牙周炎中M1型巨噬细胞与破骨细胞形成相关性研究

目的:探究牙周炎中M1型巨噬细胞与破骨细胞形成的相关性.方法:取2月龄C57BL/6J小鼠,丝线结扎建立右侧上颌牙周炎模型,左侧上颌作为自身对照.术后7 d收样,Micro-CT扫描分析牙槽骨吸收情况,苏木素-伊红(HE)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、CD80和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)免疫荧光染色观察破骨细胞...     

葛根素对大鼠下颌骨骨髓源巨噬细胞破骨细胞向分化的影响

目的: 分析不同浓度的葛根素对于下颌骨骨髓源巨噬细胞（Bone marrow-derived macrophages,BMMs）破骨分化的影响。方法: 体外分离培养4周龄雌性大鼠下颌骨BMMs。通过CCK-8分析1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L和100 μmol/L葛根素对BMMs细胞活性的影响。使用RANKL诱导BMMs破骨分化的同时加入不同浓度葛根素,采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）酶化学染色及q-PCR分析破骨细胞形成及破骨相关基因的改变。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L葛根素组与对照组活细胞数无显著差异,100 μmol/L组活细胞数较对照组降低（P<0.05）。RANKL可诱导BMMs形成多核破骨细胞。10 nmol/L、100 nmol/L及1 μmol/L葛根素组破骨细胞数目及破骨细胞面积均较对照组降低（P<0.05）。q-PCR分析发现,10 nmol/L、100 nmol/L及1 μmol/L葛根素组NFATc1、C-fos、TRAP及CTSK mRNA表达量均较对照组下降（P<0.05）。结论: 葛根素可抑制下颌骨BMMs破骨分化及相关基因表达,为葛根素应用于下颌骨骨质疏松症的预防与治疗提供了依据。     

牙周炎牙槽骨吸收的基础研究—PGE2对破骨细胞性骨吸收的作用

本研究采用分离破骨细胞的体外培养方法,将分离的兔破骨细胞与牛骨片共同培养。相差显微镜观察前列腺素E_2.(Prostaglaodin E_2,PGE_2)对破骨细胞所形成的骨吸收陷窝数及形态学影响。并利用图象分析系统计算吸收陷窝的表面积。结果表明:PGE_2对体外分离的破骨细胞所形成的吸收陷窝数及吸收陷窝面积具有抑制作用。     

大豆异黄酮对颌骨骨髓源巨噬细胞破骨细胞向分化的影响

目的:评价大豆异黄酮对大鼠下颌骨骨髓源巨噬细胞(mBMMs)破骨细胞向分化的影响.方法:采用CCK-8法检测mBMMs在100μmol/L、10 μmol/L、1μmol/L、100 nmol/L、10 nmol/L及1 nmol/LL大豆异黄酮作用下细胞活性的改变.通过RANKL刺激mBMMs破骨细胞向分化,利用TR...     

丹参对鼠齿槽骨破骨活动的影响

作者对4只受正畸力作用的S.D.大鼠上第一磨牙的局部粘膜下注射丹参注射液,在显微镜下作破骨细胞计数。发现局部注射丹参注射液侧破骨细胞数目明显较对照侧增多,其结果有统计学意义。且增多的破骨细胞常围绕在牙周膜内血管周围。推测丹参作为活血化瘀药物,有助于恢复由于正畸力所致的局部牙周膜内血液循环障碍,从而有利于破骨细胞随血流向齿槽骨组织的迁移。     

牙龈蛋白及其对破骨和成骨细胞功能的影响

牙龈卟啉单胞菌分泌的牙龈蛋白作为牙周病的一种重要的毒力因子,一方面通过降解骨保护蛋白（OPG）及促进核因子-κB（NF-κB）受体活化因子配体（RANKL）的释放激活OPG/RANKL/NF-κB受体活化因子信号转导通路,进而诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化,增强破骨细胞功能;另一方面,牙龈蛋白可通过线粒体依赖性内在程序性细胞死亡通路和肿瘤坏死因子受体家族介导的外在程序性细胞死亡通路诱导成骨细胞程序性细胞死亡,抑制成骨细胞功能,最终导致牙槽骨丧失。本文就近年来牙龈蛋白及其对破骨和成骨细胞功能的影响相关研究进展作一综述。     

