乳腺癌患者BRCAl基因外显子11突变研究

目的：检测乳腺癌患者（breast and ovarian cancer susceptibility gene1，BRCAl）基因exonll突变情况及突变位置，探讨BRCAl突变与乳腺癌的关系。方法：采取105例乳腺癌标本为实验组，30例非癌乳腺组织为对照组。应用PCR—SSCP技术和DNA直接测序法检测所有标本BRCAl基因外显子11全部序列的突变情况。结果：30例非癌乳腺组织BRCAl基因外显子11未检出突变，105例乳腺癌中有10例发生基因突变，占总例数的9．5％。10例中2例为同义突变：2430T→ C，2630T→G；8例为错义突变：2532T→G，2685T→C（2例），3191C→G，3232A→G，3667A→G（2例），3876C→A。结论：BRCAl基因外显子11突变与乳腺癌的发生关系密切，对其进行检测可能对乳腺癌的患病风险评估及早期诊断具有重要意义。     

乳腺癌BRCA1基因突变的研究

目的　乳腺癌易感基因 (BRCA1基因 )是一种抑癌基因。本研究检测BRCA1基因在乳腺癌中的突变情况 ,探讨BRCA1基因突变与乳腺癌的关系。方法　选取 89例乳腺癌患者标本作实验组 ,另取非癌乳腺组织标本 30例作对照组。每一例标本分别捣碎 ,分别用酚 -氯仿抽提法提取DNA ,每例DNA用PCR扩增BRCA1基因的 2、5、1 7、2 0等 4个外显子。分别将每例病人每个外显子的PCR扩增产物进行SSCP分析 ,对出现异常区带的PCR扩增产物进行DNA测序 ,与基因库序列比对分析其突变情况。结果　 30例非癌乳腺组织未检测出BRCA1基因突变 ,89例乳腺癌共检测出 4例突变 ,其中 2例为 5外显子的错义突变 (2 73C >G ,2 87A >T) ,2例为 1 7外显子的错义突变 (5 1 1 5T >C ,5 1 1 6A >G)。乳腺癌BRCA1的基因突变率为 4 5 %(4 / 89)。结论　BRCA1突变与乳腺癌有关系 ,检测BRCA1基因突变对于乳腺癌患病风险评估及早期诊断具有重要意义     

汉族散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变的研究

目的研究宁夏地区汉族乳腺癌患者BRCA1基因突变情况及突变位置。方法抽取已经确诊55例乳腺癌患者的外周血标本,对照组为30例健康女性查体的外周血标本,应用PCR法（聚合酶链反应）和DNA序列直接测定的方法检测BRCA1基因突变。结果（1）55例乳腺癌BRCA1的突变率9．09％（5／55）,其中17例早发性乳腺癌（≤35岁）BRCA1突变率23．53％（4／17）,高于晚发性乳腺癌基因突变率的2．63％（1／38）,差异有统计学意义（χ2=3．94,P〈0．05）;（2）5例BRCA1基因突变的乳腺癌中有3例ER、PR、人表皮生长因子受体2（HER-2）均为阴性,即三阴乳腺癌,其比例为60％（3／5）,而非BRCA1突变的乳腺癌中三阴比例为10．00％（5／50）,差异有统计学意义（χ2=5．56,P〈0．05）;BRCA1基因突变相关性乳腺癌淋巴结转移率为100％（5／5）,高于非BRCA1基因突变相关性乳腺癌62％（31／50）,差异有统计学意义（χ2=5．56,P〈0．05）。结论BRCAI突变可能与宁夏地区汉族散发性乳腺癌尤其是早发性乳腺癌的发生密切相关,并与三阴乳腺癌有密切关系,且提示预后可能较差。     

乳腺癌与BRCA1及BRCA2基因相关性研究进展

乳腺癌是女性发病率最高的一种恶性肿瘤,其死亡率在大多国家占女性各类肿瘤的首位。乳腺癌发病机制非常复杂,涉及多种基因异常,包括易感基因、癌基因、抑癌基因等,乳腺癌发生发展中对这些基因异常的认识是乳腺癌防治的关键,因此我们对乳腺癌发病过程中BRCA1及BRCA2基因的研究进展及现状进行综述。     

