人工关节假体周围感染与无菌性松动界膜组织中人β-防御素3的表达差异分析

目的探讨股骨颈骨折的滑膜组织、人工关节无菌性松动和假体周围感染的界膜组织中人β-防御素-3(HBD-3)的表达差异。方法 30例患者,其中因假体周围感染进行髋关节翻修的患者、因无菌性松动接受髋关节翻修的患者以及因股骨颈骨折接受髋关节置换的患者各10例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量聚合酶链反应(Realtime PCR)、免疫组化染色分析及免疫印迹分析(Western blot)进行假体周围界膜组织或滑膜组织中HBD-3表达水平的检测并进行统计学分析。结果 Realtime PCR发现,假体周围感染后界膜组织中HBD-3 m RNA的表达,明显高于无菌性松动界膜组织和股骨颈骨折滑膜组织中HBD-3的表达。与创伤性滑膜组织相比,细菌感染刺激引起界膜组织中HBD-3的释放增加约5倍以上;与非感染性的无菌性松动界膜组织相比,HBD-3的释放增加约2倍以上。免疫组化染色显示局部细菌炎症刺激条件下,与无菌性松动界膜组织相比,感染导致界膜组织中的成纤维细胞和成骨细胞分泌HBD-3增加。Westenblot显示,与非炎症组相比,葡萄球菌在局部定植引起组织中HBD-3蛋白水平显著提高。结论 HBD-3在感染性界膜组织和无菌性松动界膜组织之间表达差异显著。未来,HBD-3一个可行的临床应用可以通过术中界膜组织的病理活检,来区别人工关节假体周围感染和无菌性松动。     

全膝关节置换假体松动时滑膜液中的诊断性标志物

背景：人工关节置换后的无菌性假体松动一直是全膝关节置换后常见的并发症,是否与骨性关节炎的发生时的腱糖蛋白c、白细胞介素6和肿瘤坏死因子等许多细胞因子的作用密切相关？ 目的：观察全膝关节置换后无菌性假体松动发生时假体滑膜液中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和腱糖蛋白c的表达。 方法：实验组选择45例全膝关节置换翻修患者,对照组为25例首次进行膝关节置换的患者。实验排除炎性关节炎、二次关节炎感染至全身或自身免疫病以及合并肝炎、恶性肿瘤、服用激素、免疫抑制剂等疾病史的患者。取各组患者假体滑膜液,Western blot检测腱糖蛋白c剪切变异体的表达,ELISA分析假体滑膜液中白细胞介素6,肿瘤坏死因子α和腱糖蛋白c水平的变化。 结果与结论：Western blot结果显示假体松动后假体滑膜液中存在大的腱糖蛋白c突变体。假体松动后滑膜液中白细胞介素6、腱糖蛋白c的水平大约是对照组的3倍,肿瘤坏死因子α水平大约是对照组的2.5倍。证实假体松动后假体滑膜液中腱糖蛋白c的含量升高,提示腱糖蛋白c可以作为诊断假体松动有效的标志物。     

聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中TNF-α变化的实验研究

目的了解TNF-α在聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用及其机理.方法将钛合金棒植入大鼠双侧股骨远段,2周后向左侧膝关节注射聚乙烯颗粒,右侧注射生理盐水对照,每2周注射一次,12周时处死动物,取假体周围界膜组织和膝关节滑膜作组织学观察,ELISA法测定假体周围界膜组织TNF-α的浓度.结果注射聚乙烯颗粒侧关节滑膜及假体周围界膜组织可见明显的异物肉芽肿反应,假体周围界膜组织TNF-α含量明显增高.结论聚乙烯颗粒能引起假体周围骨溶解,TNF-α可能起着重要作用.     

聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中TNF-α变化的实验研究

目的了解TNF-α在聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用及其机理。方法将钛合金棒植入大鼠双侧股骨远段，2周后向左侧膝关节注射聚乙烯颗粒，右侧注射生理盐水对照，每2周注射一次，12周时处死动物，取假体周围界膜组织和膝关节滑膜作组织学观察，ELISA法测定假体周围界膜组织TNF-α的浓度。结果注射聚乙烯颗粒侧关节滑膜及假体周围界膜组织可见明显的异物肉芽肿反应，假体周围界膜组织TNF-α含量明显增高。结论聚乙烯颗粒能引起假体周围骨溶解，TNF-α可能起着重要作用。     

复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠IL-4、IFN-γ及TGF-β1表达的影响

目的:研究复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠模型血清中IL-4、IFN-γ和TNF-α及关节滑膜组织中TGF-β1的表达水平的影响,以深入探讨复方黑骨藤对类风湿关节炎的治疗作用及其相关机制。方法:构建大鼠弗氏完全佐剂性(AA)关节炎模型,通过ELISA与免疫组化方法分别检测大鼠血液中IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量和大鼠膝关节滑膜组织中TGF-β1的含量。结果:模型组与正常组比较,血清的IFN-γ、TNF-α水平升高,IL-4和滑膜组织中的TGF-β1水平降低(P0.01)。复方黑骨藤组与模型组比较血清中IFN-γ、TNF-α水平显著下降,IL-4、TGF-β1水平上调,与模型组有显著性差异。结论:本实验研究表明复方黑骨藤能显著抑制IFN-γ、TNF-α的表达,增强IL-4、TGF-β1的表达,调整大鼠Th1/Th2细胞及其细胞因子失衡,从而减轻关节滑膜炎症的持续发展和软骨破坏,对实验性类风湿关节炎的滑膜组织中T细胞增生及浸润具有显著的抑制作用。     

骨碎补醇提物对骨关节炎大鼠滑膜组织中TLR4-NF-κB信号转导的影响

目的 探讨骨碎补醇提物(RDE)对膝关节骨性关节炎的作用及分子机制。方法 将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、RDE(2 g/kg、4 g/kg、8 g/kg)组，共计5组；在第0天，采用右膝关节前交叉韧带切断术复制大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)模型，手术前和术后分别测量大鼠的机械性痛阈值和膝关节直径，每周一次，第14天开始灌胃给药，连续3周，腹主动脉取血，脱颈椎处死，解剖分离大鼠膝关节滑膜组织；采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌水平；采用RT-PCR法检测大鼠膝关节滑膜组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达；采用Western blot法检测大鼠膝关节滑膜组织中TLR4-NF-κB信号相关分子的表达。结果 与术前大鼠比较，术后模型组大鼠的机械性痛阈值显著减少，膝关节直径显著增加，RDE显著增加KOA大鼠的机械性痛阈值和减少膝关节直径。RDE显著抑制KOA大鼠血清和滑膜组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平，抑制KOA大鼠膝关节滑膜组织的炎性细胞浸润和滑膜增生，抑制KOA大鼠滑膜组织中TLR4、Myd88、p-IκB、p-p65/...     

加味木防己汤对类风湿关节炎大鼠滑膜的基质金属蛋白酶生成的影响

目的:探讨加味木防己汤对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞基质金属蛋白酶(MMP)生成的影响及其可能的分子机制。方法:将Wistar大鼠随机分4组,每组10只,并应用弗氏完全佐剂诱发大鼠AA实验性模型,造模18d开始给药,第40天处死大鼠取膝关节滑膜组织体外进行原代细胞培养,通过明胶酶谱分析法检测加味木防己汤对AA大鼠滑膜细胞MMP-2和MMP-9生成的影响。结果:①正常组大鼠滑膜细胞仅产生MMP-2;②在TNF-α(10μg/L)存在下,正常组大鼠可表达MMP-9,AA组大鼠滑膜细胞MMP-2和MMP-9生成量增加;③加味木防己汤治疗组大鼠滑膜细胞,在无干预情况下MMP-2和MMP-9的表达量均显著降低,在TNF-α存在时MMP-9的表达量未见明显增加。结论:加味木防己汤不仅能抑制AA大鼠滑膜细胞生成MMP-2和MMP-9,同时也能抵抗TNF-α对AA大鼠滑膜细胞生成MMP-9的刺激作用。提示加味木防己汤可能具有调控类风湿关节炎发病的作用。     

