应用单宁酸的负染色效果显示大鼠生殖器官微血管

近百年来,许多学者为研究器官内血管立体构筑倾注了大量心血,创造了多种显示微血管构筑的方法,诸如墨汁灌注法,橡胶、维尼龙血管、淋巴管立体铸型法,微血管铸型扫描电镜法,碱性磷酸酶法（钙铅法）以及单宁酸-氯化铁媒染法（TA-Fe法）,为科学研究及临床应用做出了贡献。继TA-Fe法媒染微血管后,我们又发现单宁酸过度媒染某些组织结构,有类似电镜标本负染色技术效果,清晰地显示了大鼠子宫、卵巢、输卵管等器官的血管构筑特点。     

单宁酸—金属盐联用媒染脑血管的研究

用２％多聚甲醛，２％戊二醛配伍不同浓度的单宁酸媒染固定液灌流大鼠，取服切片，放入２％氯化铁溶液中呈色，成功地显示了脑内各级血管及毛细血管网的形貌。高倍镜下可见各级血管呈空心管道状，基僻赤多条细纤维丝状结构编织或呈同心圆状排列而成，具有较强的立体感。     

多种金属离子与单宁酸反应媒染微血管的对比研究

目的　镜下观察单宁酸与金属盐溶液中Ca2 + 、Au+ 、Ag+ 、Pb2 + 、Cu2 + 、Al3 + 、U6+ 、K+ 联用显示大脑微血管的效果。方法　用单宁酸媒染固定液灌流大鼠 ,取脑切片 ,入氯化钙、氯化金、硝酸银、硝酸铅、硫酸铜、硫酸铝钾、醋酸双氧铀、高锰酸钾和重铬酸钾等溶液中呈色。结果　单宁酸与Ca2 + 、Cu2 + 、Ag+ 、Al3 + 结合显示血管清晰 ,与Au+ 、U6+ 、Pb2 + 、K+ 联用媒染血管效果欠佳。结论　含Ca2 + 、Cu2 + 、Ag+ 、Al3 + 的金属盐类可替代氯化铁媒染微血管 ,氯化金、醋酸双氧铀、硝酸铅、重铬酸钾和高锰酸钾不宜与单宁酸联用来显示血管     

改良单宁酸-氯化铁法媒染子宫血管的实验研究

目的：光镜下观察大鼠子宫各部位血管构筑。方法：应用单宁酸一氯化铁法(TA—Fe法)灌流固定大鼠，取子宫不同位置做冰冻切片，氯化铁显色，常规脱水、透明、封片，显微摄影。结果：子宫壁出现类似电镜负染色效果，组织结构灰黑色，血管双线条状，分支明显，过管壁切面可见内皮细胞或平滑肌；子宫动脉进入肌层分支并形成一、二级血管网和多支环状动脉，环行动脉或二级血管网发出的微动脉和毛细血管进入粘膜，形成密集的三级毛细血管网。结论：经灌流的子宫标本较长时间保存在媒染固定液内，导致血管外结构也被媒染；子宫壁有三级血管网；每个子宫有多支环状动脉；各段子宫血管构筑不尽相同。     

血管生成抑制素canstatin的新发现

Ｃａｎｓｔａｔｉｎ是 2 0 0 0年 1月由Ｋａｍｐｈａｕｓ等[1] 发现的一种新的血管生成抑制素。它具有较强的抑制血管内皮细胞增殖、迁移及诱导内皮细胞凋亡 ,抑制肿瘤的作用 ,因此受到广泛关注。1　Ｃａｎｓｔａｔｉｎ的发现和命名研究表明 ,实体肿瘤生长和转移必需新生血管的形成[2 ] ,血管基底膜胶原的合成和沉积对血管形成和存活至关重要[3] 。血管基底膜由一系列细胞外基质蛋白构成 ,如ＩＶ型胶原层连蛋白、硫酸肝素糖蛋白、纤连蛋白等[4 ] 。其中以ＩＶ型胶原含量最为丰富。ＩＶ型胶原可促进细胞粘附、迁移、分化、生长。因此 ,ＩＶ型…     

