南宁市婴幼儿弓形虫感染初步调查

1989年5～6月份,我们应用滤纸干血滴间接血凝法(IHA)对南宁市547名婴幼儿进行了弓形虫感染血清流行病学调查,报告如下。一、材料与方法1.对象:滤纸血采自南宁市区妇幼保健院及区卫生防疫站门诊3岁以下婴幼儿547名。2.滤纸干血滴的制备:(1)采集被检滤纸干血滴。(2)阳性对照滤纸干血滴:本室免疫的兔血制     

疟原虫DNA模板制备用于PCR诊断方法的研究

为确立一种快速，敏感，特异的疟原虫检测方法，根据红内期疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ基因序列，设计合成引物３条，采用微量全血和滤纸干血滴标本快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的９种方法，进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）并比较。结果显示有５种方法的实验效果最佳，其中，全血ＰＣＲ仪预热及滤氏干血滴Ｃｈｅｌｅｘ煮沸两法操作简单，所需试剂较少。采用该两法对深圳地区２０２份和湖北地区１６份镜检阳性的全血和深圳地区１２９份滤纸干血滴标     

疟原虫DNA模板制备用于PCR诊断方法的研究

为确立一种快速、敏感、特异的疟原虫检测方法，根据红内期疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ基因序列，设计合成引物３条，采用微量全血和滤纸干血滴标本快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的９种方法，进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）并比较。结果显示有５种方法的实验效果最佳，其中，全血ＰＣＲ仪预热及滤纸干血滴Ｃｈｅｌｅｘ煮沸两法操作简单、所需试剂较少。采用该两法对深圳地区２０２份和湖北地区１６份镜检阳性的全血和深圳地区１２９份滤纸干血滴标本进行检测，结果与镜检的符合率分别为９８．５％和９９．２％。表明本研究筛选出的两种方法制备ＤＮＡ模板的ＰＣＲ检测体系，适用于临床快速准确诊断间日疟、恶性疟或两者混合感染，尤其适用于流行病学调查，值得推广。     

Parasight-F法检测滤纸干血滴恶性疟原虫

疟疾滤纸干血滴检查法是以检测干血滴中抗体、抗原或 DNA等特异成份而评估流行态势。Parasight-F法是以检测红细胞中恶性疟原虫富组氨酸蛋白 ( HRP- )来诊断恶性疟。有报道该法能从恶性疟患者尿中检出富组氨酸蛋白 ,来诊断疟原虫阳性。但尚未见 Parasight-F法从滤纸干血滴中快速检出恶性疟的报道。因此 ,我们根据滤纸干血滴能保持疟原虫抗原成分活性和 Parasight-F 法诊断恶性疟的原理 ,用Parasight-F法快速简便地检测滤纸干血滴中恶性疟原虫富组氨酸蛋白 ,从而判定疟疾感染 ,以期扩展该法应用 ,为疟疾流行病学调查提供适用的方法…     

滤纸干血滴间接荧光抗体试验法检测人群弓形体感染的研究

采用滤纸干血滴标本进行间接荧光抗体试验,对徐州市部分小学学生、职业中学学生及肉联厂工人调查弓形体感染情况,在三个单位530名人群中,阳性137人,阳性率为25.84％。小学生阳性率为21.15％,职业中学学生为19.06％,肉联厂工人为33.78％。男性237人,阳性率为21.94％,女性293人,阳性率为29.01％。滤纸干血滴浸液和血清标本进行间接荧光抗体试验法比较,结果相一致。     

微量间接血凝试验诊断肺吸虫病

<正> 我们以鲜血清、干血清、干血滴法做微量间接血凝试验(IHA),对感染斯氏狸殖吸虫囊蚴的大鼠在感染后不同时间检测,并在滤纸样品放置不同时间做干血清,干血滴IHA检测,比较其对肺吸虫病的诊断价值,现报告如下。     

