卵巢癌中雷公藤内脂醇的研究进展

卵巢癌是严重威胁女性生殖健康的肿瘤之一,死亡率居各类妇科肿瘤的首位。多药耐药是治疗后复发、转移甚至死亡的主要原因。雷公藤内酯醇(triptolide,TP)具有很强的抗肿瘤活性,其在卵巢癌治疗方面的作用也引起了众多学者的重视,尤其是在多药耐药卵巢癌治疗中的应用。本文从抑制卵巢癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡两大方面综述雷公藤内酯醇在卵巢癌治疗中的研究进展。TP的毒性反应、半衰期短等缺点限制了其临床应用,纳米给药技术的出现为TP用于卵巢癌治疗提供了更广阔的应用前景。     

雷公藤内酯醇诱导上皮性卵巢癌Caov-3凋亡的实验研究

目的 :观察雷公藤内酯醇对上皮性卵巢癌体外生长特性的影响 ,并进一步探讨有关的信号转导机制。方法 :分别采用MTT法、流式细胞仪测定和克隆形成实验观察雷公藤内酯醇对上皮性卵巢癌Caov 3增殖、凋亡和侵袭能力的影响 ,以Westernblot方法检测相关的信号分子。结果 :雷公藤内酯醇显著地抑制了Caov 3的增殖和克隆形成能力 (P <0 .0 5 ) ,诱导其凋亡 ,caspase途径和ERK活化主要参与了诱导凋亡的过程。结论 :雷公藤内酯醇对上皮性卵巢癌Caov 3生长特性的影响 ,使其有望成为一种新的化疗药物应用于卵巢癌的治疗。     

鞘氨醇-1-磷酸与卵巢癌的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸（S1P）是鞘磷脂代谢产生的一种生物活性脂类,在多种癌症中对肿瘤具有促进作用。细胞内S1P生成由鞘氨醇激酶（SphKs）等调控,与相应受体（S1PR）结合发挥生物学效应。近年来涉及S1P与卵巢癌相关的研究提示卵巢癌患者中S1P呈高表达状态,其可以通过参与促进卵巢癌细胞的增殖和转移、抑制肿瘤细胞凋亡、诱导新生血管形成以及改变肿瘤免疫微环境状态等多种方式调节肿瘤细胞生物学行为,促进卵巢癌的发生和发展。阻断S1P信号传导途径中关键蛋白（包括S1P、SphK1、S1PR等）的相关药物能够抑制卵巢癌细胞生长及诱导细胞凋亡。因此,S1P相关途径可能成为卵巢癌治疗的潜在分子目标。本文简要综述了S1P信号通路在卵巢癌中的生理功能及相关药物研究进展。     

耐紫杉醇卵巢癌细胞亚系SKOV3-TR30的建立及特征

目的:建立可靠的耐紫杉醇细胞模型。方法:采用中等剂量间歇作用法结合低剂量持续诱导法及克隆稀释技术,从人卵巢癌细胞系SKOV3建立对紫杉醇耐药的亚系SKOV3-TR30;MTT法测定药物的细胞毒作用;HE染色和透射电镜观察细胞形态的特征:流式细胞术检测两种细胞的细胞周期分布。结果:SKOV3-TR30的耐药指数达27.5,对多西紫杉醇、和美新、阿霉素、诺考达唑有不同程度的交叉耐药性,对铂尔定无交叉耐药性。与SKOV3相比,SKOV3-TR30的倍增时间延长,G0/G1期细胞比率下降,体积较大,多核更明显,胞浆中细胞器也更丰富。结论:成功建立了耐紫杉醇的卵巢癌细胞亚系SK-OV3-TR30,为深入研究肿瘤对紫杉醇耐药的机制、寻找逆转耐药的措施提供了可靠的体外实验模型。     

上皮性卵巢癌中MicroRNA的研究进展

近年研究发现,microRNA可参与肿瘤发生、转移、耐药等病理进程。microRNA在上皮性卵巢癌中表达异常,提示它可能调控了上皮性卵巢癌的发生发展。本文现综述相关研究进展,阐明上皮性卵巢癌特异性microRNA表达谱,分析microRNAs与上皮性卵巢癌发生,转移,耐药的关系,以及它们作为卵巢癌临床早期诊断和预后评估指标的价值。     

孕激素对人卵巢癌细胞株H08910细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨孕激素（Ｐ）对人卵巢癌细胞株ＨＯ８９１０细胞体外增殖及凋亡的调控作用。方法 选用人卵巢癌细胞株ＨＯ８９１０进行体外培养,实验组中加入含有同浓度Ｐ的培养液,对照组加入等量空白培养液,采用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,光学显微镜和透射电子显微镜进行形态学观察,终末脱氧核苷酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）计数凋亡细胞,流式细胞仪间     

