酶联免疫吸附法检测唾液中幽门螺杆菌抗体的价值

幽门螺杆菌(Hp)被认为是人类最常见的慢性感染菌.在我国人群感染率达50%～80%[1].临床及流行病学调查检测Hp感染,特别需要寻求一种简便、价廉,患者易耐受的诊断方法.国外应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HpIgG来诊断Hp感染结果满意[2].朱人敏 et al[3]报道应用人胃Hp制成特异性抗原,免疫检测唾液中Hp抗体,结果临床证明也有价值.我们采用Cortecs公司提供试剂盒,选择部分患者观察该方法检测的准确性.     

幽门螺杆菌重组VacA-HpaA IgY的制备

目的:采用基因工程技术大量表达、提纯幽门螺杆菌(H pylori)细胞空泡毒素毒性片段,和黏附素片段的融合蛋白,以此为抗原,制备高效价的抗VacA-HpaA蛋黄抗体(IgY)．方法:大量培养重组菌pQE30-VacA-HpaA- DH5α,诱导表达获得融合蛋白VacA—HpaA, Ni2 -NTA树脂纯化．将纯化的重组蛋白免疫鸡,水稀释法提取IgY,硫酸铵沉淀法纯化浓缩VacA—HpaA IgY．ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化,SDS—PAGE分析纯度, Bradford法测定蛋白含量,Western blot检测其分别对VacA和HpaA抗原的特异性,ELISA法检测效价．结果:重组蛋白主要以包涵体形式表达,免疫鸡后提取的IgY可与该蛋白发生免疫反应, IgY效价总体上随免疫时间增加而升高．经纯化、浓缩后,获得纯度为60％左右,效价为1: 12 800的VacA-HpaA IgY,蛋白浓度为22 g／L, Westem blot显示在Mr27 000和Mr30 000处分别有相应条带,ELISA检测与VacA和HpaA反应的效价分别为1:3200和1:6400(P<0．01)．结论:成功制备了高浓度、高效价的抗重组VacA-HpaA的特异性IgY．     

应用酶联免疫吸附试验测定克汀病患者血清中抗甲状腺球蛋白抗体

酶联免疫吸附试验(ELISA)是七十年代一项免疫新技术,它具有较高的特异性和敏感性。目前在微生物学、血液学、寄生虫学及免疫性疾病等医学实践中得到了广泛的应用,但尚未见到有关克汀病方面的报道。我们采用酶标抗体与酶标葡萄球菌蛋白 A(SPA)两种结合物进行试验,对克汀病患者测得结果报道如下。     

关于抗幽门螺杆菌四联疗法的商榷

编辑同志 :　　幽门螺杆菌 (Ｈｐ)在各种慢性胃病发生、发展和复发方面的重要作用 ,医学界已取得共识。抗Ｈｐ治疗也提出了含质子泵抑制剂 (ＰＰＩ)二联或三联、含铋制剂 (胶体次枸橼酸铋 ,ＣＢＳ)二联或三联疗法。近年 ,有人提出了四联疗法方案 ,即把上述两类方案的主要组分加合成四联 ,亦即铋剂 ＰＰＩ 两种抗生素。并根据国内外的初步观察 ,在根除Ｈｐ的疗效上优于其它方案 ,似为目前最强的抗Ｈｐ疗法 ,只是由于经济原因 ,目前还难于广泛推广。对此四联疗法的合理性和确切疗效我们有所疑问 ,愿提出讨论和讨教。ＰＰＩ是目前最强的抑酸…     

酶联免疫法检测粪便幽门螺杆菌特异性抗原

目的：探讨酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测粪便幽门螺杆菌（ＨＰ）特异性抗原（ＨＰＳＡ）在诊断ＨＰ感染中的价值。方法：９９例患者通过快速尿素酶试验及组织学Ｗａｒｔｈｉｎ－Ｓｔａｒｒｙ银染法检测,分为ＨＰ感染组和非感染组,用酶联免疫法检测粪便中ＨＰＳＡ。结果：粪便酶联免疫法检测ＨＰ感染的敏感性为１００％,特异性为８５．７１％。结论：酶联免疫法检测粪便中ＨＰＳＡ敏感性、特异性高,且取材方便,方法简单,适合临床应用。     

阿米巴病的酶联免疫吸附试验

间接荧光抗体试验(IFT)是诊断阿米巴病最特异和最敏感的方法之一。酶联免疫吸附试验(ELISA)是近来介绍的一种既经济又方便的诊断方法。本文研究了用该法诊断阿米巴病的效果并与IFT试验作了比较。选择临床诊断并经病原检查肯定为阿米巴病的病人血清作IFT试验。将IFT滴度大于1:80的107例血清作ELISA试验。并以粪便检查溶组织阿米巴阴性的66名正常人的血清作对照。IFT试验,取多凹井载玻片,每井注满含有活的阿米巴滋养体(经Diamonds’TPS-1培养基培养后洗涤过的NIH:200株阿米巴)生理盐水悬液,空气干     

