羟丁酸钠对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠大脑皮层Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察不同剂量羟丁酸钠对缺血缺氧性脑损伤（HIBD）新生大鼠大脑皮层Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法新生7dSD大鼠，随机分为假手术组（S组）、生理盐水对照组（C组）和羟丁酸钠组（γ1,γ2，γ3组），每组又分为5个亚组，分别为缺血缺氧（HI）后1h、3h、1d,3d,7d（n=6）。按Rice法制作HIBD模型。C、γ1、γ2和γ3组分别在HI后即刻腹腔注射生理盐水0．2ml／10g、羟丁酸钠50、100、200mg／kg，3次／日。免疫组化方法检测HI后各时间点大脑皮层Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与S组比较，C、γ1、γ2、γ3组Bcl．2及Bax蛋白表达在HI后1、3h即增高，HI后1d达到高峰，HI后3d下降（P〈0．05），HI后7d时基本恢复正常；与C、γ3比较，HI后1、3d时γ1、γ2组Bcl-2蛋白表达增高，Bax蛋白表达降低（P〈0．05）；73组与C组间Bcl-2、Bax蛋白表达比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论羟丁酸钠上调HIBD新生大鼠大脑皮层Bcl-2蛋白表达，下调Bax蛋白表达。     

羟丁酸钠对新生大鼠缺血缺氧性脑损害的干预作用

目的 观察羟丁酸钠对新生大鼠缺血缺氧性脑损害的干预作用。方法 新生7dSD大鼠随机分为假手术组(S组)、生理盐水对照组(C组)、羟丁酸钠组(γ组),7组又分为γ_1、γ_2、γ_3组。各组20只。采用Rice法制作新生大鼠缺血缺氧性脑损害模型。C组缺血缺氧后即刻腹腔注射生理盐水,每日3次;γ_1、γ_2、γ_3组分别注射羟丁酸钠50、100和200 mg/kg,用法同C组。观察大鼠缺血缺氧后28d内存活率、脑部形态学改变、左/右大脑半球重量比值、左大脑半球含水量和学习记忆能力(Y-迷宫法)。结果 (1)C组动物存活率(60％)明显低于其余各组(P<0.05)。(2)学习记忆能力测试表明:C组达标率(41.7％)明显低于其他各组(P<0.05);γ_1组与γ_2、γ_3和S组相比,学习记忆能力较差;(3)C组和γ_1组左/右大脑半球湿重之比值明显小于γ_2、γ_3和S组(P<0.01或P<0.05);各组左侧大脑半球含水量差异无显著性(P<0.05);C组左侧大脑半球液化坏死后空洞发生率明显高于其他各组(P<0.05)。结论 羟丁酸钠对新生大鼠具有抗缺血缺氧性脑损害的作用。     

羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马NMDA受体2A亚基的影响

新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischem icbrain damage,HIBD)是引起围产期新生儿死亡和脑性瘫痪的主要原因。N甲-基-D天-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)的毒性作用是该病的主要发病机制之一。众多的研究显示[1]:HIBD时脑组织中兴奋性氨基酸浓度增高,激活     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡的研究进展

缺氧缺血性脑损伤后迟发性神经元死亡的发生与细胞凋亡密切相关。采用新生大鼠HIBD模型进行脑缺血缺氧后细胞凋亡的研究，对进一步理解新生儿缺氧缺血性脑损伤的发病机制，摸索确切的治疗途径很有意义。     

短暂性脑缺血对老年大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨短暂性脑缺血对老年大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 健康老年雄性Wistar大鼠100只,按Pusinelli方法建立四动脉阻断法全脑缺血模型,随机分为4组（n=25）：脑缺血1min组（I1组）、脑缺血3min组（I3组）、脑缺血5min组（15组）和假手术组（C组）。每组均于再灌注12h、1d,2d、3d和7d各随机处死5只大鼠。随机取其中4只大鼠的海马组织制作石蜡切片,另1只大鼠断头处死后,冰上提取海马CAl区脑组织,制作电镜标本。透射电镜观察神经元超微结构,TUNEL法检测神经元凋亡,免疫组织化学法检测caspase．3的表达。结果 各组于光镜和电镜下均可见凋亡神经元。与C组、I1组相比,I3组、I5组凋亡细胞数和caspase-3表达阳性细胞数均增高（P〈0．05）;与I3组相比,I5组凋亡细胞数和caspase-3表达阳性细胞数均增高（P〈0．05）。结论 脑缺血3～5min对老年大鼠不产生预处理的效果,可引起脑神经元凋亡。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡的研究进展

