类风湿关节炎患者外周血调节性T细胞的检测及意义

类风湿关节炎(RA)是一种以细胞免疫紊乱为主的自身免疫性疾病,RA的免疫学异常包括T细胞亚群失调和T细胞的异常活化.调节性T细胞(Treg)可通过抑制自身反应性淋巴细胞的活化、增殖来维持机体的免疫耐受.本研究对RA患者外周血的Treg(CD4 CD25 high)以及活化的CD4 T(CD4 CD25 )细胞的表达进行了检测,并结合临床资料进行分析,现报道如下.     

类风湿关节炎患者外周血T细胞抑制性多肽的研究

目的探讨HLADRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308317变构肽对类风湿关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的影响。方法选取27例HLADRB1阳性的RA患者,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。采用固相法合成HA308317变构肽,并检测RA患者外周血T细胞对这些多肽的反应性;及多肽对白细胞介素(IL)2、γ干扰素分泌及CD69表达的影响。同时进一步观察HA308317变构肽对CII263272或HA308317多肽介导的T细胞激活的抑制作用。结果变构肽刺激T细胞增殖的阳性率分别为7.4%(APL1)、3.7%(APL2)和3.7%(APL3),明显低于CII263272和HA308317原型肰(62.2%和52.9%),3条变构肽的刺激指数也明显低于原型肽(均P<0.01)。并且,其诱导IL2、γ干扰素分泌的水平及CD69的表达亦下降(P<0.05)。与单独加入CII263272或HA308317原型肽的对照组相比,加入HA308317变构肽的T细胞增殖的刺激指数明显下降(P<0.05)。结论替换HA308317多肽中T细胞受体的接触残基产生了弱或非T细胞刺激肽,它们可能有效地抑制RA的T细胞免疫反应。     

滤泡辅助性T细胞和记忆性T细胞在类风湿关节炎中的研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种不可治愈、病因不明的异质性、系统性、自身免疫性疾病,其中T淋巴细胞介导免疫损伤,它包括滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh细胞)和记忆T淋巴细胞(Tm细胞)等多种亚群。Tfh细胞和Tm细胞的生成和分化受多种因素影响,而表达程序性细胞死亡因子1、可诱导共刺激分子、CXC趋化因子受体5等诸多因子是机体发挥正常免疫反应的关键细胞。RA患者体内存在Tfh细胞和Tm细胞的调节异常,这在疾病的发生、发展和病理过程中起重要作用。未来对Tfh细胞和Tm细胞的深入研究,将有助于进一步明确RA的发病机制,探索新的治疗靶点。     

血浆Dickkopf-1在类风湿关节炎患者中的表达及其与外周血T细胞亚群的相关性

目的: 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血浆Dickkopf-1(DKK-1)水平,并分析其与外周血T细胞亚群、临床指标之间的相关性。方法: 采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测32例RA患者及20例健康对照者的血浆DKK-1的水平,并记录RA患者的各项临床表现和实验室指标。流式细胞仪检测RA患者外周血T细胞亚群(包括Treg、nTreg、aTreg、sTreg、Teff、Tfh、CD4⁺CD161⁺T、CD8⁺T、CD8⁺CD161⁺T细胞)。比较两组血浆DKK-1的水平,并分析其与外周血T细胞亚群、临床指标的相关性。结果: (1)RA患者血浆DKK-1浓度为(124.97±64.98) ng/L,健康对照组血浆DKK-1浓度为(84.95±13.74) ng/L,RA患者血浆DKK-1水平显著高于健康对照组(P<0.05),RA患者外周血CD8⁺CD161⁺T细胞百分比显著高于健康对照组(P<0.05)。(2)血浆DKK-1水平与红细胞沉降率(r=0.406,P=0.021)、DAS28评分(r=0.372,P=0.036)、免疫球蛋白G(r=0.362,P=0.042)、免疫球蛋白A(r=0.377,P=0.033)呈正相关;与年龄、病程、C-反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、免疫球蛋白M、补体C3、补体C4、白细胞计数、中性粒细胞百分比无相关性。(3)RA患者血浆DKK-1水平与外周血CD8⁺CD161⁺T细胞百分比呈正相关(r=0.413,P=0.019);与Treg、nTreg、aTreg、sTreg、Teff、Tfh、CD4⁺CD161⁺T、CD8⁺T细胞无相关性。(4)外周血CD161⁺CD8⁺T细胞百分比与红细胞沉降率(r=-0.415,P=0.004)、C-反应蛋白(r=-0.393,P=0.007)、DAS28评分(r=-0.392,P=0.007)、类风湿因子(r=-0.535,P<0.001)、抗环瓜氨酸肽抗体(r=-0.589,P<0.001)、免疫球蛋白G(r=-0.368,P=0.012)、免疫球蛋白M(r=-0.311,P=0.035)呈负相关;与年龄、病程、免疫球蛋白A、补体C3、补体C4、白细胞计数、中性粒细胞百分比无相关性。结论: RA患者血浆DKK-1水平和外周血T细胞亚群中的CD8⁺CD161⁺T细胞百分比均升高,可能与患者体内促炎细胞因子的分泌有关;DKK-1参与骨稳态的调节,可用作RA骨破坏的标志物。     