单宁酸—氯化铁法媒染肾上腺血管的观察

用２％多聚甲醛、２％戊二醛、２％单宁酸配制的媒染固定液灌流大鼠，取肾上腺做冰冻切片放入２—３％氯化铁溶液中呈色，成功地显示了肾上腺皮质、髓质血窦的形貌。高倍镜下可见血窦呈空心管道状，其管壁为细纤维丝状结构编织而成，具有较强立体感。     

应用单宁酸-金属盐法媒染脾血管的实验研究

用媒染固定液（２％戊二醛、２％多聚甲醛、２％单宁酸混合液配制）灌流大鼠,取脾做２０－４０μｍ的冰冻切片,蒸馏水复温清洗后入２－３％氯化铁溶液内呈色,１％明胶封片,光镜观察结果：低倍镜示染小动、静脉各级分支以及毛细血管管壁均被染成蓝黑色,脾小结处毛细血...     

单宁酸-氯化铁法媒染肺内微血管及细胞的组织学观察

目的　光镜下观察大鼠肺微血管及肺组织细胞。方法　应用单宁酸 氯化铁法 (TA Fe法 )灌流固定大鼠 ,取肺做冰冻切片 ,氯化铁显色 ,光镜下观察。结果　肺内小血管、微血管蜿蜒走行 ,被切成各种断面 ,管壁平滑肌细胞、内皮细胞显示清晰 ,有一定立体感 ;接近被膜的微动脉形成较粗的毛细血管 ,肺泡间毛细血管不易分辨 ,肺间质内有微血管和毛细血管分布 ,微血管周围的肺组织亦被媒染。结论　TA Fe法即可显示肺内微血管 ,又能保存组织细胞结构 ,肺内小动脉和微动脉管壁的平滑肌参与微循环的主动调节机制。     

单宁酸-氯化铁法对SHR脑微血管密度的观察

目前对高血压病血管病变的研究主要集中在“重构”、功能改变及其机理的研究上,也有少数研究发现高血压时血管的数量也会发生改变,即微血管减（稀）少。但是否高血压时各器官普遍存在微血管变少,以及它与高血压病发生的先后（因果）关系,仍研究不够。而且研究方法主要局限在传统的墨汁灌注法。本实验采用单宁酸一氯化铁组织化学方法媒染血管和图像分析技术对不同龄高血压大鼠和正常血压对照组大鼠脑微血管的密度进行定量分析．以进一步明确高血压状态时脑内微血管密度的变化,以及它与高血压发生发展的因果关系。     

应用单宁酸-氯化铁法筛选长爪沙鼠脑底动脉Willis环变异

背景:以往曾采用阳性体征来判断长爪沙鼠脑缺血的有无,但存在人为影响因素较大、指标不严谨等缺点。单宁酸-氯化铁法媒染微血管效果可靠,方法简捷易行,重复性好,有可能从血管角度筛选以克服上述缺点。目的:探索一种简便、可靠的筛选长爪沙鼠脑底Willis环变异的方法。方法:根据Kirino法制作长爪沙鼠前脑缺血模型,激光多普勒血流仪监测脑组织血流量,单宁酸-氯化铁法显示脑组织微血管。结果与结论:夹闭双侧颈总动脉后,多普勒监测到前脑仍存在血流量的长爪沙鼠,经单宁酸-氯化铁染色证实均存在Willis环变异。研究表明应用单宁酸-氯化铁法显示微血管,可简便、可靠地筛选出脑底Willis环变异的长爪沙鼠。     

