生长激素联合氟尿嘧啶对生长激素受体不同表达胃癌细胞株的影响

目的: 研究重组人生长激素(rhGH)联合氟尿嘧啶(5-FU)在体外对生长激素受体(GHR) 不同表达状态人胃癌细胞株的影响. 方法: 选用GHR高表达的SGC-7901和GHR低表达的MKN-45胃癌细胞株.每种细胞株分为空白对照组、5-FU处理组、rhGH处理组和联合处理组.采用四基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术,分析不同浓度rhGH及其与5-FU合用,对人胃癌细胞株的生长抑制、凋亡、细胞周期和增殖指数(PI)等的影响. 结果: SGC-7901细胞株:与空白对照组比,各浓度rhGH组的生长率、G2/M期比例和PI显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与5-FU处理组比, 各浓度rhGH+5-FU组的G2/M期比例和PI显著升高,抑制率和细胞凋亡率显著降低(P<0.05).MKN-45细胞株:不同浓度rhGH对该细胞株的分裂增殖无明显影响(P>0.05).联合处理组与5-FU处理组间的细胞抑制率、凋亡率和PI也无显著性差异(P>0.05). 结论: rhGH在体外能促进高表达GHR的胃癌细胞增殖,减弱5-FU的抗癌作用,但对低表达GHR的胃癌细胞无明显影响,也不能明显干扰5-FU的抗癌作用.     

重组人生长激素体外干预人肝癌细胞生长及受体表达

目的研究体外环境下重组人生长激素（rhGH）对生长激素受体（GHR）不同表达状态的人肝癌细胞株增殖、凋亡及其细胞膜表面GHR密度的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HepG-2、SMMC7721和QGY-7701,采用免疫细胞化学方法检测这3种肝癌细胞GHR的表达。每种肝癌细胞根据不同处理分为4组：未处理组、50ng／mlrhGH干预组、100ng／mlrhGH干预组、200ng／mlrhGH干预组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）荧光染色法、酶联免疫吸附法分析不同浓度rhGH对人肝癌细胞系的细胞生长、增殖、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）分泌等的影响。流式、放射性受体分析方法检测rhGH处理后细胞膜表面GHR表达情况。结果细胞株HepG-2高表达GHR;与未处理组相比,50、100、200ng／mlrhGH干预24h后生长率明显增高为：107．705％、114．181％、107．406％（P〈0．05）,48h后生长率明显增高为：109．594％、114．156％、109．292％（P〈0．05）;CFSE荧光强度明显减弱（P〈0．05）;50、100、200ng／mlrhGH干预组24h后下游蛋白IGF-1分别为（236．94±19．07）、（247．16±14．56）、（217．94±33．61）pg／ml,明显高于未处理组的（173．86±27．46）pg/ml（P〈0．05）;50、100、200ng／mlrhGH干预后,流式细胞术检测胞膜表面GHR表达情况,荧光强度较未处理组明显增加（P〈0．05）;放射性受体分析法检测50、100、200ng／mlrhGH干预后胞膜表面GHR位点数（10^3／细胞）分别为：8．44±0．24、9．40±0．51、8．33±0．31,明显多于空白对照组的7．51±0．54（P〈0．05）。细胞株SMMC7721弱表达GHR,细胞株QGY-7701未表达GHR,与未处理组比,rhGH干预组生长率、CFSE荧光强度、下游蛋白IGF-1、GHR表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论体外环境下,rhGH可以促进GHR高表达人肝癌细胞株HepG-2增殖,提高其IGF-1的表达量和增加其胞膜GHR密度;但不促进人肝癌细胞株QGY-7701、SMMC7721增殖,不能使其GHR表达状态发生改变。     

重组人生长激素体外干预人肝癌细胞生长及受体表达

24、9.40±0.51、8.33±0.31,明显多于空白对照组的7.51±0.54(P＜0.05).细胞株SMMC7721弱表达GHR,细胞株QGY-7701未表达GHR,与未处理组比,rhGH干预组生长率、CFSE荧光强度、下游蛋白IGF-1、GHR表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 体外环境下,rhGH可以促进GHR高表达人肝癌细胞株HepG-2增殖,提高其IGF-1的表达量和增加其胞膜GHR密度;但不促进人肝癌细胞株QGY-7701、SMMC7721增殖,不能使其GHR表达状态发生改变.     

