补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者红细胞免疫功能、血清CIC、补体C_3的作用

1 临床资料 1994～1995年共收集符合慢性再障诊断标准的患者68例、随机分为补髓生血冲剂治疗组(简称实验组)35例和西药治疗组(简称对照组)33例。其中男性41例,女性27例;年龄6～75岁,平均31.5岁;正常组12例,年龄为18～54岁,平均年龄30岁,均系非血液系统、非免疫系统疾病之健康献血员。实验组又分为肾阴虚型(19例)和肾阳虚型(16例)。2 方法 实验组及对照组的病人均按单盲法进行观察治疗,所有患者均停用其它治疗再障的药物半月后进行观察。实验组:肾阳虚型投以补髓生血冲剂Ⅱ号(由仙灵脾、补骨脂、巴戟天、麦冬、女贞子等药物组成);肾阴虚型投以补髓生血冲剂Ⅰ     

补髓生血冲剂对小鼠造血功能的实验研究

为了探讨补髓生血冲剂对再生障碍性贫血患的药物作用机理，对失血性贫血模型小鼠及环磷酰胺（CY）导致骨髓抑制模型小鼠进行治疗观察。对小鼠外周血WBC，RBC，Hb，网织红细胞（RC）及骨髓有核细胞（BMC），脾脏重量和多能造血干细胞（CFU－S）等指标进行检测，并与目前临床上常用的省优部优产品再障生血片进行了对比，以探讨补髓生血冲剂对小鼠造血系统的影响。结果表明补髓生血冲剂具有明显促进骨髓造血和脾脏髓外造血的作用，并且对升高WBC、RC、BMC及CFU－S等方面明显优于再障生血片。     

补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血干细胞bax、C-myc、Bcl-2基因表达水平影响的实验研究

目的 :探讨补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者造血干细胞bax、C -myc和Bcl- 2基因表达水平影响和疗效机理。方法 :应用免疫组化染色法和酶联免疫测定法检测补髓生血冲剂治疗前后CAA患者造血干细胞bax、C -myc和Bcl- 2基因表达水平。结果 :治疗后CAA患者的bax基因阳性表达率下降 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。而C -myc及Bcl- 2基因阳性表达率与对照组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :补髓生血冲剂的作用机制之一可能是通过降低bax和C -myc基因的阳性表达率以抑制细胞凋亡 ,而并非在于促进调亡抑制基因Bcl- 2表达所致。     

补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞c-kit、CxCR4受体表达的影响

目的 :探讨补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓造血祖细胞c -kit、CXCR4受体表达水平的影响。方法 :采用免疫荧光法及流式细胞技术分别对使用该颗粒剂治疗前后的CAA患者骨髓造血祖细胞c-kit、CXCR4 受体表达水平进行检测 ,并与再障生血片对照组及正常组作比较研究。结果 :补髓生血颗粒剂组临床疗效与再障生血片组疗效存在显著差异(P <0 .0 5 ) ;两组疗前c -kit受体表达高于正常组 ,治疗后均表达下调 ;补髓生血颗粒剂组治疗后CXCR4 受体表达与再障生血片组存显著性差异(P <0 .0 5 )。结论 :慢性再障骨髓造血衰竭并非c -kit受体低表达所致 ;补髓生血颗粒剂在临床疗效与CXCR4 受体表达上调作用上优于再障生血片组 ,提示补髓生血颗粒剂通过提高造血祖细胞增殖分化与黏附归巢能力而刺激造血     

补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达水平的影响

目的 :探讨补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者造血调控因子IL - 1β、IFN -γ、TNF -α表达水平的影响。方法 :采用现代医学梅联免疫 (ELISA)测定方法和放射免疫 (RIA)方法 ,分别对使用该冲剂治疗前后的CAA患者血清学IL - 1β、IFN -γ、TNF -α水平进行检测 ,并与对照组及正常组作比较。结果 :疗前CAA患者血清IL - 1β、IFN -γ、TNF -α表达水平与正常组相比有显著性差异 (P <0 0 1) ;经补髓生血冲剂治疗后 ,其血清学水平有所恢复 ,且实验组与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 )。结论 :补髓生血冲剂可使CAA患者血清中IL - 1β水平提高 ,IFN -γ、TNF -α水平降低 ,从而改善紊乱的免疫状态 ,使造血细胞增殖、分化功能在一定程度上得以恢复。     

补髓生血颗粒对造血负调控因子IL-6和TGF-β1的影响

目的:探讨补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者血清造血负调控因子IL-6和TGF-β1表达水平的影响.方法:采用免疫荧光法及流式细胞技术分别测定使用该颗粒剂治疗前后的CAA患者血清IL-6和TGF-β1表达水平的影响,并与再障生血片对照组与正常组作比较研究.结果:补髓生血颗粒剂与再障生血片临床疗效存在显著差异(P＜0.05),两组疗前血清IL-6和TGF-β1表达水平均明显高于正常组,疗后表达水平均下调.结论:CAA患者血清中IL-6和TGF-β1为造血负调控因子,参与了负向调控造血;补髓生血颗粒在下调造血负调控因子上优于再障生血片,提示补髓生血颗粒在调节CAA患者细胞免疫及下调造血负调控因子上发挥作用,从而改善了CAA的造血功能.     

