用弓形虫多功能免疫吸附凝集试验试剂盒检测孕妇弓形虫感染的实验研究

产前感染弓形虫是弓形虫病突出的问题,常分娩死胎及先天性弓形虫病的婴儿,胎儿发病与感染期密切相关。为避免产前感染的孕妇生育先天性弓形虫病的婴儿,应中止妊娠,因而早期诊断和监测极为重要。免疫吸附凝集试验-IgM(ImmunosorbentAgglutination Assaa-IgM,ISAGA-IgM)及酶免疫     

恶性肿瘤患者弓形虫抗体IgM和循环抗原的检测

为了探讨恶性肿瘤与弓形虫感染的关系，本文采用２种ＥＬＳＩＡ法检测弓形虫抗体ＩｇＭ和循环抗原。共检测恶性肿瘤患者血清１２６份，健康人血清３４份。     

用ABC—Dot—ELISA检测兔弓形虫循环抗体的初步研究

应用ABC-Dot-ELISA检测感染兔弓形虫循环抗体并与ABC-ELISA检测结果进行了比较,结果表明:前者不仅具有与后者相同的敏感性、特异性及重复性,而且操作简易、快速,所需抗原量和待检血清量较少。用二法观察了6只兔于感染后3～90天内抗体的消长情况。此外,对弓形虫速殖子的纯化,可溶性抗原的制备及其在ABC-Dot-ELISA、ABC-ELISA中的应用条件进行了研究。     

应用PcAb—ABC—Dot—ELISA检测弓形虫CAg的研究

检测宿主体内的CAg可以早期诊断寄生虫感染,鉴于应用PcAb-ABC-Dot-ELISA检测弓形虫CAg国内尚未见报道,作者用生物素化抗弓形虫PcAb为探针,检测了15份人工感染弓形虫的兔血清,结果15份血清的CAg均呈阳性反应。用35份正常兔血清,10份自然感染球虫的兔血清及血吸虫、华校睾吸虫感染的兔血清各5份作对照,除一份正常兔血清及一份血吸虫感染的兔血清呈阳性反应外,其余均为阴性。结果表明,该法有较好的特异性及重复性。     

贵阳地区汉族及少数民族孕妇病毒与弓形虫抗体的检测

测定了６５２例贵阳地区汉族及少数民族孕妇静脉血中巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒、弓形虫的特异性抗体，发现抗全阳性率高，ＲＶ及ＨＳＶＩｇＧ阳性有民族差异性，ＲＶＩｇＧ及ＩｇＭ阳 性有年龄差异，ＣＭＶＩｇＭ阳性有年龄差异。Ｍ阳性有年龄差异     

VB环境下刚地弓形虫多媒体课件的开发

目的 利用Visual Basic(VB）开发刚地弓形虫多媒体教学课件，探索VB环境下课件开发技术。方法 依据本科教学大纲的要求收集相关文本、图像、影音资料，撰写软件脚本。将所收集资料数据化并予以加工。在Windows98和B5.0(SP3）环境下进行软件的设计、编译与调试。结果 开发出了一套集文本、图像、动画、音频、视频于一体、符合教学需要的交互式多媒体课件。结论 VB可较好地应用于人体寄生虫学等基础医学课程多媒体课件的开发。     

风湿性疾病患者血清弓形虫抗体检测分析

目的：了解风湿性疾病患者弓形虫感染的情况。方法：采用ELISA法对346例风湿性疾病患者进行血清弓形虫IgG、IgM检测。结果：在被检患者中,IgG阳性率21.68%,其中男性阳性率17.00%,女性阳性率16.34%,两者比较无统计学意义（P〉0.05）;IgM阳性率20.52%,其中男性阳性率17.62%,女性阳性率17.10%,两者比较无统计学意义（P〉0.05）。类风湿性关节炎（RA）、系统性红斑狼疮（SLE）、风湿热（RF）患者IgG阳性率分别为23.83%、20.46%、20.59%,明显高于多发性肌炎（PM）、皮肌炎（DM）、干燥综合征（SS）患者的12.50%、10.00%、15.38%（P〈0.05）。RA,SLE,RF患者IgM阳性率分别为21.24%、21.59%、23.53%,明显高于PM,DM,SS患者的12.50%、10.00%、7.69%（P〈0.05）。结论：风湿性疾病患者弓形虫感染率较高,尤其是RA,SLE,RF患者。     

呼吸系统疾病患者血清弓形虫IgG及IgM抗体检测分析

目的：了解呼吸系统疾病患者弓形虫感染情况。方法：对308例呼吸系统疾病患者采用ELISA法检测血清弓形虫IgG,IgM并进行分析。结果：IgG总阳性率9.74%,其中男性、女性分别为9.82%、9.66%,差异无统计学意义（P〉0.05）;IgM总阳性率9.09%,其中男性、女性分别为9.20%、8.97%,差异无统计学意义（P〉0.05）。来自农村和城镇患者的IgG阳性率分别为6.25%、11.73%,差异有统计学意义（P〈0.05）;IgM阳性率分别为6.25%、10.71%,差异有统计学意义（P〈0.05）。学生、工人、干部患者IgG阳性率分别为5.08%、13.87%、8.04%,差异有统计学意义（P〈0.05）;IgM阳性率分别为5.08%、14.60%、6.25%,差异有统计学意义（P〈0.05）。上呼吸道感染、肺炎、肺结核、肺癌患者IgG阳性率分别为3.09%、6.06%、19.67%、23.53%,差异有统计学意义（P〈0.05）;IgM阳性率分别为4.12%、5.05%、13.23%、23.53%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：呼吸系统疾病中肺结核、肺癌的患者弓形虫抗体阳性率较高。     

