孕期膳食补锌对胎盘及母鼠小肠锌转运体mRNA表达谱的影响

目的:探讨孕期膳食补锌对胎盘及母鼠小肠中ZnT1、2、5和6mRNA表达谱的影响。方法:18只SD孕鼠随机分为正常对照组(ZC)和补锌组(ZS)。两组进食常规饲料,ZC组(n=9)饮用去离子水,ZS组(n=9)饮用补锌水(含锌1.26mmol/L)。分别于孕D9.5和孕D17.5时取胎盘和小肠。以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定胎盘和母鼠小肠中ZnT1、2、5和6mRNA的相对表达量。结果:在孕D9.5时,孕期膳食补锌可显著上调胎盘ZnT1、2及小肠ZnT1、2和6mRNA的表达,下调胎盘ZnT5mRNA的表达,对胎盘ZnT6及小肠ZnT5mRNA的表达则无影响;在孕17.5d时,膳食补锌可显著上向调控胎盘ZnT5和ZnT6mRNA的表达,对胎盘及小肠ZnT1、2mRNA的表达无影响,小肠ZnT5mRNA检测不到。结论:妊娠不同时期膳食不同锌摄入水平显著影响胎盘和母体小肠中锌转运体mRNA的表达谱。     

不同锌营养状态小鼠肾MT-1 mRNA表达的观察

通过RT—PCR法检测不同锌营养状态小鼠肾脏MT—1 mRNA表达水平,探讨两者间关系。     

破壁灵芝孢子粉对长期镉暴露大鼠金属硫蛋白表达的影响

目的研究破壁灵芝孢子粉(GLS)对长期镉暴露大鼠金属硫蛋白(MT)基因表达的影响。方法雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只,即正常对照组(C)、单独染镉(Cd)和2个给药组(灵芝孢子粉0.5 g/kg和1.0 g/kg+Cd Cl2,即GCd_L和GCd_H组)。除C组外,所有大鼠隔天腹腔注射Cd Cl2(2 mg/kg),GCd_L和GCd_H组每天灌胃灵芝孢子粉混悬液,C组和Cd组大鼠灌胃等体积生理盐水。实验过程观察动物一般表现并定期称重,分别于30、60和90 d处死取肝组织,原子吸收光谱法(AAS)检测90 d肝组织中各亚细胞细胞核、线粒体、微粒体、细胞质Cd含量;采用real time RTPCR法检测MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达。结果与单独染镉组比较,对照组与给药组(GCd)体重差异有统计学意义(P0.05);灵芝孢子粉使镉在肝组织中各亚细胞的分布发生显著变化(P0.05);与对照组比较,灵芝孢子粉可诱导镉中毒大鼠MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达上调(P0.05),且呈时间、剂量效应。结论灵芝孢子粉对长期镉暴露大鼠肝组织有保护作用,其机制可能与调节MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达水平有关。     

孕期膳食锌缺乏下向调控胎盘氨基酸转运体mRNA的表达

目的:探讨孕期膳食锌缺乏对胎盘、母鼠小肠及肝脏中氨基酸转运蛋白Slc7a9 mRNA表达的影响。方法:27只SD孕鼠随机分为正常对照组(ZC)、锌缺乏组(ZD)及对喂组(PF)。分别于孕9.5d、孕13.5d和孕17.5d取孕鼠血清、肝脏、小肠及胎盘,以半定量聚合酶链反应测定Slc7a9mRNA及肝脏金属硫蛋白1(MT-1)mRNA的相对表达量,以原子吸收法测定血清锌浓度。结果:孕9.5d和孕13.5d时,ZD组血清锌浓度和母鼠肝脏MT-1mRNA的相对表达量显著低于PF组和ZC组。各时间点ZD组胎盘和小肠中Slc7a9mRNA相对表达量均显著低于ZC组和PF组,孕17.5d时PF组与ZC组胎盘之间差异显著。孕9.5d、孕13.5d时PF组与ZC组小肠之间差异显著。各时间点ZD组和PF组孕鼠肝脏Slc7a9mRNA的相对表达量与ZC组相比均显著减低。结论:孕期膳食锌缺乏显著下调胎盘及母鼠肝脏和小肠Slc7a9mRNA的表达。     