补肾益髓生血法AA大鼠含药血清对大鼠造血干细胞红系分化JAK2/STAT5信号通路的影响

目的:探讨补肾益髓生血法再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA,简称再障)大鼠含药血清对大鼠骨髓造血干细胞红系分化JAK2/STAT5信号通路的影响。方法:在前期整体动物实验的基础上,体外培养正常大鼠造血干细胞,诱导其定向红系分化,分为空白对照组、正常对照组、模型组、司坦唑醇组(康力龙组)、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组,在培养体系中加入含药血清干预4d后,提取红系细胞总RNA及蛋白,分别采用RT-PCR和Western blot检测细胞JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,模型组细胞JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达均明显降低(P0.01);与模型组相比,各治疗组JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达明显升高(P0.01或P0.05);滋肾生血组JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达高于益髓生血组和温肾生血组(P0.05)。结论:补肾益髓生血法能够增强JAK2、STAT5的表达,可能通过影响JAK2/STAT5信号通路来促进红系细胞的分化成熟,其中滋肾生血法优于益髓生血法和温肾生血法。     

补髓生血颗粒对再生障碍性贫血大鼠造血祖细胞的影响

目的:观察补髓生血颗粒对再生障碍性贫血模型大鼠造血祖细胞增殖的影响。方法:Wistar大鼠经60Co-γ射线8.0Gy照射造成再障模型,分别给予再障生血片及低、中、高剂量补髓生血颗粒,连续给药3周后,采用甲基纤维素半固体集落培养方法培养骨髓红细胞集落形成单位(CFU-E)、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM),观察补髓生血颗粒对再障模型大鼠造血祖细胞集落形成的影响。结论:补髓生血颗粒可刺激造血祖细胞的增殖,促进再障大鼠骨髓CFU-E、CFU-GM集落的形成,对再障大鼠骨髓抑制状态有显著改善作用。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117表达的影响。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及流式细胞技术检测CAA病人治疗前后骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117水平的变化。结果:CAA患者骨髓c-kitm RNA及其CD117表达水平高于正常对照组,治疗后二者表达水平均有不同程度下降,并且补髓生血颗粒对二者表达水平的下调程度优于再障生血片对照组(P<0.05)。结论:CAA患者骨髓c-kitm RNA及CD117的表达存在异常;补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓c-kitm RNA及CD117的表达来改善CAA的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复。     

补髓生血冲剂对骨髓增生异常综合征骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

补髓生血冲剂治疗骨髓增生异常综合征 ( MDS)临床疗效确切 ,为进一步探讨该冲剂临床疗效的作用机制 ,本文应用造血祖细胞体外培养法研究了该冲剂对 MDS患者骨髓造血祖细胞体外增殖的影响 ,目的在于为该冲剂的临床应用提供实验依据。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　标本来源 :18例 MDS患者骨髓标本为辽宁中医学院附属医院血液病房及外院血液病房提供 ,均经骨髓形态学、免疫组化、骨髓活检等检查 ,符合 MDS的诊断标准 [1 ]。 18例中男 11例 ,女 7例 ;年龄 45～ 70岁。取其髂前或髂后上棘骨髓约 1.5～ 2 .0 ml,肝素抗凝备用。1.1.2　培养基…     

补肾生血法对慢性再障患者表达整合素αLβ2/CD 11a水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者粘附分子αLβ2/CD 11a表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用RT-PCR方法检测αLβ2/CD 11a和的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干祖细胞αLβ2/CD 11a的表达水平.结果:CAA患者造血细胞αLβ2/CD 11a表达异常,补髓生血颗粒剂对造血细胞αLβ2/CD 11a的表达水平有调节作用,与康力龙组比较无显著差异.结论:CAA可能存在造血干祖细胞与骨髓微环境功能缺陷,骨髓造血干祖细胞粘附分子水平异常导致其与骨髓基质细胞间的粘附功能降低,从而影响造血,所以调节骨髓造血千祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用机理之一.     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞蛋白激酶B表达的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再障患者(CAA)骨髓单个核细胞中蛋白激酶B表达的影响及其作用机制。方法:采用蛋白质印迹(Western-blot)方法检测CAA患者、正常人骨髓基质细胞PKB表达水平。结果:CAA患者骨髓单个核细胞的PKB表达水平均低于正常组(均P0.05),经补髓生血颗粒治疗后,PKB表达水平有所上升,与治疗前相比具有显著性差异(P0.05)。结论:CAA患者骨髓基质细胞PKB呈低水平表达,它可能参与了CAA的发病机制过程;中药补髓生血颗粒通过调节PKB的表达水平而抑制PKB促凋亡作用,有可能调节骨髓造血信号转导调控,促进骨髓造血功能。     

