HLA抗体筛选技术的最新进展及其在器官移植中的应用

人类白细胞抗原(HLA)是介导器官移植排斥反应的主要因素,良好的组织配型是肾移植患者长期存活和术后移植肾功能恢复的重要条件之一。在多次输血、生育史、再次移植的受者受到同种HLA免疫致敏可产生群体反应性抗体(panelreactive antibody,PRA)。PRA是一组特定的人类白细胞抗原(HLA)抗体,有多种类型,包括HLA-A、B、C、DR、DQ等抗体[1],是造成超急性和加速性排斥反应和移植物丢失的危险因素之一。PRA水平的高低更直接地影响移植肾的近期存活率。因此,将抗体筛选技术应用于器官移植实践,对减少移植后排斥反应,提高移植成功率和移植…     

群体反应性抗体（PRA）检测—附180例报告

本文研究了群体反应性抗体(PRA)对肾移植的影响,发现PRA 是免疫应答抗体,高PRA 与严重排斥反应强关联,亦是丧失移植肾的重要指征,并讨论了PRA 和CDC 作为HLA 组织配型对肾移植中提高人/肾双存活率的应用意义,证实PRA 比CDC 敏感性高。     

高PRA介导肾移植后延迟性超急排斥反应

目的：了解HLA-A、B、DR、DQ表现型为纯合子的终末期肾脏疾病患者的PRA水平,并研究其与肾移植预后的关系。方法：对2006年8月至2007年8月间在我院登记等待首次肾移植的438例终末期肾脏疾病患者HLA、PRA情况以及其中1例PRA65的HLA纯合子患者肾移植效果进行分析。HLA基因分型采用PCR-SSP技术,PRA、抗体强度及抗体特异性分析采用ELISA技术,数据统计采用SPSS11.5统计软件。结果：438例患者中有HLA纯合子12例,杂合子426例;12例纯合子中PRA阳性者6例,阳性率50,平均HLA抗体强度为55,广泛致敏率达100;426例杂合子中PRA阳性者65例,阳性率15.26,平均HLA抗体强度为28,广泛致敏率为40;纯合子与杂合子之间的PRA阳性率、平均HLA抗体强度和广泛致敏率相比差异均有统计学意义（P〈0.05）,纯合子高PRA的风险大（OR=5.29,95CI：1.67～16.70）;1例PRA65的纯合子患者术前经血浆置换、蛋白免疫吸附、静滴丙种球蛋白治疗使PRA降低至阴性,在舒莱免疫诱导下行尸体肾移植术,供受者HLA抗原2个错配,术后移植肾功能逐渐恢复,第3天开始PRA呈阳性并逐渐升高,伴随临床逐渐出现尿少、血压升高、移植肾区疼痛等排斥反应征象,血清肌酐逐渐升高,移植肾B超见动脉阻力指数逐渐升高,提示急性排斥反应,采用术前有效清除HLA抗体的所有方法再次治疗无效,于术后第36天因移植物失功行移植肾切除。结论：HLA纯合子产生高PRA的风险大;文中1例PRA阳性的HLA纯合子早期移植肾功能恢复随后出现不可逆排斥反应致移植肾失功的情况,提示近年来随着各种有效清除HLA抗体的治疗方法不断用于临床导致了抗体介导的延迟性超急排斥反应（AMDR）的出现从而使移植肾失功;高PRA患者行肾移植术需高度慎重,应尽可能避开受者PRA峰值时的全部抗体谱来选择供体。     

肾移植群体反应性抗体的检测及其临床应用

目的 :探讨人类白细胞抗原 (HLA)群体反应性抗体 (PRA)对肾移植效果的影响。方法 :采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对 2 0 6例肾移植受者的血清PRA进行检测。同时对 14 0份血清分成四组包括首次移植术前及术后 1个月 ,半年至 1年肾功能稳定期病人 ,第一次尸肾移植失功恢复血透病人进行PRA检测。结果 :PRA阴性组受者移植术后排斥发生率为 11 85 % ,阳性组受者平均PRA高达 4 6 5 % ,两组比较差异显著 (P <0 0 0 1)。首次移植术前A组PRA阳性率 17 1% ,术后B组PRA阳性率 31 4 % ,肾功能稳定组 (C组 )PRA阳性率 14 3%。而移植失功恢复血透者 (D组 )PRA阳性率达 77 1%。结论 :PRA的检测是肾脏移植术前筛选致敏受者的重要指标 ,对肾脏移植后排斥反应和移植物存活率关系密切。     

