骨桥蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人正常月经周期子宫内膜的表达。方法采用免疫组织化学法对51例人正常月经周期子宫内膜OPN蛋白质进行定位和定量检测,Western blotting法测定增殖期及分泌期OPN蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测18例人正常月经周期子宫内膜增殖期及分泌期OPN mRNA的表达。结果OPN蛋白质主要分布在正常子宫内膜腺上皮细胞,增殖早期、中期无表达,增殖晚期出现,分泌中期、晚期表达最强。月经期子宫内膜腺上皮细胞表达较强。OPN mRNA表达分泌期强于增殖期(P<0.05)。Western blotting检测结果显示正常子宫内膜组织中存在OPN蛋白,分泌期含量较高。结论OPN蛋白质及mRNA在正常子宫内膜中的表达呈现明显周期依赖性。分泌中、晚期表达增强提示其可能参与胚胎着床。     

瘦素及瘦素受体在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨瘦素及其受体mRNA及蛋白的表达在乳腺癌发生、发展中的意义。方法 采用巢式逆转录-聚合酶链反应〈RT-PCR）和免疫组织化学方法检测39例乳腺癌及其周围正常乳腺组织瘦素及其受体的mRNA及蛋白表达，分析乳腺癌组织瘦素与瘦素受体表达的相关性及其与临床病理之间的关系。结果 瘦素mRNA及蛋白在正常乳腺及乳腺癌组织阳性表达率均为100．00％；瘦素受体mRNA和蛋白在乳腺癌组织阳性表达率为74．40％。正常乳腺组织mRNA阳性表达率7．69％；瘦素及其受体在乳腺癌组织的表达量高于正常组织。差异具有统计学意义（P〈0．01）；瘦素受体的表达与瘦素表达明显相关（P〈0．01）。瘦素及瘦素受体高表达与乳腺癌的转移及浸润明显相关（P〈0．01）。结论 瘦素在乳腺癌的发生发展中可能起着促进作用，瘦素及其受体表达情况可以作为乳腺癌诊断或预后的指标。     

原位杂交检测孕酮受体mRNA在周期子宫内膜的表达

应用地高辛标记的探针进行原位杂交，检测周期内膜各组分的孕酮受体（ＰＲ）ｍＲＮＡ的表达。内膜取自子宫肌瘤患者，子宫全切术后即取内膜及部分肌层，储于液氮。据月经史及形态表现将内膜分为三期：增殖、分泌早期及中晚分泌期。结果显示，ＰＲｍＲＮＡ在子宫内膜的表达有明显的组织／细胞差异。基质细胞普遍表达ＰＲｍＲＮＡ，增殖期与分泌期比较无明显差异。中晚分泌期内膜腺体细胞ＰＲｍＲＮＡ的表达极低甚至不表达，且无明显的表浅及深层的表达差异。提示子宫内膜孕酮受体至少在腺体上可能存在转录水平的调节。     

转化生长因子β1在不明原因不育症着床窗期子宫内膜的表达

目的　探讨转化生长因子 β1(TGFβ1)在月经周期子宫内膜组织的表达规律 ,了解其对子宫内膜着床窗期的作用以及与不明原因不育症的关系。　方法　应用免疫组织化学法检测TGFβ1在增殖期 (2 5例 )、分泌期 (2 9例 )子宫内膜、不明原因不育症着床窗期内膜 (12例 )的表达。　结果　TGFβ1在早、中增殖期腺体及间质细胞大多无表达或弱阳性 ,晚增殖期表达明显增加 ,与早、中增殖期相比 ,在腺上皮细胞胞浆染色显著增强 (P <0 .0 1)。TGFβ1在中分泌期内膜腺体和间质细胞胞浆表达丰富 ,与早分泌期比较均有明显增强 (P <0 .0 1)。在不明原因不育症着床窗期内膜间质细胞TGFβ1的表达强度较对照组显著下降 (P <0 .0 5 )。　结论　TGFβ1调节子宫内膜生长、分化 ,可能参与胚胎的着床过程。TGFβ1在不明原因不育症着床窗期表达下降 ,可能是导致不明原因不育症的重要原因之一。     

