细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性行

目的 探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性.方法 鼻息肉组织标本29例,下鼻甲黏膜标本11例,免疫组化法检测上皮细胞Fas、FasL、Bcl-2和PCNA蛋白的表达活性,TUNEL过氧化酶原位标记法检测上皮原位细胞凋亡括性.结果 在鼻息肉组,PCNA阳性细胞指数(PIPCNA)大于自身的细胞凋亡指数(AI,P<0.01),而且PIPCNA和AI绝对值均大于下鼻甲组(P<0.01),但PIPCNA/AI比值(1.95±0.66)却小于下鼻甲组(P<0.01);FasL和Bcl-2阳性细胞指数(PIFasLL、PIBcl-2均大干自身的Fas阳性细胞指数(PIFasP<0.05),但该三指数均大干下鼻甲组(P<0.01);PIBcl-2/PIFas比值大于下鼻甲组(P<0.01),但组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 鼻息肉上皮细胞的增殖活性和凋亡活性均增强,但前者仍然大干后者;Bcl-2介导的细胞凋亡抑制机制和FasL介导的细胞免疫逃逸机制可能对鼻息肉上皮细胞凋亡活性产生部分抑制作用.     

鼻息肉上皮细胞增殖活性和凋亡活性的比较

目的 探讨鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡平衡状态及其发病学意义。方法 实验组（鼻息肉组）29例,对照组（下鼻甲组）11例,采用免疫组化染色法检测增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen, PCNA）的表达。采用TUNEL过氧化酶原位标记法检测原位细胞凋亡。结果 ①鼻息肉上皮PCNA 阳性细胞指数（PIPCNA）和凋亡细胞指数（AI）均大于下鼻甲（30.02±5.89,5.33±2.79）(两者P＜0.01),但鼻息肉上皮PIPCNA/AI值（1.95±0.66）小于下鼻甲（6.93±3.32）(P＜0.01)。②鼻息肉上皮PIPCNA（53.60±11.10） 大于AI（29.48±8.20）(P＜0.01)。结论 鼻息肉上皮细胞增殖活性和凋亡活性均增强,凋亡活性增强幅度较大,但总的来说,鼻息肉上皮细胞增殖率仍然大于细胞凋亡率,细胞累积增多,导致了鼻息肉上皮细胞的过度增殖。     

鼻息肉组织中凋亡与增殖相关蛋白的研究

目的探讨Fas、FasL因子及Ki-67抗原在鼻息肉组织中细胞增殖和凋亡病理状态中的表达.阐明鼻息肉在分子水平的发病机制。方法通过免疫组化SP方法,检测24例鼻息肉和10例正常下鼻甲组织中Fas、FasL及Ki-67的表达。结果①鼻息肉上皮细胞、腺上皮细胞中Fas的表达明显低于正常下鼻甲组织,而在炎性细胞中Fas表达显著高于下鼻甲;鼻息肉的上皮细胞、腺上皮细胞、炎性细胞FasL表达均高于正常下鼻甲组织。②鼻息肉上皮、腺上皮FasL表达显著高于Fas;而炎性细胞FasL表达低于Fas。③鼻息肉组织Ki-67的表达显著高于下鼻甲。结论①鼻息肉上皮细胞、腺上皮细胞存在着Fas的表达下调和FasL的上调,这可能使上皮细胞逃避了Fas和FasL系统介导的细胞凋亡而过度增殖。②鼻息肉上皮细胞有显著的增殖特性。     

