凋亡调节基因bcl-2/bax与卵巢早衰的关系

细胞凋亡在生物有机体的正常生理调节和病理过程中都有十分重要作用。近来研究表明,卵巢早衰的发病机制是由于卵母细胞过快耗竭所致,卵母细胞的活化及持续生长发育依赖于其周围的颗粒细胞的营养及旁分泌作用。bcl-2/bax参与卵巢颗粒细胞的凋亡过程,细胞是走向生存还是死亡取决于bc1-2/bax的比值,间接影响卵母细胞的凋亡,bcl-2/bax在卵巢早衰的发生和发展中起重要作用。     

p53、bcl-2和bax基因表达与IUGR胎盘细胞凋亡的相关性研究

目的：研究胎儿宫内发育迟缓（ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ,ＩＵＧＲ)患者的胎盘细胞凋亡,以ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ相关性。方法：收集ＩＵＧＲ ２０份和正常足月分娩１２例的胎盘组织,应用原位末端标记(TUNEL)法检测其胎盘组织中的细胞凋亡,免疫组化法（ＩＨＣＡ）检测胎盘组织中ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ基因表达。结果：①正常和ＩＵＧＲ胎盘组织中均可见凋亡细胞,但ＩＵＧＲ胎盘中细胞凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｅｘ,ＡＩ）为１６．７～６８．３１,明显高于正常胎盘中的９．２～３０．４／高倍视野（平均２０．６７／高倍视野）,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）;②ＩＵＧＲ ２０例胎盘组织中均有ｂａｘ过表达（４０％～９０％),高于正常组织（１０％～４０％）,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）;③正常及ＩＵＧＲ胎盘组织中均未见ｂｃｌ－２表达;④ｐ５３在ＩＵＧＲ胎盘组织中的表达为５０％～８０％,而在正常组织中为５５％～８０％（Ｐ＞０．０５）;⑤ＩＵＧＲ２０例胎盘组织中细胞ＡＩ与ｂａｘ的表达呈正相关,与ｐ５３表达无关,ｂａｘ与ｐ５３之间无相关性。结论：①正常孕妇和ＩＵＧＲ患者胎盘组织中均有细胞凋亡,但ＩＵＧ     

凋亡相关基因bcl-2和bax在妇科肿瘤中的研究进展

bcl-2和bax基因是研究较多的两种凋亡相关基因。近年发现，各种妇科肿瘤组织中均有bcl-2、bax基因蛋白表达，且两者在肿瘤的发生、发展中起重要作用，并可作为妇科肿瘤的有效的预后指标，但其作用机制尚待进一步深入研究，以期为妇科肿瘤提供一种合理有效的基因治疗手段。     

米非司酮对人早孕蜕膜组织细胞凋亡的影响

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）同胚泡植入及胎盘发育密切相关,为了进一步探讨米非司酮终止早孕的机制,本文随机选择要求人工流产的妇女２５名,服药组１３名,对照组１２名。应用流式细胞仪对经碘化丙锭（ＰＩ）染色后的蜕膜组织细胞ＤＮＡ进行分析。结果两组细胞ＤＮＡ直方图上均出现细胞凋亡峰,其细胞所占比例（ｘ±ｓ）％服药组为６．８２±３．０９,对照组为３．４３±２．１３,服药组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。二倍体峰细胞比例服药组为７６．００±７．０９,对照组为８４．４５±３．８４,服药组低于对照组（Ｐ＜０．０５）。四倍体峰细胞比例两组分别为３．７０±１．６４、３．２９±０．６７,无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结果表明人早孕蜕膜组织中存在着细胞凋亡,米非司酮终止早孕的作用可能是通过拮抗孕激素作用促进蜕膜细胞凋亡而实现的。     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响以及对凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的作用。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析阿司匹林对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用,用流式细胞术分析方法定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化。用RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的表达。结果:阿司匹林对SK-OV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈量效和时效的关系;1、5、10mmol/L3个浓度的阿司匹林处理细胞48h后,细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,而且G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高,细胞被阻滞在G2/M期,细胞周期也发生明显改变;阿司匹林可抑制卵巢癌细胞的bcl-2mRNA表达,而上调bax mRNA的表达。结论:阿司匹林能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡。此作用可能与阿司匹林抑制细胞bcl-2mRNA的表达和上调bax mRNA表达有关。     