IL-18及IL-18结合蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的探讨白细胞介素(IL)18及IL18结合蛋白(IL18BP)在人正常月经周期子宫内膜上的表达。方法取因子宫肌瘤或子宫脱垂行全子宫切除术的患者子宫内膜,按月经周期和子宫内膜形态学检查结果分为增生期和分泌期2组,每组10例。免疫组织化学法检测子宫内膜的IL-18及IL-18BP表达;实时定量聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测子宫内膜IL-18及IL-18BP mRNA的表达。结果 IL-18、IL-18BP在人增生期和分泌期子宫内膜中均有表达,且随着月经周期其表达呈现时空性变化。IL18在增生期表达于腔上皮、腺上皮细胞膜及基质细胞,与增生期相比,分泌期基质细胞IL18的阳性表达显著降低(MOD值0.33±0.07 vs.0.52±0.12,P0.05),而IL18BP的表达则显著增加(MOD值0.33±0.20 vs.0.10±0.07,P0.05)。qRT-PCR结果显示,在增生期和分泌期子宫内膜标本均有IL18和IL18BP mRNA表达,与增生期相比,分泌期IL18表达显著下降(P0.05),IL18BP表达显著增强(P0.05),IL18BP/IL18比值显著增高(P0.05)。结论 IL18和IL18BP在整个月经周期人子宫内膜上均有表达,且其表达呈现时空性的变化,可能与月经周期过程中子宫内膜的崩解修复有关。     

不明原因复发性流产患者子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因的表达

目的探讨不明原因复发性流产(URSA)与子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因表达的关系。方法采用原位杂交技术,以HOXA-10反义核苷酸为探针检测51例URSA患者及38例正常生育(NF)组的分泌期子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10 mRNA的表达水平,并以灰度阳性单位(PU值)表示。结果NF组子宫内膜分泌早期HOXA-10mRNA表达的PU值腺体为(6.66±0.11),间质为(6.76±0.15);分泌中期分别为(10.95±0.90)及(11.46±1.08);分泌晚期分别为(11.05±1.12)及(11.54±1.10);蜕膜组织分别为(11.55±1.14)及(11.93±1.92);分泌中晚期及蜕膜组织的PU值显著高于分泌早期。URSA组不同时期子宫内膜及早孕蜕膜组织中HOXA-10 mRNA的表达水平基本一致,无明显的分泌中晚期及早孕期峰,并且分泌中晚期及早孕蜕膜组织的PU值明显低于NF同期组。两组各期腺体和间质的PU值无显著差异。结论子宫内膜HOXA-10基因在分泌中晚期及早孕蜕膜组织中的高表达可能和孕卵着床及妊娠维持密切相关,其表达缺陷可能是导致URSA发生的重要原因之一。     

人输卵管Wnt家族部分基因的表达及米非司酮对其表达的影响

目的 了解Wnt基因及其抑制因子在人输卵管上有无表达,并观察其在月经周期中的变化,探讨米非司酮对Wnt基因表达的调节作用.方法 选取育龄妇女的正常输卵管组织共18例,分为3组,即增殖期输卵管组织6例、分泌期输卵管组织6例,以及分泌期服用米非司酮50 mg并于24 h后手术的输卵管6例.应用实时定量聚合酶联反应（PCR）技术检测各组的Wnt-3、Wnt-5a、Wnt-7a、FrpHE和DKK1的mRNA表达;应用蛋白印迹方法检测FrpHE和DKK1的蛋白表达.结果 Wnt-3、Wnt-5a、Wnt-7a、FrpHE和DKK1在正常育龄妇女的增殖期和分泌期输卵管组织中均有表达.增殖期Wnt-3和FrpHE的mRNA表达要显著高于分泌期（P〈0.05）,而分泌期DKK1的mRNA表达则显著高于增殖期 （P〈0.05）,其它基因的表达无显著性差异.FrpHE和DKK1的蛋白表达与其mRNA表达相符.分泌期服用米非司酮的输卵管组织的DKK1的mRNA和蛋白表达均较分泌期未服用米非司酮的输卵管组织明显降低（P〈0.05）,而其余各基因的表达在两组间无显著性差异.结论 在正常育龄妇女的输卵管组织中存在Wnt部分家族成员的表达;它们在月经周期中的不同时期发生了相应改变,提示Wnt信号通路可能受到卵巢性激素的调节作用;孕激素可能是DKK1的重要调控因子.     

