右美托咪啶对脓毒症大鼠血清炎性因子和氧化应激反应的影响

目的 探讨右美托咪啶对脓毒症大鼠血清炎性因子和氧化应激反应的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,10～ 14周龄,体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+右美托咪啶组(CLP+D组).CLP组和CLP+D组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型,CLP+D组术毕静脉输注右美托咪啶10 μg·kg-1·h-1至大鼠死亡或术后12 h,S组和CLP组给予等容量生理盐水1ml·kg-1·h-1.每组取5只大鼠,分别于术前(基础状态)、术后1、6、12 h时采集股动脉血样,测定血清IL-6、IL-10、SOD及MDA的水平.记录术后12 h内大鼠生存情况.结果 与S组比较,CLP组术后1、6、12 h时血清IL-6、IL-10和MDA的浓度升高,血清SOD活性和生存率降低(P＜0.05);与CLP组比较,CLP+D组术后6、12 h时血清IL-6和MDA的浓度降低,术后12 h时血清SOD活性和生存率升高(P＜0.05).结论 右美托咪啶可以提高脓毒症大鼠的生存率,其机制与抑制炎性因子释放及氧化应激反应有关.     

脓毒症大鼠血清肝肾功及心肌酶谱的变化及意义

目的观察脓毒症大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的变化特点并探讨其意义。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(n=9)和盲肠穿刺结扎(CLP)组(n=27),CLP组根据术后取材时间不同分为6、12和24 h 3个亚组(n=9)。假手术组仅翻动盲肠,CLP组以CLP术制作脓毒症模型,于造模后6 h、12 h及24 h处死大鼠,取血清标本,检测血清ALT、BUN、Cr、CK和LDH水平。结果与假手术组比较,大鼠血清ALT、BUN、Cr、CK及LDH水平变化均随时间延长逐渐升高,12 h时均达到最高水平,24 h时均开始下降,但仍高于假手术组(P0.05)。结论脓毒症大鼠血清中ALT、BUN、Cr、CK和LDH随时间依赖性改变,与脓毒症的病情严重程度密切相关,提示CLP术后大鼠肝、心、肾功能逐渐受损,12 h功能障碍最显著,12 h后器官可能已发生不可逆病变。     

血红素加氧酶-1在脓毒症大鼠炎性反应中的作用

目的 评价血红素加氧酶-1(HO-1)在脓毒症大鼠炎性反应中的作用.方法 雄性Wistar 大鼠72只,10～ 14周龄,体重250～ 300 g,以盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=18):对照组(C组)、脓毒症组(CLP组)、钴原卟啉Ⅸ组(Co组)及锌原卟啉Ⅸ组(Zn组).于术后6、12、24 h(T1-3)时随机取6只大鼠采集血样,采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-6和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的浓度.于T3时采集血样后取肺组织,采用RT-PCR法测定肺组织HMGB1 mRNA表达.另取40只相同条件的Wistar大鼠,按照上述方法分组,绘制生存曲线.结果 与C组比较,CLP组、Co组和Zn组血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度升高,肺组织HMGB1 mRNA表达上调,生存率降低(P＜0.05).与CLP组比较,Co组血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度降低,肺组织HMGB1 mRNA表达下调,生存率升高(P＜0.05),Zn组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 诱导HO-1表达有助于减轻脓毒症大鼠炎性反应.     

电刺激迷走神经对脓毒症大鼠炎性反应的影响

目的 探讨电刺激迷走神经对脓毒症大鼠炎性反应的影响.方法 成年雄性SD大鼠加只,采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症动物模型.随机分为4组(n=10):假手术组(S组)不行CLP术,仅分离双侧颈部迷走神经干;CLP组行CLP术和双颈部迷走神经干分离术;VGX组行CLP术及双颈部迷走神经干离断术;STM组行CLP术、双颈部迷走神经干离断术及电刺激.电刺激方法 :左侧迷走神经近心端连接刺激电极,于CLP术毕即刻行持续电刺激(电压5V、脉冲宽度2ms、频率1 Hz)20 min.右侧颈总动脉穿刺置管连续监测平均动脉压(MAP).于CLP术毕即刻、术后60、120和240min时各组取5只大鼠采集右侧颈总动脉血0.8 ml,采用酶联免疫吸附法测定血浆TNF-α浓度,于CLP术后12.0 min另取5只大鼠处死后提取肝组织,采用免疫印迹法测定肝组织NF-κB表达.结果 与S组比较,CLP组和VGX组MAP降低,血浆TNF-α浓度及肝组织NF-κB表达升高(P＜0.01);与CLP组和VGX组比较,STM组MAP升高,血浆TNF-α浓度降低(P＜0.01).CLP组、VGX组及STM组肝组织NF-κB表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 电刺激迷走神经可能通过激活胆碱能抗炎通路,减轻脓毒症大鼠炎性反应,其抗炎作用机制与NF-κB无关.     

辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠胸主动脉诱导型一氧化氮合酶及内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠胸主动脉诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及内皮型一氧化氮合酶( eNOS)表达的影响.方法 清洁级雌性Wistar大鼠80只,4月龄,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:正常对照组(Ⅰ组,n=8)、假手术组(Ⅱ组,n=8)、脓毒症组(Ⅲ组,n=32)和辛伐他汀预处理组(Ⅳ组,n=32).Ⅱ组打开腹腔找到盲肠后还纳腹腔,缝合腹壁切口.Ⅲ组和Ⅳ组采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型.Ⅳ组制备脓毒症模型前经胃管灌注辛伐他汀20 mg/kg,1次/d,连续2周,Ⅰ组～Ⅲ组给予等容量生理盐水.Ⅱ组于假手术后6h处死动物,Ⅲ组和Ⅳ组于盲肠结扎穿孔后3、6、24、48 h分别取8只动物,处死,取胸主动脉,采用Western blot法测定iNOS和eNOS表达水平.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组iNOS和eNOS表达差异无统计学意义(P＞0.05),Ⅲ组和Ⅳ组iNOS表达上调,eNOS表达下调(P＜0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组iNOS表达下调,eNOS表达上调(P＜0.05).结论 辛伐他汀预处理可下调脓毒症大鼠血管内皮细胞iNOS表达和上调血管内皮细胞eNOS表达,对血管内皮细胞功能有保护作用.     

重组人红细胞生成素对脓毒症大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨重组人红细胞生成素(rHuEPO)对盲肠结扎穿孔术(CLP)所致大鼠脓毒症急性肾损伤(AKI)的保护作用.方法 260只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假CLP组(假手术组)、CLP组(脓毒症组)和rHuEPO大、中、小剂量组.采用CLP复制脓毒症模型,rHuEPO大、中、小剂量组造模后即刻分别静脉推注rHuEPO 5000 U/kg、1000 U/kg、500 U/kg.假CLP组、CLP组、rHuEPO大、中、小剂量组按注药后2h、6h、12 h、24 h、36 h时点分成5个亚组,分别在各时点按随机原则处死大鼠.采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、肾损伤分子1(KIM-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平;免疫组化法检测大鼠肾组织NF-κB蛋白表达;光镜和透射电镜观察肾组织形态学变化.结果 与CLP组相比,rHuEPO大剂量组大鼠各时间点血清Scr、BUN、TNF-α、IL-6、KIM-1、iNOS的含量及肾组织NF-κB蛋白表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);肾脏病理改变好转.rHuEPO中、小剂量组肾脏病理改变未见好转.结论 rHuEPO能够降低脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-6、iNOS、KIM-1水平进而调节炎性反应及肾功能,对脓毒症所致AKI具有一定的保护作用.     

IL-6/STAT3信号通路在脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达上调中的作用

目的 探讨白细胞介素6/信号转导及转录激活因子3(IL-6/STAT3),信号通路在脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达上调中的作用.方法 健康雄性Wistar大鼠90只,10～14周龄;体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和抗IL-6单克隆抗体组(IL-6组).采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型.IL-6组于术前1h时腹腔注射抗IL-6单克隆抗体0.5 mg/kg,S组和CLP组给予等容量生理盐水.于术后6、12、24、48、72 h时分别处死大鼠6只,取肺组织,分别采用酶联免疫吸附法和实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达;采用凝胶阻滞电泳分析技术检测肺组织STAT3 DNA结合活性.结果 与S组比较,CLP组和IL-6组肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达、STAT3DNA结合活性升高(P＜0.05);与CLP组比较,IL-6组肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达、STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05).结论 IL-6/STAT3信号通路参与了脓毒症大鼠肺组织HMGB1表达上调.     