鼻息肉组织中Fas和FasL的表达及其意义

目的:通过对鼻息肉组织中Fas和FasL因子的检测,以探讨Fas和FasL因子在鼻息肉发生,发展过程中的介导及调控作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,检测40例鼻息肉组织匀浆及5例正常鼻黏膜中Fas和FasL因子的基因表达。结果:40例鼻息肉组织中FasL呈强势表达,Fas呈弱势表达,其相对系数的平均指数分别为:(0.62±0.74)、(0.14±0.25),与正常对照组相比差别有统计学意义(均P<0.05)。Fas在正常鼻腔黏膜上皮细胞中的表达阳性率显著大于鼻息肉组织,FasL不表达。结论在鼻息肉的发生、发展过程中存在着Fas的表达下调和FasL的上调,鼻息肉上皮细胞逃避了Fas和FasL系统介导的细胞凋亡而过度增殖。     

鼻息肉中IL-15的含量及其与Bcl-2、Bcl-XL表达的关系

目的：观察IL-15在鼻息肉与下鼻甲中表达的差异及其与Bcl-2、Bcl-XL表达的关系,探讨IL-15在鼻息肉发病机制中的作用。方法用ELISA的方法测定24例鼻息肉与8例下鼻甲的IL-15含量,同时用免疫组化法检测其组织中Bcl-2及Bcl-XL的表达情况。结果鼻息肉组中IL-15表达高于下鼻甲组,差别有统计学意义（P＜0.05）。鼻息肉组中Bcl-XL表达高于下鼻甲组,差别有统计学意义（P＜0.01）;Bcl-2的表达两组间差别无显著性;IL-15的表达与Bcl-2和Bcl-XL的表达之间没有相关性。结论在鼻息肉发病过程中,IL-15在嗜酸性粒细胞等炎症细胞的凋亡抑制过程中可能扮演着重要的角色。     

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中Fas、FasL及Bcl-2的表达

目的探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(sinonasal inverted papilloma,SNIP)中的表达及其与Bcl-2表达的相关性。方法采用免疫组化法检测20例SNIP,10例鼻腔鳞状细胞癌及10例正常下鼻甲黏膜标本中Fas、FasL及Bcl-2的表达。结果SNIP和鼻腔鳞状细胞癌组织FasL阳性表达分别为65%和70%,显著强于正常下鼻甲黏膜组织(P均<0.01),而Fas阳性表达分别为25%和30%,均显著弱于下鼻甲组织(P均<0.01),差异均有统计学意义。FasL阳性表达强于Fas阳性表达。SNIP和鼻腔鳞状细胞癌组织中Bcl-2的表达分别为60%和90%,均显著高于正常下鼻甲黏膜组织(P均<0.01)。在SNIP组织中FasL表达与Bcl-2表达呈正相关(P<0.01),Fas与Bcl-2表达无相关性(P>0.05)。结论 Fas、FasL及Bcl-2在SNIP发生、发展中起重要作用。     

内耳免疫反应中细胞凋亡的研究

目的探讨内耳免疫反应过程是否引起细胞凋亡以及Fas和FasL、Bcl-2和Bax的表达情况。方法选用雌性白色豚鼠16只，随机分为实验组和对照组各8只，以钥孔蛾血蓝蛋白全身免疫后，实验组以相同抗原进行内耳免疫，对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水，在内耳免疫7d后处死动物，取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片。通过电镜和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL)检测内耳凋亡细胞，免疫组化检测内耳Fas和FasL以及Bcl-2和Bax的表达。结果透射电镜观察发现实验组术后7d内耳外毛细胞、血管纹细胞及螺旋神经节细胞都出现了凋亡细胞的特征性改变，而对照组未发现具有上述特征的细胞。实验组内耳Corti器毛细胞，血管纹的缘细胞和螺旋神经节细胞存在TUNEL染色阳性细胞，TUNEL染色阳性细胞具有凋亡细胞的典型形态学特征，对照组内耳的任何结构中都没发现TUNEL染色阳性细胞。免疫组化染色实验组Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带Fas和FasL蛋白表达阳性，而对照组只有螺旋神经节细胞和血管纹有较弱的Fas蛋白表达，FasL蛋白表达阴性。实验组Corti器、螺旋神经节细胞、侧壁Bcl-2蛋白表达阴性，对照组的Corti器、侧壁和螺旋神经节细胞Bcl-2蛋白表达阳性。实验组Corti器、侧壁和螺旋神经节细胞Bax蛋白表达阳性，对照组只有螺旋神经节细胞Bax蛋白表达弱阳性，Corti器、侧壁表达阴性。结论内耳免疫反应可诱导细胞凋亡发生，Fas-FasL是此过程的信号转导途径之一，Bcl-2和Bax蛋白在其中起了重要调节作用。     