重组人生长激素联合氟尿嘧啶体外干预人结肠癌细胞株增殖

目的:在体外环境下观察基因重组人生长激素(rhGH)及联合氟尿嘧啶(5-FU)干预不同细胞膜生长激素受体(GHR)表达水平对人结肠癌细胞的增殖情况。方法:采用免疫细胞化学法检测人结肠癌细胞株HCT-8和LOVO膜表面的GHR表达水平。每株细胞分为对照组、rhGH组、5-FU组和rhGH+5-FU组,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、克隆形成实验和免疫细胞化学等方法,测定各组各株肿瘤细胞的抑制率、增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化。结果:HCT-8高表达GHR(阳性表达细胞数≥50%),LOVO未表达GHR。rhGH显著提高HCT-8细胞增殖和克隆形成率,PCNA表达增加,且联合化疗后,较LOVO组肿瘤抑制率减少(P0.05)。结论:在体外环境下,rhGH促GHR阳性表达的结肠癌细胞增殖,且对5-FU化疗有抵抗,对于不表达GHR的结肠癌细胞无上述作用。     

胰岛素联合生长激素上调脓毒症大鼠肝生长激素受体的表达

目的:观察脓毒症大鼠在胰岛素联合生长激素治疗前后生长激素受体的变化。方法:将56只造模成功大鼠随机分为七组,即对照组、脓毒症组、胰岛素组、生长激素组、联合组、LY294002组和MG-132组。于给药24 h后留取肝组织标本,检测生长激素受体mRNA和蛋白含量。结果:联合组较生长激素组脓毒症大鼠肝生长激素受体mRNA和蛋白含量增加。阻断PI3K和泛素蛋白酶体途径后,生长激素受体mRNA和生长激素受体蛋白均较联合组表达减少。结论:脓毒症时,胰岛素可通过PI3K信号上调肝细胞的生长激素受体水平,其作用可能与泛素蛋白酶体有关。     

人生长激素对结肠癌细胞株细胞周期动力学的影响

目的：了解人生长激素（ｈＧＨ）对于结肠癌细胞有无促增殖和分化作用。方法：取对数生长期的人结肠癌细胞株ＬＯＶＯ,以顺铂和（或）不同浓度的ｈＧＨ体外培养,２４ｈ后以流式细胞增殖周期及细胞凋亡等指标。结果：同时加顺铂和ｈＧＨ培养细胞,癌细胞群在Ｇ２－Ｍ期发生阻滞,细胞凋亡率增加,Ｓ期细胞数率非常显著地降低;加ｈＧＨ１００ｎｇ／ｍｌ组Ｇ０－Ｇ１期九率降低,Ｓ期百分率增高。结论：ＬＯＶＯ细胞表面可能有ｈＧＨ     

重组人生长激素促进肝癌血管新生的体外研究

目的: 观察重组人生长激素(rhGH)通过不同生长激素受体(GHR)表达的肝癌细胞株,对共培养的人脐静脉内皮细胞(ECV)增殖的影响. 方法:用免疫细胞化学方法筛选GHR阳性和阴性的细胞株,分别与ECV共培养.以不同浓度的rhGH(50和250 ng/mL、空白对照)进行干预.用流式细胞仪检测细胞周期比例,ELISA法测定肝癌细胞分泌的血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,描绘细胞生长曲线. 结果:Bel-7402(GHR阳性)在rhGH干预后分泌VEGF水平提高,与之共培养的ECV生长加速,细胞S期比例显著升高,呈现rhGH浓度依赖性(P<0.05).而SMMC-7721(GHR阴性)虽能促进ECV增殖,但不受rhGH影响,分泌的VEGF无变化(P>0.05). 结论:rhGH可诱导GHR( )肝癌细胞分泌VEGF,间接促进血管内皮细胞增殖.     