O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用

目的 评价O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用.方法 健康清洁级4周龄SD雄性大鼠60只,体重180-240 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:假手术组(S组,n=12)、脓毒症组(CLP组,n=16)、谷氨酰胺组(G组,n=16)及谷氨酰胺+四氧嘧啶组(G+A组,n=1 6).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠脓毒症模型,G组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,G+A组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg及腹腔注射四氧嘧啶90 mg/kg,CLP组和S组注射等容量生理盐水.术后24h时记录神经反射评分,断颈处死,测定脑组织含水量,采用Western-blot法测定脑组 织O-GlcNAc表达水平,观察脑组织病理学结果.结果 与S组比较,CLP组、G组及G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高(P＜0.05);与CLP组比较,G组和G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分降低,G组大鼠脑组织蛋白质O-GlcNAc表达上调(P＜0.05);与G组比较,G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高,脑组织蛋白质O-GlcNAc表达下调(P＜0.05);S组、CLP组及G+A组大鼠间脑组织蛋白质O-GlcNAc表达差异无统计学意义(P＞0.05).G组病理学损伤较CLP组及G+A组轻.结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤的过程.     

脓毒症大鼠肠系膜淋巴结细胞免疫功能的变化

目的 探讨脓毒症大鼠肠系膜淋巴结细胞免疫功能的变化.方法 雄性Wistar大鼠96只,体重200～250 g,随机分为假手术组(S组)和盲肠结扎穿孔致脓毒症组(CLP组),每组48只.分别于CLP后即刻、6、12、24、48、72 h(T_(1～5))时随机取8只大鼠抽取腹主动脉血,采用鲎试剂偶氮显色法测定血浆内毒素水平;取肠系膜淋巴结组织,流式细胞仪测定肠系膜淋巴结组织Th1/Th2比值和调节性T淋巴细胞(Treg)占CD4~+细胞的比例(Treg比例).结果 与S组比较,CLP组T_(2～5)时血浆内毒素水平升高,T_1时Th1/Th2比值升高,Treg比例降低,T_(2～5)时Th1/Th2比值降低,Treg比例升高(P<0.05或0.01);Th1/Th2比值与Treg比例呈负相关(r=-0.87,P<0.05).结论 脓毒症大鼠肠系膜淋巴结细胞免疫功能降低,其机制可能与肠源性内毒素介导Treg比例增加有关.     

氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响

目的 评价氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性C57BL/6小鼠112只,体重20～25 g,5周龄,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=28):假手术组(A组)、假手术+氢气组(B组)、脓毒症组(C组)和脓毒症+氢气组(D组).采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症模型.B组和D组于CLP或假手术后1、6h时分别吸入2％氢气.每组取20只小鼠,记录CLP后7d内生存情况.每组取8只小鼠,于CLP后24 h时处死,采集静脉血样,取肺组织,测定血清及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)水平,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,进行肺损伤评分,计算肺湿干重比(W/D).结果 与A组比较,C组生存率、血清和肺组织SOD和CAT活性降低,肺损伤评分、W/D、BALF蛋白浓度、肺组织MPO活性、血清和肺组织8-iso-PGF2α水平升高(P＜0.05);与C组比较,D组生存率、血清和肺组织SOD和CAT活性升高,肺损伤评分、W/D、BALF蛋白浓度、肺组织MPO活性、血清和肺组织8-iso-PGF2α水平降低(P＜0.05).结论 氢气可减轻脓毒症小鼠急性肺损伤,其机制与抑制氧化应激反应有关.     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠150只,体重154～198g,随机分为3组(n=50):假手术组(S组)仅穿线,不进行盲肠结扎穿孔;脓毒症组(SEP组)采用盲肠结扎穿孔的方法制备脓毒症模型;δ阿片受体激动剂组(DADLE组)于盲肠结扎穿孔后立即腹腔注射δ阿片受体激动剂DALDE 10 ml/kg,浓度为0.5 mg/ml.于盲肠结扎穿孔后4、8、12 h(T1～3)时各组随机取10只大鼠,抽取下腔静脉血样,采用ELISA法检测血清TNF-α和IL-10的浓度,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群变化.记录盲肠结扎穿孔后7 d内大鼠的生存情况.结果 与S组比较,SEP组和DADLE组各时点血清TNF-α和IL-10的浓度、TNF-α/lL-10比值升高,T3时CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+降低,CD8+T细胞水平升高(P＜0.05或0.01);与SEP组比较,DADLE组T2.3时血清TNF-α和IL-10的浓度、TNF-α/IL-10比值降低,T3时CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+升高,CD8+T细胞水平降低,盲肠结扎穿孔后7 d内大鼠生存率升高(P＜0.05).结论 δ阿片受体激动剂可改善细胞免疫功能,从而减轻炎性反应,有利于脓毒症大鼠的预后.     