不明原因复发性流产患者子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-1O基因的表达

目的探讨不明原因复发性流产（URSA）与子宫内膜／早孕蜕膜组织HOXA-10基因表达的关系。方法采用原位杂交技术，以HOXA-10反义核苷酸为探针检测51例URSA患者及38例正常生育（NF）组的分泌期子宫内膜／早孕蜕膜组织HOXA-10mRNA的表达水平，并以灰度阳性单位（PU值）表示。结果NF组子宫内膜分泌早期HOXA-10mRNA表达的PU值腺体为（6．66±0．11），间质为（6．76±0．15）；分泌中期分别为（10．95±0．90）及（11．46±1．08）；分泌晚期分别为（11．05±1．12）及（11．54±1．10）；蜕膜组织分别为（11．55±1．14）及（11．93±1．92）；分泌中晚期及蜕膜组织的Pu值显著高于分泌早期。URSA组不同时期子宫内膜及早孕蜕膜组织中HOXA-10mRNA的表达水平基本一致，无明显的分泌中晚期及早孕期峰，并且分泌中晚期及早孕蜕膜组织的PU值明显低于NF同期组。两组各期腺体和间质的PU值无显著差异。结论子宫内膜HOXA-10基因在分泌中晚期及早孕蜕膜组织中的高表达可能和孕卵着床及妊娠维持密切相关，其表达缺陷可能是导致URSA发生的重要原因之一。     

子宫内膜异位症患者在位内膜Stathmin的表达研究

目的探讨Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜及正常妇女子宫内膜中的表达。方法收集子宫内膜异位症患者在位子宫内膜36例和对照妇女的子宫内膜组织20例。通过免疫组化和免疫蛋白印迹法(Western-blotting)检测Stathmin的表达。结果 Stathmin在子宫内膜的腺体和基质中均有表达,且在增殖期和分泌期的表达无显著性差异(P>0.05)。Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达明显高于在对照组妇女子宫内膜中的表达(P<0.05)。结论 Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达增高,可能参与子宫内膜异位症的发病。     

层粘连蛋白、纤粘连蛋白、IV型胶原在人月经周期子宫内膜中的表达

目的　研究细胞外基质蛋白层粘连蛋白 (LN)、纤粘连蛋白 (FN)和IV型胶原 (IVCL)在正常人月经周期子宫内膜中的表达。　方法　采用免疫组织化学方法检测 4 9例正常月经周期子宫内膜中LN、FN、IVCL蛋白的表达。　结果　LN主要分布于腺上皮及腔上皮基底膜 ,分泌中期表达最强。FN主要分布于间质 ,腔上皮及腺上皮基底膜也均有表达 ,分泌中期含量丰富。IVCL在腺上皮基底膜的表达分泌中期最强 ,在间质的表达分泌早期最强 ,分泌中、晚期表达逐渐减弱。LN、FN、IVCL在血管基底膜上均有表达 ,无周期性变化。　结论　LN、FN、IVCL在月经周期子宫内膜中的表达随月经周期而变化。     

