芦荟素通过激活ERK1/2-Runx2信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用

目的 观察芦荟素对去卵巢大鼠骨量的影响,并探讨可能的机制.方法 将30只雌性Sprague Dawley大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)及去卵巢大鼠+芦荟素治疗组(LHS,去卵巢大鼠每天接受50 mg/kg芦荟素治疗,持续12周).12周后取双侧股骨进行微型计算机断层扫描(Micro-CT)检...     

异紫杉脂素治疗对去卵巢大鼠骨量流失和骨密度降低保护作用的机制研究

目的探索异紫杉脂素(isotaxiresinol,IXO)对去卵巢大鼠骨密度和骨量的影响,并探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为以下各组:假手术组(Sham)、去卵巢大鼠组(OVX)、去卵巢大鼠+异紫杉脂素组(IXO)。其中IXO组大鼠给予异紫杉脂素100 mg/(kg·d)治疗12周。Micro-CT和HE切片观察骨组织变化。通过ELISA检查用于分析骨代谢指标,进行蛋白质印迹分析以评估PI3K、Akt和RUNX-2的蛋白表达。结果 12周时,OVX组大鼠骨密度和骨量较Sham组显著降低。而IXO能显著改善去卵巢大鼠的骨密度和股骨干骺端骨小梁微观结构。去卵巢大鼠在IXO给药治疗后可显著降低P1NP和β-CTX水平(P0.05);用IXO治疗可上调去卵巢大鼠的PI3K、Akt和RUNX-2蛋白表达。结论本研究提示异紫杉脂素可以通过激活PI3K/Akt信号通路对去卵巢大鼠骨量流失和骨密度降低起到保护作用。     

肉桂醛对去卵巢诱导的骨质疏松大鼠模型骨密度和骨量的保护作用

目的探讨肉桂醛对去卵巢手术诱导的骨质疏松症大鼠模型中骨密度(BMD)和骨量的影响。方法 24只雌性Sprague-Dawley大鼠经过去卵巢手术或假手术。12周后大鼠被分为肉桂醛组(RGQ组)、对照组(CON组)和去卵巢组(OVX组)。检测所有大鼠股骨和腰椎骨密度(BMD),血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6(Interleu-kin)水平和进行股骨组织形态学分析。结果去卵巢手术显著降低大鼠的BMD值、骨小梁数量、小梁厚度和小梁面积;此外,显著增加骨小梁分离度和血清TNF-α和IL-6水平;和CON组比较差异有统计学意义(P0.05)。而RGQ治疗后,RGQ组大鼠大鼠的BMD值、骨小梁数量、小梁厚度和小梁面积显著增加,骨小梁分离度和血清TNF-α和IL-6水平显著降低;和CON组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论肉桂醛对去卵巢手术诱导的骨质疏松症大鼠模型中骨密度(BMD)和骨量有保护作用。     

乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨密度和骨形态学的影响

目的 观察乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨密度、骨组织形态学的影响.方法 50只SD健康雌性大鼠分为假手术组(Sham)10只与去卵巢模型(ovariectomy,OVX)40只,去卵巢大鼠随机分为模型组、雌激素治疗组(0.1 mg*kg-1*周-1)、小剂量乳铁蛋白治疗组、大剂量乳铁蛋白治疗组,每组10只.假手术组和模型组不做治疗.12周后观察大鼠雌激素水平、左侧股骨、脊柱密度及骨组织形态学的改变.结果 小剂量乳铁蛋白治疗组、大剂量乳铁蛋白治疗组大鼠股骨近端、脊柱骨密度值高于模型组(P<0.05),与假手术组及雌激素治疗组接近(P>0.05);骨小梁数目、骨小梁厚度、骨皮质厚度均较模型组明显改善(P<0.05),破骨细胞数较模型组减少(P=0.06).结论 适量乳铁蛋白可减少去卵巢大鼠骨丢失,预防骨质疏松的作用.     

