基于WNT/β-catenin信号通路研究DMBT1调控慢性肾小球肾炎发生发展的作用机制

目的研究DMBT1在人慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)中相对表达及甲基化水平,分析DMBT1与WNT/β-catenin信号通路在CGN发生发展中的关联。方法收集30例正常人肾组织(肾癌手术中切除的癌旁正常肾组织)、86例CGN患者肾组织作为研究对象,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DMBT1在CGN肾组织中的表达,采用甲基化PCR分析DMBT1在CGN患者中甲基化水平。选取人肾小球足细胞分为两组:DMBT1转染组(进行DMBT1基因过表达)和对照组,采用细胞划痕实验研究两组细胞迁移情况;通过免疫蛋白印迹实验验证DMBT1对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与正常肾组织相比,DMBT1在CGN患者肾组织中表达下调(P0.01);甲基化PCR结果显示CGN患者的DMBT1甲基化程度明显增高;DMBT1基因过表达能抑制细胞迁移和侵袭(P0.01);过表达DMBT1后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论 DMBT1在CGN中下调,能作为重要的调控因子参与CGN的发生发展。     

Wnt/β-catenin信号通路与骨关节炎

近年大量研究证实Wnt/β-catenin信号通路通过调节胚胎期软骨发育及出生后软骨发生、成骨细胞和破骨细胞生成、软骨内成骨、骨重塑、骨折修复等过程,调控骨骼系统相关疾病和骨代谢,对骨关节炎(OA)发生发展、骨软骨组织诱导和修复起着至关重要的作用。基因敲除小鼠模型常用于Wnt/β-catenin信号通路与OA关系研究,全基因组扫描已发现一些与OA密切相关的单核苷酸多态性位点。目前在多个水平进行Wnt/β-catenin信号通路靶向治疗OA研究,重点考虑药物安全性。该文就Wnt/β-catenin与OA关系的研究进展作一综述。     

三七皂苷调控Wnt/β-catenin信号通路对激素性股骨头坏死大鼠的作用机制研究

目的：探究不同剂量三七皂苷对激素性股骨头坏死模型大鼠骨力学参数的影响及对Wnt/β-catenin信号通路分子的干预作用。方法：50只SD大鼠分为对照组、模型组、三七皂苷低剂量组、三七皂苷中剂量组和三七皂苷高剂量组,每组10只,采用20 mg/(kg·d)甲基强的松龙诱导激素性股骨头坏死大鼠模型,每周注射3次,连续注射3周,对照组注射等量生理盐水。造模成功后,三七皂苷低、中、高剂量分别给予5、10、20 mg/(kg·d)剂量的三七皂苷灌胃6周,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。实验终点检测大鼠骨密度、骨生物力学指标、骨形态学指标;通过ELISA法检测各组大鼠血清中抗酒石酸碱性磷酸酶（TRAP）、尿I型胶原交联N末端肽（U-NTX）、骨碱性磷酸酶（BALP）、雌二醇（E2）、尿型胶原交联C末端肽（U-CTX）、骨钙蛋白（BGP）等骨转化指标;通过qPCR、Western blot法及免疫组化检测骨组织中Wnt/β-catenin信号通路关键分子Wnt5a和c-Myc的mRNA和蛋白表达水平。结果：三七皂苷能显著增加股骨头坏死大鼠股骨、脊柱骨的骨密度,提高股骨生物力学参数水平（P &l...     

骨性关节炎的发病机制及其与Wnt/β-catenin信号通路的关系

[目的]探讨Wnt/β-catenin信号通路在骨性关节炎发病过程中的重要作用.[方法]广泛查阅近年来有关骨性关节炎发病机制的国内外文献,并进行总结和分析.[结果]骨性关节炎的病变特征为软骨破坏和骨赘形成同时伴有滑膜的病变,近期研究证实Wnt/β-catenin信号通路在骨性关节炎发病中起着至关重要的作用.[结论]骨性关节炎是在诸多危险因素联合作用下的一种进行性病变,Wnt/β-catenin信号通路在骨性关节炎发病中起着至关重要的作用.     