辛伐他汀对脓毒症大鼠内皮细胞功能的影响

目的 探讨辛伐他汀对脓毒症大鼠内皮细胞功能的影响.方法清洁级雌性Wistar大鼠96只,体重200～250异,月龄4月.采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=32):假手术组(Ⅰ组)、脓毒症组(Ⅱ组)和辛伐他汀组(Ⅲ组).选模前,Ⅲ组经胃管给予辛伐他汀20 mg/kg,1次/d,连续2周,Ⅰ组和Ⅱ组用等容量生理盐水替代.Ⅱ组和Ⅲ组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型.于术后3、6、24及48 h时分别取8只大鼠,采集颈动脉血样,测定血常规,计数WBC,用ELISA法检测血清B选择素浓度.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组WBC计数和血清B选择素浓度升高,术后6 h时达峰值(P＜0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组WBC计数和血清E.选择素浓度降低(P＜0.05).结论 辛伐他汀治疗脓毒症的作用机制与保护内皮细胞功能有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of simvastatin on endothelial cell function in a rat model of sepsis. Methods Ninety-six pathogen-free female Wistar rats aged 4 months weighing 200-250 g were randomly divided into 3 groups (n = 32 each): group sham operation (group Ⅰ ); group sepsis (group Ⅱ )and group simvastatin + sepsis(group Ⅲ ) . Sepsis was induced by cecal ligation and puncture (CLP). In group Ⅲ simvastatin 20 mg/kg was given via a gastric tube once a day for 2 weeks. Blood samples were taken from carotid artery at 3,6, 24 and 48 h ( n = 8 at each time point) for WBC count and measurement of serum E-selectin concentration (by ELISA) . Results CLP significantly increased WBC count and serum E-selectin concentration in group Ⅱ as compared with group Ⅰ . The peak values were reached at 6 h after operation. Simvastatin pretreatment attenuated the sepsis-induced increase in WBC count and serum E-selectin concentration in group Ⅲ. Conclusion Protection of endothelial cell function is involved in the mechanism of treatment of sepsis with simvastatin.     

不同液体治疗对感染性休克新生兔全身炎性反应的影响

目的 探讨不同液体治疗对感染性休克新生兔全身炎性反应的影响.方法 健康新西兰长耳新生兔100只,采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备感染性休克模型,随机分为5组(n=20):假手术组(S组)、CLP组、乳酸钠林格氏液组(R组)、乳酸钠林格氏液+6%羟乙基淀粉组(R+HES组)和6%羟乙基淀粉组(HES组).CLP后即刻,R组静脉输注乳酸钠林格氏液30 ml/kg 1 h;R+HES组依次静脉输注乳酸钠林格氏液20 ml/kg 40 min和6%羟乙基淀粉10 ml/kg 20 min;HES组静脉输注6%羟乙基淀粉30 ml/kg 1 h.于CLP后即刻、0.5、1、2、4、8 h(T1～6)时记录MAP.于T6时取颈总动脉血样,测定血浆IL-6和IL-10的浓度.结果 与T1时比较,CLP组T4～6时MAP降低,R组T5.6时MAP降低(P＜0.05),其余各组差异无统计学意义(P＞0.05).与S组比较,CLP组MAP降低,血浆IL-6浓度升高,IL-10浓度降低,R组MAP降低,血浆IL-6浓度升高,HES组血浆IL-10浓度升高(P＜0.05).与CLP组比较,R+HES组和HES组血浆IL-6浓度降低,IL-10浓度升高,R组血浆IL-10浓度升高(P＜0.05).结论 新生兔感染性休克早期静脉输注乳酸钠林格氏液与6%羟乙基淀粉(2∶1)治疗,有利于维持促炎细胞因子和抑炎细胞因子的平衡,从而减轻全身炎性反应,其效果优于单独静脉输注乳酸钠林格氏液或6%羟乙基淀粉.     