套式PCR检测滤纸干血滴中恶性疟原虫的研究

目的：建立简易、实用的套式ＰＣＲ检测恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）的方法。方法：以小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）为目的片段的双温度点套式ＰＣＲ扩增滤纸干血滴中Ｐ．ｆ．ＤＮＡ，并将结果与镜检法进行比较研究。结果：１４３例标本中两法均阳性和均阴性分别有５５份和５１份，镜检阴性而ＰＣＲ阳性者３４份，镜检阳性而ＰＣＲ法阴性３份。套式ＰＣＲ总阳性率为６２％，显著高于镜检法的４１％，两者符合率为７４％。结论：本法简便、快速，敏感性高、特异性强，具有一定的现场应用价值。     

山东省弓形虫病流行病学调查研究

应用滤纸干血滴间接血凝试验（ＩＨＡＴ）对山东省９个地区１５个县市的弓形虫感染情况的调查结果表明，人群总感染率为１．５３％。调查常见动物１１种，检出阳性动物７种，感染率分别为猫４６．０％、猪３０．３４％、羊１２．８８％、狗１２．８７％、驴５．８８％、兔４．１７％、鸡４．７６％、另外４种动物牛、马、骡和鼠未发现阳性者。     

山东省弓形虫病流行病学调查研究

应用滤纸干血滴间接血凝试验（ＩＨＡＴ）对山东省９个地区１５个县市的弓形虫感染情况的调查结果表明，人群总感染率为１．５３％。调查常见动物１１种，检出阳性动物７种，感染率分别为猫４６．０％、猪３０．３４％、羊１２．８８％、狗１２．８７％、驴５．８８％、兔４．１７％、鸡４．７６％、另外４种动物牛、马、骡和鼠未发现阳性者。     

滤纸干血滴间接荧光抗体试验应用于人体包虫病诊断和流行病学调查的研究

1986～1988年我们应用绵羊棘球蚴囊壁冰冻切片抗原作间接荧光抗体试验分别检测了13例包虫病人血清和滤纸干血滴,结果均为阳性,阳性率为100％(13/13);24例健康人血清和滤纸干血滴的阴性率分别为95.8％(23/24)和100％(24/24)。本方法敏感性和特异性较高,可节省抗原材料,采血简便易行,是包虫病较为理想的辅助诊断方法。为了研究其实用价值,我们又检测了甘肃省天祝县251人,漳县242人和会宁县683人,阳性率分别为4.78％(12/251),5.37％(13/242)和1.17％(8/683),其结果与间接血凝试验的结果(阳性率分别为4.78％,4.96％和0.9%)之间无显著性差异(P>0.05)。作者认为将该方法用于包虫病流行区人群的血清流行病学调查,可反映人群包虫病的感染率。     

用DIFA 检测肿瘤患者的弓形虫抗体

目的: 为了解湖北肿瘤患者弓形虫感染概况并探索新技术直接免疫固相凝集试验(DIFA)等3项试验联合筛选诊断弓形虫感染的意义。方法: 使用DIFA检测100 例肿瘤患者的弓形虫IgG 抗体, 阳性者用IgG-IFAT 复查, 再用Toxo-IgG/IgA/IgM-ISAGA 检测。结果: DIFA 检测阳性率为12% (12/100), IgG-IFAT 检测符合率为100%; IgA 可疑1 例; IgM 抗体阳性4 例, 可疑1 例, 其中2 例提示为活动性感染。合并弓形虫感染的12 例分布于肺癌、非何杰金氏淋巴瘤和乳腺癌患者中, 其感染率分别为受检人数的22.2% (6/27)、19.3% (5/26) 及7.1% (1/14)。结论: DIFA 的敏感性和特异性均较佳, 3 种方法的联合应用适宜作弓形虫感染的常规筛选诊断。提示免疫功能降低的肿瘤患者, 特别是肺癌和非何杰金氏淋巴瘤患者容易感染弓形虫病或促使潜伏的弓形虫病活动。     

Cellulose acetate precipitation test in sero-diagnosis of amoebiasis

Cellulose acetate precipitation (CAP) test for the detection of antibody against Entamoeba histolytica using the axenic antigen, was performed on the 127 serum samples obtained from patients with amoebic liver abscess (14), amoebic hepatitis (21), amoebic dysentry (11), amoebic colitis (31), other parasitic infestations (25) and normal individuals (25). The percent positivity was 100, 95.23, 90.9, 67.74 and 16 and 12 respectively whereas the corresponding figures for the indirect immunoflourescence (IFAT) test were 100, 100, 100, 74.19, 12 and 8 respectively. Although CAP is not as good a test as IFAT, yet it can be recommended for routine testing due to its sensitivity, speed of performance and applicability to a single serum sample.     

