据库中提取570例EOC患者的临床病理特征及相应的miR-631的相对表达量,由X-tile软件计算出miR-631相对表达量的最佳截断值,根据此最佳截断值将患者分为miR-631高表达组和miR-631低表达组,再用Kaplan-Meier曲线和Cox比例风险模型来评估miR-631表达量在EOC患者中的预后价值。挑选miR-631低表达的EOC细胞株A2780、COV504和miR-631高表达的细胞株ES2和SKOV3,分别上调和下调miR-631表达量,观察细胞迁移能力。建立裸鼠EOC模型,分为对照组和miR-631类似物组,观察2组肿瘤体积。结果：Kaplan-Meier分析显示,miR-631低表达组（miR-631相对表达量＜4.78）的EOC患者的总体生存期（OS）较miR-631高表达组（miR-631相对表达量≥4.78）差（HR=0.65,95%CI=0.47～0.89,P=0.008）。单因素和多因素COX回归分析发现miR-631的表达可能是影响EOC患者预后的独立因素（HR=0.72,95%CI=0.54～0.97,P=0.029）。上调miR-631的表达会抑制EOC细胞的迁移,下调miR-631的表达会促进EOC细胞的迁移。在EOC裸鼠模型中,上调miR-631会减小EOC体积。结论：miR-631的低表达可能预示着EOC患者预后较差,上调miR-631可以抑制EOC细胞的迁移,并且可以显著地减小肿瘤体积,可能对EOC有治疗意义。     

Caveolin-1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨基因蛋白Caveolin-1的表达在卵巢癌侵袭和转移中的作用。方法选取2011年1月~2014年1月廊坊市人民医院手术切除卵巢组织存档蜡块89例,其中卵巢浆液性囊腺瘤58例和卵巢浆液性囊腺癌31例,另取10例因其他良性卵巢病变手术切除的正常卵巢组织作为对照。应用流式细胞免疫法检测99例卵巢组织中Caveolin-1的定量表达,分析Caveolin-1与卵巢癌侵袭和转移的关系。结果卵巢浆液性囊腺癌中Caveolin-1的平均荧光指数(FI)为(0.66±0.27),明显低于正常卵巢组织(1.00±0.16)和卵巢浆液性囊腺瘤(1.69±0.34),差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。有淋巴转移的卵巢浆液性癌Caveolin-1蛋白平均FI值为(0.57±0.29),明显低于无淋巴转移的卵巢液性癌(0.94±0.31),差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期的卵巢浆液性癌Caveolin-1蛋白FI值为(0.51±0.23),明显低于Ⅰ~Ⅱ期的卵巢浆液性癌(0.92±0.24),差异有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢浆液性囊腺癌组织中Caveolin-1的低表达促进了其侵袭和转移,提示Caveolin-1可作为卵巢浆液性囊腺癌诊断和判断预后的指标。     

miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的相关性

目的研究miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达,探讨其表达与相关临床病理参数的关系。方法用RT-QPCR方法检
测74例肝细胞癌手术切除的癌组织与相应的非癌组织中miR-126/miR-126*的表达,分析其表达与相关临床病理参数的关系。
结果miR-126/miR-126*在癌组织中表达水平显著低于相对应的非癌组织;miR-126/miR-126*在肝癌中的表达呈正相关关系;
复发组癌组织中miR-126/miR-126*的表达显著低于未复发组癌组织;miR-126/miR-126*高表达组无瘤生存时间显著优于低表
达组。结论miR-126/miR-126*的的低表达可能是影响肝细胞癌转移并导致患者不良预后的一个重要因素。
     