镉暴露与金属硫蛋白MT-2A基因多态性和新生儿出生头围的关系

目的探讨镉暴露与金属硫蛋白MT-2Ars 28366003位点基因多态性和新生儿出生头围的关系。方法选取300对产妇与新生儿,对产妇进行问卷调查,新生儿进行出生医学检查。采用电感耦合等离子质谱(ICP/MS)检测产妇血液、脐血中的镉浓度,聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测产妇血液及脐血金属硫蛋白MT-2A 28366003位点基因多态性。结果①母亲、新生儿中MT-2Ars28366003位点杂合/突变型基因携带者的血镉浓度均高于野生型携带者(P<0.05);②母亲血镉高暴露组的新生儿头围比低暴露组小(P<0.05),新生儿携带杂合型基因组与野生型基因组相比,头围无差异(P>0.05);③母亲镉高暴露、新生儿携带杂合型组的出生头围小于母亲镉低暴露、新生儿携带野生型组(P<0.05),其余各组间无差异。结论 MT-2Ars 28366003位点基因多态性会影响产妇、新生儿血镉的浓度;镉暴露会影响新生儿出生头围,且受MT-2A 28366003位点基因多态性的修饰。     

基因多态性对人胎盘ABCG2基因mRNA及其蛋白表达的影响

目的 评估单核苷酸多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及蛋白表达的影响.方法 选择2013年3月至5月在四川大学华西第二医院产科待产分娩的46例汉族正常孕产妇及新生儿为研究对象,收集其胎盘及脐带标本（本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,获得胎盘及脐带标本时均取得产妇及家属的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书）.其中,脐带标本用于胎儿DNA的提取,胎盘标本用于ABCG2基因的RNA及蛋白提取;通过测序确定ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点的基因型;分别通过实时荧光定量（RT）-PCR及Western-blotting法获得ABCG2基因的mRNA及蛋白表达情况.对ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点不同基因型之间mRNA及蛋白相对表达量进行比较.ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点不同基因型之间孕产妇及新生儿一般临床资料比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.结果 对于421C＞A多态位点,携带CC、CA、AA各基因型的胎盘标本的平均mRNA及蛋白表达水平比较,其差异均无统计学意义（F=1.060,3.051;P＞0.05）;对于34G＞A多态位点,携带GG基因型的胎盘标本平均mRNA及蛋白表达水平较携带AA基因型的胎盘标本高,且差异均有统计学意（q=3.540,4.720; P＜0.05）,而携带GA基因型的胎盘标本,其平均mRNA及蛋白表达水平分别与携带其他2种基因型的胎盘标本比较,其差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 421C＞A多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及蛋白的表达无影响,而34G＞A多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及ABCG2蛋白（BCRP）的表达均有影响.     

REDD1蛋白在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中REDD1蛋白的表达情况。方法选择2011年12月至2012年4月四川大学华西第二医院收治的确诊为子痫前期,年龄为(31.4±1.4)岁的单胎妊娠孕妇29例为研究对象。按照妊娠中子痫前期发生的时间,将其分为早发型子痫前期组(n=15)和晚发型子痫前期组(n=14)。同时按入院顺序号随机选择孕期在本院产前检查,年龄为(32.0±2.8)岁的单胎妊娠健康孕妇20例纳入对照组(本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。采用SP免疫组织化学染色技术,Western bloting杂交及实时荧光定量PCR检测受试者REDD1蛋白及其mRNA在胎盘组织中的表达,并采用相关统计学方法分析早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及对照组胎盘组织中REDD1蛋白表达差异。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组患者的一般临床资料(年龄、孕周及产次)分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 REDD1蛋白表达于胎盘滋养细胞的细胞质。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组胎盘组织中REDD1蛋白水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。早发型子痫前期组REDD1mRNA表达水平较对照组明显增高,差异亦有统计学意义(P<0.05);但晚发型子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 REDD1蛋白可能在子痫前期发病机制中起重要作用。     

胎盘MT1及ZnT1在低锌致胎鼠心脏畸形的表达

目的 探讨胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1在低锌诱导大鼠胚胎心脏发育畸形中的作用及可能机制.方法 SD成年健康清洁级雌鼠50只,随机分为:极低锌、低锌、中等低锌、边缘低锌及常锌组.分别饲以不同含锌量饲料.常规方法 交配受孕,于孕19天开胸抽取孕鼠下腔静脉血检测血锌值;剖取胚心行胎鼠心脏组织学观察;RT-PCR法半定量测定胎盘中金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1.结果 各低锌组孕鼠血锌值明显低于常锌组(均P<0.05);极低锌、低锌及中等低锌组较常锌组胚心畸形率明显增加(均P<0.05);极低锌、低锌及中等低锌组胚鼠胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达较常锌组明显降低(均P<0.05);心脏畸形胚鼠胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达较正常胚鼠明显降低(均P<0.05).结论 中等以上低锌孕鼠胚心畸形率明显增加,可能与胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达下降有关.     