微米级磨损微粒刺激溶骨性细胞因子表达

目的 比较钛合金和超高分子质量聚乙烯两种微米级磨损微粒对溶骨性细胞因子表达的影响。 方法 每2d 1次于大鼠背部皮下注射过滤后的空气 3ml,共6次。1周后,囊腔内分别注射微粒悬液（A组为钛合金,B组为超高分子质量聚乙烯）和生理盐水（C组）。14 d后取囊腔组织称重,石蜡包埋、HE染色,光镜下观察,全自动生化分析仪测定血清AKP活性,免疫组化法检测IL-6及TNF-α的表达,实时定量PCR法检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）的mRNA含量。结果 囊腔组织类似于无菌性松动假体周围界膜组织。B组重量高于C组（P<0.05）。光镜下,A、B组可见大量吞噬细胞。A、B组血清AKP活性、IL-6的表达和EMMPRIN的mRNA含量均高于C组（P<0.05）。 结论 钛合金和超高分子质量聚乙烯微粒均能刺激溶骨性细胞因子产生及活性,形成人工关节无菌性松动。     

IL-6、MMP-9、TNF-α在胎膜早破早产孕妇血清、羊水中的表达及意义

目的研究IL-6、MMP-9、TNF-α在未足月胎膜早破早产孕妇的血清、羊水中的含量及表达,探讨其与胎膜早破早产的关系。方法采用酶联免疫吸附法检测30例胎膜早破早产孕妇（PPROM组）与20例正常孕妇（对照组）血清和羊水中的IL-6、MMP-9、TNF-α的含量,同时进行胎膜的病理检查。结果 PPROM组母血清及羊水中IL-6、MMP-9的含量均高于对照（P〈0.05）,羊水中TNF-α的含量较对照组高（P〈0.05）。PPROM组绒毛膜羊膜炎者血清、羊水中IL-6、TNF-α（P〈0.05）、MMP-9（P〈0.01）水平均高于非绒毛膜羊膜炎者。结论孕妇血清、羊水中IL-6、MMP-9、TNF-α水平与PPROM感染引起的早产有关,检测其水平可作为PPROM良好的预测指标。     

中药组方羌活、独活、防风及木瓜联合甲氨蝶呤对佐剂性关节炎新西兰白兔TNF-α、IL-1β、VEGF分子及mRNA的影响

目的研究中药NDRF(主药为羌活、独活、防风及木瓜)对佐剂性关节炎兔的抗炎免疫机制。方法佐剂性关节炎模型新西兰白兔分为模型组、中药NDRF组、MTX治疗组、中药NDRF联合MTX治疗组、正常对照组,各组经灌胃或腹腔注射给药。酶联免疫吸附法检测各组肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、血管内皮生长因子(VEGF)水平。RT-PCR法检测滑膜组织TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA的相对表达水平。结果血清TNF-α、IL-1β、VEGF在中药组中含量分别为102.21、2.92、75.15 ng/L,模型组分别为166.73、7.76、218.65 ng/L,中药组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);联合组分别为41.47、2.61、72.36 ng/L,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。滑膜组织TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、VEGF mRNA在中药组的相对表达量分别是1.37、0.44、1.05,模型组分别是5.45、3.08、3.14,中药组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);联合组分别是0.94、0.04、0.53,与模型组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论中药NDRF对佐剂性关节炎新西兰白兔抗炎和免疫调节作用与通过抑制炎症细胞因子分泌和下调mRNA相关。     

基于Hedgehog通路探讨补肾活血方对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨的保护作用

目的:探究补肾活血方(BSHX)对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨的保护作用及其可能的机制。方法:将新西兰兔分为对照(control)组、模型(model)组、BSHX(1.86 g/kg)组、Hedgehog通路激活剂SAG(20 mg/kg)组和BSHX+SAG组,每组6只。测定兔膝关节宽度,处死兔后观察膝关节软骨大体情况,对软骨退变情况进行评定;HE染色和番红O染色观察膝关节软骨组织病理形态学变化;ELISA法检测软骨组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测软骨组织中基质金属蛋白酶13(MMP-13)和II型胶原(Col-II)蛋白表达;Western blot法检测软骨组织中Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达。结果:与control组相比,model组膝关节宽度增大,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分升高,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平升高,MMP-13阳性表达率升高,Col-II阳性表达率降低,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达升高(P<0.05)。与model组相比,BSHX组膝关节宽度减小,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分降低,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平降低,MMP-13阳性表达降低,Col-II阳性表达升高,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达降低;SAG组膝关节宽度增大,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分升高,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平升高,MMP-13阳性率表达升高,Col-II阳性表达率降低,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达升高(P<0.05)。BSHX+SAG组膝关节宽度,软骨退变评分,软骨分级,Mankin评分,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平,MMP-13阳性表达率,以及Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达均低于SAG组,Col-II阳性表达率高于SAG组(P<0.05)。结论:补肾活血方对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨具有保护作用,其机制可能与抑制Hedgehog通路有关。     

