一测多评法测定补骨脂中不同类型成分的含量

目的:探讨一测多评法在补骨脂质量评价中的应用.方法:以补骨脂药材为研究对象,选取补骨脂素为指标,确定该成分与其他药效成分——异补骨脂素、补骨脂甲素(补骨脂二氢黄酮)、补骨脂乙素(异补骨脂查耳酮)间的校对因子.考察一测多评法和外标法测得结果的差异性,并研究不同仪器及色谱柱对相对校正因子的影响.结果:补骨脂素对异补骨脂素的相对校正因子、补骨脂素对补骨脂甲素的相对校正因子及补骨脂素对补骨脂乙素的相对校正因子分别为0.8630(1.17％),0.299 6(0.86％),0.201 3(0.37％);一测多评法和外标法测得的数据间RSD均＜3％;不同仪器及色谱柱所得的相对校正因子无显著性差异.结论:一测多评法用于补骨脂的质量评价是可行的.     

基于一测多评法测定白芍中6种成分含量

目的:建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)同时测定白芍中没食子酸(A)、儿茶素(B)、芍药苷内酯(C)、芍药苷(S)、1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖(D)、苯甲酰芍药苷(E)6种成分的含量.方法:采用HP...     

一测多评法测定川白芷药材中 3种香豆素成分的含量

通过建立川白芷中欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素的"一测多评"含量测定方法,实验只用一个对照品同步测定川白芷中的3个成分。以欧前胡素对照品为内标物,在线性范围内,采用HPLC-DAD建立其与异欧前胡素、氧化前胡素的相对校正因子,并用该校正因子进行异欧前胡素、氧化前胡素的含量计算,实现"一测多评";同时采用外标法测定药材中这3种香豆素的含量,并比较计算值与实测值的差异。结果 20批药材中3种香豆素含量的计算值与实测值无显著差异(RSD<5%)。研究结果表明"一测多评"法控制川白芷药材的质量是可行、准确的。     

“一测多评”法测定陈皮中3种黄酮类成分

目的:建立陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素"一测多评"的方法,并验证该方法的准确度及可行性。方法:以橙皮苷为指标,计算川陈皮素、桔皮素与橙皮苷的相对校正因子。采用外标法测定陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量,并利用相对校正因子计算川陈皮素和桔皮素的含量,比较外标法与"一测多评"的结果,以验证"一测多评"法的准确度及可行性。结果:"一测多评"法与外标法共测定22批样品,川陈皮素与桔皮素测定结果 RSD均<2.9%,结果无显著差异。结论:"一测多评"法测定陈皮中的橙皮苷、川陈皮素、桔皮素是准确可行的。     

一测多评法同时测定清解颗粒中3种成分

目的建立一测多评法同时测定清解颗粒(苦杏仁、防风、石膏等)中3种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用依利特C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长210、254 nm;柱温30℃。以苦杏仁苷为内标,建立其他2种成分的相对校正因子,测定含有量。结果苦杏仁苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在37.08～1 236、22.4～748、11.88～396μg/mL范围内线性关系良好(R~2≥0.999 9),平均加样回收率102.17%、101.12%、104.73%,RSD 1.85%、1.74%、2.12%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法准确可靠,可用于清解颗粒的质量控制。     

一测多评法同时测定蜘蛛果中3种成分

目的建立一测多评法同时测定蜘蛛果中绿原酸、木犀草素、芹菜素的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Pntulips BP-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-甲醇-0.1%磷酸水,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长340 nm。以绿原酸为内标,计算其他2种成分的相对校正因子,测定其含有量。结果绿原酸、木犀草素、芹菜素分别在0.022 00～0.351 3、0.006 312～0.101 0、0.000 527 4～0.041 20 mg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 8),平均加样回收率(RSD)分别为96.00%(1.5%)、 96.34(2.4%)、95.93(2.5%)。一测多评法所得结果接近于外标法。结论该方法稳定可靠,可用于蜘蛛果药材的质量控制。     