红霉素干预对人鼻息肉上皮细胞凋亡的影响

目的观察红霉素对体外培养的鼻息肉上皮细胞B细胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphomas-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响,探讨上皮细胞凋亡在鼻息肉组织形成中的意义。方法将30例鼻息肉及15例下鼻甲组织均分成两组,分别对其上皮细胞进行原代培养,其中一组加入红霉素。培养第1、3、5天应用末端脱氧核苷酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸原位缺口末端标记法(the TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡情况,并用免疫组化法检测细胞凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2的表达。结果①鼻息肉红霉素组培养第1、3、5天的上皮细胞凋亡指数(用x±s表示,下同)分别为(33．23±6．50)％、(36．14±3．21)％和(52．63±7．86)％,对照组(不加红霉素组)为(31．02±5．60)％、(33．88±4．02)％和(39．64±7．48)％,培养第5天的上皮细胞凋亡指数红霉素组与对照组差异有统计学意义(t=4．480, P<0．05)。②鼻息肉上皮细胞Bcl-2和Bax表达均显著强于下鼻甲组织(P<0．01);培养第5天鼻息肉上皮细胞红霉素组Bax表达显著强于对照组(t=8．734,P<0．05),Bcl-2表达虽强于对照组,但差异无统计学意义;下鼻甲上皮细胞红霉素组与对照组的Bcl-2与Bax阳性表达差异均无统计学意义(P均>0．05);红霉素干预第5天鼻息肉上皮细胞显示明显的凋亡趋势(P<0．05)。结论红霉素能显著提高Bax蛋白的表达,有显著的促鼻息肉上皮细胞凋亡的作用。     

Fas及Bcl-2在鼻息肉组织中的表达及意义

目的：探讨Fas和Bcl 2在鼻息肉组织中的表达及与鼻息肉发病的关系。方法：应用S P免疫组化法检测36例鼻息肉组织及19例下鼻甲组织中Fas和Bcl 2的表达情况。结果： （1）Fas在鼻息肉上皮及腺上皮的表达弱于对照组（P＜0.05）；（2）Bcl 2在鼻息肉上皮及腺上皮的表达强于对照组（P＜0.05）；（3）鼻息肉上皮细胞中Fas、Bcl 2蛋白的表达无相关性（P＞0.05）。结论：（1）Fas和 Bcl 2在鼻息肉发生发展中起重要作用；（2）在NP上皮细胞中， Fas和Bcl 2无相关性，因此这两种凋亡基因在NP的形成过程中各起独立作用，协调抑制NP上皮细胞的凋亡。     

喉癌中Fas、FasL和Fas相关死亡结构域蛋白的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、FasL和Fas相关死亡结构域蛋白（Fas-associated death domain protein,FADD）基因在喉癌中的表达及其意义。方法免疫组化法检测喉癌及癌旁组织中Fas、FasL和FADD表达。结果喉癌组织中Fas、FADD阳性表达率显著低于癌旁组织,FasL阳性表达率显著高于癌旁组织（P〈0.05）;高分化鳞状细胞癌（简称鳞癌）Fas阳性表达率显著高于中低分化鳞癌（P〈0.05）,高分化鳞癌FasL阳性表达率显著低于中低分化鳞癌（P〈0.05）;FADD阳性表达率与肿瘤有无淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。Fas与FADD蛋白表达之间呈显著正相关（r=0.43,P〈0.05）。结论检测喉癌组织中Fas、FasL、FADD表达对评价喉癌的恶性程度、预后及治疗有重要意义。     

