硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经的形态学研究

目的以形态学方法观测硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经10mm缺损的疗效。方法以硫酸肝素复合胶原蛋白经冷冻干燥技术制备新型神经组织支架材料,并用此材料桥接修复SD大鼠坐骨神经缺损10mm,术后36周分别以辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,HE、甲苯氨蓝和镀银染色法,S100、生长相关蛋白43(GAP-43)、神经丝蛋白(NF)免疫组化染色法、MBP免疫荧光染色法及透射电镜等形态学方法观测其引导神经再生的疗效。结果硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料在移植术后36周已神经化。除再生有髓神经纤维的密度低于自体移植,有髓神经纤维的面积和髓鞘厚度与自体移植组无明显差异。结论以硫酸肝素复合胶原蛋白制备的神经组织工程支架材料,可以引导神经再生。     

纳米银-胶原蛋白-明胶支架材料对兔坐骨神经缺损修复的实验研究

目的 探讨含纳米银的胶原蛋白-明胶支架材料通过静电吸附层黏连蛋白对周围神经缺损修复的效果.方法 制备纳米银-胶原蛋白支架材料,作为实验组,以不含纳米银的胶原蛋白支架为对照组.将雄性新西兰兔40只随机分为两组,每组20只.将实验组材料和对照组材料分别与层黏连蛋白复合后分组修复兔坐骨神经10 mm缺损.术后30 d通过电生理学、形态学观察和荧光金逆行示踪实验对修复效果进行评估.结果 层黏连蛋白通过静电吸附作用均匀地贴附在实验组支架内表面.兔坐骨神经桥接术后30 d,甲苯胺蓝及透射电镜显示实验组在再生神经纤维数量、神经髓鞘厚度以及被荧光金逆行标记的神经元数量方面均优于对照组.电生理结果:实验组和对照组坐骨神经电位波幅分别为(0.70±0.44)、(0.58±0.37)mV,差异有统计学意义(t=2.803,P=0.012);神经传导速度分别为(40.7±2.1)、(36.6±4.8)m/s,差异有统计学意义(t=2.427,P=0.031).结论 纳米银-胶原蛋白-明胶通过静电引力对层黏连蛋白具有较好的吸附作用,而吸附层黏连蛋白的纳米银-胶原蛋白-明胶支架对成年兔坐骨神经10 mm缺损具有较快的修复作用.     

小肠黏膜下层复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经修复周围神经缺损的研究

目的小肠黏膜下层（small intestinal submucosa，SIS）复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经并探讨其修复周围神经缺损的效果。方法SD大鼠60只随机分成三组，每组20只。构建右侧坐骨神经14mm缺损，A组：单纯SIS修复组；B组：复合雪旺细胞的SIS修复组；C组：自体神经移植对照组。术后不同时间段通过大体观察、电生理检测、组织学、透射电镜、图像分析、逆行示踪和小腿三头肌称重等方法分析评价修复效果。结果术后16周，B组移植段与近远段神经外观相似，未有神经瘤形成。组织学和透射电镜检查见B组再生神经组织可顺利通过缺损区，再生神经纤维排列整齐呈束状，含有大量的有髓神经纤维，与C组相似。电生理检测见第16周B组神经传导速度和复合动作电位的波幅均较第12周有所提高，与C组相比差异无统计学意义。真蓝逆行示踪证实B组和C组再生神经轴突轴浆运输功能恢复良好。图像分析证实B组再生神经组织面积百分比、有髓神经纤维密度和髓鞘厚度与C组相比差异无统计学意义，优于A组。B组和C组患侧小腿三头肌肌肉重量和恢复率均优于A组，C组优于B组，且差异有统计学意义。结论SIS复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经能有效修复大鼠长距离坐骨神经缺损，有望成为自体神经的替代材料应用于周围神经缺损的修复。     

酒精保存的硬脊膜桥接周围神经缺损的实验研究

本文报道用酒精保存的异体硬脊膜桥接大鼠10mm坐骨神经缺损,术后1～4个月行光镜、电镜、电生理、计算机图像分析等检测证实,异体硬脊膜能成功地修复10mm的大鼠坐骨神经缺损,再生神经成熟良好,恢复传导功能,其修复神经缺损的效果明显优于带蒂的骨骼肌桥接,硬脊膜能较快地被宿主组织取代而与神经外膜无明显分界。异体硬脊膜有可能作为新的神经修复材料而应用于临床。     