缺氧缺血性脑损伤后迟发性神经元死亡的发生与细胞凋亡密切相关。采用新生大鼠HIBD模型进行脑缺血缺氧后细胞凋亡的研究,对进一步理解新生儿缺氧缺血性脑损伤的发病机制,摸索确切的治疗途径很有意义。     

羟丁酸钠对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨羟丁酸钠（γ-hydroxybutyrate,GHB）对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用大鼠肝脏热缺血再灌注模型,观察肝脏组织形态学、酶学、脂质过氧化、细胞凋亡及血浆内皮素的变化.结果肝脏缺血再灌注损伤时,血清ALT、AST、LDH、血浆内皮素、TNF-α及肝组织MDA水平均显著增高,细胞凋亡增加,肝组织SOD明显减少.再灌注前使用GHB可以明显减轻上述改变,钠络酮可以部分阻断GHB的作用.结论GHB可能通过抗脂质过氧化,下调肝脏内皮素的表达,改善微循环,减少肝细胞凋亡,从而减轻热缺血再灌注对肝脏的损伤作用.     

甘氨酸对大鼠缺血缺氧心肌细胞凋亡的影响

目的 明确甘氨酸对缺血缺氧致心肌细胞凋亡过程的影响.方法 建立SD乳鼠心肌细胞缺血缺氧模型,分为单纯缺血缺氧组和甘氨酸处理组(培养液中加入终浓度5 mmoL/L甘氨酸,其余处理同单纯缺血缺氧组).以SD乳鼠正常心肌细胞作为对照组.3组细胞培养6 h后,检测凋亡情况、线粒体跨膜电位及分布情况、线粒体通透性转换孔(mPTP)开放情况及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性变化.结果 (1)细胞凋亡程度:对照组和甘氨酸处理组荧光强度均明显低于单纯缺血缺氧组(P<0.01).(2)线粒体跨膜电位:对照组心肌细胞荧光强度为73±4,单纯缺血缺氧组荧光强度(32±7)明显较弱(P＜0.01),甘氨酸处理组荧光强度(52±4)强于单纯缺血缺氧组(P＜0.01).(3)mPTP开放情况:对照组心肌细胞线粒体荧光强度(90±7)较强,甘氨酸处理组荧光强度(62±8)明显强于单纯缺血缺氧组(27±4,P＜0.01).(4)caspase-3活性:对照组和甘氨酸处理组均显著低于单纯缺血缺氧组(P＜0.01).结论 甘氨酸对缺血缺氧心肌细胞具有抗凋亡作用,其机制可能与改变线粒体膜电位、减少mPTP开放、减轻钙超载、降低caspase-3活性有关.     

缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的：探讨缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肝脏细胞凋亡的影响。方法：建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型．将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术(S)、缺血再灌注(IR)、缺血后处理(IPo)3组，以缺血再灌注前反复多次的短暂预再灌注及停灌注作后处理，观察血清肝酶和肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平变化，用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)及透射电镜观察肝细胞凋亡状态．并行肝组织病理形态学检查。结果：与IR组相比，IPo组血清肝酶水平及肝组织中MDA含量显著降低，而SOD和GSH活性则显著升高；再灌注后可见明显的肝实质细胞凋亡现象，IPo组凋亡指数较IR组显著下降，肝组织病理形态学损伤亦明显减轻。结论：IPo可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成而拮抗肝实质细胞凋亡的发生，从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

缺血预处理对大鼠急性缺血-再灌注肾细胞凋亡的影响

目的:探讨缺血预处理对急性肾缺血-再灌注细胞凋亡的影响。方法:采用8 min缺血加5 min再灌注预处理在体肾缺血-再灌注模型(I45 min I-R 6h),将实验动物随机分为正常(A组)、假手术(S组)、单纯缺血(B组)、缺血再灌注(C组)、预处理(D组)五组,采用透射电镜、流式细胞仪检测肾细胞凋亡和细胞增殖周期,利用光学显微镜进行组织学观察,同时测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及MDA含量。结果:与A、S组相比,C组细胞凋亡率显著增高(P<0.01);与C组相比,D组细胞凋亡率和细胞增殖指数均降低(P<0.01),G0/G1时段增加(P<0.01),肾组织损伤病理评分显著降低(P<0.05),同时肾超微结构破坏较轻。结论:缺血预处理对急性肾缺血-再灌注有保护作用,可以减轻急性肾缺血-再灌注引起的细胞凋亡,其作用机制可能与调节细胞增殖周期有关。     