p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及肿瘤坏死因子在鼻息肉组织中的表达与意义

目的探讨p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及TNF-α在鼻息肉发病机制中的介导与调控作用。方法35例鼻息肉标本及15例下鼻甲组织标本，常规HE染色鉴别嗜酸性粒细胞浸润情况，免疫组织化学S-P法检测p38MAPK、P-p38MAPK、TNF-α的活性表达程度，并进行图像分析。结果鼻息肉组中p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α的表达活性均明显高于下鼻甲组（P〈0．05），而且p38MAPK及TNF－α表达干胞浆中，P-p38MAPK主要表达干胞核；p38MAPK、P-p38MAPK及p38MAPK及TNF-α蛋白的表达具有相关性。在对照标本，没有或仅少量表达p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α。结论在鼻息肉的发病机制中，p38MAPK信号传导通路处于激活状态，并且可能通过TNF-α蛋白表达活性的增强而加剧黏膜炎症反应，促进鼻息肉的发生与发展。     

Effect of erythromycin on the expression of apoptotic gene on eosinophils in nasal polyps in vitro]

OBJECTIVE: To study the expression of apoptotic gene in nasal polyps and the possible effect of erythromycin on it. METHODS: Total 40 nasal polyps biopsies were detected the expression of Bcl-2, Bax, Bcl-xL as well as Fas protein on eosinophils by immunohistochemistry. The expression of Bax, Bcl-xL, Fas on eosinophils in 15 nasal polyps explants which cultured with or without erythromycin were detected also. RESULTS: In nasal polyps, the expression of Bcl-2, Bax, Bcl-xL and Fas protein on eosinophils are 5% (2/10), 65% (26/40), 40% (16/40) and 90% (36/40) respectively. As compared with inferior turbinate, there were significant difference in expression of Bax and Fas protein between two tissues (P < 0.05). After cultured with erythromycin, the expression of Bax protein increased (P < 0.05), but the expression of Bcl-xL and Fas protein had not changed. CONCLUSION: Bax may be the most significant gene which control the apoptosis of eosinophils in nasal polyps. And a possible mechaism which erythromycin promote the apoptosis of eosinophils is increase the expression of Bax.     

CCR3和CXCR4在鼻息肉组织中的表达

目的分析CCR3和CXCR4在鼻息肉组织中的表达活性及其病理意义。方法应用免疫组织化学SP法检测41例鼻息肉组织和29例慢性肥厚性鼻炎患者下鼻甲黏膜中的CCR3及CXCR4表达活性,分析其与鼻息肉的病理关系。结果鼻息肉组织中CCR3和CXCR4阳性细胞数均显著高于对照组,其差异具有统计学意义(P<0.001)。结论CCR3和CXCR4的过表达与鼻息肉的病理关系密切,拮抗剂治疗可能成为鼻息肉的新疗法。     

鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系

目的：探讨鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系。方法：收集60例确诊为鼻息肉的患者,采用免疫组织化学SP染色法检测其鼻息肉组织中TSLP的表达,ELISA法检测组织中IL-4、IL-5、IFN-γ及IL-13的表达,并分析其与TSLP表达的相关性。结果：TSLP在鼻息肉组织中较正常下鼻甲黏膜表达高,而IL-4、IL-5、IFM-γ和IL-13在鼻息肉组织表达显著增高（P〈0．05）。TSLP与IL-4、IL-5、IL-13呈显著正相关（r分别为0．475、0．594和0．582,P〈0．01）,TSLP与IFN-γ呈显著负相关（r=-0．614,P〈0．01）。结论：TSLP高表达可能会促进T细胞向Th2方向分化,参与鼻息肉的发生、发展,并加重鼻部Th2炎症反应。     

糖皮质激素受体-α表达下调与鼻息肉相关性的研究

目的 检测糖皮质激素受体α(glucocorticoidreceptor-α,GR-α) mRNA在鼻息肉组织及健康人群鼻腔下鼻甲黏膜、窦口鼻道复合体(ostiomeatal complex,OMC)区黏膜的定量表达,并探讨其在鼻息肉发生发展中可能存在的的机制.方法 采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR...     