类风湿关节炎湿热痹阻型患者血清和关节液IL-1、IL-6、TNF-α的表达研究

目的检测类风湿关节炎(RA)湿热痹阻型患者血清和关节液中IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平,分析IL-1、IL-6、TNF-α与炎性活动指标ESR、CRP、DAS28之间的关系,探索细胞因子与RA发生发展的关系。方法采用ELISA法检测RA湿热痹阻型患者外周血血清90例、RA湿热痹阻型患者关节液28例、骨性关节炎患者关节液30例及健康对照组血清30例IL-1、IL-6、TNF-α的表达,并常规方法检测ESR、CRP。利用SPSS11.5统计学软件进行统计学分析。结果 RA湿热痹阻型患者外周血血清中IL-1、IL-6及TNF-α表达水平显著高于健康组血清,差异有统计学意义(t=12.25,10.56,8.758;P0.05);RA湿热痹阻型患者关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的表达水平显著高于外周血血清,差异有统计学意义(t=4.35,3.09,2.496;P0.05);RA湿热痹阻型患者关节液中IL-1、IL-6及TNF-α表达水平明显高于骨性关节炎关节液,差异有统计学意义(t=3.47,2.46,2.51;P0.05)。RA湿热痹阻型患者外周血血清和关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的表达与ESR、CRP、DAS28无相关性(P0.05)。结论 RA湿热痹阻型患者外周血和关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的异常升高可能参与了RA的发生发展。     

野菊花总黄酮对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞超微结构及分泌功能的影响

目的:从关节滑膜超微结构和分泌功能的角度,探讨野菊花总黄酮(TF℃)对佐剂性关节炎(AA)大鼠治疗作用的机制.方法:SD大鼠复制AA模型;大鼠免疫后12 d开始分别灌胃TFC 84、168、336 mg/kg和对照药雷公藤多件片100mg/kg.组织块培养法分离培养大鼠滑膜细胞,透射电镜分析滑膜细胞内具分泌功能细胞器的形态学改变;放射免疫测定法检测滑膜细胞分泌IL-1β、TNF-α水平;RT-PCR检测滑膜组织IL-1β、TNF-α mRNA表达.结果:TFC 168、336 mg/kg可恢复A、B型滑膜细胞的细胞器分泌功能;纠正AA大鼠滑膜细胞分泌过高的IL-1β、TNF-α功能;RT-PCR也表明TFC可剂量依赖性的抑制IL-1β、TNF-α mRNA表达.结论:TFC可恢复AA大鼠滑膜细胞具分泌功能细胞器的形态,降低滑膜细胞分泌炎性介质的功能是其治疗AA的途径之一.     

髋假体置入后假体周围松动骨质的病理学变化

背景：磨损颗粒是导致假体周围骨质溶解的重要潜在性因素之一,但引起假体周围骨溶解的原因及其发展过程尚未完全清楚。 目的：复习人工关节置换后翻修病例的病理切片,分析病理检查在人工关节置换后感染诊断中的价值。 方法：由第一作者检索1990/2008 PubMed数据及万方数据库有关髋假体置入后假体周围松动以及假体松动周围骨质的病理学变化方面的文献。 结果与结论：人工假体与骨空隙的产生导致界膜充填,磨损微粒刺激界膜释放炎性细胞因子导致骨溶解而出现假体松动,如果尽可能地减少活动中产生的磨损碎屑可减少炎性递质的释放;减少由充填性界膜向溶骨性界膜的转变,就可从生物学角度降低人工髋关节置换后假体松动的发生率。     

HIF-1α和VEGF在佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growthfactor,VEGF)在佐剂性关节炎(AA)大鼠膝关节滑膜中的表达及其与滑膜病理积分的相关性。方法:建立AA大鼠模型,于造模第28天取膝关节滑膜,常规HE染色,计算滑膜病理积分,免疫组织化学染色检测HIF-1α和VEGF在膝关节滑膜的表达。结果:AA组大鼠滑膜HIF-1α和VEGF均明显高于正常对照组(P0.01),二者之间呈显著正相关(P0.01),且均与滑膜病理积分呈显著正相关(P0.01)。结论:HIF-1α和VEGF在AA大鼠膝关节滑膜增生的过程中起重要作用,二者相互影响并促进滑膜新生血管的形成。     