中医药介导Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松的研究进展

骨质疏松症（osteoporosis,OP）的发生多由骨吸收大于骨形成导致骨稳态失衡所引起,随着人口老龄化的到来,已逐渐发展成为困扰50岁以上人群的常见慢性代谢性骨病。Wnt/β-catenin信号通路在骨骼相关细胞增殖、分化中发挥着重要作用,通过激活其核心蛋白β-catenin,上调骨形态发生蛋白-2、骨保护素及下调核因子κB受体活化因子配体的表达,进而促进间充质干细胞成骨分化和抑制破骨细胞活性,达到促进骨形成和抑制骨吸收的目的,在骨骼靶向重建及骨稳态中发挥着重要作用。中医药可通过激活Wnt/β-catenin通路影响相关因子表达防治OP,但其分子机制研究尚未完全阐明。笔者旨在探讨Wnt/β-catenin通路在OP发病中的分子机制及综述中医药介导Wnt/β-catenin信号通路防治OP的研究成果,为中医药防治OP提供依据和新思路。     

香烟烟雾暴露对大鼠睾丸组织wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨香烟烟雾暴露对雄性大鼠睾丸组织中wnt/β-catenin信号通路分子表达水平的影响。方法 8周龄雄性SD大鼠200只,按香烟烟雾剂量分为4个组:正常对照组(新鲜空气,0根香烟/d)、低剂量组(10根香烟/d)、中剂量组(20根香烟/d)和高剂量组(30根香烟/d);各组再按照香烟暴露时间长短分为2周、4周、6周、8周和12周5个亚组,每个亚组10只动物。相应暴露时间结束后,立即处死大鼠,HE染色法观察睾丸组织病理结构的变化,RT-PCR和Western blot方法分析睾丸组织中wnt-2b、β-catenin、磷酸化β-catenin及GSK-3β的mRNA和蛋白的表达水平,统计分析各组间的差异。结果随着暴露时间和暴露剂量的增加,睾丸组织出现明显的病理损伤;睾丸组织中wnt-2b和β-catenin在mRNA和蛋白水平均表达下调,GSK-3β在mRNA和蛋白水平表达上调,磷酸化β-catenin(P-β-catenin)在蛋白表达水平上调,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论香烟暴露引起睾丸组织结构损伤,可能与睾丸组织中GSK-3β表达水平上调、wnt/β-ca...     

Wnt/β-catenin信号通路重要分子及其靶基因在原发性肝癌中的作用机制

肝癌是我国及某些亚非地区常见的恶性肿瘤之一,死亡率较高.近年来我国肝癌的发生率有上升趋势,因此了解肝癌的发生发展机制及其治疗刻不容缓.但目前对其发生机制仍不清楚.其中细胞信号转导对其发生、发展、转移起着至关重要的作用.如Notch信号通路、Wnt信号通路、Ras、Jnk信号通路、mTOR通路等,目前倍受关注的是Wnt/β-catenin转导途径.经典Wnt信号通路研究最多且相关机制解释较为清楚,其激活的重要标志是β-catenin于胞质稳定表达及核内定位.研究表明,Wnt信号通路各蛋白表达水平改变及相关基因突变参与了原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生.     

Wnt/β-catenin信号通路在乳腺癌中的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路参与细胞增生分化的调节、基因表达调控和细胞迁移等重要生物过程.近年研究发现,Wnt/β-catenin信号通路的异常与乳腺癌等多种肿瘤的发生、发展密切相关.深入研究Wnt/β-catenin信号通路在乳腺癌中的作用,有助于进一步揭示乳腺癌的发生机制,为乳腺癌的防治提供新的思路及干预靶点.本文就Wnt/β-catenin通路的组成及调控机制、Wnt/β-catenin通路与乳腺癌发生、发展的关系及Wnt/β-catenin通路在乳腺癌诊治中的展望作一综述.     

Wnt／β-catenin信号通路对神经干细胞增殖分化的影响

Wnt／β-catenin信号通路在生物发育、细胞转运、肿瘤形成及细胞凋亡等生命过程中发挥着重要的作用，它的异常活化常常与多种肿瘤的发生、发展有着密切的关系。近年的研究发现它在神经干细胞（NSCs）增殖、分化过程中的调控上有着让人欣喜的作用，因此Wnt／β-catenin信号通路对NSCs的作用更受到广泛的关注。本文就此作一篇综述。     