腺相关病毒介导KLF7对小鼠坐骨神经缺损后感觉功能的作用

[目的]探讨腺相关病毒2(AAV2)介导核转录因子KLF7对脱细胞异体神经支架(ANA)修复小鼠坐骨神经缺损后感觉轴突再生和感觉功能恢复的作用。[方法]成年C57BL/6小鼠随机分为正常组、ANA+AAV2对照组和ANA+AAV2-KLF组,术后4周RT-PCR和免疫荧光染色检测神经支架内KLF7 mRNA和蛋白表达,免疫荧光染色检测神经支架内NF和S100蛋白表达,霍乱毒素亚单位B结合荧光素TRITC(CTB-TRITC)逆行示踪L2~5脊髓背根神经节神经元(DRG)标记感觉轴突再生,Hargreaves法和电生理检测感觉功能的恢复。[结果]与对照组比较,ANA+AAV2-KLF组神经支架内KLF7mRNA和蛋白表达显著增高,NF和S100蛋白表达增加,CTB阳性标记DRG感觉神经元数量增加,Hargreaves热缩足反射潜伏期降低,电生理神经传导速度增加,潜伏时缩短,动作电位波幅增大(P<0.05)。[结论]KLF7可促进小鼠坐骨神经缺损后感觉轴突再生和髓鞘形成,促进感觉功能的恢复。     

骨髓源神经干细胞修复大鼠周围神经缺损的实验研究

目的: 探讨骨髓源神经干细胞用于组织工程化人工神经修复大鼠坐骨神经缺损的治疗效果。方法: 36只Wistar大鼠随机分为3组, 每组12只。A组: 将骨髓源神经干细胞与ECM凝胶混合, 种植于几丁糖神经导管中修复10mm坐骨神经缺损; B组: 仅将ECM凝胶种植于神经导管中; C组: 坐骨神经切下10mm, 翻转180°后缝合。16周后, 行大体观察、神经电生理检测、腓肠肌湿重测定、组织学染色, 免疫组化染色和轴突计数等检查。结果: A组的各项检测指标与C组相近, 明显优于B组, 差异显著(P<0. 05)。结论: 骨髓源神经干细胞可作为周围神经组织工程的种子细胞修复周围神经缺损。     

高仿真壳聚糖支架修复神经缺损的有效性研究

[目的]构建具有仿真结构的壳聚糖神经支架,评价其在体桥接大鼠15mm坐骨神经缺损的修复效果.[方法]应用自主研发的梯度冷冻干燥技术,制备具有仿真结构的壳聚糖神经支架.将该仿真支架修复大鼠15 mm坐骨神经缺损,应用形态计量学、逆行示踪、神经电生理以及行为学检测评价该仿真支架的修复效果.[结果]本实验构建的壳聚糖支架具有轴向平行排列的微管样超微结构,该结构高度仿真于正常神经基底膜结构.在修复大鼠15 mm坐骨神经缺损的实验中,该仿真支架可取得与自体神经移植相似的修复效果.[结论]高仿真壳聚糖神经支架具有与正常神经高度仿真的内部结构,在体修复效果好,有望成为自体神经移植的替代产品.     

去细胞异种神经复合骨髓基质干细胞修复周围神经缺损的实验研究

目的 探讨去细胞异种神经(acellular xenogeneic nerve,AXN)复合骨髓基质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)修复周围神经缺损的效果.方法 体外培养大鼠BMSCs;取雌性Wistar大鼠60只,随机分为3组,每组20只,建立右坐骨神经10 mm缺损修复模型.A组:BMSCs与AXN复合修复神经缺损;B组:单纯AXN修复神经缺损;C组:自体神经移植组.术后4、12周依次进行干细胞的转归、移植免疫、神经电生理检测、新生神经组织学观察和小腿三头肌肌纤维横径等检测,判断坐骨神经功能恢复情况.结果 术后移植物内均可见细胞生长,A、C组细胞数目较多,排列整齐,只有A组S-100免疫组化染色阳性细胞内可见BrdU阳性表达,术后12周再生神经已通过远端缝合口.A组、C组组织学及电生理检测指标均优于B组(P＜0.05),A组与C组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BMSCs作为种子细胞可以在体内存活,并可分化为SCs,其与AXN复合构建组织工程神经修复神经缺损的效果接近于自体神经移植.     