补髓生血颗粒剂对慢性再障血清IL-6及TGF-β1表达水平的影响

目的 :探讨补髓生血颗粒治疗CAA的疗效机理。方法 :6 0例病人随机分为治疗组和对照组 ,分别给予补髓生血颗粒和再障生血片口服 ,观察治疗前后血清IL 6及TGF β1 表达水平 ,并和正常人相比较。结果 :疗前病人血清IL 6及TGF β1 分泌水平升高 (P <0 0 5 ) ,疗后IL 6及TGF β1 下降 ,且补髓生血颗粒组明显低于再障生血片组 (P <0 0 5 )。结论 :补髓生血颗粒通过下调负性造血调控因子的作用发挥治疗CAA的作用 ,且其疗效优于再障生血片。     

补髓生血颗粒对慢性髓劳病患者T淋巴细胞亚群、IL-17、IL-17mRNA和RORγtmRNA影响的研究

目的:通过观察补髓生血颗粒对慢性髓劳病患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群、IL-17、IL-17mRNA和RORγtmRNA表达水平的变化,探讨补髓生血颗粒治疗慢性髓劳病患者免疫失衡的作用机制和疗效机理。方法:按照诊断标准收治30例慢性髓劳病患者,应用FCM检测慢性髓劳病患者治疗前后T淋巴细胞亚群(CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+)表达比例的变化,ELISA法检测慢性髓劳病患者治疗前后IL-17表达水平的变化,RT-PCR法检测慢性髓劳病患者治疗前后IL-17mRNA和RORγtmRNA表达水平的变化。结果:疗前试验组慢性髓劳病患者CD_4~+细胞比例、CD_4+/CD_8~+比值降低,CD_8~+细胞比例增高,与正常对照组相比均有显著性差异(P0.05)。疗后试验组CD_4~+细胞比例、CD_4~+/CD_8~+比值升高,CD_8~+细胞比例下降,与疗前相比均有显著性差异(P0.05);疗前试验组慢性髓劳病患者IL-17、IL-17mRNA和RORγtmRNA的表达水平均高于正常组,与正常对照组相比均有显著性差异(P0.05),疗后较疗前下降,相比均具有显著性差异(P0.05)。结论:1补髓生血颗粒通过调整异常表达的T淋巴细胞数量和比值,进而抑制亢进的细胞免疫状态,以促进骨髓造血功能的恢复;2补髓生血颗粒通过下调IL-17、IL-17mRNA和RORγtmRNA的表达水平,以恢复因免疫损伤而导致的骨髓造血功能障碍,进而促进造血干/祖细胞的增殖和分化;3补髓生血颗粒具有调整慢性髓劳病患者免疫失衡的作用,这可能是补髓生血颗粒治疗慢性髓劳病的作用机制之一。     

补髓生血冲剂配合西药治疗重型再障Ⅱ型的临床研究

目的:观察补髓生血冲剂配合西医疗法治疗重型再障Ⅱ型的临床疗效.方法:60例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组在对照组单纯使用西药的基础上加用补髓生血冲剂.结果:治疗组疗效明显优于对照组,差异显著(P＜0.05).结论:中西医结合治疗重型再障Ⅱ型疗效显著.     