类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞百分率的变化及意义

目的 探讨滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)百分率在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及意义.方法 选取该院2016年9-11月收治的RA患者,分为RA活动组与RA稳定组,各35例.另选取同期行健康体检者35例作为健康对照组.用流式细胞术检测受试者外周血CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh细胞的百分率,分析RA患者外周血Tfh细胞百分率与28个关节疾病活动度评分(DAS28)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF)水平的相关性.结果 RA活动组外周血Tfh细胞百分率[(0.84±0.16)％]明显高于RA稳定组[(0.64±0.15)％]及健康对照组[(0.56±0.14)％],差异均有统计学意义(P＜0.01);且RA稳定组亦高于健康对照组(P＜0.05).RA患者外周血Tfh细胞百分率与DAS28及抗CCP抗体水平均呈明显正相关(r=0.355、0.324,P＜0.01),与RF水平无明显相关性(r=0.205,P＞0.05).结论 外周血中Tfh细胞百分率的增加可能与RA的发生、发展有关.     

复发性生殖器疱疹患者外周血T细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子的模式

目的分析复发性生殖器疱疹 ( RGH)患者外周血中 T细胞亚群及 Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在发病机理中的作用。方法采用三色和双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测 2 0例 RG H患者和正常对照组外周血 T细胞亚群及 CD4 + T、CD8+ T细胞内 4种细胞因子染色阳性细胞百分率。结果 RGH患者 CD3+ T细胞、CD4 + T细胞、CD4 + T/CD8+ T明显低于正常对照水平 ( P<0 .0 0 1) ;IL- 2、IFN- r、IL- 12阳性细胞百分率均显著降低 (分别为 CD4 + T:P<0 .0 0 1,CD8+ T:P<0 .0 5) ;IL- 4阳性细胞则明显升高 ( CD4 + T:P<0 .0 5,CD8+ T:P<0 .0 0 1)。结论 RGH患者存在 T细胞亚群和 Th1、Th2细胞分泌细胞因子交互作用失衡 ,后者表现为 Th2型细胞因子( IL - 4)产生过多 ,而 Th1型细胞因子 ( IL - 2、IL - 12、IFN - r)产生过少 ,Th1/Th2失衡在 RGH的发病机制中可能具有重要的作用。     

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3~ 、CD4~ T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4~ IFN-γ%及IFN-γ~ /IL-4~ 明显升高(P值均<0.01),而CD4~ IL-4~ %明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。     

