组织因子、凝血功能紊乱与肝缺血再灌注损伤

近年来，随着临床治疗技术的发展，使许多组织、器官缺血后重新得到血液灌注，损伤结构得以修复。但在有些情况下，经过一定时间缺血的组织和器官的功能，在得到血流再灌注时，出现了明显障碍，导致原有的缺血性损伤进一步加重或出现新的损伤，即缺血一再灌注损伤（ischemia-reperfusion iniury，IRI）。近年来研究表明，     

肝缺血再灌注损伤与NF-κB

核转录因子-κB(Nuclear Factor-Kappa B,NF-κB)是一种重要的转录因子,近年来的研究表明,在炎症反应、免疫反应及细胞凋亡中起重要作用,在肝缺血再灌注损伤过程中亦至关重要。现就NF-κB及其在肝缺血再灌注损伤过程中的作用机制作一综述。     

NF-kB在大鼠肝缺血再灌注损伤中的活化及意义

目的探讨NFkB在肝缺血再灌注损伤过程中的作用。方法选择健康雌性Wistar大鼠24只,随机分为手术对照组,肝缺血90min组,肝缺血90min/再灌注120min组,每组8只。常规方法观察肝脏组织学改变,检测血清酶学水平和肝组织中髓过氧化物酶(MPO)含量,采用sABC免疫组织化学方法测定肝组织中NFkB的活化程度。结果手术对照组肝组织形态正常,无NFkB活化,肝功能酶学和MPO正常水平;缺血组动物肝细胞索排列紊乱,肝小叶变形,肝细胞和内皮细胞普遍水肿变性,NFkB呈中重度活化,血清酶学和MPO水平升高(P<0.01);肝缺血/再灌注组肝组织在缺血组改变基础上合并中央区局灶性肝细胞坏死,血窦内微血栓形成,汇管区中性粒细胞浸润,NFkB活化最为明显,血清酶学和MPO升高最为显著(P<0.01)。结论肝缺血再灌注时,NFkB被活化,使中性粒细胞组织浸润,对肝脏缺血再灌注损伤病理过程起到重要的作用。     

MG132对核因子-κB介导的大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

肝脏缺血再灌注时,细胞因子、黏附分子等炎症介质趋化聚集中性粒细胞,使它在肝组织中释放大量蛋白水解酶及氧自由基。核因子-κB(NF-κB)能够转录调节再灌注时诱导表达的炎症介质编码基因。NF-κB受到活化时,需要抑制因子核因子一κB抑制蛋白(IκB)的降解,而蛋白酶体抑制剂通过抑制泛素一蛋白酶体途径,减少I κB在蛋白酶体中的降解。本实验采用肝脏部分缺血再灌注模型,研究蛋白酶体抑制剂MG132对NF κB介导的肝缺血再灌注损伤中的保护作用。     

核因子-κB及其与心脏缺血-再灌注

核因子-κB（nuclear factor-tcappaB,NF-κB）是一种具有基因转录多项调控作用的转录因子,是参与炎症反应的一个重要转录因子,广泛存在于真核细胞中参与许多基因表达的调控。Sen和Baltimore1986年首先从B淋巴细胞核提取物中,检测到的一种能与免疫球蛋白κ链基因增强子κB序列（GCGACTTTC）特异性结合,并能促进κ基因表达的核蛋白因子,称之为核因子-κB,在此后的30年的研究中发现,NF-κB是普遍存在于细胞浆中的一种快反应转录因子,参与几十种蛋白质类细胞因子的转录,也因此而参与许多病理过程的发生与发展。     

核因子-κB与心肌缺血再灌注后无复流

冠状动脉介入或溶栓治疗后无复流的发生严重影响了急性心肌梗死患者的预后,其分子机制已经成为目前研究的热点.核因子-κB介导参与缺血再灌注损伤、远端血管栓塞/微血栓形成和冠状动脉微循环障碍的个体易患性、细胞凋亡及自噬等可能是无复流发生的机制.     

核转录因子κB在大鼠小肠缺血再灌注后TNF-α诱导的肺损伤中的作用

目的 观察核转录因子κB(NF-κB)在大鼠小肠缺血再灌注(I/R)后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的肺损伤中的作用.方法 48只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、假手术组、对照组和实验组,建立小肠I/R模型,于I/R后24 h取材,采用组织病理学、免疫组织化学染色技术和图像分析技术,观察肺组织病理学改变和NF-κB的表达.结果 NF-κB的阳性表达位于肺泡上皮细胞胞核或者胞浆,其表达强度实验组高于对照组、假手术组和正常组(P＜0.05).结论 NF-κB参与到大鼠小肠I/R损伤后TNF-α诱导的肺上皮细胞凋亡中的病理变化过程中.     