补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠造血祖细胞增殖分化及其机制的影响

目的：探讨补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠骨髓造血祖细胞增殖分化及其机制的影响。方法：60Co-γ射线联合环磷酰胺建立再障大鼠模型,以正常对照组、模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组复方中药灌胃大鼠,制备其含药血清培养正常大鼠骨髓细胞,培养体系中含药血清比例为20豫,进行骨髓造血祖细胞集落形成单位（CFU）计数;收集集落细胞,RT-PCR 检测红系GATA-1 mRNA及粒系PU.1 mRNA表达。结果：与正常对照组相比,模型组骨髓有核细胞显著减少（P<0.01）,造血祖细胞红系集落形成单位（CFU-E）、红系爆式集落形成单位（BFU-E）和粒单核系造血祖细胞集落（CFU-GM）数目均明显降低（P<0.01）,GATA-1、PU.1 mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组相比,各个治疗组大鼠骨髓有核细胞升高,造血祖细胞CFU-E、BFU-E 和CFU-GM 数目显著增加（P<0.01）;滋肾生血组CFU-E、BFU-E明显优于益髓生血组（P<0.01）;滋肾生血组CFU-GM优于益髓生血组、温肾生血组。各治疗组GATA-1、PU.1 mRNA表达明显高于模型组（P<0.01）;滋肾生血组GATA-1 mRNA表达明显高于益髓生血组、温肾生血组（P<0.05）;滋肾生血组PU.1 mRNA表达高于益髓生血组、温肾生血组。结论：补肾益髓生血法可能通过增加GATA-1、PU.1 mRNA表达而促进骨髓造血祖细胞增殖分化,其中滋肾生血法优于益髓生血法和温肾生血法。     

补髓生血颗粒对慢性髓劳病患者Kv1.3通道蛋白表达的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性髓劳病患者骨髓单个核细胞Kv1.3通道蛋白表达的影响。方法:32例慢性髓劳病患者温水冲服补髓生血颗粒,每次1袋,每日3次,连续服用6个月后收集患者及健康人群(n=10)骨髓液4 mL,应用Western blot方法检测慢性髓劳病患者治疗前后及健康人群骨髓单个核细胞Kv1.3通道蛋白。结果:慢性髓劳病患者治疗前Kv1.3通道蛋白表达低于健康人群(P0.05),治疗后Kv1.3通道蛋白表达较治疗前升高,但仍低于健康人群(P0.05)。结论:补髓生血颗粒可能通过提高慢性髓劳病患者骨髓单个核细胞Kv1.3通道蛋白表达水平,修复因整合素β1介导的细胞迁移及黏附异常损伤的造血微环境,从而促进骨髓造血干细胞增殖。     

不同剂量补髓生血颗粒对再障模型大鼠造血祖细胞增殖的影响

目的:研究不同剂量补髓生血颗粒对再障模型大鼠骨髓造血祖细胞增殖的影响是否有差异。方法:Wistar大鼠用60Co-γ射线8.0Gy照射造成再障模型,分别给予不同剂量补髓生血颗粒灌胃治疗,连续给药三周后,取股骨中的骨髓有核细胞,采用甲基纤维素半固体集落培养方法培养骨髓红细胞集落形成单位(Colony-Forming Unit-Erythroid,CFU-E)、粒-巨噬细胞集落形成单位(Colony-Forming Unit-Granulocyte Macrophage,CFU-GM),观察补髓生血颗粒对再障模型大鼠造血祖细胞集落形成的影响。结果:体外甲基纤维素半固体集落培养,低、中、高剂量补髓生血颗粒使CFU-E集落产量分别提高至106.37±6.50、108.20±9.88、110.63±6.52,与模型对照组73.17±8.91比较有显著差异(P<0.05)。低、中、高剂量补髓生血颗粒使CFU-GM集落产量分别提高至42.43±5.41、43.77±5.83、43.87±6.80,与模型对照组32.50±4.48比较有显著差异(P<0.05)。各剂量补髓生血颗粒对CFU-E、CFU-GM集落形成的提升和促进...     

补髓生血颗粒对于慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞粘附分子CD11b水平影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,Chronic Aplastic Anemia CAA)患者的整合素家族成员之一CD11b表达水平的影响;方法:将65例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组(试验组)和再障生血片组(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测试验组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞相关整合素家族粘附分子CD11b的抗原表达水平并进行比较分析,并与10例正常对照组进行比较;结果:CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子CD11b处于低表达状态,治疗后表达水平升高,且补髓生血颗粒对CD11b表达的调整程度优于再障生血片组,疗后CD11b表达阳虚型与阴虚型有显著差异;结论:CAA患者粘附分子CD11b表达异常,可能与再障的发生密切相关.补髓生血颗粒能通过改善再障粘附分子的表达水平来改善CAA造血功能.     

补肾生血法对慢性再障患者表达α5β1／CD49e水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者α5β1/CD49e表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用逆转录,聚合酶链反应(RT-PCR)检测α5β1/CD49e的mRr NA表达,流式细胞术(FcM)检测骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e的表达水平.结果:CAA骨髓单个核细胞整合素α5β1/CD49e mRNA及骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e呈低表达状态,补肾中药补髓生血颗粒能促进其表达,与有效药物康力龙比较无显著差异(P>0.05).结论:CAA可能存在骨髓微环境功能缺陷,调节骨髓造血干/祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干/祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质问的粘附功能,从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用理之一.