Prostate cancer cell proliferation is influenced by leptin

BACKGROUND: Obesity is considered a risk for many cancers. Serum leptin levels are often elevated in obese people. Leptin acts as a mitogenic agent in many tissues; therefore, it may act to promote cancer cell growth. We previously demonstrated that leptin acts as a growth factor for prostate cancer cells in vitro. The purpose of this study was to characterize leptin receptor isoform mRNA expression in leptin-treated DU145 and PC-3 prostate cancer cell lines. Expression levels of SOCS-3, a known leptin-inducible suppressor of leptin signaling, and known mitogenic signaling pathways of PI3K and ERK were also analyzed METHODS: DU145 and PC-3 cells were treated with 0, 4, 40, or 80 ng/ml leptin for 0, 0.5, 1, 2, 4, 24, or 48 h. Multiplex RT-PCR was performed to determine mRNA levels of the short (huOB-Ra) or the long (huOB-Rb) OB-R isoforms or SOCS-3. p-Akt and p-ERK were determined by Western blot. Cell viability and apoptosis were determined by MTT and nucleosomal fragmentation assay RESULTS: DU145 and PC-3 expressed huOB-Ra, huOB-Rb, and SOCS-3 mRNA. huOB-Ra mRNA levels increased in PC-3 at 48 h (P < 0.01); however, no significant changes were observed in DU145. huOB-Rb mRNA levels decreased at 48 h in DU145; however, a twofold increase at 48 h (P < 0.01) was observed with PC-3 and was dose-dependent (P < 0.05). Leptin increased SOCS-3 mRNA in DU145 at 24 and 48 h (P < 0.05) and in PC-3 at 1 h (2-fold) and 48 h (fivefold; P < 0.01). Leptin up-regulated p-Akt in a time- and dose-dependent manner in the DU145 prostate cancer cells via a suppression of apoptosis. Leptin up-regulated p-ERK in a time-dependent manner in PC-3 cells CONCLUSIONS: In prostate cancer cells, the mitogenic effects of leptin are not a consequence of altered receptor isoform mRNA expression. No defect in SOCS-3 signaling was observed, and proliferation appears to be working through the PI3K and MAPK leptin receptor-activated pathways, depending on cell type. Leptin stimulation may be selective for either pathway to suppress apoptosis, thereby enhancing prostate cancer growth.     

瘦素和瘦素受体在食管癌中的表达及其意义

目的 探讨瘦素及其受体与食管癌发生发展的关系.方法 采用免疫组织化学染色方法检测52例食管癌和49例正常食管组织中瘦素及受体的表达,并分析其与临床病理组织学各参数之间的关系.结果 52例食管癌组织中瘦素与受体的表达率分别为78.8%(41/52)、82.7%(43/52).49例正常的食管组织两者的表达率分别为58.3%(28/49)、59.2%(29/49).瘦素及其受体在食管癌与正常食管组织中的表达差异均有统计学意义(P＜0.05),瘦素及其受体的表达与部位、肿瘤大小、组织学、淋巴结的转移及TNM分期明显相关(P均＜0.05).结论 瘦素及其受体的双重表达在食管癌的发生发展过程中起一定的促进作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of leptin and leptin receptor in carcinogensis and development of esophageal carcinoma. Methods The expression of leptin and leptin receptor was detected in 52 cases of esophageal carcinoma tissues and 49 cases of normal esophageal tissues by immunohistochemistry. The correlation between their expression and clinicopathological parameters was also analysized. Results The expression rate of leptin and leptin receptor in esophageal carcinoma was 78. 8% (41/52) and 82.7% (43/52) respectively, and the rate in normal esophagus was 58.3% (28/49) and 59.2% (29/49) respectively. The expression rate of leptin and leptin receptor both had statistically significantly differences between esophageal carcinoma and normal esophagus tissues (P ＜ 0. 05). The expression rate of leptin was associated with position, tumor size, differentiation, lymphatic metastasis and TNM stage (P ＜ 0. 05 ). Conclusion Leptin and leptin receptor were dually expressed in esophageal carcinoma.They played important roles in the process of carcinogensis and development of esophageal carcinoma.     