核因子-κB与心肌缺血再灌注损伤

核因子-κB（NF-κB）是一种调控多种基因转录的关键因子，在许多疾病的发生、发展中起重要作用。NF-κB的激活诱导多种炎性基因的表达，如粘附分子、细胞因子、化学趋化因子等基因的表达，而这些基因的异常表达与心肌缺血再灌注损伤关系密切。本文拟就NF-κB与心肌缺血再灌注损伤的关系作一综述。     

缺血预适应对大鼠肺缺血再灌注中NF-κB表达的影响

目的研究缺血预适应(IP)对缺血再灌注(I/R)后在体鼠肺脏NFκB表达的影响,探讨IP减轻肺脏I/R损伤的可能机制及NFκB的作用。方法雄性SD大鼠36只,随机分为3组假手术(Sham)组,缺血再灌注(I/R)组,缺血预适应(IP)组。I/R组开胸后,建立在体肺脏I/R损伤模型。在此基础上,IP组于缺血开始前,应用3个循环的5min缺血 5min灌注进行IP处理。用免疫组化法观察肺脏NFκB的表达,同时测定肺脏湿重/干重(W/D)比值,电镜下观察肺脏超微结构的改变,光镜下HE染色观察肺脏的病理形态学变化。结果IP组和I/R组相比肺脏NFκB表达有显著性差异(P<0.01),肺脏超微结构损害和肺水肿程度明显减轻。结论IP可抑制I/R损伤时肺组织中NFκB的表达,从而减轻肺脏超微结构损害和肺水肿程度,减轻肺I/R损伤。     

心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤及其与核因子-κB的关系

目的:研究心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤现象及其与核因子(NF)-κB的关系。方法:32只家兔随机分为4组(每组8只):假手术组(S组)、持续缺血组(I组)、晚期再灌注组(I/R组)、PDTC干预组(P组),建立体内心肌缺血再灌注动物模型。S组冠状动脉旷置6h,I组冠状动脉持续结扎6h,I/R组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,P组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,并于再灌注前10min静脉注入PDTC(200mg/kg)。6h后处死动物取心脏组织分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GR)含量,免疫组化指标NF-κB、IκBα,凋亡指数(AI)。结果:与S组相比,I/R组、P组和I组的SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;I/R组与I组相比,SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;P组与I/R组相比SOD、GR、IκBα升高,MDA、NF-κB、AI降低;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:心肌缺血晚期再灌注可导致梗死边缘区心肌细胞凋亡增加,提示存在再灌注损伤现象。氧化应激增强、NF-κB的过度激活可能是导致晚期再灌注损伤的重要因素。     

甘氨酸对大鼠肝移植缺血再灌注损伤库普弗细胞CD14和核因子-κB的影响

目的 探讨甘氨酸对大鼠肝移植缺血再灌注损伤库普弗细胞CD14和核因子-κB(NF-κB)的影响。 方法 将大鼠分为肝移植缺血再灌注组、等渗盐水预处理组、甘氨酸预处理组,检测再灌注后受体存活率、肝脏功能和病理组织学改变。分离培养再灌注后库普弗细胞,检测细胞CD14 mRNA的表达、NF-κB活性、培养上清液肿瘤坏死因子α和白细胞介素-1分泌情况。 结果 甘氨酸预处理能明显提高大鼠术后1周存活率(x2值分别为6.67和8.57,P值均<0.0 1)、改善肝功能、减轻肝脏病理组织学改变;甘氨酸预处理能明显下调库普弗细胞CD14 mRNA的表达(F=7.64,P<0.01)、降低NF-κB活性(F=11.47,P<0.01)、减少上清液肿瘤坏死因子α和白细胞介素-1分泌(F值分别为14.08和9.56,P值均<0.01)。 结论 甘氨酸能够有效地减轻肝移植后缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制库普弗细胞CD14表达和NF-κB活性、减少肿瘤坏死因子α和白细胞介素-1的分泌有关。     

Effect of ONO-4057 and tacrolimus on ischemia-reperfusion injury of the liver

AIM: To investigate the effects of a novel Leukotriene B4 receptor antagonist and/or tacrolimus on ischemiareperfusion in a rat liver model.METHODS: Male Lewis rats were pretreated with ONO-4057 (100 mg/kg) and/or tacrolimus (1 mg/kg) orally, and divided into four experimental groups; group 1 (control), group 2 (ONO-4057), group 3 (tacrolimus),group 4 (ONO-4057 + tacrolimus).RESULTS: There was a tendency for long survival in the groups treated with tacrolimus alone and ONO-4057 plus tacrolimus. Post-reperfusion serum aspartate aminotransferase levels decreased more significantly in ONO-4057 plus tacrolimus group ( P < 0.01), than in the tacrolimus alone group ( P < 0.05), compared to controls. CONCLUSION: This study demonstrated that pretreatment with ONO-4057 in combination with tacrolimus produced additive effects in a rat model of liver ischemia- reperfusion injury.     