HSYA对骨关节炎大鼠膝关节软骨损伤的修复作用研究

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对骨关节炎(OA)大鼠膝关节及MMP-3、TGF-β1、Notch1的影响。方法将25只大鼠随机分为正常组(假手术)、OA组(模型大鼠)、低HSYA组(模型大鼠尾部注射2.5 mg/kg HSYA)、中HSYA组(模型大鼠尾部注射5.0 mg/kg HSYA)、高HSYA组(模型大鼠尾部注射10.0 mg/kg HSYA)。采用ELISA检测血清指标IL-1β、TNF-α,Pelletier评分评估膝关节软骨损伤情况,HE染色观察组织病理形态并以Mankin评分进行评估,免疫组化检测MMP-3阳性表达,Western blot检测TGF-β1、Notch1蛋白水平。结果OA组血清中IL-1β、TNF-α水平高于其余各组(P<0.05),高HSYA组IL-1β、TNF-α水平低于低HSYA组和中HSYA组(P<0.05)。各组大鼠Pelletier评分组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。OA组软骨和滑膜组织Mankin评分高于其余各组(P<0.05),高HSYA组Mankin评分低于低HSYA组、中HSYA组(P<0.05)。各组大鼠关节组织MMP-3阳性细胞率组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠关节组织TGF-β1、Notch1蛋白水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HSYA能够降低OA大鼠血清炎性因子IL-1β、TNF-α水平,缓解滑膜组织损伤,且存在浓度依赖性,其机制与抑制MMP-3和Notch1表达、提高TGF-β1水平相关。     

机械压应力作用下IL-1α与TNF-α对滑膜细胞 MMP-2,-9活性的影响

目的 通过研究机械压应力作用下炎症因子对滑膜细胞MMP-2,-9活性的影响,探讨滑膜组织在前交叉韧带(anterior cruciate ligament, ACL)机械性损伤过程中所起的作用。方法 在利用等双轴拉伸装置对滑膜细胞施加12%模拟机械损伤的压应力以及施加炎症因子IL-1α与TNF-α 的条件下,通过明胶酶谱法检测MMP-2,-9的活性。结果 12%机械压应力使MMP-2的活性增加了122%,TNF-α 对MMP-2的活性有着明显的时间依赖性增加,然而IL-1α 则没有。但是IL-1α 与TNF-α 共同作用则对MMP-2,-9活性有着显著增加,机械压应力与炎症因子对MMP-2,-9的活性有着显著的协同作用。结论 机械压应力与炎症因子能够增加滑膜细胞MMP-2,-9的活性,因此滑膜组织可能参与调节关节腔内微环境以及膝关节组织损伤与修复的过程。     

延边地区膝骨性关节炎患者滑膜组织基因谱的表达

背景：原发性骨性关节炎的发展是多种相关基因表达失常的缘故。采用mRNA基因表达谱芯片技术,检测膝关节骨性关节炎滑膜差异表达基因,有助于阐明骨性关节炎病理过程的相关机制。 目的：比较延边地区膝关节骨性关节炎和正常关节滑膜的基因表达谱变化,筛选出与膝关节骨性关节炎相关的差异表达基因,并探讨其在骨性关节炎发病机制中的意义。 方法：选择延边地区原发性膝关节骨性关节炎患者9例及正常对照者3例,应用mRNA基因表达谱芯片技术检测所获得的滑膜组织中表达差异的基因,筛选出表达差异基因并对其进行GO分析。 结果与结论：膝关节骨性关节炎及正常对照者滑膜的差异表达基因分析结果显示,延边地区膝关节骨关节炎滑膜中的差异表达基因共有1 261个,其中上调的基因有451个,下调的基因有810个。差异表达基因GO统计分析显示,信号转导、翻译调节、趋化作用、炎症应答、细胞增殖等多种基因的表达有差异。基因芯片技术能有效地筛选出骨性关节炎差异表达的基因,并进一步证实了骨性关节炎的病理过程是多种功能基因参与的复杂的病理过程。     