抗细胞凋零基因bcl-2和bax与卵巢上皮性肿瘤的关系

目的:研究抗凋零基因bcl-2和bax与卵巢上皮性肿瘤发生及预后的关系。方法:通过免疫组化方法,用抗bcl-2及抗bax抗体检测卵巢上皮肿瘤76份(良性27份、交界性24份、恶性25份)中bcl-2和bax的表达产物,并以正常卵巢12份做对照。结果:正常卵巢组织12份中bcl-2和bax阳性检出率为0,在良性、交界性及恶性肿瘤组织中bcl-2和bax的阳性检出率分别为7.4%(2/27)、16.7%(4/24)、36.0%(9/25),22.2%(6/27)、45.8%(11/24)、56.0%(14/25),良性与恶性肿瘤之间差异有显著性(P<0.05),而且bax的表达率比bcl-2高(P<0.05),bax在恶性肿瘤组Ⅰ级与Ⅲ级间差异有显著性(P<0.05)。结论:抗细胞凋零基因bcl-2和bax过度表达可能与卵巢上皮性肿瘤发生有关,推测bax不仅参与细胞凋零的调控,而且可能与肿瘤分化及预后有关。     

米非司酮配伍米索前列醇抗早孕蜕膜与绒毛细胞凋亡及其调控基 …

目的 探讨细胞凋亡及其调控基因Ｂ－细胞淋巴瘤／白血病－２（ｂｃｌ－２）,ｂｃｌ－２相关Ｘ蛋白（ｂａｘ）基因的表达与药物终止早孕的关系,方法 对随机采用米非司酮负吸收（１５例米非司酮组）米非司酮并米索前列醇（米索）（１４例,米非司酮米索组）,负压吸收（１５例,对照组）终止早孕经碘化丙锭染色的蜕膜与绒毛组织,应用流式细胞定性定量分析技术进行ＤＮＡ分析,采用免疫荧光标记对Ｂｃｌ－２,ｂａｘ基因蛋白进行分     

survivin基因在早孕绒毛与蜕膜中的表达及米非司酮对其的影响

ｓｕｒｖｉｖｉｎ是一种凋亡抑制蛋白 ,大多数人类的恶性肿瘤组织及人与鼠的胚胎组织中有表达[1 ] 。本研究通过检测早孕绒毛和蜕膜组织中ｓｕｒｖｉｖｉｎｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达 ,以证实绒毛和蜕膜中ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因的存在 ,并初步探讨米非司酮对其表达的影响。一、资料与方法(一 )研究对象收集 2 0 0 0年 2月至 2 0 0 0年 6月于本院妇产科门诊自愿终止妊娠的健康早孕妇女的绒毛和蜕膜组织标本。随机选取其中人工流产 15例 (人流组 ) ,药物流产 15例 (药流组 )。药流组的服药方法为 :第 1天清晨空腹口服米非司酮 5 0ｍｇ,当晚口…     

三苯氧胺联合米非司酮药物流产对早孕绒毛细胞凋亡及调控基因的影响

目的:探讨三苯氧胺联合米非司酮对早孕绒毛细胞凋亡及凋亡调控基因bcl-2和bax表达的影响。方法:将妊娠49d内的早孕妇女50例随机分成两组,试验组和对照组分别给予三苯氧胺120mg或安慰剂联合米非司酮150mg配伍米索前列醇600μg的药物流产方案,收集两组服用米索前列醇后6h内自然排出的绒毛组织,应用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测绒毛组织的细胞凋亡指数,免疫组化方法检测绒毛组织中bcl-2、bax的表达,并用Imageproplus4.10版本的专业图像分析软件测定bcl-2、bax蛋白表达积分光密度值。结果:①绒毛细胞凋亡主要发生于细胞滋养细胞和合体滋养细胞,且试验组指数明显高于对照组(14.40%±7.05%vs9.06%±5.04%,P<0.01;9.89%±3.95%vs5.85%±2.15%,P<0.01)。②Bcl-2蛋白表达于合体滋养细胞浆中,试验组其表达积分光密度值低于对照组(328.24±194.20vs682.41±237.41,P<0.01);Bax蛋白主要表达于细胞滋养细胞和合体滋养细胞胞浆中,且试验组的表达积分光密度值均高于对照组(1036.18±369.47vs658.78±200.76,P<0.01;1554.28±554.20vs988.18±301.14,P<0.01)。结论:三苯氧胺配伍米非司酮较单独使用米非司酮促进绒毛滋养细胞凋亡更强,这一作用与bcl-2蛋白表达下降、bax蛋白表达上升有关。     