电纺丝壳聚糖/聚乳酸神经导管修复大鼠周围神经缺损的实验研究

目的研究利用电纺丝壳聚糖/聚乳酸(chitosan/polylactic acid,ch/PLA)神经导管修复大鼠坐骨神经缺损的方法和效果。方法采用电纺丝方法制备ch/PLA神经导管,通过扫描电镜、生物力学测定、表面润湿性测定和体外生物相容性检测,并与纯PLA比较,测试ch/PLA神经导管的性能。选取健康SD大鼠54只,随机分成3组,每组18只,制作右侧坐骨神经10 mm缺损模型,分别利用ch/PLA神经导管(A组)、自体神经(B组)移植修复,并与切除旷置(C组)进行对照。术后4、8、12周,通过大体观察、坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)、神经电生理、肌肉湿重恢复率、肌细胞横截面积检测和组织学、免疫组织化学染色、透射电镜观察,对大鼠神经再生进行评价。结果随着chitosan的加入,神经导管的均一性、物理性能、亲水性及体外生物相容性均得到了明显改善。术后4周A组再生神经已通过神经缺损。术后A、B组SFI不断改善,两组恢复速度相似,差异无统计学意义(P0.05)。术后8、12周,A、B组可引出神经肌电图表现,且神经传导速度与动作电位波幅均不断恢复(P0.05)。术后12周,A、B组肌肉湿重恢复率与肌细胞截面积优于C组(P0.05),但A、B组间差异无统计学意义(P0.05)。生长相关蛋白43、神经纤维丝蛋白160亚单位、S-100蛋白免疫组织化学染色示,A、B组轴突与髓鞘恢复情况相似。术后12周A、B组再生神经纤维直径相似(P0.05),而A组再生神经髓鞘厚度优于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论电纺丝ch/PLA神经导管具有促进大鼠周围神经再生的作用,有可能成为治疗周围神经缺损的新方法。     

叶酸复合交联多聚尿烷聚酯神经导管促进大鼠坐骨神经长距离缺损修复

目的 探讨叶酸复合交联多聚尿烷聚酯(folic acid coated-crosslinked urethane-doped polyester elastomer,fCUPE)神经导管支架修复大鼠坐骨神经长距离缺损的效果。方法 选取36只3月龄雄性SD大鼠(体质量180～220 g)随机分为3组，每组12只，分别为CUPE神经导管支架移植组(A组)、fCUPE神经导管支架移植组(B组)及自体神经移植组(C组)，取C组对侧健康肢体作为对照组(D组)。建立大鼠20 mm长坐骨神经缺损模型，按分组分别采用相应材料修复神经缺损，于术后1、2、3个月采用Bain公式计算A～C组坐骨神经指数(sciatic function index,SFI)，神经电生理技术评价A～D组患侧神经传导速度(nerve conduction velocity,NCV)；术后3个月处死大鼠，大体观察后取A～C组再生神经组织行S-100免疫组织化学染色观察及A、B组雪旺细胞计数，比较各组神经修复和再生水平。结果 术后3个月各组大鼠手术部位神经导管支架均部分降解，神经及导管与周围组织之间无严重粘连，导管与远、近端神经连...     

带与不带血管周围神经移植的比较

目的：比较带与不带血管周围神经移植的再生情况及探讨其再生机理。方法：用ＳＤ雄性大鼠５０只，随机分组，６只为正常对照组，其余等分为Ａ组（带血管神经移植组）和Ｂ组（不带血管神经移植组）。两组均在移植后不同时间取材，进行光镜、电镜对比观察。结果：在移植后的前４周，Ａ、Ｂ两组组织形态学变化基本相似。从第６周开始，移植段神经纤维再生率、有髓神经纤维再生率、有髓神经纤维直径恢复率、神经纤维变性率，Ａ组均明显优于Ｂ组，并进行了差异程度比较。Ａ组结缔组织增生少，神经纤维再生好。发现Ｂ组神经束内有结缔组织包裹２～３条神经纤维呈小束，再生而又变性的神经纤维多。结论：带血管周围神经移植优于不带血管的周围神经移植。     

TISSUE RESPONSE TO SILICONE TUBES USED TO REPAIR HUMAN MEDIAN AND ULNAR NERVES

Silicone tubes of appropriate sizes were used to enclose the injured zone of transsected ulnar and median nerves in the human forearm as an alternative to conventional microsurgical repair of the nerve trunk. A gap measuring 3-5 mm was left intentionally between the nerve ends inside the tube. The clinical early results from a prospective randomised study that compared these two principles have recently been presented. Seven patients (five men and two women), aged 15-49 years (median 20) were reexplored 12-44 months (median 22) after the initial procedure because of local discomfort from the tube in four patients. There was a new nerve structure bridging the former gap and in most cases it was impossible to distinguish the site of the injury. In all cases there was a thin capsule around the silicone tube that microscopically consisted of connective tissue with thin walls and no signs of inflammation, granuloma or macrophages (n = 4), while in two cases a mild foreign body reaction was seen at a single site (n = 1) or at patchy areas (n = 1). These results indicate that after more than one year there is a limited tissue reaction around silicone tubes used to repair median and ulnar nerves in humans.     