生长激素联合氟尿嘧啶对结肠癌LOVO细胞影响的实验研究

目的: 探讨生长激素(GH)联合氟尿嘧啶(5-Fu)在体外对结肠癌LOVO细胞的影响. 方法: 将培养的结肠癌LOVO细胞分为对照组、GH组、5-Fu组和GH+5-Fu组,GH组又按剂量分为两个亚组,即GH1终浓度为50 ng/mL和GH2终浓度为100 ng/mL;GH+5-Fu组又按剂量分为两个亚组,即GH1+5-Fu(GH 50 ng/mL+5-Fu 100 μg/mL)和GH2+5-Fu(GH 100 ng/mL+5-Fu 100 μg/mL),加入不同浓度的处理液后24、48和72 h,分别行四基偶氮唑蓝(MTT)比色观察,计算细胞存活率.并于加入不同浓度的处理液24 h后,以流式细胞仪测定细胞周期和凋亡情况.结果: 5-Fu组和GH+5-Fu组与对照组比较,细胞存活率明显下降(P＜0.05).GH+5-Fu组与单用5-Fu组比较,细胞生存率均有所降低,但各时间段无显著性差异(P＞0.05).GH组与对照组比较,S期细胞百分比和增殖指数(PI)均增加(P＜0.05),G_0/G_1细胞百分比有所减少(P＜0.05).GH+5-Fu组的S期细胞百分比和PI均降低(P＜0.05).5-Fu组和GH+5-Fu组的细胞凋亡率均升高(P＜0.05);GH+5-Fu组与5-Fu组比较,S期细胞百分比、PI和凋亡率均无显著性差异(P＞0.05). 结论: rhGH体外作用于结肠癌LOVO细胞,未刺激细胞生长,GH与化疗联合用是安全的.     

重组人生长激素治疗肿瘤的安全性

生长激素(growth hormone,GH)是由脑垂体前叶分泌的一种非糖基化蛋白质激素,主要生理功能是刺激代谢、促进蛋白质合成和脂肪降解,整体表现为促进组织、器官、骨骼和机体的生长发育。重组人生长激素(rhGH)与天然人类GH的分子结构和性     

重组人生长激素联合心理干预治疗特发性矮小症效果评价

探讨重组人生长激素联合心理干预治疗特发性矮小症的临床效果,为特发性矮小症的治疗提供参考.方法 将恩泽医院收治的80例特发性矮小症患儿随机分为对照组和观察组,每组40例;对照组给予常规营养支持,观察组在此基础上给予重组人生长激素联合心理干预治疗;比较2组患儿治疗前后的心理状况、胰岛素生长因子1(IGF-1)、胰岛素生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)、生长参数及并发症等.结果 治疗后,观察组患儿的情绪稳定性和汉密顿焦虑量表(HAMA)得分(3.49± 1.25,7.52±2.48)均低于对照组(5.63±1.53,10.84±2.73)(t值分别为6.85,5.69,P值均<0.01);观察组患儿的IGF-1[(329.53±104.44) ng/mL],IGFBP-3[(4.07±1.18) μg/L]水平均明显高于对照组[(207.36±75.38)ng/mL,(3.31±0.94) μg/L](t值分别为6.00,3.19,P值均<0.01);观察组患儿的年生长速度、预测成年身高[(9.45±2.38)(169.27±8.36) cm]均明显高于对照组[(5.96±1.62) (164.41±9.54) cm](t值分别为7.67,2.42,P值均<0.05);2组治疗过程中的并发症发生率差异无统计学意义(12.5%,17.5%,P>0.05).结论 特发性矮小症患儿实施重组人生长激素联合心理干预治疗可缓解焦虑、稳定情绪、提高IGF-1和IGFBP-3水平,促进生长发育.     