孕晚期母亲铁状态对胎盘ferroportin1表达的影响

目的研究孕晚期母亲不同铁营养状态下胎盘ferroportin1(FP1)的蛋白定位、蛋白表达及其mRNA的表达。方法临床选择不同铁营养状态的孕妇,收集分娩时的胎盘。采用免疫组织化学方法测定FP1蛋白的定位,Western Blot测定蛋白表达量的变化,采用实时定量RT-PCR测定mRNA表达。结果FP1蛋白主要表达在人足月胎盘的合体滋养细胞(STB)胞浆;母亲不同铁营养状态下胎盘FP1蛋白和mRNA的表达均无明显变化。结论孕晚期胎盘FP1蛋白和mRNA的表达不受孕妇铁状态的影响。     

脑金属硫蛋白基因的表达调控及锌的影响

近年国外对脑金属硫蛋白（ＭｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎＭＴ）基因的表达与调控进行了许多研究，尤其发现微量元素锌（Ｚｎ）在脑ＭＴ表达和调控的过程中发挥重要作用。本文将其研究进展综述如下。     

锌缺乏对小鼠巨噬细胞与小肠粘膜上皮细胞的影响

用缺锌饲料制成小鼠缺锌模型,观察其外观、体重、脏体比、巨噬细胞(Mφ)与小肠粘膜上皮细胞形态等变化。给缺锌饲料2周后可见缺锌鼠(n=24)食量减少,与对照组(n=11)体重呈显著性差异,至第4周差异更大。缺锌鼠死亡率29.17％,对照组为0。缺锌鼠肝、肾、肾上腺、胸腺重量显著下降,胸腺脏体比显著下降,其他脏体比无显著差异。扫描电镜观察,缺锌组Mφ表层结构趋向简单,丝状片状伪足短而少,激活细胞比下降至56.4％(对照组81.9％,P<0.01)。透射电镜可见Mφ与小肠粘膜上皮细胞内线粒体、溶酶体数量减少,粗面内质网肿胀扩张,外周核糖体脱落并脱颗粒,高尔基体萎缩。荧光显微镜下缺锌鼠Mφ体积缩小,微丝及微管数量、粗细、荧光反应强度、定向排列均改变。Mφ吞噬指数降低至2.53±0.22,表面积缩小。说明机体内锌水平的变化,可直接影响Mφ活化,使小肠粘膜上皮、Mφ的膜结构损伤,微丝、微管改变。     

大豆寡糖对断奶环江香猪小肠发育及SGLT1和GLUT2表达的影响

目的研究大豆寡糖(SBOS)对小肠发育及其吸收功能的影响。方法选用21 d龄断奶的环江香猪12头,随机分为2组,每组6头,分别饲喂添加0.5%SBOS的日粮和基础日粮,试验期14 d。试验结束后采集血液,肝素抗凝,离心分离血浆,测定血糖浓度;放血处死后取空、回肠组织各两份,另一份采用于组织固定,进行形态学观察;一份利用荧光定量RT-PCR法,测定葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2 mRNA的表达。结果与基础日粮组相比,SBOS组葡萄糖转运载体的表达具有肠道空间位置特异性,空肠SGLT1和GLUT2 mRNA的表达量显著高于回肠(P<0.05);并显著高于基础日粮组空肠的表达量(P<0.05);SBOS显著提高了仔猪小肠绒毛高度与隐窝深度的比值(P<0.05)。结论 SBOS能促进小肠发育,提高肠道对营养物质的吸收。     

缺锌和补锌对运动大鼠锌营养状况的影响

通过建立大鼠缺锌模型，观察缺锌及补锌对游泳大鼠血清、肝脏锌含量和五种含锌金属酶活性的影响。结果表明：（１）血浆锌浓度和碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性是评价机体锌缺乏的灵敏指标；（２）血浆ＡＫＰ活性同时也是评价运动大鼠锌缺乏的较好指标，而血管紧张素Ｉ转换酶、酸性α－Ｄ－甘露糖苷酶５－核苷酸酶等不太理想；（３）运动时，缺锌大鼠血浆锌金属酶活性多数变化剧烈，表明机体内环境遭受较大破坏。而补锌后上述指标均接近正常水平，说明适量补锌有助于改善机体缺锌状况，维持机体内环境的稳定     

燕麦β-葡聚糖对小肠蠕动及淀粉酶活性的影响研究

目的:观察燕麦β-葡聚糖(Oglu)对小肠蠕动能力及淀粉酶活性的影响。方法:采用昆明种雄性小鼠进行小肠推进实验、用SD大鼠进行小肠平滑肌收缩实验(体内和体外给药)、体外模拟β-葡聚糖对淀粉酶酶解作用抑制能力实验。结果:灌喂Oglu后,食物在实验动物小肠体内的推进速度明显提高(P<0.01),小肠平滑肌蠕动的频率和幅度也显著增强。同时体外实验表明Oglu对淀粉酶的酶水解作用有一定抑制能力。结论:Oglu可通过抑制体内酶水解能力、增加小肠平滑肌蠕动的频率和幅度提高食物在小肠内的推进速度,使机体糖吸收能力降低。     