Fascin基因在卵巢浆液性癌中的表达及其意义

目的了解Fascin基因在卵巢浆液性癌中的表达情况及其意义。方法采用免疫组织化学法分别检测71例卵巢浆液性癌,17例交界性囊腺瘤和20例良性囊腺瘤中的Fascin表达。结果卵巢浆液性癌、交界性囊腺瘤及良性囊腺瘤标本Fascin蛋白表达率分别为91.55%（65/71）、17.64%（3/17）和0%（0/20,P〈0.05）。卵巢浆液性癌标本中,高分化与中分化及低分化卵巢浆液性癌中Fascin蛋白表达率分别为62.5%（10/16）、100%（55/55,P〈0.05）。交界性囊腺瘤标本中,高级别增生肿瘤及交界性肿瘤淋巴结和腹膜种植结节中Fascin蛋白表达率分别为30%（3/10）、42.86%（3/7,P〈0.05）。结论卵巢浆液性肿瘤中Fascin表达与肿瘤的级别及淋巴结转移密切相关,对卵巢浆液性肿瘤的早期诊断、治疗及判断预后可能有重要的意义。     

Transgelin基因在卵巢浆液性肿瘤中的表达

目的 探讨Transgelin基因在卵巢浆液性肿瘤发生、发展过程中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western Blot方法对10例正常卵巢、11例卵巢良性浆液性瘤、14例卵巢交界性浆液性瘤及38例卵巢浆液性癌组织中Transgelin基因mRNA及蛋白进行检测.结果 Transgelin基因mRNA及蛋白在卵巢浆液性癌中阳性表达率及相对含量皆低于卵巢交界性浆液性瘤、良性浆液性瘤及正常卵巢组织,差异均有显著性(P<0.05).Transgelin基因mRNA及蛋白低表达或缺失与卵巢浆液性癌的临床手术病理分期、组织学分级及淋巴结转移有关,与有无腹水无关.结论 Transgelin基因低表达或表达缺失为卵巢浆液性肿瘤发生过程中的早期事件,可能是卵巢浆液性肿瘤发生过程中的抑制因素,与卵巢浆液性癌的发生、发展密切相关.     

miR-300在浆液性卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-300在浆液性卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义。方法:收集卵巢癌患者、良性卵巢肿瘤患者及健康妇女各57例的血清标本,提取血清总RNA,通过实时定量PCR检测血清miR-300的表达水平,并绘制ROC曲线;采用χ2检验miR-300的表达水平与卵巢癌患者临床病理特征的关系,Kaplan-Meier法分析患者5年总体生存率之间的关系。结果:卵巢癌患者血清中miR-300的表达水平显著高于良性卵巢肿瘤患者及健康对照患者,miR-300ROC曲线下面积0.812(95%CI:0.761-0.911),灵敏度为84.6%,特异度为85.3%。血清miR-300的表达水平与浆液性卵巢癌患者的临床分期密切相关(P=0.0018),而与年龄(P=0.792)及淋巴结分期(P=0.793)无显著相关性。血清miR-300高表达的卵巢癌患者5年总体生存率要显著低于血清miR-300低表达患者。结论:浆液性卵巢癌患者血清中miR-300表达水平增高,为浆液性卵巢癌的临床诊断及预后判断提供了重要参考。     