类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T细胞水平检测

目的：检测外周血滤泡辅助性T细胞(follicular T helper cells , Tfh cells)的比例及其表面标志,分析与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis , RA)患者疾病活动度的关系。方法： 收集40例类风湿关节炎患者及20例正常对照组的外周血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)及血清,流式细胞术检测PBMC中CD4+CXCR5+Tfh细胞(CXCR5, 趋化因子受体, C-X-C chemokine receptor type 5)的比例及其表面程序性细胞死亡1(programmed death-1, PD-1)、可诱导的协同刺激性因子(inducible co-stimulator, ICOS)、CD40配体(CD40 ligand, CD40L)及白介素21受体（interleukin-21 receptor, IL-21R）的表达情况,实时荧光定量PCR方法检测B 细胞淋巴瘤-6(B-cell lymphoma 6, Bcl-6)、白介素-21(interleukin-21, IL-21)及IL-21R的表达,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA)检测血清中IL-21和B 细胞趋化因子CXC配体13 (B cell-attracting chemokine CXC ligand 13, CXCL13)水平。结果： （1）流式细胞术结果提示,与正常对照组比较,RA患者组外周血CXCR5+ CD4+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高（16.75±3.92 vs. 7.49±1.84,P＜0.001）;低疾病活动度或缓解组RA外周血CXCR5+ CD4+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高（16.62±3.43 vs. 7.49±1.84,P＜0.001）;中疾病活动度组RA外周血CXCR5+ CD4+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.82±3.07 vs. 7.49±1.84, P＜0.001);高疾病活动度组RA外周血CXCR5+ CD4+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.87±5.50 vs. 7.49±1.84, P＜0.001);RA患者外周血ICOS、PD-1、IL-21R在CD4+CXCR5+细胞的表达与正常对照组相比显著升高 (ICOS+ CXCR5+CD4+细胞, 8.37±4.28 vs. 3.72±1.81, P＜0.001; PD-1+ CXCR5+CD4+细胞, 1.57±1.10 vs. 0.24±0.30, P=0.035; IL-21R+ CXCR5+CD4+细胞, 4.60±4.05 vs. 0.20±0.19, P=0.006),而CD40L在CD4+CXCR5+细胞的表达在两组间差异无统计学意义(3.38±3.71 vs. 0.54±0.34, P=0.135)。（2）RA患者组较正常对照组外周血中IL-21R mRNA升高(5.00±4.94 vs. 0.74±0.55, P<0.001),而转录因子Bcl-6 mRNA ［4.54(3.33, 7.23) vs. 5.31(2.81, 7.44), P=0.329］以及IL-21 mRNA ［0.72(0.26, 3.45) vs. 0.56(0.27, 3.71) P=0.195］表达差异无统计学意义（P>0.05）;Bcl-6、IL-21和IL-21R mRNA的表达在不同组RA患者之间差异也无统计学意义（P>0.05）。（3）RA患者血清中IL-21、CXCL13水平明显高于正常对照组［IL-21, (200.49±154.56) ng/L vs. (8.21±5.95) ng/L, P<0.001; CXCL13, (43.09±1.28)ng/L vs. (93.72±49.72) ng/L,P<0.001］;相关分析显示IL-21、CXCL13浓度与RA疾病活动度正相关（r>0.4）,而血清类风湿因子(rheumatoid factor, RF)和抗环瓜氨酸多肽抗体（anti-citrullinated protein antibody, anti-CCP）与RA疾病活动度无相关性(r<0.2)。结论： 外周血Tfh细胞及其相关细胞因子在RA患者中显著升高,说明Tfh细胞可能参与RA的发病机制,阻断Tfh细胞的产生,有望成为治疗RA患者的新的作用靶点。     

Th17/Treg细胞平衡与类风湿关节炎的研究新进展

类风湿关节炎(RA)是一种常见慢性进行性多关节受累的免疫系统疾病,发病机制尚不明确。随着对该疾病研究的不断深入,已发现辅助性T细胞(Th)17细胞和调节性T细胞(Treg)在自身免疫调节中发挥重要作用。目前研究认为,RA是抗原呈递细胞和CD4+T细胞相互作用的结果。近年来,Th17细胞、Treg细胞及Th17细胞/Treg的细胞平衡在RA发病中受到越来越多的关注,并发现后两者才是RA发病机制的核心。     

类风湿关节炎病人血清Th1/Th2细胞因子的水平及临床意义

目的：探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）病人Th1／Th2平衡状态及血清中细胞因子的变化与RA发病机制及疾病发生发展的的关系。方法：采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测RA病人和正常人血清中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4的水平变化。结果：（1）RA病人血清中IFN-γ水平明显升高，IL-4水平明显下降，与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；（2）活动期RA病人血清中IFN-γ、IL-4水平变化与缓解期RA病人比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；（3）缓解期与活动期RA病人比较，各临床参数均有明显改善。站论：在RA血清中Th1／Th2细胞分泌的细胞因子存在明显失衡，分泌模式朝Th1偏移，Th1／Th2平衡可能与RA的发病机制及疾病的发生发展密切相关。     