红霉素促进鼻息肉上皮细胞凋亡的实验研究

目的：观察红霉素对上皮细胞凋亡的影响，探讨上皮细胞凋亡在鼻息肉组织形成中的意义。方法：将30例鼻息肉及6例下鼻甲上皮细胞均分成2组，1组加红霉素，培养原代上皮细胞，另1组不加红霉素，1、3、5?d时用TUNUL法检测细胞凋亡。结果：红霉素组培养1、3、5?d的上皮细胞凋亡指数分别为（33.23±6.50）%、（38.21±7.22）%和（52.63±7.86）%，不加红霉素组为（31.02±5.60）%、（32.13±7.15）%和（39.64±7.48）%，培养5?d的上皮细胞凋亡指数两组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：红霉素有明显的促鼻息肉上皮细胞凋亡的作用。     

Protein kinase C in eosinophil proliferation and infiltration in nasal polyp tissue]

OBJECTIVE: To explore the significance of protein kinase C (PKC) in eosinophil (EOS) proliferation and infiltration in nasal polyp tissues. METHODS: With the methods of in situ hybridization and immunohistochemistry staining, PKC and apoptosis gene (Bcl-2, Bax) expression were measured between nasal polyps from 26 patients and inferior turbinate mucous membrane tissue (ITMMT) from 20 normal persons. EOS was identified with May-Grünwald-Giemsa (MGG) staining. RESULTS: In EOS, the positive cell expressive rate of Bcl-2 mRNA and its protein were significantly higher in group of nasal polyps than that in group of ITMMT (P < 0.01). Although the positive cell expressive rate of Bax mRNA and its protein were slightly higher in group of nasal polyp tissue than that in group of ITMMT, the difference was not significant (P > 0.05). PKC was expressed in EOS of all 26 cases from nasal polyp tissues, but in 20 cases from ITMMT, only 7 cases showed occasional PKC expression. In both groups, PKC positive cell expression was significantly different, and the expression of PKC and Bcl-2 mRNA as well as their protein in EOS of nasal polyps showed remarkably positive relation (r1 = 0.0875, r2 = 0.0823, P < 0.01). CONCLUSION: PKC expression increasing in EOS of nasal polyp tissues was closely associated with apoptosis inhibiting. So we presumed that EOS inhibiting in nasal polyp tissues was obtained by activating PKC signal transduction pathway.     

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中增殖细胞核抗原和Bcl-2的表达及意义

目的检测、观察和对比鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(sinonasal inverted papillomas,SNIP)增殖的上皮和鼻息肉(nasal polyps,NP)炎性上皮中细胞增殖和凋亡抑制的表达情况并分析其相关性,探讨细胞增殖和凋亡抑制在SNIP发生和发展中的作用及意义。方法 SNIP标本30例,均为初发病例;鼻内镜手术中所取NP标本15例,亦均为初发病例。用免疫组化法检测标本上皮中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Bcl-2的表达情况。结果在30例SNIP标本和15例NP标本中PCNA和Bcl-2均有表达,在SNIP标本中两者表达均高于15例NP标本(t=5.626,P=0.0001;t=2.539,P=0.011)。在SNIP标本中,细胞增殖与细胞凋亡抑制的表达呈正相关(r=0.53,P<0.005)。结论细胞增殖及凋亡抑制可能共同参与了SNIP的发生及发展。细胞增殖在SNIP的发生和发展中起主要的作用。相关分析显示PCNA与Bcl-2分别作为细胞增殖辅助因子和细胞凋亡的调控基因在SNIP的发生发展中可能具有一定的相关性。