酶联免疫吸附试验诊断包虫病

本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)试管法和微量平板法检测人体包虫病的抗体。以包虫的粗抗原和纯化抗原包被聚苯乙烯试管和平板分别进行试验。在比较ELISA两法敏感性的同时,还与间接血凝试验(IHA)及双相免疫扩散试验(DD)进行比较、评价。包虫粗抗原按Bombardieri氏等的方法制备。纯化部分按Oriol氏等法,分得含A和     

酶联免疫吸附试验诊断疟疾

镜检发现疟原虫是诊断疟疾的传统方法。但这一方法仅对技术训练有素的人员才有用。因为疟原虫常被漏检,结果也不可靠。免疫试验是检出抗体和抗原的一种有效方法。同位素方法已用于疟疾抗原的分析,但放射免疫试验技术在许多实验室还不适用。本文作者企图用酶联免疫吸附试验(ELISA)代替血检法。     

粪幽门螺杆菌新酶联免疫检测的一种新方法

最近已研究出一种免疫亲和力纯化的多克隆抗幽门螺杆菌(Ｈｐ)兔抗体,可用以检测粪Ｈｐ抗原(ＨｐＳＡ)。本文旨在评价这种检测的应用价值,并按照接受器运算特征(ＲＯＣ)曲线试图确定适用的分界值。方法３４９例受检者中１８３(男１３４,女４９)例[年龄(５３．２±１１．１)岁]未接受抗Ｈｐ感染治     

酶联免疫法定量检测幽门螺杆菌抗体的研究

对73例十二指肠溃疡和胃炎进行血清抗HP抗体定量测定,结果以尿素酶试验和胃粘膜涂片同时阳性作为HP阳性标准,判断血清抗体法检测HP阳性符合率,以同样方法判断血清抗体法阴性符合率.在尿素酶和胃粘膜涂片阳性39例中,抗HP-IgG抗体阳性35例,阳性符合率为89%;尿素酶和胃粘膜涂片阴性34例中,30例阴性,阴性符合率为88%,5例在临界值范围.经卡方检验差别无显著性(P>0.05).抗HP-IgG定量方法的测定比定性方法更准确.定量方法可得出具体数据,可以判断患者感染细菌时间长短以及反映机体对HP免疫力强弱.HP血清学检查可用于观察抗HP疗效及HP普查.本操作每次应设阴阳性对照,用标准品作为定量标准,标本定量应在24h内完成,以免HP-IgG效价降低,若放置低温冰箱,应避免反复冻融.     

应用多聚酶链反应评价抗幽门螺杆菌治疗效果

幽门螺杆菌(HP)被认为是慢性活动性胃炎的主要病因,该菌可能参与了消化性溃疡的发病过程.且与十二指肠的复发密切相关.因此临床上对HP相关性胃肠疾患给予抗HP治疗就显得很有必要.目前,抗HP治疗方案各异,治疗后判断HP是否被根除,目前尚无统一的检测评价标准.有联合使用细菌培养和组织学检查作评价标准的,也有采用尿素     

多聚酶链—酶联免疫吸附测定方法

多聚酶链－酶联免疫吸附测定方法陈朝红刘志红关键词多聚酶链反应酶联免疫吸附测定法亲合杂交中图法分类号Ｒ４４６．６１多聚酶链反应（ＰＣＲ）是分子生物学技术中检测ＤＮＡ最灵敏的方法之一［１］，而酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）又是免疫学中最敏感性和特异性检...     

酶联免疫吸附试验检测梅毒患者血清中抗苍白螺旋体IgM抗体

目的评价抗苍白螺旋体IgM抗体检测对梅毒的临床意义.方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)对72例梅毒患者检测了特异性IgM抗体,并与快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较分析.结果血清抗苍白螺旋体IgM抗体在一期梅毒的阳性率为73.3%(11/15),在二期梅毒的阳性率为88.9%(16/18),二者差异无显著的统计学意义(χ2＝1.6363,P＞0.10).在潜伏梅毒,IgM抗体阳性率为26.1%(6/23),非常显著地低于早期显性梅毒(χ2＝17.6189,P＜0.005).在一期、二期和潜伏梅毒,RPR和TPPA的阳性率均为100%.入组前2～24个月已经正规抗梅治疗的梅毒16例,其中IgM抗体阳性2例.结论 ELISA法检测特异性IgM抗体诊断一期梅毒并不优于RPR和TPPA.IgM抗体在潜伏梅毒敏感性低,其诊断应依靠RPR和TPPA.目前不推荐单独检测抗梅毒IgM抗体来监测病情和判断疗效.抗苍白螺旋体IgM抗体的临床意义有待更深入的研究.     