直径相异的神经连接方法对神经再生的影响

目的探讨直径相异神经的连接方法与神经再生的关系。方法以大鼠臂丛根性撕脱伤为模型,将膈神经移位于外侧束(直径比为1:4),采用干干、干束、包埋和端侧缝合及无间隙和小间隙静脉套接六种连接方法,术后用电生理学、组织学和功能测定评估神经再生和功能恢复情况。结果术后4个月时,各端端吻合组的各项观察指标优于端侧组;各端端吻合组间,除潜伏期和最大收缩持续时间恢复率无明显差异外,静脉套接组的有髓神经纤维通过率优于干束组,其余各项指标显示静脉套接组、干干组、包埋组优于干束组。结论端端吻合优于端侧吻合;干干对合优于干束对合;套接缝合优于直接缝合;无间隙与小间隙静脉套接无明显差异。     

Nerve grafts in nerve roots

Summary The positive results of microsurgical technique in suturing and grafting of peripheral nerves have encouraged us to consider grafting of nerve roots. Experimental replantation of anterior nerve root fragments on dogs and rats were performed. Microsurgery was used in all operations. By bioelectrical stimulation, as well as histologically, it is shown that functional regeneration in these animals occurs after grafting of motor nerve roots. The consequences of these experiments in human surgery are discussed.Presented in parts at the annual meeting of the Swiss Society for Plastic and Reconstructive Surgery, Sion, Switzerland, September 1973     

预变神经段修复神经缺损的实验研究

目的探讨不同预变时间组移植神经对神经再生的影响。方法以ＳＤ大鼠的不同预变时间组的尺神经作为移植神经，修复其正中神经的缺损。实验侧按移植神经预变时间的不同分为０、１、２、３、４、８周共６组，每组６只ＳＤ大鼠。移植后１２周，检测实验侧趾屈肌群的张力、最大收缩力、再生神经的形态及神经轴突的截面积。结果用预变１周的尺神经修复正中神经后，其趾屈肌群的张力及最大收缩力的恢复率达到正常对照组的８１．１％及８５．９％。显微镜下观察，预变１周组和其它各时间组相比，其再生的神经轴突最多，发育最成熟。结论用预变１周的神经段修复神经缺损，其神经再生能力最佳     

Strain and excursion in the rat sciatic nerve during a modified straight leg raise are altered after traumatic nerve injury.

PURPOSE: This study investigated the biomechanics of the sciatic nerve with hind limb positioning in live and euthanized Sprague-Dawley rats after traumatic nerve injury. METHODS: With radiographic analysis, sciatic nerve excursion and strain were measured in situ during a modified straight leg raise, which included sequential hip flexion and ankle dorsiflexion. Comparisons were made between nerves in uninjured, sham-injured and mild crush-injured rats at the 7-day and 21-day recovery times. RESULTS: Significant strain and proximal excursion of the sciatic nerve were observed in all groups during hip flexion, and additional increased strain was noted during dorsiflexion. Seven days after nerve injury, strain increased significantly during hip flexion (17.64+/-14.12%; p=0.0091) and dorsiflexion (22.56+/-15.47%; p=0.0082) compared to the sham-injured controls. At 21 days after injury, the strains were similar between the injured and sham-injured groups. CONCLUSIONS: Nerve bed elongation during straight leg raise causes sciatic nerve strain and excursion towards the moving joint with the greatest movement nearest the moving joint. In the first week after injury, the maximal strain exceeded the level previously shown to impair nerve conduction and circulation.     

神经刺激器指导实施下肢神经联合阻滞的麻醉效果

目的比较在神经刺激器指导下实施不同下肢神经联合阻滞的麻醉效果。方法选择ASAⅠ或Ⅱ级18~58岁股骨下段以下的下肢手术患者80例,随机均分为:坐骨神经加股神经阻滞组(N1组)、坐骨神经加股神经加股外侧皮神经阻滞组(N2组)、坐骨神经加腰大肌肌间沟阻滞组(N3组)与脊麻组(S组)。用不同电流强度刺激指导穿刺,比较神经阻滞的起效和持续时间、阻滞的效果以及患者满意度评分和不良反应。结果N2、N3组止血带反应明显轻于N1与S组。N1、N2和N3组的感觉与运动阻滞时间均明显长于S组(P<0.01)。电流的强度与起效时间呈正相关。结论神经刺激器电流强度在0.25~0.30mA时麻醉效果满意。坐骨神经加股神经加股外侧皮神经阻滞和坐骨神经腰大肌肌间沟阻滞用于股骨下段以下的下肢手术是一种安全可靠的麻醉方法,坐骨神经加股神经阻滞适用于股骨下段以下短小手术,效果可靠。