镉诱导LLC-PK1细胞凋亡对基因表达的影响

目的探讨镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞（LLC-PK1）凋亡对bcl-2、p53（mtp53）、c-myc、c-fos与ras基因表达的影响.方法采用流式细胞仪分别测定bcl-2、p53、c-myc、c-fos与ras基因表达产物.结果不同浓度CdCl2（0,10,20,40 μmol/L）作用LLC-PK1细胞,8 h后bcl-2表达逐渐下降,并呈良好的剂量-反应关系（r=-0.910,P＜0.05）;4,8 h p53表达均明显下降,呈剂量-反应关系（r值分别为-0.716,-0.972,P均＜0.05）;8 h后c-myc表达逐渐下降,呈剂量-反应关系（r=-0.694,P＜0.05）;8 h后c-fos表达未见剂量-反应关系;8 h后ras表达逐渐下降,呈明显的剂量-反应关系（r=-0.887,P＜0.05）.结论镉诱导LLC-PK1细胞凋亡的机制可能与镉抑制bcl-2、p53、c-myc、ras基因表达有关.     

工频磁场对人绒毛滋养细胞凋亡相关基因表达的影响

目的研究50Hz工频磁场对人早孕绒毛滋养细胞凋亡相关基因表达的影响，探索工频磁场对人生殖健康影响的可能机制。方法体外分离培养人早孕绒毛滋养细胞。以50Hz、0．4mT强度的正弦磁场分别辐照处理6、48、72h，同时设立相应的平行对照组，用实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测工频磁场辐照对bcl-2、bax、caspase-3、p53、fas基因表达的影响。结果辐照6、48、72h后bcl-2、bax、caspase-3、p53、fas基因表达变化倍数平均值均接近1，暴露组与对照组的差异均没有统计学意义（P〈0．05）。结论72h内，0．4nat工频磁场体外辐照不会影响人早孕绒毛滋养细胞bcl-2、bax、caspase-3、p53、fas等凋亡相关基因的表达水平。     

金雀异黄素诱导人乳腺癌细胞凋亡作用机制研究

目的探讨金雀异黄素对体外培养的人乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响及作用机制。方法采用MMT法、凋亡细胞的荧光显微镜、电镜观察和流式细胞仪的检测,观察了不同剂量的金雀异黄素诱导细胞凋亡。同时采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax和癌基因erbB2蛋白的表达。结果通过荧光显微镜和电镜技术观察到凋亡的MCF7细胞。流式细胞仪也检测到了金雀异黄素诱导MCF7细胞产生凋亡,并随着金雀异黄素浓度的增加,细胞凋亡率显著增加。蛋白水平检测表明金雀异黄素促进MCF7细胞Bax表达升高,抑制erbB2表达。结论金雀异黄素可诱导MCF7细胞凋亡,并主要是通过调节Bax和erbB2蛋白表达实现的。     

宫清颗粒对人早孕绒毛、蜕膜组织细胞凋亡及信号转导的影响

目的：探讨宫清颗粒对人早孕绒毛、蜕膜组织细胞凋亡及信号转导的影响,为临床防治药物流产后异常子宫出血（简称药流后出血）提供生物学依据。方法：将120例受试者随机分为宫清药流组、茜芷药流组、单纯药流组及负压吸宫组,各30例,收集各组绒毛及蜕膜组织,观察细胞超微结构变化;TUNEL法检测细胞凋亡率（AR）、荧光分光光度计检测细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）、免疫组化法检测蛋白激酶C（PKC）蛋白表达。结果：宫清药流组绒毛、蜕膜组织细胞超微结构出现典型凋亡改变,AR、[Ca2＋]i升高,PKC蛋白表达降低,与其它3组比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：宫清颗粒能影响细胞内Ca2＋及PKC介导的细胞信号转导,诱导人早孕绒毛、蜕膜组织细胞凋亡,促进绒毛与蜕膜组织完全排出,进而防治药物流产后出血。     

蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱变化的研究

目的研究蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱的变化，为蟾酥诱导HL-60细胞凋亡的可能机制提供依据。方法采用细胞形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡；应用DNA芯片技术检测蟾酥作用前后HL-60细胞基因表达谱的变化。结果1％(v／v)的蟾酥可明显诱导HL-60细胞凋亡。细胞凋亡发生前，在检测的1152个基因中共有9个基因表达改变，其中8个基因上调，1个基因下调。结论在蟾酥诱导HL-60细胞发生凋亡过程中有多个基因参与，BCL-2下调以及IL-8上调与凋亡的发生关系密切。     