PMX205对致敏毒素C5a诱导RAW264.7向破骨细胞分化的影响

目的:探讨PMX205作用下,致敏毒素C5a对RAW264.7破骨细胞分化的影响.方法:采用MTT法检测不同浓度PMX205对RAW264.7细胞增殖水平的影响;在含核因子受体活化因子配体(RANKL)的破骨细胞诱导液条件下,实验分为3组:阴性对照组、C5a组和C5a+PMX205组,按上述条件培养5 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测各组破骨细胞分化水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组破骨细胞相关基因的表达水平.结果:MTT结果显示,PMX205对RAW264.7细胞的增殖水平无明显抑制作用.TRAP染色和qRT-PCR结果显示:10 ng/mL RANKL可成功诱导破骨细胞形成;与阴性对照组相比,1μmol/L C5 a组TRAP阳性多核细胞数目及破骨相关基因:c-fos、NFATc1和TRAF6均显著增多(P<0.01);而与C5a组相比,C5a+1μg/mL PMX205组TRAP阳性多核细胞数目及破骨相关基因的表达明显下调(P<0.01),但仍高于阴性对照组(P<0.01).结论:PMX205可通过C5a-C5aR轴抑制C5a诱导的RAW264.7破骨细胞分化.     

布鲁顿酪氨酸激酶对破骨细胞增殖及分化作用的实验研究

目的 观察布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）对破骨细胞增殖及分化的影响,探讨BTK对根尖周炎骨破坏的作用。方法 破骨前体细胞RAW264.7经100 ng·L ^-1核因子κB受体活化因子配体（RANKL）诱导5 d后,通过观察细胞形态、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色及实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的方法,验证破骨细胞是否诱导成功。破骨细胞诱导成功后,转染BTK-小干扰RNA（siRNA）24 h,利用RT-qPCR检测TRAP mRNA的表达,采用CCK-8和TRAP酶活性检测法检测破骨细胞的增殖及分化情况。结果 RAW264.7细胞经RANKL诱导5 d后,可见大量体积较大,外观呈圆形、椭圆形,周围有不规则突起及TRAP染色阳性的多核破骨细胞。经BTK-siRNA转染24 h后,破骨细胞TRAP mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）,其增殖及分化能力也明显受到抑制（P<0.05）。结论 抑制BTK表达,可以抑制破骨细胞的增殖及分化;BTK可作为抑制破骨细胞的新靶点。     

川陈皮素纳米粒对破骨细胞作用的实验研究

目的 :研究载川陈皮素(nobiletin,NOB)纳米粒(Nanoparticles, NPs)对破骨细胞的作用。方法 :通过透析法制备载川陈皮素纳米胶束(NOB-poly(ethylene glycol)-block-poly(e-caprolactone micelles,NOB-PEG-PCL),以包封率和粒径作为评价指标。采用Malvern粒度仪测定纳米粒的粒径分布,透射电镜考察其形态,并考察纳米粒的体外释放行为。检测空白胶束和载药胶束对破骨细胞前体巨噬细胞的生物相容性,以及对破骨细胞相关基因的表达影响。结果:川陈皮素载药纳米粒的包封率为(76.34±3.25)%,载药量为(7.60±0.48)%,粒径为124 nm,透射电镜显示纳米粒粒径均一,成球状分布,12 h累积释放为65%,实验组NOB-PEG-PCL TRAP细胞阳性细胞数以及TRAP基因显著减少(P<0.05)。结论:实验表明载川陈皮素纳米粒能明显地减少破骨细胞数量,可进一步应用于牙槽骨骨组织工程。     