番茄红素对人前列腺癌细胞生长的影响

目的：观察番茄红素对体外培养的人前列腺癌DU－145和LNCaP细胞存活率、细胞周期和凋亡的影响。方法：用MTT检测番茄红素对DU－145和LNCaP细胞作用的时间效应和剂量效应;流式细胞仪观察番茄红素处理人前列腺癌细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变。结果：番茄红素对DU－145细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率可达78％,并有剂量-效应关系。流式细胞仪分析显示,番茄红素可影响该细胞周期并引起细胞凋亡,凋亡率最高达42．42％。而对LNCaP细胞作用不明显。结论：番茄红素对人前列腺癌细胞DU－145具有直接抑制作用,其抑制机理是通过影响人前列腺癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。本研究同时也显示番茄红对激素不依赖型细胞DU－145作用较激素依赖型细胞LNCaP敏感。     

重组人生长激素治疗垂体性侏儒症对身高骨骼和器官发育的影响

目的　研究国产和进口重组人生长激素 (rhGH)治疗垂体性侏儒症 (生长激素缺乏症 ,GHD)的促身高效应 ,骨龄和肺功能的变化。方法　应用国产rhGH 67例 ,进口 19例。剂量rhGH 0 1IU·Kg-1 ·d-1 ,疗程 6个月 ,使用进口rhGH 19例患者进行 2年的GH疗法 ,第 2年合用绒毛膜促性腺激素或庚酸睾酮 ,了解其 2年中身高年龄增加与骨龄增加的关系。其中 10例在治疗前、治疗后 6个月、12个月进行肺功能的检测。结果　rhGH对这些患儿体格的线性生长有显著促进作用 (P <0 0 0 1) ,国产rhGH治疗 6个月生长速率和进口的相似 (P >0 0 5 )。rhGH 2年疗法的对象 ,患者治疗前、治疗后不同阶段的HA皆和BA呈正相关。 10例观察肺功能的对象 ,肺活量 (VC) ,最大通气量 (MVV)治疗后 12个月均比治疗前明显增加 ( P <0 0 5 )。结论　国产和进口rhGH皆是治疗GHD的有效药物 ,两者的疗效相似。单用rhGH和合用性激素治疗均对GHD有明显的促线性生长作用 ,后者疗效更佳。它们在促身高增加的同时也促骨龄成熟 ,两者平行。rhGH有明显的促器官发育和增加肌力作用 ,身高年龄增加 ,骨龄增加与肺功能改善三者呈平行线性关系。     

抑癌基因Deleted in Liver Cancer1在人胶质瘤细胞株中的作用及机制

目的探讨抑癌基因DLC1表达的isoform1及isoform2两个亚型在人胶质瘤细胞株中的表达、功能及机制。方法RT-PCR方法检测体外培养的胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44中DLC1isoform1,2的mRNA水平;10μM5-aza-2'-de-oxycytidine(5'-AZA)或者共含有500nMtrichostatinA(TSA)处理细胞36h,检测DLC1isoform1,2的表达;MTT方法检测转染DLC1isoform2及没有GAP活性的isoform2突变体DLC1-K714E表达质粒对胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44增殖的影响。结果在U87-MG细胞株中没有检测到DLC1isoform1;在SHG-44中检测到微量的DLC1isoform1,5'-AZA或者共含有TSA处理使其表达上调;DLC1isoform2在上述细胞株都能检测到,5'-AZA或者共含有TSA处理细胞未改变其表达水平;过表达DLC1isoform2及其突变体DCL1-K714E促进U87-MG和SHG-44细胞株增殖。结论DLC1isoform1在胶质瘤细胞株中不表达或低表达,可能原因是由于不转录或者启动子发生甲基化。DLC1isoform2有一定的表达水平,高表达的DLC1isoform2促进胶质瘤细胞增殖,且不依赖GAP活性。     