利用媒染染料茜素蓝S显示硫酸化粘液物质

媒染染料的主要特征是当加不同媒染剂时,其染色性能亦不相同。Puchter(1974)以氯化铁作为媒染剂配制茜素蓝S溶液,细胞核染成蓝色,软骨和嗜碱性细胞亦成蓝色,他认为这个络合物和铬矾—核酸菁蓝相似,可能是与核酸的磷酸基结合。天青石蓝用铬矾或硫酸铜作媒染剂时,核染成蓝色,软骨和粘液染成紫色。用铁矾或氯化铁作媒染剂,则可代替苏木精显示细胞核。上皮细胞内酸性粘液物质的分布很广,其化学性质分硫酸化和非硫酸化(羧酸化)两种,而且在同一种上皮和粘液腺内常以混合形式存在,因此用一种染色是不易区分的。欲区分硫酸化和羧酸化粘液物质,多采用Spicer(1960)醛品红与爱先蓝结合染色法,因醛品红     

改进TA-Fe法显示大鼠肾血管和肾小管的研究

目的 光镜下观察改进单宁酸-氯化铁法（TA—Fe法）媒染肾微血管和肾小管的效果。方法 经TA-Fe法媒染的大鼠肾的两组冰冻切片。一组切片用TA—Fe法，湿片拍照；另一组切片用改进TA—Fe法经脱水、透明、封片。显微摄影。结果 两种TA—Fe法均能显示肾微血管和肾小管。改进TA—Fe法使组织结构更清晰．肾血管球毛细血管分叶更明显。肾小囊上皮、毛细血管内皮细胞、足细胞以及球内系膜细胞核亦被良好显示。切片可较长时间保存。但立体感较改进前略差。结论 改进后的TA—Fe法显示肾微血管和肾血管效果更好，适合做回顾性研究。     

同时显示肾微血管和细胞构筑的实验研究

目的：在媒染微血管的同时显示肾内细胞构筑，以了解肾微血管与肾小管之间的相互关系。方法：用单宁酸一氯化铁法(TA—be)媒染肾微血管，再以苏木精、H—E法复染来观察肾小管细胞结构。结果：经复染的2组切片各级血管和细胞均染色良好，血管壁平滑肌纤维、内皮细胞界限清晰，细胞核蓝染，H—E染色的细胞质呈深浅不同的红色。因切片较厚，保证了微血管的立体感，细胞的染色效果却不及薄切片的鲜艳。结论：TA—Fe法配合苏木精或HE复染，可同时显示肾微血管和细胞构筑。     

应用单宁酸增加致密核心小泡电子密度的研究

对如何应用单宁酸提高密核心小泡电子密度进行了研究，结果发现实验组动物应用单宁酸后，其延髓背角胶状质的超微结构出现了如下特征性变化；（１）膜结构清晰度增加，反差鲜明；（２）大、小致密核心小泡均被媒染，其电子密度显著提高、大致密核心小泡于突触部位胞吐入细胞间隙内的介质，被即时媒染、固定。     

慢性肾功能不全患者血层粘连蛋白和α1-微球蛋白测定的意义及评价

层粘连蛋白(laminin,LN)是细胞外基质成分中的一种非胶原糖蛋白,主要存在于基底膜的透明层,与Ⅳ型胶原等共同维持基底膜的结构和功能.自从Timpl等人于1979年首次从EHS肉瘤中发现LN并命名以来,已相继发现LN在某些疾病中可以异常增多,如肝病[1]、肿瘤[2]及微血管病[3]等.     

TA-Fe法媒染骨骼肌微血管及肌纤维的光镜研究

目的　光镜下观察骨骼肌微血管构筑及其与肌纤维的关系。方法　应用单宁酸媒染固定液灌流大鼠 ,取髂腰肌 ,冰冻切片 ,氯化铁显色 ,光镜下观察。结果　髂腰肌内微动脉以一定角度进入肌束内 ,形成毛细血管前微动脉或毛细血管营养纤维 ,毛细血管可同向走行 ,亦可呈反向或爪形分支 ,常见两条或者几条毛细血管互相吻合成网 ,多数毛细血管长距离直行于肌纤维之间 ,偶见波浪状走行者 ,毛细血管呈双线条状 ,可见细胞核 ,肌纤维保存完好 ,横纹清晰。结论　TA Fe法可清晰的显示髂腰肌微血管和肌纤维 ,血管内皮细胞和肌细胞的核明显     