青娥丸调控Wnt1/β-catenin信号通路治疗糖尿病骨质疏松

目的 探究青娥丸对糖尿病骨质疏松（diabetic osteoporosis,DOP）小鼠模型Wnt/β-catenin通路的影响。方法 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲菌素建立DOP小鼠模型,对小鼠进行药物干预,分为空白组、模型组、青娥丸低、中、高剂量组及阿仑膦酸钠组,进行一般状态观察,股骨组织进行HE染色,验证造模成功情况。生化检测各组小鼠碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、天冬氨酸转氨酶（AST）的水平,免疫组化检测股骨Wnt/β-catenin信号传导通路中相关蛋白Wnt1、β-catenin、Runx2表达水平,HE染色观察各组股骨组织细胞形态,qPCR检测股骨组织中GSK-3β、低密度脂蛋白受体相关基因5(LRP5)、COL1A1 mRNA水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠骨小梁间隔增大,骨小梁之间连接减少,小鼠多饮多尿少动,尾静脉血糖值增加（P＜0.01）,血清中ALP、BUN、AST含量和GSK-3β mRNA水平均增加（P＜0.01）,体重和LRP5、COL1A1 mRNA水平下调（P＜0.01）,Wnt1、β-catenin、Runx2蛋白呈少量阳性表达（P＜0.01）。与模型组相比,青娥丸组和阿仑膦酸钠组骨小梁间隔变小,骨小梁间的连接增多,尾静脉血糖值下降（P＜0.01）,血清中ALP、BUN、AST含量和GSK-3β mRNA水平均减少（P＜0.01）,体重和LRP5、COL1A1 mRNA水平上调（P＜0.01）,Wnt1、β-catenin、Runx2蛋白阳性表达增多（P＜0.01）。结论 青娥丸可增强DOP小鼠骨组织的修复作用,其机制可能与Wnt1/β-catenin信号通路的激活有关。关键词：中医中药;青娥丸;糖尿病性骨质疏松;骨组织;Wnt1/β-catenin信号通路     

Wnt/β-catenin信号通路调节软骨代谢作用于骨坏死疾病的研究进展

越来越多的学者认为骨坏死疾病的发生与软骨细胞代谢异常有关,而Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的激活能促进软骨细胞分化,同时也能促进软骨分化中的细胞死亡。因此暗示该通路能够通过调节软骨代谢影响骨坏死疾病的发生发展。其次,软骨细胞特异性β-catenin基因条件敲除小鼠模型的成功建立,有助于阐明Wnt/β-catenin信号通路调节软骨代谢的作用机制,为骨坏死疾病的病机阐述以及针对性治疗提供支持。本文就Wnt/β-catenin信号通路、软骨代谢与骨坏死三者间的关系展开综述。     

蒙药那仁满都拉调控Wnt/β-catenin信号通路抗骨质疏松的作用及机制

目的 观察蒙药那仁满都拉对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨微结构与骨形成的影响,初步探讨其防治骨质疏松的作用及机制。方法 将30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙药那仁满都拉低、中、高剂量组,每组6只,利用去卵巢大鼠构建骨质疏松模型大鼠,模型制备成功后用蒙药灌胃,假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。连续12周后,通过对股骨组织进行Micro-CT、骨骼力学检测、HE染色,分别观察大鼠骨密度、骨骼力度、骨组织病理形态,检测Wnt、β-catenin蛋白表达情况;从1日龄大鼠颅骨中提取成骨细胞用低、中、高浓度的含药血清干预后检测ALP染色、矿化染色,观察其ALP分泌、矿化结节大小,检测Wnt、β-catenin蛋白表达情况。结果 在模型大鼠股骨组织中Micro-CT显示,蒙药组均能增加骨小梁密度;骨骼力学分析显示,蒙药组均能提高骨骼力学的载荷与刚度,其中中、高剂量组具有显著统计学意义(P<0.01,P<0.05)。HE染色结果显示蒙药组均可明显改善骨小梁病理变化;Western blot结果提示蒙药组中Wnt、β-catenin蛋白表达明显升高(P<0.000 1);蒙药含药血...     