薯蓣皂甙元诱导人卵巢癌细胞系HO-8910凋亡及对Survivin基因表达的影响

目的观察薯蓣皂甙元对人卵巢癌细胞系HO-8910凋亡的诱导作用,并探讨其凋亡机制与survivin基因的关系。方法通过MTT法,流式细胞仪等方法研究薯蓣皂甙元对人卵巢癌细胞系HO-8910的诱导凋亡作用,运用RT-PCR分析薯蓣皂甙元对HO-8910细胞survivin表达的影响。结果薯蓣皂甙元在浓度为12.5μg/m l至100μg/m l,作用HO-8910细胞24、48、72 h可以明显抑制HO-8910细胞增殖,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),且呈时间剂量依赖性。在浓度为25μg/m l及50μg/m l时,流式细胞仪可以检测到明显的凋亡峰,且HO-8910细胞表达Survivin基因较用药前明显下降。结论薯蓣皂甙元可以诱导HO-8910细胞凋亡,其机制可能与抑制survivin表达有关。     

二十二碳六烯酸对人树突状细胞基因表达谱的影响

目的:研究二十二碳六烯酸(DHA)对人树突状细胞(DCs)成熟过程中基因表达谱的影响. 方法:采用GM-CSF及IL-4诱导人外周血单核细胞获得非成熟DCs,经DHA( 50 μmol/L)孵育24 h后,再予以LPS (100 ng/ml)作用48 h,用cDNA芯片检测人DCs基因表达谱.用RT-PCR法验证相关差异表达基因的结果.分别将未经脂肪酸处理的DCs和硬脂酸(SA)处理的DCs作为对照. 结果:经DHA预处理后,成熟的DCs与未经脂肪酸处理的成熟DCs相比,共有20条基因差异表达 ,约占芯片中基因总数的29.4%.其中18条基因表达下降,2条基因表达增加.在差异表达的基因中,涉及细胞因子、趋化因子(受体)及其抗原呈递相关分子基因等.而采用饱和脂肪酸(SA)处理的DCs的表达谱未见明显变化. 结论:50 μmol/L DHA对DCs成熟过程中的基因表达具有显著的影响 ,涉及到细胞因子、趋化因子(受体)及其抗原呈递相关分子基因的调节.     

创伤性脑损伤后肠黏膜细胞凋亡和c-fos基因表达

目的:研究创伤性脑损伤(TBI)后小肠黏膜细胞凋亡及c-fos基因表达,探讨肠黏膜上皮细胞凋亡在破坏肠黏膜屏障中的作用及c-fos基因表达与凋亡的关系.方法:雄性Wistar大鼠,随机分为假手术(对照)组和脑创伤后3 h、12 h、24h、72 h和7 d组,采用自由落体撞击致重型颅脑损伤.在各时相点取空肠近端,应用TUNEL法观测小肠黏膜细胞凋亡,应用免疫组化法观察c-fos基因的表达.结果:①凋亡细胞以肠黏膜上皮细胞为主;②脑损伤后3 h肠黏膜上皮即出现明显凋亡,凋亡细胞的数量以伤后72 h最多,分布于绒毛顶端,后延伸至绒毛中下部;③脑损伤后肠黏膜上皮细胞的c-fos基因表达逐渐增强,主要出现在上皮细胞、平滑肌细胞和淋巴细胞,伤后24h、72h和7d的表达明显升高.结论:创伤性脑损伤可引起大鼠小肠黏膜细胞明显凋亡和c-fos基因的显著表达.     

神经酰胺诱导人结肠癌细胞凋亡的作用

目的 探讨外源性神经酰胺诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的作用。方法 采用噻唑兰(MTT)显色法、荧光显微镜、电镜观察以及通过免疫组化方法检测Fas、P53的表达情况。结果 神经酰胺对HT-29细胞的生长有明显抑制作用，并可诱导HT-29细胞产生凋亡，并随着神经酰胺浓度的增加，细胞凋亡率逐渐增加；Fas蛋白的表达随着神经酰胺浓度的增加呈现逐渐升高的趋势，p53蛋白的表达随着神经酰胺浓度的增加呈现降低的趋势。结论 神经酰胺能诱导HT-29细胞产生凋亡。     