HLA配型和DSA对移植肾功能的影响研究

器官移植中良好的供受者间HLA配型对预防移植肾早期排斥和移植肾的长期存活具有重要意义.肾移植术后发生排斥的重要因素之一是群体反应性抗体(PRA)的参与,特别是肾移植术后产生抗供者特异性抗体(DSA).因此本文对肾移植供受者HLA分型和DSA对移植肾急性排斥反应和近期肾功能进行研究.现报道如下. 材料和方法 一般资料:选择了2007年10月至2009年12月间在我院接受肾移植的128例患者,男性88例,女性40例;最大年龄63岁,最小年龄20岁.     

抗免疫排斥反应中抗体药物偶联物的突破性进展

背景：宿主与移植物间的免疫排斥反应是器官移植失败的主要原因之一,传统的免疫抑制剂已无法满足临床治疗的需求,抗体药物偶联物作为一类新型药物,可能为免疫排斥反应的治疗带来希望。目的：综合分析抗体药物偶联物的构成、作用机制、临床研究进展以及未来的发展趋势。方法：以“抗体药物偶联物、免疫抑制剂、免疫毒素、器官移植、移植物排斥”,“ADCs,immunosuppressive agents,immunotoxins,organ transplantation,graft rejection”为检索词,应用计算机检索CNKI 和 PubMed 数据库。同一领域文献选择近期发表或发表在权威杂志文章,排除与研究目的无关和内容重复者,保留43篇文献做进一步分析。结果与结论：抗体药物偶联物以其高效低毒的特性在靶向治疗肿瘤方面已取得突破性进展,而在抗免疫排斥反应中仍处于摸索阶段。以同种胰岛移植为研究对象,寻找一种更有效阻断CD8效应T细胞CD103/E-Cadherin通路的抗体药物偶联物,将可能成为同种器官移植抗排斥反应的新颖研究药物。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

HLA配型、群体反应性抗体与肾移植术后早期急性排斥反应的关系

目的：研究人类白细胞抗原(HLA)配型、群体反应性抗体(PRA)与肾移植术后早期急性排斥反应的关系。方法：应用单克隆抗体板、微量序列特异性引物、混合抗原板进行供受者HLA-I类抗原分型、HLA-Ⅱ类基因分型、PRA检测。结果：PRA为低、中、高三组受者的早期急性排斥反应发生率分别为16％、27％、66．6％。HLA位点错配数(MM)为0-1组明显比5—6组早期急性排斥反应率低。结论：良好的组织配型、低水平的PRA，可降低早期急性排斥反应的发生。     

非HLA 抗体在肾脏移植中作用的研究进展

肾移植术后产生的抗体与移植肾排斥反应密切相关,并影响移植肾长期存活。近年来非HLA 抗体在肾移植 领域越来越受到关注。尽管对非HLA 抗体的研究并不全面,然而实验及临床研究均发现针对某些非HLA 抗原诸如血管紧张 素1 类受体、基底膜聚糖、自身抗原等产生的抗体能够影响移植肾急性及慢性排斥反应的进程。非HLA 抗体影响移植肾排斥 反应及存活的潜在机制是目前研究的重要领域之一。本文针对肾移植领域主要的非HLA 抗体做一综述,并阐述其对移植物 的致病机制。鉴别出非HLA 介导的移植肾抗体性排斥反应的免疫表型,有利于为治疗移植肾抗体性排斥反应提供新的靶点, 并为提高移植物的长期存活提供有效策略。     