PTEN基因对卵巢癌耐药细胞系C13K顺铂耐药性的影响

目的:探讨第10号染色体上PTEN对人卵巢癌顺铂耐药细胞株C13K顺铂耐药性的逆转作用。方法:将野生型PTEN基因真核表达质粒在脂质体介导下转染人卵巢癌耐药细胞系C13K细胞,同时以转染空载体和未转染C13K细胞作为对照,分别应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(W estern blot)检测PTEN mRNA及蛋白表达水平,对转染细胞株进行四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)实验,观察PTEN基因对肿瘤细胞生长的抑制作用和C13K细胞对顺铂药物敏感性的影响,流式细胞仪(FACS)分析细胞的凋亡。结果:转染48 h后,与对照组相比,转染野生型PTEN基因能明显增加C13K细胞PTEN mRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05);MTT法显示,转染野生型PTEN基因的C13K细胞生长明显慢于转染空载体和未转染的C13K细胞,转染PTEN的C13K细胞对顺铂的敏感性显著增加;FACS分析显示,顺铂作用24h后,转染PTEN基因能够显著提高C13K细胞凋亡率。结论:转染野生型PTEN质粒能有效地提高C13K细胞内PTEN的表达,恢复细胞对顺铂的敏感性。     

Survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC_1/DDP凋亡的实验研究

目的 :探讨经脂质体介导的survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡的作用。方法 :将脂质体介导的survivin反义寡核苷酸 (survivin ASONs)作用于COC1/DDP细胞 ,采用一步法RT PCR检测survivin、bcl 2mRNA的表达 ,并进行细胞核DNA梯形电泳 ,检测caspase 3活性 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 :经survivin ASONs作用后COC1/DDP细胞中survivin等抗凋亡基因的表达下降 ,细胞核DNA电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ,caspase 3活性增加且呈时间依赖性 ,细胞凋亡率达33.18% ,细胞周期G2 /M及S期明显下降而多阻滞于G0 /G1期 ,与对照组差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论 :survivin ASONs反义寡核苷酸能诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞凋亡 ,且效果显著     

细胞凋亡与卵巢癌化疗耐药的相关性研究

卵巢癌死亡率居妇科肿瘤之首，其中肿瘤化疗耐药是主要原因之一。近年研究证实细胞凋亡功能失调亦是化疗耐药发生的关键因素。许多基因和调控因子如p53、bcl-2、TRAIL、IAP家族均参与化疗药物诱导的细胞凋亡过程，表现出与卵巢癌化疗耐药相关。现就其相关性以及通过调控肿瘤细胞凋亡逆转耐药方面的实验研究、临床研究及进展综述。     

DNA-PKcs在复发性卵巢癌中的表达及意义

目的:检测初发与复发卵巢癌组织中DNA-PKcs的表达,探讨DNA损伤修复与卵巢癌耐药的关系。方法:用免疫组化SP法测定36例卵巢癌的初发和复发肿瘤组织中DNA-PKcs的表达。结果:初发肿瘤组织中DNA-PKcs表达为中度及强阳性者占36%;复发肿瘤组织中表达为中度及强阳性者占83%。36例中29例复发癌组织DNA-PKcs的表达较自身初发癌组织增强,这种表达的变化与肿瘤初发时的病理类型、病理分级和临床分期无关。结论:在卵巢癌的化疗过程中肿瘤细胞的DNA修复能力增强,这可能是卵巢癌顺铂耐药产生的重要机理之一。     

促性腺激素释放激素类似物与卵巢癌和卵巢功能保护

卵巢癌是一种激素依赖性肿瘤,内分泌治疗作为辅助疗法之一的历史悠久。近年来随着促性腺激素释放激素（GnRH）类似物对卵巢癌细胞增殖、凋亡等作用的发现,GnRH类似物的抗癌治疗成为研究热点。除直接抗肿瘤作用外,GnRH类似物对化疗后卵巢功能保护的作用有重要的临床意义。对于早期、保留卵巢功能的患者,GnRH类似物能同时治疗肿瘤和保护卵巢功能,提高患者的生活质量。     

miR-199a在卵巢癌中表达下调及其对卵巢癌生物学功能的影响

目的:检测mi R-199a在上皮性卵巢癌组织中的表达水平以及在卵巢癌中参与的功能,初步探讨mi R-199a在卵巢癌发生、发展中的作用和机制。方法:通过实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)检测上皮性卵巢癌20例、良性上皮性卵巢肿瘤组织15例以及正常卵巢上皮细胞IOSE和1组具有不同侵袭能力的卵巢癌细胞株中mi R-199a的表达;构建mi R-199a的逆转录病毒质粒p MSCVpuro-mi R-199a并筛选稳定过表达mi R-199a的SKOV3细胞株;分别用CCK8和Transwell小室法检测过表达mi R-199a的SKOV3细胞在增殖、侵袭及迁移方面的改变。结果:mi R-199a在卵巢癌组的表达低于良性卵巢肿瘤组(P=0.001),mi R-199a在卵巢癌细胞中的表达低于正常卵巢上皮细胞IOSE(P<0.05),且在SKOV3中表达最低(P<0.01);与转染空载质粒SKOV3细胞相比,稳定转染p MSCVpuro-mi R-199a质粒的SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移力均降低(P<0.000 1)。结论:mi R-199a在卵巢癌组织中表达降低,并在卵巢癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中起抑癌基因的作用。     