Bcl-2、Bax在米非司酮治疗前后子宫内膜单纯性增生组织中的表达

目的:探讨米非司酮对子宫内膜单纯性增生的调节机制。方法:正常子宫内膜组织10例(增生期和分泌期各5例),单纯性增生子宫内膜43例,同一患者口服3个月米非司酮(10 mg/d)治疗后的子宫内膜标本43例。采用链酶菌素-生物素(S-P)免疫组化染色方法测定bcl-2、bax的表达量采用SPSS11.5统计学软件包进行数据处理,以P<0.05为有显著性差异。结果:增生期子宫内膜bcl-2阳性信号明显高于分泌期(P<0.05),单纯性增生bcl-2表达明显高于正常增生期子宫内膜(P<0.05)。与单纯性增生相比,米非司酮治疗后,子宫内膜bcl-2明显下降(P<0.05)。分泌期bax表达明显高于增生期(P<0.05),单纯性增生bax表达明显低于正常增生期子宫内膜(P<0.05)。与单纯性增生相比,米非司酮治疗后,子宫内膜bax明显增高(P<0.05)。结论:RU486增加了子宫内膜bax的表达,减少了bcl-2的表达,可能是其促进细胞凋亡,抑制子宫内膜增生的机制之一。     

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘细胞凋亡及调控基因的研究

目的　通过观察妊娠肝内胆汁淤积症 (ICP)患者胎盘细胞凋亡调控基因p5 3、bax和bcl 2在胎盘中的表达 ,探讨细胞凋亡基因在胎盘细胞凋亡中的作用。方法　采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法对 3 1例ICP患者 (ICP组 )的胎盘组织中p5 3、bax和bcl 2基因表达及调亡指数进行检测 ,并以 3 1例正常妊娠妇女的胎盘组织作对照 (对照组 )。结果　 (1)ICP组胎盘组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中细胞凋亡指数分别为 (49 1± 9 1) %、(46 6±9 8) %、(3 5 1± 9 5 ) %、(3 8 7± 9 7) % ,明显高于对照组的 (2 2 5± 6 2 ) %、(2 1 6± 5 2 ) %、(17 9±6 2 ) %、(17 0± 4 7) %。两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )而调控基因p5 3的表达 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bax的表达在两组滋养细胞中比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。但在合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bcl 2的表达在ICP组胎盘组织细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,均明显低于对照组 (P <0 0 1)。 (3 )p5 3、bax和bcl 2在ICP组合体滋养细胞中的表达分别是 (75 9± 8 2 ) %、(65     

米非司酮顿服后不同时间对早孕蜕膜形态及类固醇受体表达的影响

目的探讨药物流产中缩短米非司酮用药时间的可行性。方法将80例因非意愿妊娠自愿要求终止早孕的女性随机分为4组:对照组(直接负压吸宫术)、用药后12 h组、24 h组、48 h组,3个用药组顿服米非司酮150 mg,于不同时间行负压吸引术,留取各组蜕膜组织。应用光学显微镜、透射电子显微镜观察4组蜕膜组织的形态学改变,应用免疫组织化学方法和计算机图像分析系统检测四组蜕膜组织中类固醇受体的表达。结果 3个用药组蜕膜细胞变性、坏死,间质水肿、出血,毛细血管扩张充血。对照组蜕膜组织中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)阳性染色位于大部分蜕膜细胞及少数腺上皮细胞,用药后12 h组、24 h组、48 h组蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05),而这3组之间无统计学差异(P0.05)。结论米非司酮用药后12 h蜕膜组织变性坏死,蛋白表达受到抑制,为临床缩短药物流产用药时间提供了一定的理论参数。     

米非司酮对人早孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法对１５例正常早孕吸宫流产和１５例米非司酮流产病例的绒毛组织,应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在细胞中的染色（细胞增殖）情况,ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％,且见细胞浆阳性染色,合体滋养细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色;合体滋养细胞和细胞滋养细胞的凋亡指数分别为２．５２％±０．８６％和０．５２％±０．２６％;米非司酮流产绒毛细胞滋养细胞增殖指数降为５０．８６％±１．４４％,细胞浆阳性现象消失;细胞凋亡指数显著增加,合体滋养细胞和细胞滋养细胞分别达到２２．１６％±２．２６％和２０．１２％±１．７４％。结论米非司酮终止早孕可能是通过抑制滋养细胞增殖和促进滋养细胞凋亡来实现的     

The effect of mifepristone on apoptosis and caspase-3 activation in human ovarian luteinized granulosa cells

Objective

To investigate the effect of mifepristone, an oral contraceptive, on apoptosis in human ovarian luteinized granulosa cells.