孕激素对脂多糖诱导的蜕膜基质细胞的影响

目的 探讨孕激素对细菌脂多糖诱导的蜕膜细胞活性的影响.方法 获取正常早期妊娠妇女的蜕膜组织,经细菌脂多糖刺激体外培养孕激素作用后,用四氮唑盐比色法测定蜕膜细胞增殖抑制情况.结果 不同浓度的细菌脂多糖均抑制了蜕膜基质细胞的生长,孕激素明显抑制了细菌脂多糖对蜕膜基质细胞生长的影响,以孕激素浓度为0.05μg/mL时蜕膜基质细胞增殖最高(F=5.389,P<0.05).结论 细菌脂多糖抑制早孕蜕膜细胞的生长,孕激素明显抑制了细菌脂多糖对蜕膜基质细胞生长的影响,提示孕激素参与到反对细胞内毒素的保护机制.     

TNF-α对妊娠蜕膜重塑机制的调节作用

肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)具有广泛的生物活性,对于整个妊娠期间的影响至关重要。文章综述了TNF-α与妊娠病的关系,阐述TNF-α对蜕膜细胞重塑机制的调节作用,从母胎界面免疫平衡、细胞凋亡、胎盘血管重铸等角度予以说明。     

复发性流产患者子宫蜕膜细胞凋亡蛋白Fas、抑制凋亡蛋白Bcl-2表达的相关性研究

目的:探讨子宫蜕膜细胞凋亡蛋白Fas、抑制凋亡蛋白Bcl-2与复发性流产患者的相关性。方法:选择20例复发性流产患者作为研究组,以下称RAS组,同期正常计划外受孕者20例作为对照组。采用免疫组织化学方法测定各组子宫蜕膜细胞Fas、Bcl-2蛋白的表达。根据阳性表达率和表达强度进行量化评分,并进行相关性分析。结果:RAS组Fas的表达为(4.67±0.59)明显高于对照组(1.31±0.66)(P<0.001),而Bcl-2的表达为(1.76±0.51)明显低于对照组(4.89±0.41)(P<0.001),且两者的表达呈明显负相关(r=-0.61,P<0.05)。结论:①子宫蜕膜细胞Bcl-2低表达、Fas高表达与复发性流产患者的发生有关。②Fas与Bcl-2在子宫蜕膜细胞中的表达失衡可能是复发性流产患者发生的原因之一。     

精索静脉曲张对大鼠生殖激素及睾丸细胞凋亡基因表达的影响

目的研究精索静脉曲张(varicocele,VC)对大鼠生殖激素及睾丸细胞凋亡基因表达的影响,为VC造成男子不育的机理提供理论支持。方法雄性SD大鼠采用左侧精索静脉曲张模型,将30只大鼠随机分为VC组(n10),假手术组(n10)和对照组(n10),建模90d后一并处死,称量大鼠左侧睾丸湿重,放射性免疫检测大鼠血液中FSH、LH和睾酮的含量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(Terminal dexynucleotidyl Transferase(TdT)-mediated dUTP Nick End Labeling,TUNEL)测定睾丸细胞的凋亡,免疫组化检测凋亡基因的表达。结果与对照组相比,大鼠左侧睾丸湿重及睾酮(Testosterone,T)含量显著显著下降(P0.05),VC组血清中的垂体分泌卵泡刺激素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)和黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)含量显著升高(P0.05);VC组与对照组相比,大鼠睾丸细胞凋亡率、Bax和Caspase-3表达显著升高(P0.01,P0.05,P0.05);而Bcl-2表达显著下降(P0.05)。结论精索静脉曲张造成了大鼠睾丸细胞凋亡升高,引起大鼠性激素分泌的紊乱,进而影响精原细胞的分裂和精子的成熟。     

高碘对豚鼠脑和甲状腺细胞凋亡及调节基因表达的影响

目的 探讨高碘对脑和甲状腺细胞凋亡及ｂｃｌ－２、ｂｏｘ基因表达的影响。方法 分别以含碘量为５０μｇ／Ｌ（适碘组）和１００００μｇ／Ｌ（高碘组）的蒸馏水喂养两个实验组的豚鼠６个月,应用流式细胞术和免疫荧光技术检测豚鼠大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡率,并对ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因蛋白表达进行定量检测。结果 高碘组大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡率明显高于适碘组;高碘组大脑皮质、海马和甲状腺组织ｂｃｌ－２蛋     

