胃癌中P16基因启动子区甲基化检测的临床意义

目的：探讨P16基因启动子区域甲基化在胃癌发生和发展过程中的临床意义。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）对37例胃癌病人手术切除肿瘤组织及其癌旁组织P16基因启动子区域甲基化状态进行检测。结果：P16基因在手术切除的29．7％的胃癌组织和2．7％的癌旁组织发生了甲基化，且与年龄、性别、淋巴结转移以及分化程度等临床病理指标无相关性。结论：P16基因启动子区甲基化可能是肿瘤特异性的（P〈0．05），可作为胃癌早期诊断的分子标记物。     

胃癌DAPK1基因启动子甲基化状况及表达的研究

目的对DAPK1基因甲基化状态、表达进行研究,探讨基因甲基化在胃癌发病中的作用。方法用半定量RT-PCR方法研究胃癌及癌旁组织中DAPK1基因的表达,用甲基化特异性PCR（MSP）对胃癌及癌旁组织中DAPK1基因启动子区甲基化情况进行研究。结果 DAPK1有16例表达下调,6例表达上调,基因在癌旁组织的mRNA表达明显高于癌组织,具有统计学意义（P=0.465）。DAPK1在胃癌组织及癌旁组织中甲基化率均为100%,无统计学意义（P〉0.05）。结论胃癌组织中DAPK1基因表达下降与该基因甲基化无明确相关性。     

E-cad在肺癌的表达及意义

目的研究E-cad在肺癌的表达及意义,探讨其与肺癌的组织类型、病理分级及淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化S-P法检测E-cad在104例肺癌的表达,其中鳞癌46例、腺癌33例、小细胞癌10例、其它类型癌15例。结果E-cad在104例肺癌的阳性表达为鳞癌21例(45.7%),腺癌14例(42.4%),小细胞癌5例(50%),其它类型癌为7例(46.7%)。结果显示E-cad的阳性表达与肺癌组织类型无相关性(P>0.05);淋巴结转移阳性表达(32.1%),无淋巴结转移阳性表达(64.6%),二者表达有显著相关性(P<0.05);病理分级(腺癌、鳞癌)Ⅰ级阳性表达(55.6%),Ⅱ级阳性表达(40%),Ⅲ级阳性表达(29.6%),结果显示也有明显相关性(P<0.05)。结论肺癌组织中E-cad的阳性表达与肺癌淋巴结转移及分化程度有关。检测E-cad的表达可作为判断肺癌预后的重要指标。     

胃癌及癌前病变中hMLH1启动子区甲基化及表达的研究

目的：探讨具微卫星不稳定性表型的胃癌、癌前病变组织中hMLHl基因启动子区甲基化及其表达的情况。方法：采用同工酶切产物特异性扩增法检测组织hMLHl基因启动子区甲基化情况。并且免疫组化法检测其在组织中的表达。结果：胃癌组织、癌前病变组织甲基化的发生率分别为4l.5％、19．6％；MSI-H、MSI-L、MSS组中甲基化发生率及蛋白异常表达率分别为100％、71．4％；57．9％、52．6％；l.5％、0。结论：MSI阳性组织中hMLHl基因启动子区甲基化发生率高于MSS组，且蛋白表达异常的发生率明显高于MSS组。表明hMLHl基因异常甲基化为基因转录失活的主要原因，且此基因甲基化为胃癌组织中MSI发生的重要因素,从而促进胃癌的发生。     

胃癌及癌前病变中p16基因启动子异常甲基化研究

目的 探讨p16基因异常甲基化在胃癌发生中的作用.方法 应用甲基化特异性pCR技术检测胃腺癌及癌前病变组织中p16基因甲基化状态,并应用免疫组化染色检测p16蛋白的表达.结果 慢性萎缩性胃炎、重度异型增生及胃腺癌组织p16基因启动子甲基化阳性率分别为11.1%、40%和43.3%.胃腺癌组与浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组及轻-中度异型增生组间p16基因甲基化阳性率差异有显著性(P＜0.05),而与重度异型增生组间差异无显著性(P＞0.05).p16蛋白阳性率在胃腺癌组、重度异型增生、轻-中度异型增生、萎缩性胃炎组和浅表性胃炎组分别为36.7%、40%、85.7%、83.3%和100%;在19例p16基因甲基化阳性病例中,18例p16蛋白缺失.结论 p16基因启动子异常甲基化可能是其在胃癌蛋白表达缺失的主要原因.p16基因启动子异常甲基化可能是胃癌发生的早期事件,在胃癌的发生起重要作用.     