新疆地区哈萨克族乳腺癌患者BRCA1和BRCA2基因的突变分析

目的：探讨新疆地区哈萨克族散发性乳腺癌中 BRCA1和 BRCA2基因的突变频率及分布情况。方法选择2005年1月-2013年10月新疆医科大学第一附属医院和附属肿瘤医院收治的来自新疆地区的哈萨克族乳腺癌患者86例（病例组）和哈萨克族健康女性70例（对照组）,由外周静脉血提取基因组 DNA,对乳腺癌易感基因1（Breast Carcinoma 1,BRCA1）外显子2、10、18、20和乳腺癌易感基因2（Breast Carcinoma 2,BRCA2）外显子10、11及外显子-内含子拼接区进行DNA直接测序,并鉴定突变位点。结果病例组和对照组共检测到的18个突变位点中,rs80357374、rs4987117为未知功能变异,其余均为多态性改变。在病例组和对照组中分别检测到195个和143个变异序列。病例组 rs1799950、rs1801499、rs1799944的分布频率明显高于对照组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。在中国人群中尚未检测到 rs80357374,Intron18-268为新发突变位点,但在对照组中均检测到2个基因突变。两组中携带4个以上突变的患者人数占各组携带者的56．9％、39．6％,差异无统计学意义（P ＞0．05）。BRCA2突变频率高于BRCA1,但2个基因突变频率差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论哈萨克族乳腺癌患者BRCA1和BRCA2突变频率高,且相当一部分受试对象同时携带多个突变位点,这可能是哈萨克族人群的特有遗传特征。rs1799950、rs1801499、rs1799944这3个位点可能增加哈萨克族人群罹患乳腺癌的风险,值得今后进一步研究验证。     

50例散发性乳腺癌患者BRCA1基因的检测

应用PCR和直接测序方法检测50例散发性乳腺癌中国汉族患者的BRCA1基因突变情况，结果未发现BRCA1基因突变现象。提示散发性乳腺癌中国汉族患者BRCA1基因突变较为罕见，与国外报道一致。     

53例家族性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因部分序列的突变分析

ＢＲＣＡ1和ＢＲＣＡ2是家族性乳腺癌(ｆａｍｉｌｉａｌｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ,ＦＢＣ)的主要易感基因,均为抑癌基因。ＢＲＣＡ1的异常与45%的家族性乳腺癌、卵巢癌有关;ＢＲＣＡ2的异常不仅与45%的家族性乳腺癌有关,尚与早发乳癌、男性乳癌关系密切。这两个基因在人群...     

中国汉族乳腺癌家系中BRCA1和BRCA2基因的胚系突变

目的 检测中国家族性乳腺癌中BRCA1和BRCA2的胚系突变位点。方法 对象为来自汉族的14个乳腺癌家系中的15例乳腺癌患者、散发性乳腺癌患者76例和正常对照100名,知情同意后取其外周静脉血,提取基因组DNA,用15例家族性乳腺癌患者和2份pool DNA(每份pool DNA含50名正常对照者的等量DNA)作为样本,对BRCA1基因外显子4、8、11、18、19、20和部分内含子区域,BRCA2基因外显子1～14、外显子17～24和外显子27及部分内含子区域进行序列测定。用DNA Star软件进行序列比较分析,筛查基因突变位点及多态性位点,对有意义的突变位点在正常对照和散发性乳腺癌患者中进行基因分型。结果 在BRCA1的外显子11上发现6个单核苷酸多态性(SNP)位点,2个不改变氨基酸编码,4个改变氨基酸编码。其中2个为致病性位点：一个致病位点为G 1235A(Trp 372 stop),导致蛋白质合成终止,该位点仅在1例29岁的家族性乳腺癌患者中发现;另一致病位点C 1196 T(Pro 359 Leu)也只在1例37岁的家族性乳腺癌患者中发现,该位点在正常对照和散发性乳腺癌患者中进行基因分型后均为野生型,并在相关的文献和乳腺癌信息中心网站的突变数据库中均未检索到,为一新的中国家族性乳腺癌特有的致病位点。在BRCA2的外显子3、10及11中发现8个SNP位点,5个不改变氨基酸编码,3个改变氨基酸的编码,其中2个位点A 1093 C(Asn 289 His)和A 3199 G(Asn 991 Asp)在2个pool DNA样本中均为野生型。结论 在BRCA1上发现两个致病的SNP,可能与早发型乳腺癌有关,其中一个可能是中国家族性乳腺癌特有的新的突变位点。     