血管活性肠肽对脓毒性休克大鼠的保护作用

目的探讨血管活性肠肽（VIP）对脓毒性休克大鼠的保护作用及其可能机制。方法采用盲肠结扎加穿孔（CLP）法制备脓毒性休克大鼠模型。将30只雄性SD大鼠随机分成3组：假手术组（SO,n=10）、CLP组（n=10）和VIP组（n=10）。VIP组大鼠在行CLP术后即刻给予5nmol VIP,持续监测各组大鼠的平均动脉压（MAP）,统计20h存活率;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）水平;取大鼠肺、肾和肠等组织行病理检查。结果在8h以后的各时间点,VIP组的MAP显著高于CLP组（P〈0．05）;与CLP组比较,VIP组的TNF-α水平明显降低、IL-10水平明显升高。20h存活率显著提高（P〈0．05）。各脏器病理损伤明显改善。结论VIP通过抑制促炎因子的生成并促进抗炎因子的产生在大鼠脓毒性休克中发挥保护作用。     

七氟醚对感染性休克大鼠全身炎性反应及心肺功能的影响

目的 评价七氟醚对感染性休克大鼠全身炎性反应及心肺功能的影响.方法 清洁级SD大鼠32只,体重250～300 g,月龄8～10月,雌雄各半,随机分为4组(n=8):假手术组(S组)仅开腹,不行盲肠结扎穿孔(CLP);感染性休克组(CLP组)采用CLP法建立感染性休克模型;七氟醚I组(SEV1组)感染性休克后1 h时吸入2.4%七氟醚30 min;七氟醚Ⅱ组(SEV2组)感染性休克后3 h时吸入2.4%七氟醚30 min.于感染性休克后1、3、5 h时记录MAP和HR,并采集动脉血样1.5ml,取0.3 ml血样行血气分析,剩余1.2 ml血样检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的浓度.于感染性休克后5 h时测定心功能,记录心脏左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室短轴缩短率(LVFS)和心输出量(CO).心功能测定后处死动物,取肺组织,计算肺湿干重比(W/D),测定伊文氏兰(EB)含量;取心、肺、肝、肾组织,检测NF-κB活性.结果 与s组比较,CLP组、SEV1组和SEV2组MAP降低,HR增快,LVEDD、LVESD、LVFS、CO、pH值、PaOz和PaCO2降低,肺W/D、EB含量、血浆TNF-α、IL-1、MDA和NO的浓度增加,心、肺、肝、肾组织的NF-κB活性升高(P<0.05).与CLP组和SEV2组比较,SEV1组心、肺、肝、肾组织的NF-κB活性和血浆TNF-α、IL-1、MDA和NO的浓度降低(P<0.05),其余各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 感染性休克后1 h大鼠吸入2.4%七氟醚30 min可抑制全身炎性反应,但抑制程度较低,不足以改善心肺功能.     

免疫调理对脓毒症免疫功能和预后的作用

目的：探讨免疫调理对改善脓毒症大鼠和患者免疫功能及预后所起的作用。
方法：（1）实验部分：将大鼠分为3组：假手术组、对照组和实验组,每组20只。后2组采用大鼠盲肠结扎穿孔的方法制备大鼠脓毒症模型,对照组接受抗生素治疗,实验组接受抗生素加免疫调理。制作模后分别在3,12,24,48 h采血。各组大鼠按时点进行淋巴细胞计数和测定CD4+,CD8+ T淋巴细胞和CD4/CD8比值;观察胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡情况,计算脓毒症大鼠的存活率。（1）临床部分：前瞻性分析70例符合脓毒症患者,随机分成对照组和观察组。对照组接受经典治疗,观察组采用经典治疗联合蛋白酶抑制剂和胸腺肽α1治疗（经典治疗+免疫调理）,免疫调理疗程为7 d,分别观察治疗前和治疗后1,3,7 d临床和相关免疫学指标。
结果：（1）实验部分：CLP脓毒症造模成功后,实验组淋巴细胞,CD4+T淋巴细胞水平,CD4/CD8值均显著高于对照组明显（P＜0.05）。对照组胸腺和脾脏的淋巴细胞凋亡指数比实验组明显增高（P＜0.05）。实验组72 h存活时间比对照组明显延长（P＜0.05）。（2）临床部分：观察组CD4+T淋巴细胞,淋巴细胞计数及CD14+单核细胞HLA-DR水平较对照组显著升高（P＜0.05）。对照组死亡20例,观察组死亡13例（P＜0.05）。
结论：免疫调理可使脓毒症大鼠免疫功能提高,降低胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡率,提高脓毒症大鼠的存活率。免疫调理可提高脓毒症患者免疫调理的免疫功能,改善其免疫麻痹,延长近期生存率。     