血管紧张素II和洛沙坦对肝星状细胞合成胶原的影响

目的 :探讨血管紧张素II及其 1型受体 (AT1a)拮抗剂洛沙坦 (losartan) ,对肝星状细胞合成胶原的影响。方法 :①大鼠肝星状细胞的分离、培养及鉴定 ;②在不同浓度的血管紧张素II和洛沙坦作用下 ,采用 [3 H]-脯氨酸掺入释放法分别检测肝星状细胞生成胶原的情况。结果 :①细胞得率为 2× 10 7- 3× 10 7个 /只 ,活力在 95 %以上 ,纯度超过 90 %。②血管紧张素II在浓度为 10 -6mol/L - 10 -10 mol/L时 ,肝星状细胞生成胶原明显增多 (P <0 0 5 ) ;血管紧张素II浓度与胶原量呈正相关 (r=0 96 0 ,P <0 0 1)。洛沙坦在浓度为 10 -6mol/L - 10 -9mol/L时 ,胶原生成量显著减少 (P <0 0 5 ) ;且浓度与胶原生成量呈负相关 (r=- 0 882 ,P <0 0 1)。结论 :血管紧张素II可以促使肝星状细胞产生大量的胶原 ;洛沙坦通过拮抗AT1a后 ,胶原合成量显著减少 ,提示血管紧张素II在促使肝纤维化的发展过程中起着重要的作用 ,AT1a的拮抗剂有望为阻止肝纤维化发展提供新策略     

不同浓度生肌玉红胶原对鸡胚尿囊膜血管新生的影响

目的:观察不同浓度生肌玉红膏提取液载入修饰后胶原(生肌玉红胶原)促鸡胚尿囊膜(CAM)血管新生的作用。方法:实验分空白组、对照组(无药胶原)、实验组1、2、3(分别将生肌玉红膏提取液以0.8、1.6、3.2mg/ml载入胶原),各组胶原植入7日龄CAM,孵化7天后取出,观察鸡胚成活、血管生长、胶原降解情况,测定植入胶原周围CAM内微血管数和胶原内血红蛋白浓度以及胶原内组织总DNA含量。结果:各实验组CAM内血管围绕胶原呈轮辐状生长,胶原包裹率和降解率均以实验组2最高,实验组2植入胶原周围CAM微血管数和血红蛋白含量以及胶原内总DNA量均高于对照组及其它实验组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:生肌玉红胶原可以促进CAM血管新生,最佳浓度为1.6mg/ml。     

在线虫,C.elegans,Laminin〆链基因突变导致神经发育异常

Laminin是一个巨大的糖蛋白家族,是构成细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的主要成分,通过直接和间接地与其它细胞外基质蛋白质如四型胶原蛋白,硫酸肝素,nidogen/entactin,proteoglycan[1、2]等的相互作用形成网状结构,构成基底膜[3]。研究显示Laminin通过与细胞表面受体相互作用影响细胞的粘附、转移、生长和分化[4],因此,Laminin在细胞的发育,组织的形成及基底膜的机械支撑等方面起着重要的作用。Laminin对神经细胞的作用尚不完全清楚,中枢神经系统与其它系统组织不同,被认为缺乏细胞外基质。在高等脊椎动物,由于分化成熟的神经元不…     

应用单宁酸-氯化铁法显示小脑不同部位的微血管构筑

目的　光镜下观察 6只大鼠小脑前叶、后叶及蚓部微血管构筑。方法　用单宁酸 -氯化铁法 (TAFM)媒染显示小脑内血管。结果　小脑各部位皮质、髓质动脉均来源于软脑膜动脉和小脑动脉中央支 ,软脑膜动脉分支多以直角进入小脑皮质 ,分别在分子层、蒲肯野细胞层、颗粒层形成毛细血管网 ;小脑后叶髓质中微动脉呈爪状分支 ,小叶两侧皮质深层微动脉或毛细血管可跨过髓质互相沟通。结论　 TAFM显示小脑微血管构筑清晰、立体感强 ,并发现小叶内皮质深层微血管之间有吻合支