枸杞多糖对慢性辐射小鼠细胞凋亡及bcl-2基因表达的影响

目的：探讨枸杞多糖(LBP)对辐射小鼠细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法：以水提取-乙醇沉淀法制备枸杞多糖，并制成0．8％的饲料，给予受试小鼠(枸杞多糖组)。正常对照组、辐射对照组给予普通饲料。除正常对照组外，另两组均用^60Coγ射线对动物进行全身性照射，每天照射1次，每天照射剂量为0.084Gy，每周照射5d，连续照射6w，照射总剂量为2.52Gy。检测骨髓微核率、睾丸精母细胞染色体畸变、精子畸形率、肝细胞caspase-3 mRNA表达水平、细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达等指标。结果：LBP可使辐射引起的微核率、染色体畸变、及精子畸形率显降低，骨髓细胞增殖活性提高，凋亡率降低，使辐射小鼠bcl-2基因表达提高、caspase-3 mRNA表达水平降低。结论：枸杞多糖的抗辐射作用与其调控细胞bcl-2基因表达，影响细胞凋亡有关。     

缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的研究

目的：探讨缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的相关机制。方法取体外新生大鼠心肌细胞作为试验样本,将其随即平均分配为四组,A组为对照组,B组为模拟缺血组,C组为缺血2 h后再灌注1h组,D组为缺血持续3 h组。采用TUNEL法对各组样本心肌细胞凋亡情况进行检测,并采用免疫组织化学法对Bcl-2/Bax基因的表达情况进行检测。结果在心肌细胞I/R后,检测到明显的阳性凋亡细胞,同时D组和C组细胞凋亡指数明显高于B组,差异具有显著性（P〈0.05）;免疫组织化学检测结果表明,Bax蛋白表达明显上调,Bcl-2基因表达明显下调。结论缺血和缺血再灌注均会造成心肌细胞凋亡,同时心肌细胞的凋亡同Bcl-2/Bax基因的表达之间存在一定的相互作用关系。     

马鞭草诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡作用观察

[目的]探讨马鞭草C部位对人绒癌JAR细胞抑制作用机理. [方法]通过相差显微镜观察活细胞贴壁程度、细胞形态改变;荧光显微镜观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞超微结构变化;琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况. [结果]马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩;荧光显微镜下观察到典型凋亡细胞的形态学特征;电镜下见到明显的凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳出现"阶梯状条带";流式细胞仪检测发现用药后出现明显的凋亡峰. [结论]马鞭草C部位对人绒癌JAR细胞抑制作用机理是诱导其凋亡.     

肿瘤特异性凋亡基因对人淋巴瘤细胞诱导作用

目的观察肿瘤特异性凋亡基因(Apoptin gene)对人淋巴瘤细胞U937的凋亡诱导作用。方法用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937；采用台盼蓝染色法、RT—PCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人淋巴瘤细胞U937诱导凋亡的作用。结果Apopin基因瞬间转染的人淋巴瘤细胞U937可出现明显的细胞凋亡：而且凋亡细胞的数量与Apoptin的转染时间有关。结论Apoptin基因具有诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡的作用。     

金雀异黄素诱导人胃癌细胞凋亡的机制研究

采用 4’ ,6 二乙酰基 2 苯基吲哚染色、琼脂糖凝胶电泳实验观察了金雀异黄素 (Gen)对体外培养的人胃癌SGC 790 1细胞的凋亡诱导作用 ,并采用WesternBlot法检测Gen对人胃癌细胞p5 3、Caspase 3蛋白的表达情况。结果显示 ,Gen诱导了胃癌细胞凋亡 ,并抑制突变型p5 3蛋白表达 ,增加Caspase 3蛋白表达。结果提示 ,Gen抑制突变型p5 3蛋白表达 ,增加Caspase 3蛋白表达 ,可能是其诱导胃癌细胞凋亡的机制之一     

汉坦病毒感染人胚肾细胞诱导凋亡的研究

目的探讨汉坦病毒在人胚肾细胞(HEK-293)内的增殖及诱导凋亡的机制。方法采用间接免疫荧光法检测HEK-293内汉坦病毒抗原,用westen blot方法测定汉坦病毒作用后bcl-2、bax、Cyt-c及caspase-3的表达。结果汉坦病毒感染细胞后用间接免疫荧光法可在感染的HEK-293胞浆内检测出汉坦病毒抗原;Western blot-ting结果显示,随着汉坦病毒浓度增加,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达上调,Cyt-c蛋白及caspase-3酶原活化片段表达升高。结论汉坦病毒可感染HEK-293细胞并在其体内增殖,可能通过线粒体途径诱导HEK-293细胞发生凋亡。