抗幽门螺杆菌治疗探讨

幽门螺杆菌(Hp)为革兰阴性菌，早在1874年在胃内发现螺形菌，直到1983年从人体胃粘膜中分离培养出该细菌后，引起人们重视。世界范围内50％～70％的成年人有Hp感染，我国约有60％～80％之间。经近20多年研究，已有大量的资料表明Hp感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的发生有关，所以Hp的治疗具有重要的临床意义。     

抗幽门螺杆菌治疗近况

幽门螺杆菌(Helicobacter—pylori;HP)在人群中的感染率颇高,各地流行病学调查报告不一,西方人群中约40%,东方发展中国家在50%以上。自从1983年Warren和Marshall培养成功HP,并提出其与慢性胃炎有密切关系后,国内外广泛地开展了研究。有报道慢性胃炎病人HP检出率为78.6%,活动期达95.45%,抗HP治疗根除该菌后,不仅胃炎症状,内镜下表现好转,而且病理组织学检查亦相     

扶正祛邪联合四联根除方案抗幽门螺杆菌的临床研究

[目的]观察以扶正祛邪为主的中药联合抗幽门螺杆菌(Hp)四联根除方案治疗Hp的根除率、症状改善及不良反应发生情况.[方法]以2011年1月～2012年12月在我院治疗的门诊或住院Hp感染患者60例,随机分为观察组和对照组.观察组接受扶正祛邪的中药方剂+四联根除方案,对照组接受单纯四联根除方案,疗程均为7d.比较2两组患者Hp根除率、主要症状改善及不良反应发生率等.[结果]2组患者用药后症状均有好转,观察组患者的上腹痛及反酸改善明显优于对照组(P＜0.05);Hp根除率(93.33％)明显高于对照组(73.33％)(P＜0.05).观察组有4例患者发生不良反应,对照组有5例发生不良反应,均未影响后续治疗.[结论]以扶正祛邪为主的中医药联合四联根除方案治疗Hp感染具有明显的优势,可明显提高Hp根除率,明显改善患者的上腹痛和反酸等症状,不良反应小.     

人红细胞胰岛素受体自身磷酸化的酶联免疫吸附测定

目的建立人红细胞胰岛素受体自身磷酸化测定法。方法应用合成的磷酸酪氨酸钥孔帽贝血蓝蛋白（ＰＹＫＬＨ）免疫家兔得到抗血清，将纯化的抗磷酸酪氨酸抗体作为第一抗体，羊抗兔Ｉｇ酶结合物（辣根过氧化物酶标记）作为第二抗体，建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定法。结果批内变异系数为８．４％，批间变异系数为９．０％。２０例健康人的红细胞ＩＲ的自身磷酸化活性，测定值为０．１５０±０．０２２ｎｍｏｌＰＹ／ｍｇ受体蛋白。在体外，胰岛素在１０－６ｍｏｌ／Ｌ时对自身磷酸化达到最大激活。结论用酶免法测定人红细胞胰岛素受体灵敏、特异、简便，为胰岛素作用机制的理论研究、胰岛素受体基因突变的检测和糖尿病及其它胰岛素抵抗综合症的病因及治疗的探讨提供了有效的方法。     

微量酶联免疫吸附试验测定恶性疟患者抗体的特异性

作者用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定疟疾病人和在流行区居民的抗体。收集恶性疟原虫感染的红细胞(50～100%为滋养体和裂殖体)和游离的原虫,经洗涤、离心超声等处理后,获得抗原。有些试验中用~(35)S-蛋氨酸代谢标记培养中的恶性疟原虫抗原进行试验,另以正常人体红细胞溶血后的细胞膜制备红细胞抗原与疟原虫抗原平行进行试验。抗IgG、抗IgM免疫球蛋白碱性磷酸酶     

酶联免疫吸附测定法检测抗髓过氧化物酶IgG亚型分布及其临床意义

目的：观察抗髓过氧化物酶（MPO）IgG各亚型（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)在小血管炎患者的分布及其与临床病情的关系,以探讨IgG亚型是否能更准确地反映病情变化。方法：选取30例抗MPO抗体阳性的原发性小血管炎患者,对其活动期和缓解期血清采用抗原特异性ELISA法分别测定活动期抗MPO IgG各亚型的阳性率及缓解期的转阴率,并与抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）总IgG的变化进行对比。结果：临床活动期抗MPO－ANCA IgG的4种亚型均为阳性,以IgG4最高;而缓解期以IgG1和IgG3下降为著,其中IgG3的转阴率最高,且显著高于总IgG。结论：IgG3的变化与病情活动密切相关,在一定程度上可以代替总IgG监测病情的发展。IgG4在疾病的活动期与缓解期都显著增高,可能与反复的抗原刺激和慢性的免疫反应有关。