白细胞介素-24通过Jak-Stat通路对破骨细胞影响的实验研究

目的:研究白细胞介素-24(interleukin-24,IL-24)在体外通过Jak-Stat信号通路对单核巨噬细胞向破骨细胞分化的影响。方法:使用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)确定最佳感染复数(MOI);使用ELISA检测培养基中IL-24的含量;采用Real-time PCR方法检测RAW264.7细胞中Jak-Stat信号通路相关基因Jak1、Jak2、Jak3、Stat1、Stat2、Stat3及其向破骨细胞分化过程中相关基因NFATc1、CTSK、MMP9 mRNA的表达。结果:MOI=600为最佳转染效率;转染组IL-24含量显著高于未转染组(P＜0.01);在RANKL诱导条件下转染IL-24的RAW264.7细胞与未转染组相比Jak2、Stat3 mRNA的表达增加(P＜0.05),在RANKL诱导条件下转染IL-24的RAW264.7细胞加入信号通路抑制剂后与未加入抑制剂组相比,向破骨细胞分化过程中相关基因NFATc1、CTSK、MMP9 mRNA的表达降低(P＜0.05)。结论:IL-24通过Jak-Stat信号通路调控破骨细胞的分化及功能。     

基质细胞趋化因子-1对人牙周膜干细胞趋化因子受体——CXC亚家族受体4表达的影响研究

目的:证实人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)表达趋化因子受体——CXC亚家族受体4(cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4)及探究趋化因子基质细胞趋化因子-1(stromalcell-derived factor1,SDF-1)和阻断剂AMD3100(商品名:普乐沙福)对CXCR4表达的影响,从而为探究牙周膜干细胞生物学效应的影响提供理论基础。方法:采用消化组织块法联合有限稀释法分离纯化得到hPDLSCs,取第3代hPDLSCs随机分为3组:阴性对照组、SDF-1组(200μg/L SDF-1),SDF-1+AMD3100组(200μg/L SDF-1+10 mg/L AMD3100)。利用Western blot检测CXCR4在hPDLSCs上的表达及在SDF-1、AMD3100作用下CXCR4表达的变化。结果:1.筛选后的hPDLSCs可被诱导分化为成骨细胞和成脂细胞,证实其具有多向分化潜能;利用流式细胞仪检测其细胞表型鉴定其符合牙周膜干细胞的免疫表型。2.Western blot检测结果显示hPDLSCs上表达CXCR4,且应用SDF-1后上调CXCR4的表达,SDF-1+AMD3100组无明显变化。结论:1.hPDLSCs可从新鲜离体牙的牙周膜中培养获得,经有限稀释法纯化后鉴定为间充质来源。2.hPDLSCs上表达CXCR4,SDF-1通过上调hPDLSCs上CXCR4的表达,AMD3100可阻断SDF-1与其受体CXCR4结合。     

加温联合化疗对人舌癌SCC─25细胞杀伤作用的实验研究

采用ＭＴＴ法评价了人舌鳞状细胞癌ＳＣＣ－２５细胞对几种常用抗癌药物联合加温的敏感性，正常温度（３７℃）时ＳＣＣ－２５细胞对化疗药物敏感性顺序为：阿霉素、顺铂、丝列霉素Ｃ、博莱霉素、氨甲喋呤、匹莱霉素、５－氟脲嘧啶；４０～４５℃温度范围内，不同抗癌药物联合加温对ＳＣＣ－２５细胞杀伤作用表现出各自的最佳作用温度，在有效药物浓度条件下，药物浓度增加不能显著地改变药物联合加温的综合癌细胞杀伤效应。     

术前放疗对游离皮瓣影响的实验研究

本实验选用成年新西兰白兔２４只作单侧兔耳术前放疗，剂量分别为７Ｇｙ×４（Ⅰ组）、９Ｇｙ×４（Ⅱ组）及１１Ｇｙ×４（Ⅲ组），放疗后３周行双侧耳背皮瓣游离移植术（左右换位）．术后观察皮瓣的变化及成活情况，并于术后不同时期作光镜及电镜组织学观察，并行血管铸型标本制作及扫描电镜下形态计量分析．结果显示：Ⅰ组的皮瓣成活率为７５％（６／８），Ⅱ组为６２．５％（５／８），Ⅲ组为３７．５％（３／８）．光镜显示成活皮瓣存在上皮、皮肤附件及皮下组织明显萎缩现象，电镜下核固缩、胶原纤维水肿、基底膜不完整等表现可持续至术后１年以后，血管铸型标本中发现Ⅲ组血管密度明显低于Ⅱ组     