一测多评法测定不同产地紫苏子中4种活性成分的含量

目的:建立同时测定紫苏子中咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素含量的方法。方法:采用Agilent SB C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)柱;以乙腈为流动相A,0.1%甲酸溶液为流动相B,按梯度洗脱(0～6 min,10%～18%A;6～15 min,18%～50%A);流速为0.3 mL·min~(-1);检测波长为330 nm;柱温为30℃;进样量为2μL。以迷迭香酸为参照物,计算其对咖啡酸、木犀草素及芹菜素的相对校正因子,比较外标法与一测多评法(QAMS)所得含量的差异,验证该方法的可靠性。结果:咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素分别在0.653 2～32.661 7、5.133 2～256.658、0.727 3～36.364 0、0.755 0～37.750 6μg·mL~(-1)线性关系良好;平均加样回收率分别为111.57%(RSD=3.32%)、101.97%(RSD=0.30%)、95.11%(RSD=2.76%)和98.33%(RSD=5.40%);相对校正因子分别为1.69、1.00、1.05、1.42,外标法与一测多评法(QAMS)所得含量结果差异较小。结论:所建立的QAMS可准确测定紫苏子中4种活性成分的含量。     

基于一测多评法测定相思子叶总黄酮部位中5种成分含量

目的 建立一种适用于相思子叶黄酮部位中5个黄酮成分含量测定的一测多评法（QAMS）。方法 采用高效液相色谱法,以滨蓟黄苷为内标,通过外标法（ESM）建立其与柚葡糖苷、（2R）-柚皮素6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷、异柚葡糖苷和高车前素-4′-O-β-D葡糖苷的相对校正因子（RCF）,以该RCF计算对应4种成分的含量（计算值）,分析计算值与实测值之间的差异,实现一测多评。结果 柚葡糖苷、（2R）-柚皮素6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷、异柚葡糖苷和高车前素-4′-O-β-D葡糖苷与滨蓟黄苷的RCF分别为0.76、0.77、1.38和0.33,且该RCF具有良好稳定性和重现性。12批相思子叶总黄酮样品经QAMS与ESM测定比较,结果无显著性差异,计算值与实测值之间的RSD均小于4%。结论 所建立的QAMS具有良好的准确性和可靠性,可用于相思子叶总黄酮部位的品质分析和评价。     

一测多评法测定苦参中5种生物碱的含量

目的:在建立苦参中5种主要生物碱成分同时测定方法的基础上,建立5种生物碱一测多评测定方法,验证该方法在苦参含量测定中应用的可行性和技术适应性.方法:以苦参中5个主要生物碱成分为指标,建立氧化苦参碱与槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱的相对校正因子,并考察了相对校正因子的重现性;同时采用外标法测定该5种生物碱的含量.结果:相对校正因子的重现性较好;21批苦参药材和饮片中5个生物碱的含量用一测多评法进行测定,其计算值与外标法实测值间无明显差异.结论:以同步测定氧化苦参碱、槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱的一测多评法控制苦参药材和饮片的质量是可行的、准确的.     

女贞子“一测多评”法测定

目的:建立女贞子"一测多评"(QAMS)法,以实现女贞子中多指标成分控制。方法:采用HPLC法,以建立女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷和oleonuezhenide含量测定方法为基础,以特女贞苷为参照物,统计其他成分的相对校正因子(fi,s)作为定量参数,同时统计其他组分与特女贞苷的相对保留时间(γi,s)作为定性参数。结果:各成分分离良好,系统适应性与方法学考察结果符合含量测定要求,在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均0.999 5,平均回收率为96.8%~105.0%(RSD≤3%),在系统适应性范围内各fi,s的RSD均5%,各γi,s的RSD均2%,比较校正因子法与外标法的测定值,显示无显著差异。结论:建立的QAMS法准确、快速,结果可靠,具有可操作性,可用于女贞子多指标成分质量控制。     