LncRNA HMGA1P4在肝细胞癌中的表达及其与miR-4436a调控关系的研究

目的： 探讨长链非编码RNA（lncRNA）高迁移率族蛋白A1假基因4（ high mobility group A1 pseudogene 4,HMGA1P4）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及临床意义,并验证HMGA1P4与miR 4436a的调控机制及其对肝细胞癌细胞株迁移和侵袭能力的影响。方法： 采用实时荧光定量PCR检测肝细胞癌组织芯片中HMGA1P4和miR-4436a的表达;分析肝细胞癌组织中HMGA1P4的相对表达量与患者临床病理参数及预后的关系;通过Transwell实验验证HMGA1P4与miR 4436a对肝细胞癌细胞株HepG2迁移和侵袭能力的影响;采用双荧光素酶报告实验验证HMGA1P4与miR-4436a之间的调控关系。结果： HMGA1P4在肝细胞癌组织中异常高表达,而miR 4436a在肝细胞癌组织中的表达下调;在肝细胞癌组织中HMGA1P4的异常高表达与肿瘤淋巴结转移,TNM分期,复发,血清γ 谷氨酰转肽酶（γ-GGT）水平,细胞程序性死亡配体1（PD-L1）、表皮生长因子受体（EGFR）以及细胞毒T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）状态相关;在TNM Ⅰ～Ⅳ期、TNM Ⅰ期、TNM Ⅱ期的肝细胞癌患者中,HMGA1P4高表达组患者总体生存率和无复发生存率较低表达组患者显著降低;HMGA1P4高表达是肝细胞癌患者预后较差的独立危险因素。Transwell实验表明下调miR 4436a能够逆转HMGA1P4沉默对HepG2细胞迁移和侵袭的抑制作用;双荧光素酶报告实验表明HMGA1P4能够调控miR 4436a。结论：HMGA1P4的异常高表达对肝细胞癌恶性生物学行为以及不良预后起到促进作用,其能够通过调控miR 4436a 促进肝细胞癌细胞的迁移和侵袭。     

miR-215-5p在甲状腺滤泡癌中的表达及与血清TSH的相关性

目的 观察甲状腺滤泡癌组织中微小RNA-215-5p（miR 215 5p）的表达特征，并分析miR-215-5p与血清中促甲状腺激素（TSH）的关系。方法 选取2014年3月~2017年4月河北省人民医院和河北以岭医院55例甲状腺滤泡癌术后组织为观察组，留取术前的血清标本，另选取55例甲状腺滤泡性腺瘤组织为对照组。应用实时荧光定量PCR（qPCR）检测miR-215-5p的表达，免疫组化法检测甲状腺滤泡癌组织中Ki67的表达，电化学发光法检测甲状腺滤泡癌患者血清TSH的表达。结果 甲状腺滤泡癌中miR-215-5p的表达明显低于对照组，miR-215-5p 的表达在不同肿瘤最大径、Ki67增殖指数和TNM分期的分组中差异有统计学意义（均P＜0.05）。miR-215-5p的表达与预后相关，甲状腺滤泡癌组织中miR-215-5p与血清TSH呈负相关。结论 miR-215-5p在甲状腺滤泡癌中的表达下降，与病变的临床特征相关，且与TSH成负相关。miR-215-5p 的表达与患者预后有关。     

卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义

目的: 探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)及其金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases-1, TIMP-1)在卵巢浆液性肿瘤中的表达特点及意义. 方法: 采用免疫组化法,观察6例正常卵巢组织,12例卵巢浆液性囊腺瘤,12例交界性囊腺瘤,22例卵巢浆液性囊腺癌组织中MMP-9及TIMP-1表达特点及规律. 结果: 正常卵巢上皮细胞只有1例表达MMP-9,但有5例表达TIMP-1. 大部分卵巢浆液性肿瘤细胞都有MMP-9及TIMP-1的表达,但其表达强度在恶性程度不同的肿瘤中有明显差异. 结论: TIMP-1可能参与卵巢的正常生理功能. MMP-9及TIMP-1在卵巢浆液性囊腺癌的浸润、转移中起了重要作用.     

前列腺干细胞抗原在卵巢浆液性腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨前列腺干细胞抗原(PSCA)在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用SP免疫组织化学方法检测75例卵巢浆液性囊腺癌、20例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、20例浆液性囊腺瘤组织标本中PSCA蛋白的表达水平。结果:PSCA蛋白在浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤标本中阳性表达率分别为62.7%、35.0%、15.0%,三者比较有极显著性差异(χ2=29.804,P=0.000)。PSCA蛋白在浆液性囊腺癌中的表达与临床分期及组织分化程度相关(P<0.05),与患者年龄和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:PSCA蛋白与卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展有关,可作为对其进行早期诊断及预后评估的重要参考指标。