Study design

Human ovarian luteinized granulosa cells were treated in vitro with 1.25, 2.5, 5.0, 10.0, or 20.0 μM of mifepristone. Nuclear morphology, apoptosis ratio, and level of caspase-3 expression were determined with immunofluorescence microscopy, the terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling (TUNEL) assay, and flow cytometry.

Results

We found that mifepristone-treated cells contained single condensed chromatin with multiple nuclear fragments, which is morphologic evidence of apoptosis. A significant difference was observed in the TUNEL assay between mifepristone-treated cells and control cells (P < 0.05). Consistent with the results of the TUNEL assay, the fluorescence intensity of caspase-3 in drug-treated cells was also significantly different (P < 0.05) from control cells; specifically, the difference between cells treated with different doses of drugs was much smaller and negligible.

Conclusion

From these results, we propose that mifepristone induces human ovarian luteinized granulosa cells to undergo apoptosis by activating caspase-3.     

米非司酮并米索前列醇终止早孕的蜕膜组织T淋巴细胞亚群及细胞因子的表达

目的观察米非司酮并米索前列醇终止早孕的蜕膜组织T淋巴细胞亚群及细胞因子的表达,探讨药物流产的免疫作用机理.方法将38例停经≤49d的早孕妇女分成3组米非司酮组13例(Ⅰ组),米非司酮并米索前列醇组12例(Ⅱ组),对照组13例(Ⅲ组),应用流式细胞技术对蜕膜组织T淋巴细胞亚群,即辅助T淋巴细胞(CD+4)、抑制或杀伤T淋巴细胞(CD+8)、T总淋巴细胞(CD+3)、自然杀伤(NK)细胞白细胞分化抗原分化簇(CD+56、CD+16)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)的表达进行分析.结果Ⅰ组、Ⅱ组CD4+分别为(30.9l±2.57)%、(31.58±3.28)%,与Ⅲ组(25.64±2.36)%比较,差异均有显著性(P＜0.05,P＜0.01).Ⅰ组、Ⅱ组CD+56分别为(22.40±2.77)%、(26.88±3.79)%,与Ⅲ组(18.58±4.04)%比较,差异均有显著性(P＜0.05,P＜0.01).Ⅰ组、Ⅱ组CD+16分别为(8.98±2.18)%、(10.84±2.51)%,与Ⅲ组(6.34±2.01)%比较,差异均有显著性(P＜0.01,P＜0.001).TNF-α在Ⅰ组、Ⅱ组的表达较Ⅲ组有增高趋势,TGF-β有下降趋势,但差异无显著性(P＞0.05),而CD+3、CD+8、CD+4/CD8+比值,3组比较,差异无显著性(P＞0.05).结论米非司酮并米索前列醇通过影响蜕膜组织局部免疫细胞及细胞因子的表达,可导致局部免疫微环境的破坏,使母体免疫抑制反应减轻,排斥反应增强,这可能是其抗早孕的免疫作用机理之一.     

凝集素受体WGA、RCA和ECL在米非司酮流产绒毛及蜕膜组织中表达的研究

目的:通过麦胚凝集素(WGA)受体、蓖麻凝集素(RCA)受体和鸡冠珊瑚树凝集素(ECL)受体在米非司酮流产的绒毛及蜕膜组织中的表达,探讨米非司酮的抗早孕机理。方法:以生物素标记的凝集素WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和组织化学染色法检测3种凝集素受体在米非司酮流产组(实验组)和人工流产组(对照组)早孕绒毛及蜕膜组织上皮细胞及其间充质细胞的分布。结果:实验组WGA受体、RCA受体和ECL受体在蜕膜组织上皮细胞的表达比对照组均显著降低(P0.01)。实验组ECL受体在绒毛上皮的表达显著低于对照组(P0.01),实验组WGA和RCA受体在绒毛上皮细胞的表达与对照组无显著差异(P0.05)。实验组3种凝集素受体在绒毛及蜕膜的间充质细胞的表达,与对照组无显著差异(P0.05)。结论:米非司酮可能通过下调蜕膜上皮组织中WGA受体、RCA受体和ECL受体的表达,阻碍胚胎发育而导致流产。