山豆根致大鼠肝毒性研究

目的:观察山豆根长期大剂量给药后对大鼠产生的肝毒性反应。方法:SD大鼠,随机分为正常组、12 g.kg-1山豆根组、20 g.kg-1山豆根组,分别灌服蒸馏水、12 g.kg-1山豆根水煎液(0.6 g.mL-1)、20 g.kg-1山豆根水煎液(1 g.mL-1),连续给药26 d。观察给药期间的一般表现,体重变化等。末次给药后,用25℅乌拉坦腹腔麻醉,腹主动脉取血,离心,取血清,全自动生化仪检测ALT,AST,ALP,TbiL,TP,ALB,GLO等肝功能指标;摘取肝脏,称质量,计算脏器指数;按电镜要求,取肝脏组织,固定,透射电镜下观察超微结构。结果:大鼠连续灌胃山豆根水煎液10 d后,动物活动减少,四肢无力,粪便以及尿液增多;26d后,与正常组比较,ALT值及肝脏脏器指数升高(P0.01或P0.05),TP,ALB值降低(P0.01或P0.05);电镜显示,山豆根组动物肝脏细胞核变形、有肿胀趋势,核膜皱缩,毛细胆管扩张,滑面内质网略见扩张。结论:大鼠连续灌胃山豆根后,可对肝脏产生毒性,且随着剂量增加,毒性增强。     

山豆根水煎液致大鼠亚急性肝脏毒性研究

目的:给予质量可控的山豆根(RRST)水煎液致大鼠肝脏毒性,并探讨其毒性作用机制.方法:采用代表性好、来源固定的药材,取山豆根饮片加6倍量水,浸泡30 min,武火煮沸,换文火煎煮60 min,共煎煮2次,合并2次的滤液浓缩至生药2 g·mL-1,得山豆根水煎液储备液,并对其苦参碱及氧化苦参碱进行测定,对其质量进行控制.动物实验:选用Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组(灌胃给予蒸馏水)、阳性对照组(灌胃给予10％ CCl4)、低剂量组(灌胃给予1 g·kg-1山豆根水煎液)、中剂量组(灌胃给予4 g·kg-1山豆根水煎液)和高剂量组(灌胃给予16 g·kg-1山豆根水煎液),每组6只.连续给药14d,第15天ip 25％乌拉坦麻醉,腹主动脉取血,离心取血清测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA),采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α).摘取肝脏,称重,计算脏器指数,病理制片,进行组织病理学检查.取部分肝组织加冷生理盐水制成10％肝匀浆,离心,取上清波,测定肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性,丙二醛(MDA)含量.结果:大鼠连续给予不同剂量山豆根水煎液7d后,高剂量组出现活动减少,四肢无力;14 d后,与空白对照组相比,高剂量组ALT,ALP,TBA值升高(P＜0.05),病理组织学检查发现高剂量组的肝细胞肿大,并伴有炎症浸润.高剂量组及阳性对照组的IL-6,TNF-α含量升高(P＜0.05及P＜0.01),SOD活性降低,MDA含量升高(P＜0.05),SOD/MDA含量显著降低(P＜0.01).结论:山豆根具有肝脏毒性,给予大鼠16 g·kg-1山豆根水煎液可导致明显的肝损伤,且其损伤机制与炎症因子的作用和脂质过氧化有关,与四氯化碳的肝毒性具有一定的相似性.     

一测多评法测定贵州产切面红色土茯苓中3种活性成分的含量

目的:建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷及落新妇苷的一测多评分析方法,并验证该方法的可靠性和准确性。方法:以落新妇苷为内参物,通过方法学考察,建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷对落新妇苷的相对校正因子,根据建立的相对校正因子计算22批药材中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷的含量,并比较外标工作曲线法、外标一点法与一测多评法的结果,验证一测多评法的准确性和科学性。结果:建立的5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷相对于落新妇苷的相对校正因子重复性和耐用性良好;一测多评法计算的22批贵州产切面红色土茯苓药材样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷含量与外标工作曲线法、外标一点法的含量测定结果无明显差异(RSD4.0%);样品含量分析结果表明样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷和落新妇苷的含量差异较大,分别为0.106 3%~2.692%,0.031 29%~0.677 1%,0.581 2%~4.897%。结论:建立的一测多评法准确可靠,可用于贵州产切面红色土茯苓的多成分质量评价。     