蛋白质与锌不同摄入水平对大鼠锌吸收与存留影响的研究

WAK纯品系断奶雄大鼠30只,随机分为6组。喂纯合成饲料。第1、2、3组饲料含锌分别为6、15和24ppm,含蛋白质均为10％。第4、5、6组饲料含蛋白质分别为5％、10％和20％,含锌量均为15ppm。喂养50天后按体重每100g灌胃~(65)Zn 1.5μCi,即日起连续收集5天粪尿,用~(65)Zn示踪法测定各组动物锌吸收与存留情况。结果表明:低锌组大鼠锌吸收率与存留率显著增高;低蛋白组大鼠锌吸收率与存留率显著降低,提高蛋白质摄入水平可明显改善锌的吸收与存留;大鼠尿锌排出率很低,作为研究锌代谢指标的意义不大。本文并对锌吸收与存留的测定方法进行了讨论。     

锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白-1基因表达的影响

目的　研究锌对肝脏缺血再灌注损伤 (HIRI)保护作用的分子机制。方法　采用RT- PCR技术 ,检测分析金属硫蛋白 - 1 (MT- 1 )基因在 HIRI大鼠肝组织中的表达和锌对其表达的调节。结果　各组大鼠肝组织均有MT- 1基因表达 ;缺血 30 min、再灌 90 min大鼠肝组织中 MT- 1m RNA较对照组显著降低 (P<0 .0 1 ) ;灌胃补锌后 ,HIRI大鼠肝 MT- 1 m RNA转录水平较对照组明显增高 (P<0 .0 1 ) ,单纯补锌亦可上调其组织中 MT- 1基因表达 (P<0 .0 1 )。结论　在锌对HIRI产生保护作用的分子机制中 ,调节其肝组织中 MT- 1转录水平的表达可能是一条重要途径。     

兔小肠吸收纳豆激酶及其分布特征研究

目的研究兔小肠吸收纳豆激酶及其分布特征。方法双夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中纳豆激酶;链霉菌抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学技术观察小肠吸收纳豆激酶分布。结果颈总动脉血栓模型兔十二指肠注射纳豆激酶液体发酵粗酶液,高剂量组(4500IU/kg·bw)注射1、1.5、2、3h和低剂量组(2500IU/kg·bw)注射1.5、2、3h,血浆中纳豆激酶检测阳性。免疫组化染色结果表明,正常兔口服纳豆激酶粗制液后,空肠纹状缘深棕色阳性吸收颗粒最多,上皮细胞胞浆中有深棕色阳性吸收颗粒,十二指肠与回肠纹状缘有棕色、弥漫性的阳性吸收颗粒,吸收强度为空肠>回肠>十二指肠。结论纳豆激酶可经小肠吸收进入血浆。     

锌对热应激大鼠垂体POMC mRNA表达的影响

目的：通过锌对热应激大鼠垂体阿黑皮素原（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ表达的影响研究，探讨锌对热应激大鼠的保护机理。方法：２０只ＳＤ雄性大鼠随机等分４组，即高锌高温暴露组（Ａ组）、中锌高温暴露组（Ｂ组）、低锌高温暴露组（Ｃ组）和正常锌室温对照组（Ｄ组）。在ＡＩＮ－９３Ｍ饲料配方基础上，以碳酸锌为锌源，配制成高锌、中锌、低锌和正常锌饲料，每公斤饲料锌含量测定值分别为９２．２ｍｇ、４５．６１ｍｇ、２１．７０ｍｇ和４５．６１ｍｇ。４组大鼠在室温下饲以相应饲料１４天后，将Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠置于高温室（Ｔｄｂ４０℃，Ｔｗｂ３０．８℃）中连续暴露３小时。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析法（探针为地高锌标记的ＰＯＭＣｃＲＮＡ），观察垂体ＰＯＭＣｍＲＮＡ表达水平。结果：（１）高温应激可使大鼠垂体ＰＯＭＣｍＲＮＡ表达水平增高；（２）高锌摄入可使热应激大鼠垂体ＰＯＭ－ＣｍＲＮＡ表达水平升高，而低锌摄入则相反。结论：锌对热应激大鼠垂体ＰＯＭＣ基因有调控作用，作用环节可能在转录水平上