新生儿缺氧缺血性脑病早期细胞凋亡诊断的研究进展

新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）指在围生期发生窒息而导致脑组织的缺氧缺血性损害,神经细胞凋亡是其主要病理改变。HIE的诊断主要依靠实验室和影像学检查,但是难以对其进行早期诊断。目前通过制备HIE的动物模型进行其分子机制研究已越来越受到重视,并逐步应用于临床。     

咪达唑仑对新生猪缺氧缺血性脑损伤的影响

目的 评价咪达唑仑对新生猪缺氧缺血性脑损伤的影响.方法 雄性新生猪24头,日龄3～7 d,体重1.8～3.0 kg,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、缺氧缺血性脑损伤+盐水组(HI-S组)和缺氧缺血性脑损伤+咪达唑仑组(HI-M组).HI-S组和HI-M组采用窒息性心跳骤停后心肺复苏的方法 制备缺氧缺血性脑损伤模型.自主循环恢复(ROSC)后3 h,各组均静脉输注芬太尼10～30 μg·kg-1·h-1和泮库溴铵0.1～0.2 mg·kg-1·h-1,HI-M组同时静脉输注咪达唑仑0.05 mg·kg-1·h-1至ROSC后24 h,HI-S组和S组静脉输注等容量生理盐水.于模型制备前(基础状态)、低氧37 min、吸入空气5 min、窒息5 min、ROSC后6、12和24 h时取动脉血样行血气分析,并记录各时点MAP;于ROSC后48、72、96及240 h时行神经行为学评分(NVS),于ROSC后240 h时取脑组织,计数纹状体(壳状核和尾状核)存活神经元,计算存活神经元密度.结果 与S组和基础值比较,HI-S组和HI-M组低氧窒息期间动脉血氧分压降低,窒息5 min时动脉血二氧化碳分压升高,pH值和MAP降低(P<0.05),HI-M组和HI-S组各时点上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).与S组比较,HI-S组和HI-M组壳状核和尾状核存活神经元密度降低(P<0.01),ROSC后48996 h时NBS评分升高(P<0.05);与HI-S组比较,HI-M组壳状核和尾状核存活神经元密度明显增加,ROSC后72和96 h时NBS评分降低(P<0.05).结论 心肺复苏早期应用咪达唑仑可减轻新生猪缺氧缺血性脑损伤.     

Association of HIF- expression and cell apoptosis after traumatic brain injury in the rat

Objective: To explore the expression of hypoxia inducible factor-1α (HIF-1~) and the correlation between HIF-1α and apoptosis after traumatic brain injury.Methods: Using experimental traumatic brain injury in the rats, the expression of HIF-1α was studied by immunohisto-chemistry in cerebral tissue, apoptotic cell death was evaluated with TUNEL (transferase-mediated XdUTP nick end labeling ), and double-labeled immunohistochemistry and TUNEL methods were used to investigate the relationship between HIF-1α and apoptosis.Results: There was remarkable difference in the expression of HIF-1α between the experimental groups and the control groups (P ＜ 0.01), in the experimental groups,the expression of HIF-1α at 48 hours was highest; the evidence of apoptotic cell death after experimental traumatic brain injury was found by TUNEL; the apoptotic percentage increased or decreased according to the changes of the positive expression of HIF-1α (r = 0.99).Conclusions: The results suggest that secondary brain ischemia plays a crucial role in apoptotic cell death after traumatic brain injury; HIF-1α can prompt apoptotic cell death after experimental traumatic brain injury.*e expres     