山豆根药理毒理研究进展

山豆根为临床常用药,具有抗肿瘤、抗病毒、抑菌、镇痛抗炎、抗肝损伤、抗氧化及增强免疫等多种药理作用,但同时也会导致肝、神经、胃肠道及呼吸中枢等毒性反应。山豆根产生的药效及引起的毒性反应与提取工艺、使用剂量、给药时间有关。因此,探索合适的山豆根提取工艺、毒效剂量范围、毒性物质基础可以为山豆根减毒及临床安全用药提供保障。     

金雀花碱在山豆根肝毒性中的作用

目的:通过金雀花碱(CYT)体内和体外的肝毒性研究,探讨山豆根的肝毒性是否与CYT相关。方法:小鼠肝AML12细胞用于体外肝毒性研究,细胞增殖及细胞毒性检测(CCK-8)试剂盒检测细胞活性。分别加入终浓度为6,10,14 mmol·L~(-1)的CYT,于加药后3,6,12,24 h,取细胞上清液,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL)及乳酸脱氢酶(LDH)水平。急性毒性实验,小鼠分别单次口服灌胃24.8,33.1,44.2,58.9,78.5 mg·kg~(-1)CYT,设空白组。亚慢性毒性实验,小鼠随机分为3组,分别口服灌胃超纯水,11.2,14.0 mg·kg~(-1)CYT,连续90 d。第91天小鼠麻醉后取血清检测ALT,AST,TBIL,LDH等生化指标,并做肝脏病理切片。结果:CYT的半抑制浓度(IC50)为15.17 mmol·L~(-1)。14 mmol·L~(-1)CYT自6 h起,ALT,AST释放逐渐增加,于12 h达到峰值(P0.05,P0.01),之后有下降趋势(P0.01);14 mmol·L~(-1)CYT早在给药6 h,LDH释放就已经显著升高(P0.01),在12 h达到顶峰(P0.01),在24 h有下降趋势(P0.01);各浓度CYT在3,6,12,24 h时,较相应时间点空白组而言,TBIL释放均无显著性差异。在急性毒性实验,CYT的半数致死量(LD50)为48.16 mg·kg~(-1),属于全球化学品统一分类和标签制度(GSH)第2级。在亚慢性毒性实验,与空白组相比,CYT组小鼠血清ALT及LDH水平无明显差异;虽然CYT 14.0 mg·kg~(-1)组小鼠血清TBIL含量升高(P0.05),AST含量下降(P0.05),但是均在本实验室背景数据范围内,与空白组相比,肝组织病理学切片亦无明显差异,这一结果可能与CYT14.0 mg·kg~(-1)组小鼠一半死亡,导致血液生化及肝脏病理标本量减少相关。结论:CYT属于GSH分类的经口急性毒性2级毒性物质,其在体外培养条件下具有肝细胞毒性,但是其在体内的肝毒性以及是否为山豆根肝毒性的毒性成分需要进一步研究。     

山豆根中生物碱的毒性研究进展

目的:介绍山豆根中生物碱的毒性研究进展。方法:查阅国内外相关资料从临床表现、实验室研究及毒性机制3个方面,对山豆根毒性研究进行汇总、分析、综述。结果:山豆根具有神经毒性、肝毒性、心血管毒性及引起胃肠道反应、过敏反应。毒性以胃肠道反应、肝毒性为主,但是以神经毒性为最。结论:山豆根中生物碱是引起毒性反应的物质基础,其中苦参碱和氧化苦参碱是主要毒性成分,超剂量服用是中毒的主要原因,毒性机制与抑制体内乙酰胆碱酯酶活性及氧化应激、炎症损伤相关。     

GC-MS定量测定山豆根非生物碱部分成分含量

目的:采用GC-MS定性、定量分析山豆根非生物碱中的部分化学物质组成和含量.方法:非生物碱部位样品经TMs衍生后,采用GC-MS法测定,通过NIST 2.0数据谱库检索,结合人工解析,鉴定各种化学成分.在此基础上,测定了各组分的含量.结果:从非生物碱部位共鉴定了24个化合物,其中定量测定了19个化合物的含量,占总量的34.72%,其中5个糖类成分占22.62%,9个有机酸占11.81%,其他5个成分占0.29%.结论:该法简便、快速、灵敏度高、重复性好,为定性、定量测定植物中复杂初生代谢产物提供了一种有效方法.     