促性腺激素释放激素类似物与卵巢癌和卵巢功能保护

卵巢癌是一种激素依赖性肿瘤,内分泌治疗作为辅助疗法之一的历史悠久。近年来随着促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对卵巢癌细胞增殖、凋亡等作用的发现,GnRH类似物的抗癌治疗成为研究热点。除直接抗肿瘤作用外,GnRH类似物对化疗后卵巢功能保护的作用有重要的临床意义。对于早期、保留卵巢功能的患者,GnRH类似物能同时治疗肿瘤和保护卵巢功能,提高患者的生活质量。     

半胱氨酸蛋白酶L在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌的早期发现率低,70%以上的患者诊断时已为进展期,由于广泛转移和耐药,其预后极差。半胱氨酸蛋白酶L（CTSL）是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员之一,可分布于细胞内或分泌到细胞外基质,以细胞内外多种蛋白为底物。CTSL在多种恶性肿瘤组织中表达水平增高,卵巢癌组织和卵巢癌患者血清中CTSL的水平也异常增高。CTSL促进卵巢癌的生长、转移、耐药、血管生成等恶性生物学行为。血清CTSL与其他生物标记联合应用有利于早期诊断卵巢癌,同时实验研究表明以CTSL为靶点的治疗对控制卵巢癌的进展有较好的效果。因此对CTSL在卵巢癌进展中的作用机制进行更深入的探讨有望为卵巢癌的早期诊断和治疗提供新的思路。     

伏隔核因子1在卵巢癌化疗耐药中的研究进展

化疗耐药是制约卵巢癌治疗效果的主要原因之一,寻找逆转卵巢癌耐药的有效方法是当前国内外研究的热点。近年来研究表明,伏隔核因子1（nucleus accumbens-1,NAC-1）在卵巢癌中的过度表达不仅在其发生发展、转移复发中起重要作用,而且与化疗耐药密切相关。NAC-1通过调节药物耐药相关的多种信号通路,导致卵巢癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性降低。因此以NAC-1为靶点逆转卵巢癌耐药可能为治疗开辟新的思路,NAC-1特异性抑制剂联合其他化疗药物有望成为卵巢癌新的治疗策略。现就NAC-1在卵巢癌化疗耐药中的研究进展进行综述。     

卵巢癌干细胞与上皮-间质转化的研究进展

近年有研究指出肿瘤可能是肿瘤干细胞性疾病。随着各种肿瘤干细胞不断被分离与鉴定出来,卵巢癌干细胞的分离与鉴定也取得了进展。卵巢癌干细胞是卵巢癌中具有自我更新和多向分化能力的细胞。越来越多的证据表明,肿瘤干细胞可能是介导肿瘤转移和耐药的关键细胞。同时,研究发现上皮-间质转化（EMT）在肿瘤转移中发挥着重要作用,且EMT可能介导肿瘤细胞获得干细胞特性。综述卵巢癌干细胞与EMT之间的关系,进一步探讨卵巢癌的潜在治疗策略。     

微小RNA-3619-5p通过靶向作用于p21基因对卵巢癌细胞生长的影响

目的:探讨微小RNA-3619-5p(miR-3619-5p)过表达对卵巢癌细胞系A2780和SKOV3中p21基因的上调作用及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:使用Lipofectamine 3000分别向卵巢癌细胞系A2780和SKOV3瞬时转染miR-3619-5p(实验组)或者dsControl(对照组)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测p21、细胞周期依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA的表达情况。蛋白质印迹(Western blotting)检测p21、CDK4和Cyclin D1蛋白的表达情况。流式细胞术检测对照组和实验组细胞周期分布差异和细胞凋亡情况。EdU增殖实验和集落形成实验检测细胞增殖能力。结果:与对照组相比,转染miR-3619-5p后2种细胞系中p21 mRNA均显著升高(P0.01),而CDK4和Cyclin D1 mRNA的表达均明显降低(P0.01)。Western blotting实验结果与qRT-PCR结果一致。与对照组相比,转染miR-3619-5p后,位于S期和G_2/M期的细胞比例明显下降,位于G_0/G_1期的细胞比例明显增大,细胞凋亡率明显升高。EdU增殖实验和集落形成实验均显示,与对照组相比,转染miR-3619-5p的卵巢癌细胞的增殖能力明显下降(P0.05)。结论:miR-3619-5p可通过激活卵巢癌细胞中p21蛋白的表达抑制卵巢癌细胞的生长。