Immunodiagnosis of amoebiasis

Serological studies were done on 127 cases using three different techniques namely indirect haemagglutination (IHA), indirect fluorescent antibody test (IFT) and counter immunoelectrophoresis (CIEP) to detect antiamoebic antibodies. All amoebic liver abscess cases showed significant titre of antibodies by all the three tests used. In the group of patients suffering from amoebic pathology of liver, 90.47 per cent were positive by IHA, 100 per cent by IFT and 85.71 per cent by CIEP respectively. Among amoebic dysentry and amoebic colitis cases 81.81 per cent and 80.64 per cent respectively were positive by IHA. The corresponding figures for IFT were 100 per cent and 74.19 per cent and for CIEP 90.90 per cent and 64.51 per cent respectively. Follow up study showed no significant fall in antibody titre in nine cases studied upto 10 weeks after treatment. Amoebic antigen could be detected in pus from all the nine cases with amoebic liver abscess by CIEP test.     

湖北省黑热病流行态势的评估

[目的 ]复查湖北省自 1989年起陆续报告的 14例“黑热病”,及评估我省黑热病的流行现况。 [方法 ]复查“黑热病”患者的骨髓片、免疫学检查 (L DT、IFAT)、接种动物及真菌培养、媒介 (白蛉 )和保虫宿主 (犬 )的调查。[结果 ]除 1例输入的和 1例残存的皮肤型黑热病外 ,其余 12例为播散型荚膜组织胞浆菌病。1997～ 1999年在 9个地市的 2 3个县 (市 )的 2 5个乡镇进行了免疫学监测 ,对 13 890人采用利什曼素皮内试验 (L DT) ,阳性率 0 .0 0 7% ,40岁以下的人群无阳性。其中 175 6人作间接荧光抗体试验 (IFAT) ,结果均为阴性。在调查区内未发现中华白蛉。查犬 30 2只 ,未发现病犬。 [结论 ]湖北省已消灭黑热病 ,且防治成果巩固     

华支睾吸虫成虫抗原免疫酶染色试验和间接免疫荧光抗体试验效果的比较

应用成虫冰冻切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)及间接免疫荧光抗体试验(IFAT),对比检测了 51份华支睾吸虫病患者和 50份健康人血清,两法的阳性率分别为 92％和 88％;假阳性率分别为 2％和4％,应用 IEST和IFAT对比检查 22份急性血吸虫病患者血清、20份慢性血吸虫病患者血清及 15份并殖吸虫病患者血清。IEST 出现的交叉反应率分别为 14％、5％和0;IFAT出现的交叉反应率分别为 14％、10％和0。表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性,并且抗原定位好。而 IEST不需要特殊仪器,更适合于现场应用。     

IEST、IFAT和Dot-ELISA诊断华枝睾吸虫病的比较研究

用成虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验(IEST)、间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和斑点-ELISA(Dot-ELISA)对比检测了51例华枝睾吸虫病人血清,阳性率分别为92%、88%和92%.检测健康人血清50例,假阳性率分别为2%、4%和2%.用3法检测22例急性血吸虫病人血清、20例慢性血吸虫病人血清和15例肺吸虫感染者血清.IEST的交叉反应率分别为14%、5%和0;IFAT的交叉反应率分别为14%、10%和0;Dot-ELISA的交叉反应率分别为14%、5%和0.显示3种方法诊断华枝睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性.而IEST和Dot-ELISA更适于现场应用.     