Metalloproteinase inhibition reduces lung injury and improves survival after cecal ligation and puncture in rats

BACKGROUND: Neutrophil activation with concomitant matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) release has been implicated in the development of sepsis-induced acute lung injury. We hypothesized that COL-3, a chemically modified tetracycline known to inhibit MMP-2 and MMP-9, would reduce lung injury and improve survival in rats following cecal ligation and puncture (CLP). METHODS: Sprague-Dawley rats were separated into five groups: 1) sham CLP+ carboxymethylcellulose (CMC; vehicle for COL-3, n = 6); 2) sham CLP + COL-3 (n = 6); 3) CLP + CMC (n = 10); 4) CLP + single-dose (SD) COL-3 administered concomitant with CLP (n = 9); and 5) CLP + multiple-dose (MD) COL-3 administered concomitant with CLP and at 24 h after CLP (n = 15). Rats were sacrificed at 168 h (7 days) or immediately after death, with survival defined as hours after CLP. Histological lung assessment was made based on neutrophil infiltration, alveolar wall thickening, and intraalveolar edema fluid. Lung MMP-2 and MMP-9 levels were assessed by immunohistochemistry. MMP-2 and MMP-9 levels were correlated with survival by simple regression analysis. RESULTS: The mortality of rats in the cecal ligation and puncture without treatment group (CLP + CMC) was 70% at 168 h. A single dose of COL-3 in the CLP + COL-3 (SD) group significantly reduced mortality to 54%. Furthermore, with a repeat dose of COL-3 at 24 h after CLP, mortality was significantly reduced to 33%. Pathologic lung changes seen histologically in the CLP + CMC group were significantly reduced by COL-3. A significant reduction in lung tissue levels of MMP-2 and MMP-9 was noted in both groups treated with COL-3. Reduction of MMP-2 and MMP-9 levels correlated with improved survival. CONCLUSION: Inhibition of MMP-2 and MMP-9 by COL-3 in a clinically relevant model of sepsis-induced acute lung injury reduces pulmonary injury and improves survival in a dose-dependent fashion. Our results suggest that prophylactic treatment with COL-3 in high-risk patients may reduce the morbidity and mortality associated with sepsis-induced acute respiratory distress syndrome.     

多次给予羟乙基淀粉或高渗氯化钠溶液对实验性脑出血大鼠脑水肿的影响

目的 评价多次给予羟乙基淀粉或高渗氯化钠溶液对实验性脑出血(ICH)大鼠脑水肿的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠167只,体重260～300 g,随机分为假手术组(S组,n=20)、ICH组(M组,n=38)、氯化钠组(N组,n=55)和羟乙基淀粉组(H组,n=54).采用立体定向技术向大鼠右侧尾状核注入自体血50μl建立ICH模型,S组仅刺入基底节,但不注血.N组分别于ICH后2、24、48、72 h前5～10 min静脉输注7.5%氯化钠溶液5 ml/kg,H组分别于ICH后2、24、48、72 h前45～50 min静脉输注6%羟乙基淀粉130/0.4 30 ml/kg,速率均为0.2 ml/min.S组和M组分别于ICH后2、24、48、72 h随机取5只大鼠断头处死,N组和H组则在上述各时点输液前、后随机取5只大鼠处死,采用干湿重法测定脑含水量;各组每天行行为学评分,观察大鼠生存情况.结果 与M组比较,N组和H组ICH后2、24、48、72 h输液后注血侧皮层和基底节脑含水量、ICH后24、48 h时行为学评分降低,ICH后24、48、72 h时生存率升高(P<0.05);与N组比较,H组ICH后72 h时生存率升高(P<0.05).结论 多次给予6%羟乙基淀粉130/0.4或7.5%氯化钠溶液可改善ICH后大鼠脑水肿.