双酚A对人胚肝细胞凋亡的影响

[目的]研究双酚A(BPA)对人胚肝L-02细胞的凋亡的影响。[方法]以MTT来分析不同浓度BPA对人胚肝L-02细胞的细胞存活率的影响;用流式细胞术分析不同浓度BPA对细胞凋亡的影响;通过RT-PCR分析BPA引起的生长抑制、DNA损伤基因GADD45、GADD153、GADD34表达水平的变化。[结果]BPA处理后,L-02细胞的生存率随着BPA浓度的增加而下降,在≥50μmol/L,细胞的存活率显著降低(P<0.01)。随着BPA浓度升高,细胞凋亡率增加,≥50μmol/L可显著升高L-02细胞的凋亡率(P<0.01)。生长抑制DNA损伤基因GADD45、GADD153.GADD34表达水平随着BPA浓度增加表达量也增加,100μmol/LBPA组显著高于正常对照组,但在100μmol/L,BPA+VitC组三种GADD基因表达量均稍降低。[结论]BPA对L-02细胞具有细胞毒性作用,可导致细胞凋亡率升高,与细胞生长调控和DNA损伤相关的GADD45、GADD153、GADD34基因表达升高,VitC可减缓BPA对DNA的损伤作用。     

茶多酚抑制肝癌细胞生长的体外实验

观察了茶多酚对人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１生长和核分裂的影响。当培养液中茶多酚浓度为２５μｇ／ｍｌ和５０μｇ／ｍ１时，肝癌细胞的生长和核分裂均受到抑制，这种抑制作用随茶多酚浓度的增加而增强．     

左旋肉毒碱对肝功能储备和肝癌生长的影响

目的探讨脂肪代谢促进剂左旋肉毒碱对肝功能储备和肝癌生长的影响。方法临床确诊的原发性肝癌合并肝硬化患者26例,按入院先后次序交替地分为对照组和治疗组。对照组11例,接受基础护肝治疗。治疗组15例,接受左旋肉毒碱和与对照组相同的基础护肝治疗。两组患者均在治疗前和治疗后30天做肝脏CT检查,计算肿瘤月增长率;在治疗前、治疗后15和30天,测定血清白蛋白、总胆红素、谷丙转氨酶、凝血酶原时间。结果两组患者的肿瘤月增长率差异无显著性;治疗组的血清白蛋白、谷丙转氨酶、凝血酶原时间的恢复状况显著优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论左旋肉毒碱可以显著改善肝功能储备,具有显著的护肝作用。左旋肉毒碱对肝癌的生长既无促进作用也无抑制作用。     

选择性COX-2抑制剂对大肠癌细胞生长的影响

目的　观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT -2 9细胞增殖和凋亡的影响 ,为治疗结肠癌寻找安全有效的化疗药物。方法　采用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,流式细胞仪 (FCM)、吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜等技术 ,研究塞来昔布对HT -2 9细胞增殖和凋亡的影响。结果　MTT比色法显示体外塞来昔布抑制HT -2 9细胞生长 ,呈浓度和时间依赖性。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率在 ( 7 3 1± 2 3 7) %～ ( 4 8 3± 2 86) %;使G0 /G1 期细胞比例升高 ,S期和G2 /M期比例下降 ,呈一定剂量依赖关系。荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变 :细胞体积缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。结论　体外塞来昔布抑制HT -2 9细胞增殖 ,并诱导细胞凋亡。这种作用可能与阻止细胞周期进展有关     

叶酸在体外对人肝癌细胞株生长的影响

目的研究叶酸的抑癌防癌作用,用叶酸在体外对人肝癌细胞SMMC-7721进行处理.方法采用生长曲线法、MTT法研究叶酸对细胞的增殖和功能的影响;采用FCM进行细胞周期分析研究叶酸对细胞凋亡的影响.结果提示在叶酸浓度达13.5×10-5mol/L和40.5×10-5mol/L时对人肝癌细胞株的增殖和功能有抑制作用,40.5×10-5mol/L时引起的凋亡率可达27.3%.结论叶酸对脐静脉内皮细胞无抑制作用,表明叶酸对正常人体细胞无不良影响而对癌细胞有抑制作用.     

微囊藻毒素-LR对人肝癌HT17细胞周期及细胞凋亡的影响

目的 研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对人肝癌HT17细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 调整HT17细胞密度为1×104/孔,分别设终浓度为0(溶剂对照,0.1%DMSO)、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、2.0、5.0μmol/L的MC-LR染毒组和去铁敏(DFO,1 mmol/L)染毒组以及...