散发性乳腺癌中BRCA1基因突变的检测

目的 分析散发性乳腺癌患者BRCA1基因3个外显子的突变特性及突变位置。方法 采用PCR-SS-CP银染结合DNA直接测序方法，对34例乳腺癌患者BRCA1基因第2，11，20外显子进行突变检测。结果 2例患者BRCA1基因第11外显子的2430位点出现突变，由A变成G。结论 中国散发性乳腺癌中BRCA1突变率较低（6%），可能只与小部分散发性乳腺癌的发生相关；在普通人群中进行广泛的BRCA1突变筛查意义不大；在Ashkenazi犹太妇女中发现的两个突变热点185delAG和5382insC不是中国乳腺癌患者的突变热点，在中国人群中进行上述突变热点的筛查意义不大。     

广西地区散发性乳腺癌BRCA1突变及其相关临床、组织病理特征的研究

目的：探讨广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因的突变情况,及其与乳腺癌的临床、组织病理特征。方法：采用PCR联 合基因直接测序法检测广西地区235例乳腺癌患者（包括155例汉族及80例壮族乳腺癌患者）BRCA1基因的突变情况,同时 采用免疫组化方法检测乳腺癌组织中ER、PR及CerbB-2的表达情况。结果：①235例乳腺癌患者BRCA1突变率为8.5% （20/235）;其中汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率分别为7. 1 % （11/155）、11. 3% （9/80）,两者比较差异无统计学意义（χ^2=1. 169,P =0. 280）。②20例BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为65. 0%,三阴性乳腺癌（TNBC）检出率为35.0%; 而无BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为30. 0%,TNBC检出率为14. 8%,两组比较Cerbfr2阴性表达率及TNBC检 出率差异有统计学意义（χ^2 = 10.031, P =0.002;χ^2=4.018, P =0.045）。结论：广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因突变率 相对较低,汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率无明显差异;BRCA1突变乳腺癌CerbB-2阴性表达率高,与三阴性乳腺癌关 系密切,提示预后可能较差。     

散发性三阴乳腺癌中BRCA1启动子甲基化与蛋白表达

目的：通过检测散发性三阴乳腺癌（TNBC）中乳腺癌易感基因（breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1）启动子甲基化和蛋白表达,探讨BRCA1与散发性TNBC的关系.方法：应用重亚硫酸盐测序PCR（bisulfite sequencing PCR,BSP）法检测50例散发性TNBC组织及配对癌旁组织中BRCA1启动子甲基化状态,用免疫组织化学方法检测上述组织中BRCA1蛋白的表达情况,分析BRCA1启动子甲基化与蛋白表达的相关性.结果：散发性TNBC组织中BRCA1启动子甲基化率为42.0％（21/50）,癌旁组织未检测出甲基化,两者比较差异有统计学意义（P=0.000）.BRCA1蛋白在散发性TNBC癌组织中的表达率为32.0％（16/50）,明显低于癌旁组织68.0％ （34/50）（P＜0.05）.散发性TNBC癌组织中BRCA1蛋白表达与启动子甲基化呈负相关（r=-0.323,P=0.022）.结论：BRCA1启动子的高甲基化引起BRCA1蛋白表达下降或缺失,可能是散发性TNBC重要的发病机制之一.     