磨损颗粒与人工关节无菌性松动

人工关节无菌性松动是影响人工关节长期使用和妨碍人工关节发展的最重要的并发症。许多研究表明,人工关节无菌性松动与假体磨损有着密切关系。磨损颗粒的产生及其所诱发的一系列生物反应是导致假体周围骨溶解及假体无菌性松动的重要因素,其中巨噬细胞、成纤维细胞释放的骨吸收介质和成骨细胞的功能抑制可能是假体无菌性松动发生的重要机制。本文就近年来有关磨损颗粒与人工关节无菌性松动机制的一些研究进展进行综述     

丹参注射液治疗对膝骨性关节炎模型兔关节软骨中TNF-α、IL-6、MMP-3表达的影响

目的 研究丹参注射液治疗膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型兔关节软骨中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)的表达情况,探讨丹参注射液治疗膝骨性关节炎的分子机制。方法 选用40只健康白兔,随机分成四组,即假手术组、KOA模型(KOA)组、KOA+透明质酸钠(sodium hyaluronate,SH)组、KOA+丹参组。假手术组只作切口,不切断半月板,其余组均采用切断兔右膝关节半月板的方式,建立一个兔关节失稳的实验动物模型。KOA组给予0.9%生理盐水(0.7 mL/d),KOA+SH组给予兔关节内注射SH(0.4 mL/d),KOA+丹参组给予丹参注射液(0.7 mL/d),均连续注射5周。采用矿场实验验证兔失稳模型建立是否对兔的运动能力产生影响,并采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和Western blot法分别检测兔膝关节软骨中TNF-α、IL-6、MMP-3的mRNA含量和蛋白表达量。酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测兔膝关节液中TNF-α、IL-6、MMP-3的含量。结果 在KOA模型建立之前,各实验组动物均无明显的运动能力差异,模型建立之后,KOA组兔子运动的距离明显低于假手术组[(150±5)比(580±9),t=60.610,P<0.05],而KOA+丹参组与KOA组相比,家兔移动的距离明显增加,差异具有统计学意义[(438±27)比(150±5),t=16.730,P<0.05]。KOA组兔关节液中TNF-α、IL-6和MMP-3含量明显高于假手术组[(22.62±2.18)mg/mL比(11.74±2.09)mg/mL,(4.01±0.14)mg/mL比(1.76±0.11)mg/mL,(0.57±0.05)mg/mL比(0.27±0.03)mg/mL,t值分别为4.413、17.620、6.495,P值均<0.05];KOA+丹参组兔关节液中TNF-α、IL-6、MMP-3含量较KOA组明显降低,差异具有统计学意义[(15.01±2.37)mg/mL比(22.62±2.18)mg/mL,(2.47±0.19)mg/mL比(4.01±0.14)mg/mL,(0.40±0.02)mg/mL比(0.57±0.05)mg/mL,t值分别为3.725、8.803、9.185,P值均<0.05]。在兔膝关节软骨的mRNA的检测中,KOA组TNF-α、IL-6、MMP-3的含量较假手术组明显升高[(1.90±0.02)比(1.00±0.15),(1.70±0.02)比(1.00±0.07),(1.60±0.20)比(1.00±0.13),t值分别为11.050、24.250、14.850,P值均<0.05];KOA+丹参组中TNF-α、IL-6、MMP-3的含量较KOA组相比明显降低,差异具有统计学意义[(1.09±0.05)比(1.90±0.02),(1.13±0.09)比(1.70±0.02),(1.04±0.08)比(1.60±0.20),t值分别为32.190、8.822、5.868,P值均<0.05)。在兔膝软骨的蛋白检测中,KOA组TNF-α、IL-6、MMP-3的蛋白表达量较假手术组明显升高,差异具有统计学意义(t值分别为65.280、12.320、22.280,P值均<0.05);KOA+丹参组中TNF-α、IL-6、MMP-3的蛋白含量较KOA组明显降低,差异具有统计学意义(t值分别为26.150、9.053、24.670,P值均<0.05)。结论 丹参注射液可以明显改善KOA组兔的运动能力,同时也降低了TNF-α、IL-6、MMP-3的水平,因此丹参注射液治疗膝骨性关节炎可能是抑制了骨基质蛋白酶的释放,抑制关节软骨的降解,对关节软骨的退行性病变起到控制作用,最终改善膝骨性关节炎的症状。