月经周期子宫内膜凋亡与Bc1-2、Fas及Fas-L基因表达产物的相关研究

为探讨子宫内膜凋亡与某些相关基因表达产物的关系,应用免疫组化方法对４６份正常子宫内膜标本Ｂｃ１－２、Ｆａｓ及Ｆａｓ－Ｌ基因表达产物进行检测,并应用ＴＵＮＥＬ法对其中１３份标本同时进行凋亡检测。结果表明：分泌晚期及月经期凋亡细胞较多,血内雌二醇、孕酮水平低下;Ｂｃ１－２蛋白在增殖晚期含量高、分泌期低落、月经期消失;Ｆａｓ则在分泌期及月经期略高于增殖期,而Ｆａｓ－Ｌ表达产物低下。结论：子宫内膜的凋亡呈现周期性改变,与Ｂｃ１－２、Ｆａｓ表达相关,并受雌、孕激素显著调节,提示凋亡与月经期内膜脱落相关。     

瘦素及其受体在胃癌中的表达

目的研究瘦素(Leptin)和瘦素受体(ob-R)在胃癌组织中的表达并探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学染色方法检测54例胃癌组织中瘦素和瘦素蛋白的表达。并就其表达与临床病理组织学参数之间的关系进行了相关性分析。结果54例胃癌组织中瘦素和瘦素受体的的表达率为72．22％(39／54)和74．07％(40／54)，肠型胃癌瘦素表达率明显高于弥漫性胃癌。瘦素的表达率与肿瘤组织分化、癌肿大小、转移、TNM分期有关。结论瘦素和瘦素受体以双重表达方式存在于胃癌组织中，参与胃癌的早期发生过程并在其发展中起一定作用。     

子宫内膜异位症和腺肌症患者子宫内膜雌激素受体的时空表达

目的　研究子宫内膜异位症和子宫腺肌症子宫内膜各种细胞中雌激素α和 β受体的表达模式 ,为探索子宫内膜异位症和子宫腺肌症的致病机理提供依据。　方法　 10 8例患有内膜异位症、腺肌症、两症并发组和对照组子宫内膜组织 ,常规光镜下按Noyes分期标准行形态学分期。采用免疫组织化学的方法观察不同月经周期时相子宫内膜腺上皮、基质和血管内皮细胞中雌激素受体ERα和ERβ的表达。　 结果　与对照组相比 ,ERα信号强度在各组相应的细胞类型、相应的时相无显著差异 ,但子宫内膜腺上皮细胞、基质细胞和血管内皮细胞中显示阳性信号的细胞比例增大 ,且腺上皮细胞质普遍出现ERα阳性信号。子宫内膜异位症和腺肌症的血管内皮细胞中ERα阳性细胞数显著增加。ERβ在各组的表达模式与对照组相比无明显差异 ,甚至略呈下降趋势。　结论　人子宫内膜中ERα为雌激素效应的主要受体亚型 ,表达ERα的腺上皮、基质和血管内皮细胞数量的增多以及腺上皮细胞质普遍出现ERα阳性信号可能与这两种疾病的发病密切相关 ;ERβ并不参与这一过程。     

Expression of leptin and leptin receptor in the testis of fertile and infertile patients

The aim of our study was to investigate the relationships between the expression of leptin, leptin receptor in the testis and spermatogenesis, and testosterone (T) concentration in infertile men. Testicular tissue samples were collected from the testes of five fertile volunteers, eight patients with obstructive azoospermia (OA), six patients with Sertoli cell-only syndrome (SCO) and 32 oligospermic patients with varicocele testis. In testicular tissue, leptin and leptin receptor were identified by staining with polyclonal antibodies. Serum follicle stimulating hormone, lutenising hormone (LH), and T were determined by chemiluminescence assays. Leptin was expressed on germ cells, mainly on spermatocytes. The ratio of immunostained germ cells to total germ cells was inversely correlated with the concentration of T (r = -0.32, P = 0.01), sperm concentration (r = -0.51, P = 0.002) and Johnsen's score (r = -0.44,P = 0.005). In contrast, leptin receptor immunostained cells were found in the interstitium, primarily in Leydig cells. Leptin receptor expression on Leydig cells was inversely correlated with serum T concentration (r = -0.50, P < 0.001). The dysfunction of spermatogenesis is associated with an increase in leptin and leptin receptor expression in the testis.     

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。