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??OBJECTIVE To develop a simultaneous quantitative analysis method of four triterpenoids in Alismatis Rhizoma by multi-components by single maker (QAMS). METHODS Four main triterpenoids (alisol A, alisol A 24-acetate, alisol B and alisol B 23-acetate) were selected as analytes to evaluate the quality of Alismatis Rhizoma. Alisol B 23-acetate was used as the internal reference standard and three relative correction factors (RCFs) to alisol B 23-acetate were calculated. These RCFs were obtained by high performance liquid chromatography coupled with diode array detector under various chromatographic conditions. Then 31 batches of Alismatis Rhizoma samples collected from different areas were determined by both external standard method (ESM) and QAMS. RESULTS The RCFs were obtained with good reproducibility (RSD ?? 2.25%). No obvious differences were observed between the analysis results of QAMS method and ESM method (RSD ?? 3.52%). CONCLUSION The established QAMS method is reliable and feasible for simultaneous analysis of four triterpenoids and could be used for quality control of Alismatis Rhizoma.     

Quality Evaluation of Astragali Radix Products by Quantitative Analysis of Multi-components by Single Marker

Objective To develop a quantitative analysis of multi-components by single-marker(QAMS)method for the simultaneous determination of eight components in Astragali Radix products,and to examine the feasibility of using the method among the different dosage forms and between two different types of compounds.Methods Eight main effective components,campanulin,genistin,ononin,calycosin,genistein,formononetin,methylnissolin,and astragaloside IV were selected as analytes for the quality control of Astragali Radix products.Calycosin was selected as the internal reference substance,the content of which was determined by external standard method;the relative correction factors(RCFs)of campanulin,genistin,ononin,genistein,formononetin,methylnissolin,and astragaloside IV were calculated.In total,twelve Astragali Radix specimen in decoction pieces,as well as in two different dosage forms,such as granule and oral liquid products,were used for the quality control by both methods of external standard and QAMS.The validity of the QAMS method was evaluated by comparison on the quantitative results of the two methods.Results These RCFs were obtained with good reproducibility(RSD<6.5%)by using ultra high performance liquid chromatography coupled with diode array detector under various chromatographic conditions.Meanwhile,no obvious differences(RSD<3.98%)were found in the quantitative results of the seven components in twelve samples of Astragali Radix products determined by the two methods.Conclusion QAMS is a reliable and feasible method in determining the components in products of Astragali Radix.     

山豆根致大鼠肝毒性机制研究

目的:研究山豆根致大鼠肝脏损害的毒性机制.方法:SD大鼠,随机分为山豆根组和正常组,山豆根组灌服10g·kg-1山豆根水煎液7 d后,灌服20g·kg-1山豆根水煎液至26d,正常组灌服等容量蒸馏水,连续给药26 d后,25％乌拉坦腹腔麻醉,腹主动脉取血,离心,取血清测ALT,AST.摘取肝脏,加冷生理盐水制成10％肝匀浆,离心,取上清液,测定肝组织中SOD,GSH活性,MDA,γ-GT蛋白含量;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定大鼠肝组织TNF-α含量;采用免疫组织化学SABC法测定大鼠肝组织ICAM-1蛋白表达量.结果:与正常组比较,口服山豆根水煎液后,大鼠血清ALT,AST值显著升高(P＜0.01);SOD/MDA,GSH显著下降(P＜0.01);γ-GT值显著上升(P＜0.05);TNF-α含量升高(P＜0.05);ICAM-1阳性表达明显增强(P＜0.01).结论:大鼠灌胃给予山豆根后,可对肝脏产生明显的毒性,其机制可能与自由基及炎症因子的产生有关.