SOCS1对炎症和辅助性T细胞作用的研究进展

细胞因子信号传导抑制因子(suppressors of cytokine signaling,SOCS)是由细胞产生并反馈性阻断细胞因子信号转导过程的负性调节因子.近年来很多学者及实验团队对其的研究不断加深,发现其主要通过JAK-STAT通路在炎症的预防及治疗中起着关键的作用并且是辅助性T细胞分化和发挥功能的重要调节剂.主要专注于SOCS1在炎症和辅助性T细胞发挥功能中的作用的最新进展.     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞表面PD-1的表达及意义

目的观测类风湿关节炎（RA）患者外周血CD4+T细胞表面程序性死亡因子1（PD-1,CD279）表达的变化、探讨PD-1在RA发生、发展中的作用。方法应用流式细胞术检测40例RA患者和20例健康体检者外周血CD4+T细胞表面PD-1的阳性率,对比分析RA患者病情活动组与稳定组间PD-1表达的差异,分析PD-1阳性率与C反应蛋白（CRP）,红细胞沉降率（ESR）,类风湿因子（RF）等临床指标的相关关系。结果病情活动期RA患者外周血CD4+T细胞PD-1阳性率为（32.90±12.15）%,明显高于健康体检者（22.32±6.04）%,差异有统计学意义（P＜0.01）;稳定期RA患者的PD-1阳性率为（27.49±6.79）%,与健康体检者的差异无统计学意义（P＞0.05）。RA患者中,CD4+T细胞表面PD-1阳性率与RF呈正相关（r=0.525,P＜0.01）,与ESR呈正相关（r=0.328,P＜0.05）,与CRP无明显相关性（r=0.232,P＞0.05）。结论病情活动期RA患者外周血CD4+T细胞表面PD-1表达增加,可能对疾病的发生、发展具有重要意义。     

缺氧缺血性脑病患儿外周血调节性T细胞和辅助性T细胞17及其细胞因子水平的变化

目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)及其细胞因子白细胞介素(IL)-10、IL-17、IL-23、转化生长因子-β(TGF-β)水平的变化。方法选取2012年1月至2014年1月在临颍县人民医院接受治疗的HIE患儿82例作为观察组,并选取40例健康新生儿作为对照组。抽取新生儿外周血,应用流式细胞仪检测全血中Treg和Th17的比例,采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-10、IL-17、IL-23和TGF-β水平。结果轻度HIE组患儿外周血Treg水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿外周血Treg水平显著低于对照组(P<0.05);轻度HIE组患儿外周血Th17水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿外周血Th17水平显著高于对照组(P<0.05)。轻度HIE组患儿血清IL-10、TGF-β、IL-17和IL-23水平与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿血清IL-10和TGF-β水平显著低于对照组(P<0.05),而IL-17和IL-23水平则显著高于对照组(P<0.05)。结论 HIE患儿存在外周血Treg、Th17及其细胞因子表达的失衡,检测外周血Treg、Th17及其细胞因子水平对判断HIE病情进展、指导临床治疗有一定的临床意义。     

小儿类风湿关节炎患者外周血CD4+、CD8+ T细胞CD69表达及意义

目的分析小儿类风湿关节炎（RA）患者的外周血CD4^＋、cDB^＋T细胞CD69表达水平，探讨其在小儿关节炎症发生过程中的免疫病理作用。方法收集32例RA患儿和30例健康儿童外周血标本，利用流式细胞仪检测CD4^＋、cD8^＋T细胞CD69表达，分析它们在疾病发展过程中的作用。结果RA患儿外周血CD4^＋、CD5^＋T细胞CD69表达明显升高，与健康者比较有统计学差异（P〈0．05），所有患儿均接受了有效的药物治疗，待症状控制后，分析发现患者的CD4^＋、CD8^＋T细胞表达CD69水平显著下降（P〈O．05）。结论RA患儿外周血T细胞表达CD69水平明显升高，提示T细胞在关节炎症病变过程中激活、增殖，参与关节滑膜组织及全身免疫应答。     

雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞及IL-21的影响

目的探讨雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞(Tf H)及其细胞因子白细胞介素21(IL-21)水平的影响。方法将2015年1~8月河北省沧州中西医结合医院诊治的90例类风湿关节炎患者根据随机数字表法分为观察组和对照组,各45例。观察组采用口服雷公藤多苷20 mg,每日3次,双氯芬酸钠肠溶片50 mg,每日3次,甲氨蝶呤10 mg,每周1次;对照组给予双氯芬酸钠肠溶片50 mg,每日3次,甲氨蝶呤10 mg,每周1次,疗程均为12周。观察两组患者的治疗效果及Tf H细胞、IL-21蛋白的变化。结果治疗后,观察组的总有效率高于对照组[93.3%(42/45)比71.0%(32/45)],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组生活质量评分高于对照组[(71±13)分比(65±13)分],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组压痛关节数、肿痛关节数、白细胞、血小板及红细胞沉降率、总体类风湿关节炎患者病情评价评分均低于对照组[(4.8±1.1)个比(9.3±1.7)个,(3.0±0.8)个比(6.9±1.1)个,(6.4±1.2)×109/L比(8.5±1.0)×109/L,(280±66)×109/L比(313±68)×109/L,(40±11)mm/1 h比(57±11)mm/1 h,(2.7±0.6)分比(3.9±0.9)分],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗后,观察组Tfh细胞及IL-21水平低于对照组[(10±3)%比(20±6)%,(335±78)ng/L比(414±99)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。经Pearson相关性分析,Tfh细胞及IL-21水平与DAS28评分呈正相关(r=0.712,0.709,P<0.05)。结论雷公藤多苷对类风湿关节炎治疗效果好,并能够显著改善Tf H细胞及其细胞因子IL-21水平。     

重组IL-18对类风湿关节炎患者治疗前后外周血T细胞活化及前炎症因子分泌的影响

0 引言 类风湿性关节炎（RA）是以关节滑膜慢性炎症反应为特征的自身免疫性疾病,表现为骨关节滑膜组织慢性炎症,导致滑膜组织内纤维母样细胞增生,有大量激活的淋巴细胞浸润,并分泌有大量的促炎症介质等．IL-18在RA发病过程中起着重要免疫病理作用。通过分析IL-18在RA患者血清中的表达,探讨IL-18对RA患者外周血T细胞激活和促炎症细胞因子分泌调节及其在疾病发生过程中作用．     

急性髓系白血病患者外周血调节性T细胞、辅助性T细胞17及其相关细胞因子的表达及意义

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)及其相关细胞因子转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、白细胞介素(IL)-10和IL-17的表达及意义。方法 选择2015年1月至2021年12月南阳市第一人民医院和南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的85例AML患者为研究对象,根据《成人急性髓系白血病(非急性早幼粒细胞白血病)中国诊疗指南(2017年版)》预后危险度分级标准将患者分为非高危组(n=56)和高危组(n=29);另选择同期在本院体检的40例健康人作为对照组。应用流式细胞术检测3组受试者外周血Treg、Th17细胞水平,应用酶联免疫吸附法检测3组受试者血清中TGF-β₁、IL-10和IL-17水平。结果 高危组和非高危组患者Treg细胞占外周血CD4⁺ T细胞百分比及Treg/Th17显著高于对照组,高危组患者Treg细胞占外周血CD4⁺ T细胞百分比及Treg/Th17显著高于非高危组(P<0.05);高危组和...     

类风湿关节炎患者外周血髓源性抑制细胞的检测及与Th1/Th2细胞的相关性分析

目的: 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血中髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)的水平,分析其与Th1/Th2细胞的相关性。 方法：选取确诊的RA患者36例,根据临床资料计算DAS28评分,将其分为活动组和稳定组;另选取10例健康者作为对照组。3组MDSCs、Th1及Th2细胞的比例用流式细胞术检测并进行比较。分析MDSCs与Th1/Th2细胞的相关性。结果： 活动组MDSCs的比例明显高于稳定组和对照组(P均<0.05);稳定组MDSCS的比例与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Spearman相关性分析,MDSCs与Th1细胞呈负相关(P<0.05);而与Th2细胞无相关性(P>0.05)。 结论： MDSCs在RA活动期显著增高,且与CD4+T细胞亚群关系密切,可作为辅助评估RA活动状态的指标。