刚地弓形虫P30两个不同片段的克隆、表达及鉴定

目的：构建刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因的2个不同片段的克隆并进行表达、鉴定。方法：根据已发表的弓形虫P30基因序列，参考有关文献设计合成两对引物，用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段，分别构建T-A克隆，经PCR扩增及酶切鉴定后，进行测序，再亚克隆入pMAL—p2质粒并转化DH5α感受态细胞，于氨苄青霉素LB平板上初步筛选阳性克隆，再经酶切及PCR扩增鉴定重组子。将重组子转入表达菌BL21，用IPTG进行诱导表达，并对所表达的蛋白以western blot鉴定，结果：成功构建相应的T-A克隆及pMAL—p2亚克隆，经诱导、表达和鉴定，证实2个表达产物均为目的蛋白，其分子量分别为70和73Ku。结论：成功获得弓形虫主要表面抗原P30的2个表达产物，为其进一步的纯化及应用奠定了基础。     

弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区在大肠杆菌中的表达

目的：克隆并表达弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段，为下一步表达蛋白纯化奠定基础方法：将弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段克隆入高效融合表达载体pET32α，转化大肠杆菌B121(DE3)，37℃、IPTG诱导表达，SDS—PAGE分析表达产物结果：成功构建重组质粒pET32α—SAG1，经诱导后表达出含外源基因的融合蛋白，SDS—PAGE分析表达产物分子质量约44kDa，结论：弓形虫SAG1成熟蛋白编码区在原核表达系统pET32α/BL21(DE3)中获得成功表达，为下一步表达蛋白纯化提供试验依据。     

不孕不育人群弓形虫IgM抗体检测及结果分析

目的 探讨不孕不育人群弓形虫近期感染情况.方法 采集不孕不育人群血清并低温保存,用酶联免疫吸附试验检测血清中IgM抗体.结果 1 411 例不孕不育患者IgM阳性127例,阳性率9.001%.其中男性206例,IgM阳性11例,阳性率5.340%;女性1 205例,IgM阳性116人,阳性率9.627%.115对夫妇中男、女性弓形虫IgM抗体阳性率分别为6.957%和19.13%.男女弓形虫感染率有显著性差异.结论 弓形虫在不孕不育人群中存在较高感染率,女性感染率高于男性,因此应高度重视并治疗弓形虫感染.     

单克隆双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵抗原

用双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵主要血清学抗原。为了在所用的单克隆抗体H6、C12、H7及B2中获得包被抗体与复盖抗体(酶联抗体)的最适组对,我们进行了20组配对试验。实验结果表明,H7单抗最适于作包被抗体而H6单抗最适于作复盖单抗。有兴趣的是最佳的配对组是H7-EH6和混合单抗-EHG组而不是混合单抗-E混合单抗组。上述两个最佳组对在10次试验的OD均值均较任何一组高,有非常显著的意义(P<0.01)。我们还观察到,同一单抗既作包被抗体又作复盖抗体的效果常不理想。     

红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究

目的 比较阿奇霉素、红霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫的效果.方法 用弓形虫RH株速殖子感染培养在盖玻片上的巨噬细胞,每一种药物根据其血药浓度及预实验设立2～3个浓度,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后用不同浓度的药物处理,每隔1小时在倒置显微镜下观察细胞及弓形虫的形态及生长情况,9天后取出盖玻片,经吉氏染色、二甲苯透明后,镜下观察.再将培养液及培养细胞注入鼠腹腔,观察小鼠的发病情况.结果 阿奇霉素的浓度在20 μg/mL 时具有抑制虫体生长的作用,＞40 μg/mL 时对巨噬细胞有明显的毒性.红霉素的浓度为100 μg/mL、150 μg/mL时可抑制弓形虫的生长与繁殖,但不能完全杀死虫体,形成假包囊,将假包囊及培养液接种小鼠腹腔,6天后,小鼠发病死亡,解剖小鼠后,可见大量的虫体.没有观察到100 μg/mL 、200 μg/mL的磺胺嘧啶及20 μg/mL、40 μg/mL的大蒜素抑制弓形虫生长的作用.结论 阿奇霉素具有明显的杀灭速殖子的作用,但浓度大于40 μg/mL时对细胞的毒性较大,100 μg/mL的红霉素可抑制弓形虫生长繁殖,形成假包囊(或包囊).当红霉素的浓度达150 μg/mL时,对弓形虫的抑制作用增强,但不能完全杀灭弓形虫.100 μg/mL、200 μg/mL的磺胺嘧啶及20 μg/mL、40 μg/mL的大蒜素对弓形虫的生长无抑制作用.