散发性乳癌WIF-1基因启动子区多态性研究

目的 探讨WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T位点单核苷酸多态性与散发性乳癌发生的关系.方法 采用等位基因特异性扩增(ASA)法对200例乳癌病人和200例正常对照者的WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T位点单核苷酸多态性进行分析,PC...     

家族性及早发性乳癌病人BRCA1基因外显子2和20突变研究

目的 研究青岛地区家族性及早发性乳癌病人乳癌易感基因-1(BRCA-1)外显子2、20的突变情况,探讨其与乳癌发病的关系.方法 选取青岛地区家族性乳癌病人(家系中至少一个一级亲属有乳癌患病史)30例、早发性乳癌(发病年龄＜35岁)25例为实验组,以20例乳腺良性肿瘤病人为对照组.应用PCR技术和DNA直接测序技术检测所有标本BRCA1基因外显子2、20的突变情况.结果 实验组与对照组在外显子2和20的序列中均未发现有突变.结论 BRCA1基因外显子2和20上的序列突变对青岛地区家族性及早发性乳癌发生的影响不大,有待于寻找BRCA1基因的其他突变热点.     

免疫组化法检测乳腺癌患者骨髓内转移癌细胞

明确乳腺癌患者是否存在早期血行转移具有理论和实际意义,目前的各种检查方法尚难以完成。本文首次应用上皮膜抗原、角蛋白单克隆抗体检测乳腺癌患者骨髓中的微小转移取得了成功。实验方法采取敏感的卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC法)这一较新的免疫组化技术。对病人在手术麻醉状态下行多部位骨髓穿刺,标本用Ficoll分层离心以集中有核细胞和可能存在的瘤细胞。已完成10例病人,其中4例找到了阳性的肿瘤细胞,为乳癌的早期诊断和治疗开辟了新径。     

帕金森病病人USP24基因外显子39～68突变筛查

目的对帕金森病(PD)病人泛素-特异性蛋白酶24(USP24)基因的外显子(exon)39～68进行突变筛查,以进一步了解USP24基因是否为PD的致病基因。方法对中国湖南省92例散发PD病人USP24基因的exon39～68通过PCR产物直接测序法进行突变筛查。结果在exon39～68中未见任何碱基变异,在外显子-内含子交界区检测出11种变异,其中3种为已知多态(rs6588545、rs12031876和rs10493176),位于exon59的c.7078+22a>g变异仅在1例以强直为主要临床症状的早发男性PD病人中存在,在95例正常人中不存在此变异。结论在湖南地区的中国人群中,USP24基因位于exon39～68的基因突变可能在PD的发病机制中不起主要作用。     

内蒙古经典型苯丙酮尿症PAH基因外显子11突变的检测

目的：研究内蒙古地区经典型苯丙酮尿症（PKU）苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变的特点和频率，以提高该地区PKU的基因诊断率。方法：应用PCR—SSCP-银染法和DNA直接测序的方法，对22例内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子11进行了检测。站果：检出一种已知突变Y356X（TAC→TAA），突变频率为13．6％。结论：内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子11的突变频率均高于我国的其它北方人群，也高于云南PKU病人的突变频率，这为内蒙古地区PKU病人PAH基因分析和产前诊断提供了科学依据。     

乳腺癌P53基因点突变的检测

目的：探讨Ｐ５３基因点突变检测在乳腺癌预后判断中的意义。方法：应用聚合酶链反应———单链构像多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法对３５例乳腺癌患者的Ｐ５３基因位点的点突变进行检测。结果：３例出现点突变，经ＤＮＡ序列分析，１例为第１３６密码子ＣＡＡ（Ｇｌｎ）被ＣＡＧ（Ｇｌｎ）替代，１例为第２２７密码子ＴＣＴ（Ｓｅｒ）被ＧＣＴ（Ａｌａ）替代，１例为第２７３密码子ＣＧＴ（Ａｒｇ）被ＣＡＴ（Ｈｉｓ）替代。结论：Ｐ５３基因突变可能是引起乳腺癌分化不良的因素之一，并可能预示着乳腺癌预后较差。