大黄素治疗对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用机制研究

目的探讨大黄素(emodin,DHS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及大黄素组(DHS),每组10只;其中DHS组大鼠接受大黄素[90 mg/(kg·d)]治疗12周;待治疗结束后使用Micro-CT、HE染色切片、骨代谢指标、以及蛋白质印迹观察治疗效果以及可能的机制。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和HE染色切片结果显示DHS组的大鼠骨小梁数量和骨密度得到明显改善。DHS组大鼠BMD、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P<0.05)。与OVX组相比,DHS组的BALP水平明显升高(P<0.05);而TRACP-5b和β-CTX水平显著降低(P<0.05)。和OVX组比较,DHS组OPG表达水平上调(P<0.05),而RANKL和β2AR表达水平下调(P<0.05)。结论大黄素可以通过降低β2AR表达和激活OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用。     

葛根素联合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松大鼠氧化应激、炎症反应及骨代谢的影响

目的观察研究葛根素联合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松大鼠氧化应激、炎症因子和骨代谢的影响。方法实验分为假手术组、去卵巢组、A药组、B药组和AB药组,构建绝经后骨质疏松大鼠动物模型,分别给予不同药物干预。分别检测血清氧化应激、炎性因子、骨代谢指标及骨密度,观察骨组织形态结构。结果去卵巢组大鼠血清SOD和GSH-Px水平较假手术组均显著降低(P<0.05),AB药组较去卵巢组均显著升高(P<0.05);去卵巢组大鼠血清H2O2和MDA水平较假手术组均显著升高(P<0.05),AB药组较去卵巢组均显著降低(P<0.05)。去卵巢组大鼠血清炎性因子和骨代谢指标较假手术组均显著升高(P<0.05),AB药组较去卵巢组均显著下降(P<0.05)。去卵巢组大鼠骨组织BMD较假手术组显著降低(P<0.05),AB药组较去卵巢组显著升高(P<0.05)。去卵巢组骨皮质明显变薄,骨小梁明显稀疏,排列紊乱,髓腔扩大。AB药组骨皮质轻微改变,骨小梁明显增多,排列规则,髓腔明显变小。结论葛根素联合阿仑膦酸钠具有协同抑制绝经后骨质疏松大鼠氧化应激和炎症反应,降低氧化应激和炎性因子分泌,调节骨代谢,改善骨组织形态学结构,发挥抗骨质疏松作用。     

运动与碳酸钙联合应用对去卵巢大鼠骨元素含量的变化

目的 用测定骨元素含量的方法 ,观察运动和碳酸钙(CaCO3)联合应用对去卵巢大鼠骨元素代谢的影响.方法 将健康4月龄雌性SD大鼠48只,按体重随机分成6组:正常对照组;假手术组;去卵巢组;去卵巢+CaCO3组;去卵巢+运动组;去卵巢+CaCO3+运动组.去卵巢+CaCO3组和去卵巢+CaCO3+运动组.大鼠于去卵巢手术后第2d开始给予CaCO3灌胃[元素钙20 mg/(kg·d)],持续11 w.去卵巢+运动组和去卵巢+CaCO3+运动组大鼠于去卵巢术后第7d开始给予中等强度的运动训练,每周5 d,每天连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10w.结果 去卵巢组大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量均明显低于假去卵巢组(P<0.01),骨P含量明显高于假去卵巢组(P<0.01);去卵巢+CaCO3组和去卵巢+运动组大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量虽然较去卵巢组明显增加(P<0.01),但仍显著低于假去卵巢组(P<0.01);运动与CaCO3联合应用后,去卵巢大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量均显著回升(P<0.01),骨P含量显著回降(P<0.01),并且基本恢复到对照组水平.结论 运动可加强CaCO3对抗由于去卵巢引起的大鼠骨元素代谢紊乱的作用.     

白茅苷对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响

目的观察白茅苷治疗去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响并初步探索可能机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及白茅苷组(BMG),每组10只;其中BMG组去卵巢大鼠每天给予白茅苷(20 mg/kg)灌胃治疗;待12周治疗结束后分离培养各组大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),使用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红(ARS)染色并使用蛋白质印迹检测BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1蛋白表达;进一步使用Micro-CT和骨生物力学检测观察治疗效果。结果 OVX组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较Sham组明显降低(P0.05);而经过BMG治疗,BMG组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较OVX组明显增加(P0.05)。OVX组股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th较Sham组明显降低,而Tb.Sp则明显升高(P0.05)。BMG组左侧股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th均明显高于OVX组(P0.05),而Tb.Sp明显低于OVX组(P0.05)。结论白茅苷通过促进BMSCs诱导成骨分化来减少去卵巢大鼠骨骨密度、骨量和骨强度下降。     