胃癌p16基因启动子CpG岛甲基化研究

目的：探讨p16基因启动子CpG岛甲基化在胃癌中的表达及意义．方法：采用特异性甲基化PCR（MSP）法检测p16基因启动子CpG岛甲基化水平．结果：对照组未检测到CpG岛甲基化,胃癌细胞株均检测到CpG岛甲基化,23例（74％）胃癌组织检测到CpG岛甲基化．此外,17例（74％）癌旁组织检测到CpG岛甲基化．胃癌组织p16基因CpG岛甲基化与分化程度及淋巴结转移之间无相关关系（P〉0．05）．结论：胃癌广泛存在p16基因启动子CpG岛甲基化,并且可能是胃癌发生的早期分子事件．     

胃癌中Runx3表达及其甲基化

目的探讨Runx3表达及其甲基化与胃癌的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测42例胃癌组织、癌旁正常组织及转移淋巴结中Runx3 mRNA的表达,同时用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3甲基化状况。结果胃癌组织、转移淋巴结、癌旁正常组织中Runx3 mRNA的表达相对值分别为0.569±0.131、0.609±0.141、0.871±0.237,胃癌组织、转移淋巴结与癌旁正常组织相比,均有显著性差异（P〈0.05）。胃癌组织、转移淋巴结Runx3甲基化阳性率分别为71.4%、62.5%,两者无显著性差异（P〉0.05）;而癌旁正常组织中未检测到Runx3甲基化。胃癌组织中Runx3甲基化表达与肿瘤的分化程度有关,与性别、肿瘤大小、浸润深度等临床病理特征无关。结论Runx3甲基化是胃癌发生、发展过程中的频繁事件,通过对其检测,可能会对胃癌的早期诊断、治疗提供重要依据。     

胃癌中IRX1的表达与启动子区甲基化的相关性

目的探讨胃癌中同源盒基因IRX1的表达与启动子区甲基化修饰之间的关系。方法生物信息学软件分析IRX1基因启动子区;RT-PCR检测胃癌细胞株及手术切除胃癌组织IRX1基因mRNA表达水平;MSP及BSP法检测启动子区甲基化状态;检测去甲基化试剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷的干预对胃癌细胞IRX1基因表达的逆转效应。结果经生物信息学预测IRX1基因转录起始点上游启动子区富含CpG岛;胃癌细胞株及胃癌组织IRX1基因表达有不同程度下调;MSP及BSP检测显示所有胃癌细胞株启动子区呈高甲基化状态;经5-Aza-CdR处理的细胞株IRX1基因的表达有不同程度上调。结论胃癌中IRX1基因的表达下调与启动子区甲基化修饰有一定关系,为探讨IRX1基因作为去甲基化治疗靶点的可能性提供了实验数据。     

胃癌及癌旁组织中Runx3基因甲基化研究及临床意义

目的:探讨Runx3基因启动子区域甲基化及表达在胃癌发生和发展过程中的意义。方法:采用DNA甲基化特异性PCR(MSP)技术对35例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测,同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Runx3 mRNA的表达情况。结果:Runx3基因在35例胃癌及其癌旁组织中甲基化率分别为40.0%(14/35)和8.5%(3/35);胃癌组织标本中Runx3基因表达(0.593 8±0.100 7)较癌旁正常组织表达(0.831 1±0.287 2)明显下调,差异有统计学意义(P﹤0.05)。Runx3 mRNA在胃癌标本的表达与其病理临床特征密切相关,在伴有淋巴结转移和低分化的胃癌组织标本中Runx3 mRNA的表达显著下调(P﹤0.05)。结论:Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与胃癌的发生发展密切相关,可作为胃癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。     

MSP法检测胃癌的PTEN基因甲基化改变

目的:检测胃癌中抑癌基因PTEN启动子区域甲基化状况,并探讨其甲基化改变的特点与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异的PCR法(MSP)检测胃癌组织及相应癌旁组织(各35例)中PTEN启动子区域甲基化状态。结果:35例癌旁正常胃组织未发现有PTEN基因启动子的甲基化,16/35例胃癌组织检测到PTEN基因启动子的甲基化,癌组织PTEN基因启动子甲基化率显著增高(P<0.05)。有淋巴结转移的19例胃癌组织中,有12例PTEN基因启动子甲基化,有淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:PTEN基因启动子的甲基化与胃癌的发生、转移相关。甲基化特异的PCR法(MSP)是检测胃癌抑癌基因PTEN启动子区域甲基化状况的一种较新且特异的实验方法,可用于胃癌的辅助诊断和预后判断。     