ELISA IFAT和PCR/生物素探针检测中枢神经系统疾病中弓形虫感染

目的　比较 ELISA、IFAT和 PCR/生物素探针检测弓形虫感染的效果 ,了解中枢神经系统疾病中弓形虫感染的情况。方法　应用 EL ISA、IFAT和 PCR/生物素探针 (PCR-BP)对 164例脑囊虫病、10 8例疑似脑囊虫病、88例原发性癫痫患者和 115例健康人群进行了血清弓形虫抗体及血液中弓形虫特异序列 DNA检测和比较。结果　 ELISA和 IFAT检测各组人群抗弓形虫抗体阳性率分别为 15 .85 %、14 .81%、13 .64 %和 6.0 9% ,14 .0 2 %、14 .81%、14 .77%和 6.0 9%。PCR-BP检测各组弓形虫特异性 DNA阳性率分别为 2 .44 % (4 /164 )、3 .70 % (4 /10 8)、3 .41% (3 /88)、0 (0 /115 )。结论　 PCR/生物素探针适合诊断现症弓形虫感染 ,而 EL ISA和 IFAT可作为弓形虫感染的筛选方法。脑囊虫病、疑似脑囊虫病和原发性癫痫患者中存在弓形虫感染     

Antibody response of patients harbouring different zymodemes of Entamoeba histolytica to homologous and heterologous antigens

Entamoeba histolytica isolates characterized into four zymodemes were used as antigens in the IFAT; with 17 sera obtained from patients harbouring different amoebic isoenzyme groups. The method of cultivation used was found to influence the ease of reading the IFAT. Reactivity of serum samples, obtained from the selected patients (i.e. with varied forms of amoebiasis), against homologous and heterologous antigens did not reveal any antigenic differences among amoebic zymodemes. The present result is an advance on our knowledge and corroborates previous findings. However, since the clinical spectrum of the disease may vary and diagnosis based on history may not necessarily be complete, it is suggested that the present result should be taken as tentative until reactivity of the antigens (from different zymodemes) against specifically raised sera in 'animal models' is known.     

Diagnostic and prognostic value of an immunofluorescent assay for melioidosis

Melioidosis caused by Burkholderia pseudomallei is endemic in southeast Asia. The clinical manifestations range from wound infections to acute septicemia. In some cases, recurrence can also occur following complete recovery. Case fatality rates are high and a major factor is the delay in the culture and identification of the bacterium. An immunofluorescent assay (IFAT) using whole-cell antigen for the detection of total antibodies to B. pseudomallei was tested with 650 sera. Using a cut-off value of 1:80, 66 sera from culture-confirmed cases were positive with titers > or = 320. In another 523 sera from patients in which no other etiology could be found, 149 (23.4%) were positive. To monitor disease activity, persistence of antibody levels was investigated on 61 serial sera samples collected from 14 other confirmed cases on follow-up visits while on oral maintenance therapy. The IFAT demonstrated a reduction in titers in cases of localized infections, suggesting that either the infection was being resolved or arrested while septicemic patients maintained high IFAT titers on follow-up, suggesting the possibility of continuous sequestration of antigen from an intracellular source.     

幼虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验诊断旋毛虫病

目的：评价幼虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）诊断旋毛虫病的价值。方法：应用纯净幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验检测感染旋毛虫小鼠和旋毛虫病患者血清中的抗旋毛虫抗体,在患者发病后及应用阿苯达唑治疗后不同时间采集血清,以其他寄生虫病患者和健康人血清为对照。结果：１５只小鼠感染旋毛虫后２ｗｋ即可检出抗体,４６７例旋毛虫病患者的抗体阳性率为８６．５％,而丝虫病、包虫病患者各４５例和健康人血清５６份均为阴性。４８份并殖吸虫病患者的交叉反应率为１６．６７％。旋毛虫病患者发病后１ｗｋ的抗体阳性率为７０．２１％,至发病后２ｗｋ、３ｗｋ及４ｗｋ则分别升至９１．０％、９５．８％及１００％。幼虫冰冻切片的抗原活性于－２０℃可保存至５年。旋毛虫病患者治疗后１ｗｋ抗体阳性率从治疗前的８７．５％上升到１００％,血清抗体滴度比治疗前也有明显升高,治疗后１个月的抗体转阴率为２４％,至治疗后４个月达７５％。结论：幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验诊断旋毛虫病具有较高的敏感性和特异性,并可用于疗效考核