运动与复方丹参合剂联合应用对去卵巢大鼠骨元素含量的影响

目的 用测定骨元素含量的方法,观察运动和复方丹参合剂(CDM)联合应用对去卵巢大鼠骨元素代谢的影响.方法 将健康4月龄雌性SD大鼠48只,按体重随机分成6组:正常对照组;假去卵巢组;去卵巢组;去卵巢+复方丹参合剂组;去卵巢+运动组;去卵巢+复方丹参合剂+运动组.去卵巢+复方丹参合剂组和去卵巢+复方丹参合剂+运动组大鼠于去卵巢手术后第2 d开始给予复方丹参合剂溶液灌胃[10 mL/(kg·d)],持续11 W.去卵巢+运动组和去卵巢+复方丹参合剂+运动组大鼠于去卵巢术后第7 d开始给予中等强度的运动训练,每w 5 d,每天连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10 W.结果 去卵巢组大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量均明显低于假去卵巢组(P<0.01),骨P含量明显高于假去卵巢组(P<0,01);去卵巢+复方丹参合剂组和去卵巢+运动组大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量虽然较去卵巢组明显增加(P<0.01),但仍显著低于假去卵巢组(P<0.01);运动与复方丹参合剂联合应用后,去卵巢大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量均显著回升(P<0.01),骨P含量显著回降(P<0.01),并且基本恢复到对照组水平.结论 运动可加强复方丹参合剂对抗由于去卵巢引起的大鼠骨元素代谢紊乱的作用.     

辛伐他汀对老年去卵巢大鼠骨量丢失的治疗作用

目的观察辛伐他汀对老年去卵巢大鼠骨量丢失的治疗作用。方法10月龄SD大鼠行双侧卵巢切除术,术后2个月开始用药物治疗,用药2个月后用骨组织形态计量学方法测定大鼠第四腰椎松质骨静态、动态参数,大鼠第五腰椎体应用骨生物力学方法作椎体压缩试验。结果辛伐他汀使去卵巢大鼠骨小梁面积(%Tb.Ar)增加不明显,与去卵巢组相比,差异无统计学意义;但辛伐他汀可改善去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况,表现在能使去卵巢大鼠的破坏载荷和破坏应力增加。结论辛伐他汀对老年去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况有改善作用。     

牛蒡苷元通过OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用

目的探讨牛蒡苷元(AGN)对去卵巢大鼠骨强度和骨量的影响,并探索可能的机制。方法本研究中通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及牛蒡苷元组(AGN),每组10只;其中牛蒡苷元组大鼠接受牛蒡苷元[40 mg/(kg.d)]治疗12周;待治疗结束后使用Micro-CT、Masson染色切片、骨代谢指标、骨生物力学检测以及蛋白质印迹观察治疗效果以及可能的机制。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和Masson染色切片结果显示AGN组的大鼠骨小梁数量和骨密度得到明显改善。AGN组大鼠BMD、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P0.05)。治疗12周时,AGN组极限载荷和刚度较OVX组显著增加(P0.05),而AGN组骨代谢指标AKP和TRACP水平显著降低(P0.05),差异有统计学意义(P0.05)。和OVX组比较,AGN组OPG表达水平明显上调,而RANKL表达水平显著下调,差异有统计学意义(P0.05)。表明AGN组的大鼠OPG/RANKL信号通路被激活。结论牛蒡苷元可以通过OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨骼的保护作用。     

牛磺酸治疗通过激活自噬介导对老年大鼠骨量和骨强度的保护作用

目的探讨牛磺酸(NHS)对老年大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法将30只大鼠随机分为对照组(CON)、模型组(MOD)以及牛磺酸组(NHS),每组10只;其中NHS组大鼠每天接受牛磺酸(2 g/kg)治疗12周;待治疗结束后通过Micro-CT检测、HE染色切片、血清指标、蛋白质印迹观察治疗效果,探讨可能的机制。结果治疗12周后,与MOD组相比,三点弯曲试验、Micro-CT和HE染色切片结果显示NHS组大鼠的骨小梁数量、骨强度和骨密度(bone mineral density,BMD)得到明显改善。NHS组大鼠最大载荷和弹性模量、BMD、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P<0.05)。和MOD组比较,NHS治疗后大鼠血清BLAP、P1NP、TRACP-5b和β-CTX水平明显降低,组间差异有统计学意义(P<0.05)。和MOD组比较,NHS组Runx2、BMP2、Beclin-1和LC3Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平明显上调,而P62表达水平显著下调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论NHS可能通过激活自噬,从而对年龄引起的骨量丢失起到保护作用。     

甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失的保护作用

目的探讨甜菜碱(betaine,TCJ)对2型糖尿病大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法30只大鼠被随机分为对照组(CON)、模型组(MOD)及甜菜碱组(TCJ),每组10只,其中对MOD组和TCJ组建立2型糖尿病模型。随后TCJ组大鼠每天接受50 mg/kg甜菜碱治疗12周,待治疗结束后通过Micro-CT检测、HE染色切片以及蛋白质印迹检测。结果治疗12周后,与MOD组相比,三点弯曲试验、Micro-CT和HE染色切片结果显示TCJ组的大鼠骨小梁数量、骨强度和骨密度得到明显改善(P<0.05)。TCJ组大鼠最大载荷和弹性模量、骨密度(bone mineral density,BMD)、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较MOD组明显改善(P<0.05)。和MOD组比较,TCJ组β-catenin表达水平明显上调,而p-IGF-1R、p-GSK-3β、p-β-catenin、IGF-1R和GSK-3β表达水平显著下调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失起到保护作用。     

吡咯喹啉醌通过降低氧化应激和RANKL/OPG比率减少去卵巢大鼠骨量流失研究

目的观察补充吡咯喹啉醌(PQQ)对去卵巢诱导的骨质疏松大鼠骨量和骨强度的影响。方法 30只12周龄(225～260 g)雌性SD大鼠随机分为3组(每组n=10),即OVX组、OVX+PQQ组和Sham组;其中OVX组和OVX+PQQ组进行手术切除双侧卵巢,而Sham组进行假手术; OVX+PQQ组术后食物添加4 mg/kg PQQ。治疗12周,在治疗结束收集血液和股骨,分别进行微型计算机断层扫描(Micro-CT)、生物力学检测、组织切片检测、蛋白印迹检测(WB)以及血清指标检测。结果Micro-CT和HE切片表明,与Sham组相比,OVX组的股骨骨密度和骨微观参数显著降低(P0.05); OVX组的小梁间距显著增加(P0.05),而OVX+PQQ上述指标明显优于OVX组(P0.05)。生物力学检测表明Sham组具有最高的极限载荷、能量和刚度;与OVX组比较,OVX+PQQ组极限载荷、能量和刚度明显增加(P0.05)。血清学表明,与Sham组大鼠相比,OVX大鼠血清CTX-1、TRACP-5b和MDA水平均显著升高,而T-AOC和SOD活性显著降低; PQQ治疗后显著改善(P0.05)。WB检测结果表明与Sham组大鼠相比,OVX大鼠RANKL和RANKL/OPG比率均显著升高,而OPG和FOXO1表达显著降低;经过PQQ后得到RANKL和RANKL/OPG比率均显著降低,而OPG和FOXO1表达显著增加(P 0.05)。结论 PQQ通过抑制氧化应激和降低RANKL/OPG比率来增加去卵巢大鼠骨量和骨强度。     

黄芪多糖治疗对去卵巢诱导骨质疏松大鼠骨密度、骨量和骨代谢的影响

目的探索黄芪多糖对去卵巢大鼠骨量和骨代谢以及BMP-2/Smads信号通路的影响。方法30只雌性SD大鼠进行去卵巢手术或假手术。正常饲养12周后被分为黄芪多糖组(ASNT组)、对照组(CON组)和去卵巢组(OVX组),其中黄芪多糖组每天给予400 mg/kg黄芪多糖治疗。通过骨密度、骨代谢指标、Micro-CT以及WB检测评估ASNT对骨质疏松症大鼠骨量、骨代谢以及BMP-2/Smads信号通路的影响。结果经过12周治疗,ASNT组大鼠骨密度较OVX组显著增加(P<0.05);ASNT治疗12周可以降低血清ALP和OC水平,增加血钙含量,增加股骨骨密度。经过12周治疗,ASNT组大鼠骨体积分数(BV/TV)、表面积体积分数(BS/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)较OVX组显著增加;而骨小梁间隙(Tb.Sp)较OVX组显著降低,差异比较有统计学意义(P<0.05)。WB结果表明OVX大鼠骨组织的BMP-2/Smsds信号通路受到抑制;ASNT可以通过上调BMP-2、p-Smad1和p-Smad5的表达显著激活BMP-2/Smsds信号通路传导。结论研究表明ASNT对去卵巢大鼠骨密度和骨量具有保护作用,可能和激活BMP-2/Smads信号通路有关。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠下颌骨显微结构及最大载荷的影响