PTEN异常表达及甲基化与PTC的关系

目的探讨PTEN异常表达及其基因启动子区异常甲基化与甲状腺乳头状癌发生、发展及转移的关系。方法采用免疫组化、western-blot、甲基化特异性PCR(MSP)分析正常甲状腺与甲状腺乳头状癌组织中PTEN蛋白表达差异及PTEN基因启动子区甲基化情况。结果与正常甲状腺组织相比,甲状腺乳头状癌组织中PTEN蛋白表达明显下调(P<0.01),同时笔者发现PTEN基因蛋白的下调与肿瘤的淋巴结转移状况呈负相关(P<0.005),且甲状腺乳头状癌组织中PTEN基因启动子区甲基化程度显著增高。结论 PTEN蛋白低表达是甲状腺乳头状癌的发生、转移的重要原因之一,其低表达与基因启动子区过度甲基化有关。     

CD168在胃癌中的表达及临床意义

目的 研究CD168在胃癌组织中的表达及与胃癌临床特征的关系.方法 采用免疫组化SABC法检测92例胃癌组织中CD168的表达情况;根据CD168表达分为阳性组（n=30）和阴性组（n=62）,分析CD168表达与临床病理特征（年龄、性别、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结侵犯、血管侵犯等）的关系.结果 胃癌组织中,CD168蛋白表达阳性率为32%;CD168阳性表达肿瘤浸润深度、淋巴结转移、淋巴管及血管侵犯呈显著相关,生存分析显示：CD168阳性表达组的5年生存率显著低于阴性组（P＜0.05）,多因素回归分析显示：CD168表达阳性、淋巴结侵犯、浸润深度,为影响预后独立的危险因素.结论 CD168阳性表达与胃癌侵袭性及转移相关,并可作为胃癌的预后指标.     

增殖细胞核抗原和P糖蛋白在胃癌中的表达和意义

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)和P糖蛋白在判断胃癌预后、指导化疗中的意义。方法 :采用S -P免疫组化染色法。结果 :低分化腺癌PCNA阳性率 (97 4% )明显高于高分化腺癌PCNA阳性率 (75 0 % ) ,两者具有极显著性差异 (P <0 0 1 ) ;低分化腺癌的PCNA表达强度高于高分化腺癌 ,且差异具有显著性 (P <0 0 5 )。P糖蛋白表达与淋巴结转移及肿瘤细胞的恶性程度无关 (P >0 0 5 )。结论 :对胃癌病人进行PCNA、P糖蛋白检测 ,在判断预后、指导化疗中起重要作用     

MCM4蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的检测胃癌组织中微小染色体维持蛋白4（MCM4）的表达,探讨MCM4表达异常与人胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测45例胃癌,20例同期癌旁正常胃组织中MCM4蛋白的表达。结果45例胃癌组织中MCM4蛋白的阳性表达率为91．11％（41／45）,对照组均为阴性表达,两组比较差异有统计学意义（P〈0．001）。胃癌组中MCM4蛋白的阳性表达与淋巴结转移、组织学分级有关（P〈0．05）,而与胃癌患者的年龄、肿瘤大小、组织学类型、浸润深度及TNM分期无关（P〉0．05）。结论细胞复制准许因子MCM4蛋白的高表达可能参与了人胃癌的发生、发展过程,MCM4蛋白的检测可作为评价胃癌癌细胞的增殖状态、预测胃癌临床预后、指导临床治疗的重要生物学指标。     

E-cad、MMP-2在子宫腺肌病中的表达及意义

目的：研究E-cad、MMP-2在子宫腺肌病中的表达，探讨其表达与子宫腺肌病发生的相关性．方法：应用免疫组化SP染色法检测30例子宫腺肌病在位内膜、异位内膜、16例对照组子宫内膜E-cad、MMP-2的表达．结果：E-cad在子宫腺肌病在位内膜组中的表达显著低于对照组（P〈0．05）；E-cad在子宫腺肌病异位内膜组中的表达显著低于子宫腺肌病在位内膜组（P〈0．01）．MMP-2在子宫腺肌病异位内膜组中的表达显著高于子宫腺肌病在位内膜组及对照组（P〈0．01，P〈0．01）．结论：E-cad、MMP-2的异常表达可能与子宫腺肌病的发生有关．     