缺血再灌注过程中肝细胞自噬研究进展

自噬(autophagy)是真核细胞进行代谢过程中特有的生命现象,在细胞存活与死亡中是把双刃剑,既能促进其存活也会导致细胞死亡,对于多种疾病的发展和治疗产生重要的影响。近来研究表明,自噬对于指导肝缺血再灌注损伤治疗的方法意义重大,为寻找其干预措施开拓了特殊的思路。     

p38信号转导途径对离体肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 研究离体肝脏缺血再灌注期间p38信号转导途径的激活对其损伤程度的影响。 方法 通过自行建立的兔离体肝脏缺血再灌注模型,将一定剂量的特异性p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB202190加入到保存液中,根据原位灌注液及保存液中加入SB202190的剂量再将离体肝分为A、B、C、D4组。分别于冷保存前、冷保存末及再灌注5、10、15、30、60、120 min获取离体肝组织及受体兔静脉血液标本。分别应用免疫印迹杂交和免疫沉淀法测定离体肝组织磷酸化p38M A P K的活性。用全自动生化分析仪测定离体兔肝功酶学含量;并测定再灌注120 min内的胆汁分泌总量。 结果 在正常肝组织中p38 MAPK即有一定的基础活性;经冷保存后有一定的升高,再灌注10 min时达到峰值,然后逐渐下降,至再灌注120 min时降低至正常水平,而在冷保存液中加入SB202190后,再灌注期间p38 MAPK的活性受到显著性抑制,其中B、C、D组p38 MAPK活性峰值仅分别为A组的53.9％,12.8％,9.6％;再灌注期间各组受体肝酶学水平均表现为A>B>C>D,而胆汁分泌量表现为A相似文献   

灯盏花素对肝脏缺血再灌注损伤大鼠肝脏和肠黏膜屏障功能的保护作用*

目的 探讨灯盏花素对肝脏缺血再灌注损伤（IRI）大鼠肝脏和肠黏膜屏障功能的保护作用。方法 随机将45只SD大鼠分为对照组、模型组和灯盏花素干预组,制备肝脏缺血再灌注损伤和肠缺血再灌注损伤模型,采用ELISA法检测肠黏膜分泌型（S）IgA和血浆内毒素水平,检测肠组织诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、内皮型一氧化氮合成酶 （eNOS）和一氧化氮（NO）水平,使用试剂盒检测血浆降钙素原（ PCT）、二胺氧化酶（DAO）、TNF-α和IL-1β,采用Western Blotting法检测肝组织Toll样受体-4（TLR4）和核因子（NF）-κB表达水平。结果 模型组大鼠肠粘膜SlgA水平为（0.2±0.1）μg/kg,显著低于对照组【（0.7±0.1）μg/kg,P<0.01】,血清内毒素水平为（0.8±0.1）EU/ml,显著高于对照组【（0.2±0.1） EU/ml,P<0.01】,肠组织iNOS为（0.7±0.1） U/g,显著高于对照组 【（0.2±0.1） U/g,P<0.01】,而eNOS为（0.2±0.1） U/g,显著低于对照组【（0.4±0.1）U/g,P<0.01】, NO为（0.2±0.1）μmol/g,显著低于对照组【（0.4±0.0）μmol/g,P<0.01】, PCT为（5.0±1.2） ng/ml,显著高于对照组【（3.5±0.98）ng/ml,P<0.01】,DAO为（10.5±1.6） Ku/l,显著高于对照组【（6.5±1.2） Ku/l,P<0.01】;灯盏花素干预组SlgA为（0.7±0.1）μg/kg,显著高于模型组【（0.2±0.1）μg/kg,P<0.01】,内毒素为（0.3±0.1） EU/ml,显著低于模型组【（0.8±0.1） EU/ml,P<0.01】,iNOS 为（0.3±0.1） U/g,显著低于模型组 【（0.7±0.1） U/g,P<0.01】, eNOS为（0.8±0.2） U/g,显著高于模型组【（0.2±0.1）U/g,P<0.01】,NO为（0.8±0.1）μmol/g,显著高于模型组【（0.2±0.1）μmol/g,P<0.01】,PCT为（3.9±1.0） ng/ml,显著低于模型组【（5.0±1.2） ng/ml,P<0.01】,DAO为（7.5±1.3） Ku/L,显著低于模型组【（10.5±1.6） Ku/l,P<0.01】;模型组大鼠肝组织TLR4和NF-κB表达及血清TNF-α和IL-1β水平显著高于对照组（P<0.01）,而灯盏花素干预组大鼠肝组织TLR4和NF-κB及血清TNF-α和IL-1β水平显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 灯盏花素通过促进eNOS／NO表达和下调TLR4和NF-κB表达能降低血浆内毒素对肝脏的损伤,对IRI动物具有保护作用。     