目的应用Micro-CT和骨生物力学技术,探讨骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠的下颌骨显微结构及最大载荷的影响。方法40只3月龄雌性SD大鼠,随机分为5组:假手术组(sham operation group,Sham)、去卵巢模型组(ovariectomized group,OVX)、骨碎补总黄酮高剂量组(high-dose drynaria total flavonoids group,GB-H)、骨碎补总黄酮低剂量组(low-dose drynaria total flavonoids group,GB-L)和戊酸雌二醇组(Estradiol Valerate group,EV),建模成功后连续给药12 w。实验结束后,取下颌骨进行显微CT扫描及三维重建,然后进行最大载荷测量。结果与Sham组相比,OVX组大鼠下颌骨微结构:骨密度、相对骨体积、骨小梁厚度、骨小梁数目明显减小(P0.05),骨表面积体积比、骨小梁间隙明显增高(P0.05);下颌骨的最大载荷明显减少(P0.05)。与OVX组相比,EV组大鼠下颌骨微结构获得良好修复,最大载荷也明显修复。骨碎补总黄酮低剂量组相对骨体积、骨小梁数目较OVX组显著升高(P0.05),骨小梁间隙显著减小(P0.05)。骨碎补总黄酮高剂量组疗效优于低剂量组,大鼠下颌骨的相对骨体积、骨表面积体积比、骨小梁间隙、骨小梁数目以及下颌骨骨密度均得到一定程度修复,下颌骨最大载荷也较OVX组显著增加(P0.05)。结论骨碎补总黄酮能够修复去卵巢大鼠下颌骨微结构,提高下颌骨骨密度和最大载荷,这将可能为颌骨骨质疏松的防治提供一种新的途径。     

蛇床子素/壳聚糖衍生物胶束对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨吸收的影响

目的观察蛇床子素/壳聚糖衍生物胶束(Osthole-loaded N-octyl-O-sulfonyl chitosan micelles,NSC-OST)对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨吸收的影响,初步探讨其抗骨质疏松的分子机制。方法将40只雌性SD大鼠按照随机原则分为5组:假手术组(Sham)、模型组(Ovx)、尼尔雌醇组(Nil)、蛇床子素(OST)、蛇床子素/壳聚糖衍生物胶束组(NSC-OST),除了假手术组以外均通过摘除双侧卵巢形成骨质疏松模型,连续给药12周后,通过HE染色和Micro-CT检测分别从二维、三维形态学角度观察药物对骨微结构的影响;通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察药物对体内破骨细胞生成和分化的影响;通过免疫组化手段检测药物对破骨特异分子NFATc1、c-fos、CTSK表达的影响。结果 HE染色结果显示药物组均能明显改善造模引起的组织骨质疏松样改变,其中Nil组改善骨微结构的效果最明显,其次为NSC-OST组,最后是OST组;通过Micro-CT分析发现NSC-OST可显著提高大鼠股骨的BMD和BV/TV(P0.05),并明显改善Tb.N、Tb.Sp、Tb.Th三项指标(P0.05),效果要优于OST组,但略逊于Nil组; TRAP染色提示NSC-OST可以明显抑制N.Oc/BS和Oc.S/BS两项破骨生成参数(P0.05),效果要优于OST组,但略逊于Nil组;免疫组化实验提示:NSC-OST可以抑制大鼠骨组织中的破骨特异分子NFATc1、c-fos、CTSK的表达,前两项指标NSC-OST与Nil抑制作用相当,抑制CTSK时NSC-OST的作用要弱于Nil,均强于OST。结论 NSC-OST可以显著改善去卵巢大鼠的骨微结构,其抗骨质疏松作用的发挥可能与其抑制破骨细胞的生成和分化相关。