胃癌组织CyclinE表达的研究

用免疫组化SP法测定胃癌石蜡切片中cyclinE蛋白异常表达，以探讨其表达在胃癌中的意义。结果表明，cyclinE表达在胃癌中为62％，癌旁组织为23．32％，二者相比有显著差异（P＜0．005），并与分化程度呈负相关，而与淋巴结转移无关。因此cyclinE过表达可作为胃癌的一个潜在性诊断指标。     

E-cadherin、p16蛋白表达与子宫内膜癌临床生物学特征关系的研究

目的　探讨E 钙粘附蛋白 (E cad)及p16蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义。方法　采用免疫组化SP法对 38例子宫内膜癌及 19例正常子宫内膜组织进行了p16蛋白及E 钙粘附蛋白的免疫组化检测。结果　①在子宫内膜癌与正常子宫内膜组织中 ,E cad和p16蛋白的表达差异显著 (P <0 .0 1)。②E cad表达与子宫内膜癌的病理类型、肌层浸润和临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,与病理分级、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ;p16蛋白表达与子宫内膜癌的病理类型及病理分级无关 (P >0 .0 5 ) ,与淋巴结转移、肌层浸润和临床分期有关 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论　E cad及p16蛋白在子宫内膜癌的发生及进展过程中起重要作用。     

宫颈癌RAS相关区域家族1A基因启动子甲基化检测及临床意义研究

目的 检测宫颈癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子甲基化状态并探讨其在宫颈癌分子诊断与预后评估中的临床意义.方法 应用甲基化特异性PCR和逆转录PCR分别检测我院2008年1月-2009年1月确诊的65例宫颈癌组织和癌旁正常组织RASSF1A基因启动子甲基化状态和mRNA表达,比较两者间的差异与临床病理因素之间的关系.结果 65例宫颈癌组织中有48例检测出甲基化条带(甲基化率73.8%),mRNA表达呈抑制状态,癌旁组织中有4例检测出甲基化条带(甲基化率6.2%),mRNA表达正常;不同年龄的患者RASSF1A基因启动子甲基化率间差异无统计学意义(P＞0.05);肿瘤直径越大,RASSF1A基因启动子甲基化率越高;宫颈鳞状细胞癌、腺癌和腺鳞癌RASSF1A基因启动子甲基化率分别为82.0%、40.0%和60.0%,三者间差异有统计学意义(P＜0.05);宫颈癌RASSF1A基因启动子甲基化率随着临床分期和淋巴结转移增加而增加,甲基化率在不同国际妇产科联盟(FIGO)分期及有无淋巴结转移中的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 RASSF1A基因启动子甲基化与宫颈癌的发病机制紧密相关,其在宫颈鳞状细胞癌中甲基化发生率明显高于腺癌,可作为宫颈癌的分子诊断和预后评估的生物标志物.     

抑癌基因FHIT和WWOX在胃腺癌中的表达及其临床意义

目的通过检测FHIT蛋白和WWOX蛋白在胃腺癌组织中表达情况和FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌和癌旁正常组织的表达情况,分析两者与临床病理特征之间的关系及两者之间是否具有相关性。方法随机抽取佳木斯大学附属第一医院普外科2000年到2011年期间的70例胃腺癌切除组织标本,采用免疫组化和RT-PCR方法检测胃腺癌组织中临床病理关系及胃腺癌与癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5CM)的关系。结果 (1)FHIT和WWOX均阳性表达28例。FHIT和WWOX均阴性表达24例。FHIT阳性而WWOX阴性8例。FHIT阴性而WWOX阳性10例。FHIT和WWOX在胃腺癌中的表达成正相关性。(2)FHITmRNA与WWOXmRNA在70例胃腺癌组织中表达较癌旁组织低者分别有22例和28例;较癌旁胃正常组织高者均有6例。FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌的表达低于癌旁胃组织。结论 (1)FHIT和WWOX在胃腺癌组织中阳性表达率较低,在组织学分级,病理分期中呈正相关,而与年龄和病理分型无相关性。(2)FHIT和WWOX的在胃腺癌组织中与癌旁胃正常组织中差异有显著性。(3)FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌组织中的低表达呈低度正相关性。(4)FHIT和WWOX是重要的抑癌基因。