保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法对大鼠肝血缺再灌注损伤的影响.方法:将96只Wistar大鼠随机分为Pringle法Ⅰ组、半肝阻断Ⅱ组和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断Ⅲ组.阻断肝血流30 min后,去血管夹恢复血流,分别于再灌注后1,2,6,24 h,抽血检测ALT和AST水平,然后取肝组织用于检测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量、肝脏病理学及肝细胞凋亡.结果:与Ⅰ组比较Ⅱ组和Ⅲ组再灌注后各时间点,ALT,AST,肝组织MDA含量及细胞凋亡率显著降低,肝组织SOD活力明显升高.Ⅲ组肝功改变、肝组织MDA含量、SOD活力及肝细胞凋亡率与Ⅱ组之间无显著差异(P>0.05).结论:保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法对肝脏缺血再灌注损伤轻,效果好,操作简单,因而优于半肝血流阻断法.     

大鼠肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡与Bcl-2蛋白表达的关系

目的 探讨肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡与Bcl—2蛋白表达的关系。方法 建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型，将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组和缺血再灌注组，采用免疫组织化学法测定再灌注后不同时相中肝组织Bcl—2蛋白含量，用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿苷(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜观察肝细胞凋亡状态。结果 再灌注后1、3、6、24h肝组织Bcl—2蛋白含量明显低于正常组及假手术组，并于3～6h达到其最低值；再灌注后1、3、6、24h肝细胞凋亡指数(HAI)则明显高于正常组和假手术组，并于3～6h达到高峰。再灌注后各时相中Bcl—2蛋白水平与HAI呈明显负相关。结论 在肝脏缺血再灌注时，Bcl—2蛋白表达水平异常下调，其抑制细胞凋亡的效能减弱，促使肝实质细胞凋亡增加，加重肝脏缺血再灌注损伤。     

Role of nitric oxide in hepatic ischemia-reperfusion injury

Hepatic ischemia-reperfusion injury (IRI) occurs upon restoration of hepatic blood flow after a period of ischemia. Decreased endogenous nitric oxide (NO) production resulting in capillary luminal narrowing is central in the pathogenesis of IRI. Exogenous NO has emerged as a potential therapy for IRI based on its role in decreasing oxidative stress,cytokine release,leukocyte endothelial-adhesion and hepatic apoptosis. This review will highlight the influence of endogenous NO on hepatic IRI,role of inhaled NO in ameliorating IRI,modes of delivery,donor drugs and potential side effects of exogenous NO.     

三七总皂甙对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护

三七总皂甙对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护梁力建１何强２吕明德１彭宝冈１黄洁夫Ｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｏｎｌｉｖｅｒｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓＬＩＡＮＧＬｉ＿Ｊｉ...     

促红细胞生成素抑制caspase-3蛋白表达对缺血再灌注大鼠的心脏保护作用

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌缺血及梗死面积、心肌细胞凋亡和caspase-3蛋白表达的影响.方法 采用在体大鼠心肌I/R模型,将24只健康SD大鼠按随机数字表法随机分成3组:(1) 假手术组,以6-0号丝线在冠状动脉左前降支下穿过,不予以结扎;(2) I/R组,以6-0号丝线在冠状动脉左前降支下穿过,并结扎,在结扎线中埋置松解线,45 min后,松解结扎线,实现再灌注24 h;(3) EPO组,手术过程同I/R组,在再灌注开始即刻,给大鼠腹腔内注射重组人EPO(rhEPO),5 000 U/kg.再灌注24 h后用伊文蓝和氯化四唑(TTC)进行心肌染色,测量心肌缺血范围和梗死范围;采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;采用Western印迹法检测心肌caspase-3蛋白p17亚基的表达.结果 经过45 min缺血和24 h再灌注:心肌染色显示:假手术组心肌无缺血区和梗死区;与假手术组比较,I/R组和EPO组心肌有明显缺血区和梗死区,其缺血范围和梗死范围均显著增大(P<0.01);与I/R组比较,EPO组缺血范围略为缩小,其差异没有显著性(P>0.05),但梗死范围显著缩小(P<0.01).TUNEL结果显示:与假手术组比较,I/R组和EPO组心肌细胞凋亡显著增加(P<0.01);与I/R组比较,EPO组心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01);Western印迹法结果显示:与假手术组比较,I/R组和EPO组caspase-3蛋白p17亚基表达水平显著升高(P<0.01);与I/R组比较,EPO组caspase-3蛋白p17亚基表达水平显著下降(P<0.01).结论 EPO显著缩小I/R大鼠心肌缺血和梗死范围,减少心肌细胞凋亡,对I/R心肌具有明显的保护作用,其机制可能与下调caspase-3蛋白表达相关.