抑制Wnt/β-catenin信号通路对骨折愈合的影响

目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路在骨折愈合中所起的作用. 方法采用8周龄Col2al-ICAT转基因小鼠为实验组(转基因在软骨细胞中特异性表达后可竞争性阻断β-catenin信号)和同窝出生WT小鼠(对照组)作为实验动物,分别制备右下肢胫骨中段截断骨折模型.于骨折后7、9、14、21、28 d取材进行分析,通过X线片、组织学观察和组织形态计量学分析,比较两组软骨痂和骨性骨痂在骨折愈合不同时期所占的比例. 结果通过X线片观察发现,骨折后第21天,WT小鼠骨折线已消失,而Col2al-ICAT转基因小鼠骨折线仍可见.组织学观察发现,与WT小鼠相比,Col2al-ICAT转基因小鼠软骨痂出现延迟,软骨内骨化受阻,骨折的塑形改造延迟.组织形态计量学结果显示:Col2al-ICAT转基因小鼠软骨痂较晚出现高峰期,骨折后第14和第21天时骨性骨痂占总骨痂的比例明显低于WT小鼠,差异有统计学意义(P<0.05).结论 抑制Wnt/β-catenin信号通路将抑制骨折愈合的软骨内骨化过程,最终导致骨折愈合延迟.     

Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调节成骨细胞分化的研究进展

在成骨细胞的分化增殖中,经典Wnt /β-catenin通路起着重要的调节作用;此通路中的任何一个因子都能影响成骨细胞的分化增殖。近几年里,大量研究证明R-脊椎蛋白家族巳成为Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子。本文就Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调控影响成骨细胞分化增殖的研究进展作一综述。     

microRNA-21调节Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症作为老年骨科中的一种代谢性及慢性疾病,主要表现为骨密度降低及骨骼脆性增加。microRNA-21作为最为密切的骨质疏松症相关微小因子,能够发挥调节作用进而抑制骨质疏松症的进展。Wnt/β-catenin信号通路作为与骨质疏松症相关的经典信号通路,对延缓骨质疏松症的进展具有重要的作用。microRNA-21通过调节该信号通路的表达,进而防治骨质疏松症的进展。该文就microRNA-21与该信号通路的相关性及在防治骨质疏松症方面的作用进行综述,以期从微小分子方面探讨新的防治骨质疏松症的途径,为骨质疏松症的研究提供更多的理论依据。     

Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞SOX9表达的实验研究

目的 研究Yes相关蛋白（YAP）通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞SOX9表达的机制。 方法 用siRNA分别沉默YAP基因和LATS1基因来调控YAP的活性,通过Real-time PCR 检测软骨特异性基因和Wnt/β-catenin信号通路下游基因的表达;通过Western Blot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β-catenin的蛋白水平以及SOX9的蛋白水平;并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用siRNA沉默YAP基因后,再用氯化锂干预细胞,通过Western Blot检测SOX9的表达和GSK3β的磷酸化水平。 结果 沉默YAP基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平减少,c-Myc和Nanog基因表达减少,SOX9、COL2和Aggrecan基因表达升高,并且软骨细胞分泌基质增多;沉默LATS1基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平增加,c-Myc和Nanog基因表达增加,SOX9、COL2和Aggrecan基因表达减少,并且软骨细胞分泌基质减少。此外,氯化锂可以阻断沉默YAP引起的SOX9表达上调。 结论 YAP通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞SOX9的表达。     

Wnt/β-catenin信号通路主要因子与成骨细胞研究进展

经典Wnt/β-catenin信号通路在成骨细胞的增殖、分化及骨形成过程中起关键作用.Wnt信号通路中主要因子Wnt配体、β-catenin及转录因子Runx2表达与功能的改变,将会影响成骨细胞的增殖、分化、骨基质的形成和矿化,进而导致骨量的变化.通路中不同因子在成骨细胞分化与成熟的过程中所起作用又有所不同,而且在此过程中又会受到其它因素的影响,进而增强或减弱成骨细胞分化与成熟的进程.     

Wnt/β-catenin信号通路及与之相关骨质疏松药物研究

目的 Wnt/β-catenin信号通路在维持骨组织平衡过程中发挥至关重要的作用,主要通过调节信号通路过程中的三类抑制物实现,分别为Sclerostin、Dickkopfs(DKKs)、Secreted frizzled-related proteins(SFRPs)。同时,与之相关的促进骨形成的新药,如Sclerostin单克隆抗体(AMG 785)和DKK1单克隆抗体(RH2-18),正在进行动物及III期临床试验。本文就Wnt/β-catenin信号通路的结构及分布,该通路及其调节机制对骨代谢的作用及与之相关的骨质疏松药物研究作一综述。