依达拉奉对新生猪缺氧缺血性脑损伤的影响

目的 探讨依达拉奉对新生猪缺氧缺血性脑损伤的影响.方法 出生3～7 d的雄性猪,体重2.0～3.0 kg,采用窒息性心搏骤停后心肺复苏的方法制备缺氧缺血性脑损伤模型.取自主循环恢复(ROSC)的新生猪20头随机分为2组(n=10):脑缺氧缺血组(HI组)和依达拉奉组(E组),另取10头作为假手术组(S组).ROSC后30 min,E组静脉注射依达拉奉3 mg/kg,随后静脉输注,速率为1.5 mg·kg~(-1)·h~(-1),输注时间5.5 h,HI组以溶剂替代依达拉奉.于ROSC后48、72和96 h时行神经功能损伤评分,于ROSC后96 h时测定脑组织8-羟基(脱氧)鸟苷(8-OHdG/OHG)表达水平,光镜下观察脑组织病理学结果,并计算存活神经元密度.结果 与S组比较,HI组和E组脑组织存活神经元密度降低,8-OHdG/OHG表达水平升高,神经功能损伤评分升高(P<0.01);与HI组比较,E组脑组织存活神经元密度升高,8-OHdG/OHG表达水平降低,E组ROSC后48 h时神经功能损伤评分降低(P<0.05);E组脑组织病理学损伤较HI组减轻.结论 依达拉奉可减轻新生猪缺氧缺血性脑损伤,其机制可能与减轻DNA/RNA氧化损伤有关.     

新生猪缺氧缺血性脑病模型的建立

目的 建立一种新生猪缺氧缺血性脑病(HIE)模型.方法 健康3～7 d雄性新生猪随机分为假手术组(Sham n=5)和模型组(HI n=12),采用全身缺氧40 min、空气5 min、窒息7min后复氧、心肺复苏再灌注法制作新生猪HIE模型,于自主循环恢复(ROSC)后第4天取脑,观察缺血缺氧后小猪体质量增长情况,神经功能障碍评分(NDS)以及脑组织病理形态学改变.结果 两组各参数基础值差异无统计学意义,HI组在40 min缺氧过程中,氧分压降至(22±3)mm Hg,心率加快,平均动脉压升高,动脉氧饱和度降低,血糖升高;吸入空气时上述参数略有恢复;在7 min窒息期间,表现更严重的低氧血症、代谢性酸中毒、高碳酸血症、高血糖以及显著的低血压和心动过缓,窒息5 min时MABP降至(30±18)mm Hg;HI组体质量增长明显慢于Sham组(P<0.05).Sham组除第1天因麻醉残留造成较高的NDS评分外,后期未见明显异常行为改变,HI组ROSC后第1、2和3天NDS评分明显升高(P<0.05).Sham组脑神经元形态正常,HI组壳核、尾状核和感觉运动皮层存活神经元密度分别降低至Sham组的(12.6±10.1)%、(51.5±8.4)%和(49.1±23.4)%(P<0.01).结论 制作新生猪HIE模型成功,该模型符合新生儿围产期全身缺氧、窒息继发缺血,复氧、CPR后再灌注致HIE脑损伤病理生理变化过程.纹状体和感觉运动皮层HE染色可见以核固缩为典型特征的神经元缺血性改变,     

依托咪酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤的保护作用

目的观察依托眯酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法雄性SD大鼠10只,体重90-100 g,制备大脑皮质和海马脑片,随机分为对照组、缺氧复氧组、3 μmol ·L-1依托咪酯组、6μmol·L-1依托咪酯组、15 μmol·L-1依托咪酯组和6 μmol·L-1依托咪酯+γ-氨基丁酸 A(GABAA)受体拮抗剂Picrotoxin 50 μmol·L-1组。各组脑片缺氧10 min复氧120 min时,测定经三苯基氯化四唑氮染色的吸光度(A490),Fluo-3荧光染色后计算细胞内Ca2+浓度。结果缺氧复氧可导致大脑皮层、海马A490降低,细胞内Ca2+浓度升高,不同浓度依托咪酯可减弱缺氧复氧导致的上述改变,以 6 μmol·L-1依托咪酯的效果较好,且此作用可被GABAA受体拮抗剂完全拮抗。结论依托咪酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤有一定的保护作用,可能通过GABAA受体介导,并降低Ca2+负荷有关。     

Correlation of cell apoptosis with brain edema and elevated intracranial pressure in traumatic brain injury

Traumaticbraininjury(TBI) isamongthemostseriousinjuries, frequentlycausingdeathorpermanentdisability. ItiscloselyrelatedwiththehottesttopicsabouthowtoreducetheneurologicalimpairmentwhichmayresultfromTBI.Necrosisinthedamagedregionhadbeenconventionallythoughttobetheonlydeathmodeoftheinjuredneuronsuntilrecently. Atpresent, alotofevidencehasindicatedthatapoptosismightbeanothermainmodeofcelldeathafteraheadtrauma.1 Inthisresearch, animalmodelofTBIwasmadewithadultrabbit, apoptoticcellsweredetecte…