山羊髁突刨削术后髁突软骨面修复的初步观察

目的:观察山羊髁突刨削术后髁突的愈合过程。方法:实验动物7只山羊,将6只山羊两侧髁突软骨面磨除,另1只未做手术为正常对照。分别于术后4、8、12周;每个时间点取材2只实验动物进行HE染色加以评价。结果:术后4周山羊髁突软骨缺失区粗糙,为骨样及一些纤维样组织修复,或可见少许纤维样软骨;术后8周及12周髁突表面较术后4周时光滑,修复组织逐渐变为以骨性组织为主,软骨样成分逐渐消失。结论:经过关节髁突的刨削术,术后3个月时,实验动物髁突软骨缺失区不能形成正常的软骨组织。     

爆炸伤对犬面神经影响的实验研究

目的 建立面神经爆炸伤动物模型，并研究面神经爆炸伤特点及相关的全身反应。方法 麻醉下分别在距犬面部7、10、15cm处放置雷管，模拟爆轰波致伤效应，在雷管爆炸同时，用滑膛枪发射钢珠弹致伤犬同侧咬肌或颈部以模拟破片致伤。观察动物伤情，并取材检测面神经病理和传导速度改变。分析不同距离条件下全身和局部的创伤效应。结果 7cm致伤时动物伤情较重，不能存活较长时间；10cm致伤时动物经过抢救仍可存活，受伤的面神经干肿胀，外膜不光滑，神经干内弥漫性出血。镜下表现为广泛的神经纤维断裂、坏死，并由大量炎细胞弥散浸润；单纯爆炸、15cm处爆炸复合面部破片或10cm处爆炸复合颈部破片致伤时，局部伤情均较轻。随着创伤的恢复，面神经传导速度也逐渐恢复。结论 采用距爆源10cm，咬肌切线伤的致伤条件能最好地模拟爆炸条件对面神经的致伤作用，这种致伤条件接近实战情况，并利于伤后长期观察面神经创伤的预后和转归。     

人乳牙牙根吸收过程中根面破骨细胞的观察

目的　观察人乳牙根吸收面的破骨细胞形态特点。方法　收集和固定人滞留乳牙,制备硬组织切片,经苏木精-伊红、抗酒石酸酸性磷酸酶染色,在光镜和扫描电镜下观察破骨细胞。结果　在人乳牙根吸收面有多个破骨细胞,呈重叠状态,细胞形态不规则,体积大,细胞周缘可见丝状突起,多核,被吸收的牙本质表面高低不平。结论　人滞留乳牙牙根吸收面存在大量的破骨细胞,是研究人破骨细胞的一个来源。     

不同包埋方法对铸件边缘适合性影响的实验研究

目的　观察无圈包埋和有圈包埋对铸件边缘适合性的影响。方法　制作模拟后牙全冠外形的标准试件及圆管 ,于试件上制作 12个蜡型 ,并随机分为 2组 ,每组 6个蜡型。对同一种包埋料 ,采用两种包埋方法 ,即无圈包埋和有圈包埋 ,包埋模拟铸件后牙冠的帽状蜡型 ,铸造后铸件试合于原帽状试件 ,在体视显微镜下分别测试铸件的边缘适合性。结果　无圈包埋组铸件的边缘适合性与有圈包埋组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　无圈铸造可提高铸件的边缘适合性     

赤芍粗提物对变形链球菌影响的实验研究

目的研究赤芍粗提物对变形链球菌的生长、产酸、粘附及合成胞外多糖的影响。方法采用倍比稀释法测定不同浓度赤芍粗提物抑制变形链球菌生长的情况,通过统计学方法确定最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）;再以MIC及低于MIC的4个倍比稀释浓度配制含药的胰酶解酪蛋白-植物蛋白胨-酵母提取物（trypticase-phytone-yeast extract medium,TPY）液体培养基,测定赤芍粗提物对变形链球菌产酸、粘附及合成胞外多糖能力的影响。结果赤芍粗提物抑制变形链球菌体外生长的MIC为12.5g/L;当赤芍粗提物浓度≥3.13g/L时有较明显地抑制变形链球菌产酸、粘附、合成水溶性胞外多糖的作用;当赤芍粗提物浓度≥6.25g/L时能明显抑制变形链球菌合成水不溶性胞外多糖。结论达到一定浓度的赤芍粗提物对变形链球菌的生长、产酸、粘附及合成胞外多糖均有一定的抑制作用。