应用流式补体依赖淋巴细胞毒技术检测肾移植病人HLA抗体

目的为了更好地识别造成移植肾排斥的特异性抗供者HLA的IgG类型同种抗体，对Flow-CDC方法应用于肾移植及其临床相关性进行研究。方法对96例等候肾移植受者同时进行PRA、NIH-CDC和FloW-CDC实验，并观察其中34例接受NIH-CDC阴性肾移植术的受者近期移植效果。结果FloW-CDC和NIH-CDC两种实验方法的阳性率[27．8％（42／151）和17．3％（26／151）]之间差异有统计学意义（X^2=4．86，P〈0．05）。另外，PRA阴性受者其NIH-CDC和Flow-CDC均为阴性，阴性吻合率为100％；在接受同种异体肾移植术的34例受者，其中20例PRA阴性受者接受了NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾，移植后未发生排斥，移植肾功能迅速恢复；13例PRA阳性的致敏受者接受NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾的，1例发生急性排斥经治疗后逆转，12例无排斥移植肾功能良好；1例PaA阳性再次移植受者接受了NIH-CDC阴性而Flow-CDC阳性的供肾，移植后第2天出现少尿，10d切除移植肾。结论Flow-CDC方法是一种能够识别具有补体结合能力的抗供者特异性HLA抗体的交叉配型技术，比经典的NIH-CDC方法具有更敏感、可标准化、快速等优点，对预示肾移植术后的排斥反应方面更具有前瞻性。     

细胞因子与移植排斥

细胞因子在异体器官移植的排斥反应中占重要地位 ,各类细胞因子对移植排斥有不同作用。近年来 ,人们对各类细胞因子在移植排斥中的表达及作用机理、细胞因子与移植排斥的诊断及鉴别诊断的研究 ,取得了很大进展。部分细胞因子或其抗体可抑制排斥反应 ,诱导移植耐受 ,为临床治疗移植排斥、提高移植器官存活提供了依据。     

Comparative analysis of how immune sensitization is defined prior to lung transplantation

BackgroundImmune sensitization prior to lung transplantation may be associated with worse survival. Using solid phase assays to define sensitization, we assessed the relationship between PRA status, donor specific anti-HLA antibodies (DSA) pre-transplant, cytotoxic cross match results and the clinical outcomes following lung transplantation.MethodsLuminex assays determined the presence of antibodies to class I and class II MHC molecules prior to lung transplantation. At the time of transplant, the PRA status, the presence of DSA and prospective cytotoxic cross match result were analysed in 195 patients undergoing lung transplantation between June 2008 and June 2012. Clinical outcomes analysed included acute cellular and antibody-mediated rejection, chronic lung allograft dysfunction (CLAD) and mortality.ResultsAt the time of transplant, 45% of patients had a positive PRA and 29% had DSA. On univariate analysis, the presence of pre-transplant class I or II anti-HLA donor-specific antibodies was not associated with the development of chronic lung allograft dysfunction (CLAD) despite significant associations with PRA status and B-cell crossmatch.ConclusionDefining sensitization using solid phase assays provide additional details regarding donor-specific sensitization but did not provide additional prognostic information to that provided by historically available cell-based cross-match assays.     

初次等待肾移植患者产生群体反应性抗体的因素分析

背景：移植前后群体反应性抗体的存在与否是影响移植肾存活率及肾功能的重要因素之一。 目的：分析研究初次等待肾移植手术的患者产生群体反应性抗体的因素。 方法：检测1 674例初次等待肾移植患者群体反应性抗体。根据患者肾移植前的输血史和妊娠史,将患者分单纯输血组(n=509)：输血均为全血,输血量为200 mL以上;单纯妊娠组(n=397);输血+妊娠组(n=235);未输血未妊娠组(n=533)。 结果与结论：初次等待肾移植的患者中,群体反应性抗体阳性患者单纯输血组88例,阳性率为17.29%(88/509);单纯妊娠组33例,阳性率8.31%(33/397);输血+妊娠组64例,阳性率27.23%(64/235)。结果提示,单纯妊娠导致群体反应性抗体产生的概率较低,其阳性率并不随着妊娠次数的增加而增加;其次是输血的的影响,女性患者移植前输血产生群体反应性抗体的概率高于男性;既输血又妊娠的患者群体反应性抗体产生概率大于单纯输血或单纯妊娠患者;既未输血又未妊娠的患者一般不会产生群体反应性抗体。     

前群体反应性抗体对肾移植长期存活的影响

目的：分析术前PRA水平与肾移植长期存活之间的关系 。方法：收集我中心2001年1月至2014年6月间,接受首次肾移植术的1 162例受者临床资料,根据受者术前PRA水平分组,将PRA≤10%分为阴性组,PRA>10%为阳性组,并对其进行回顾性分析。结果：术前PRA阴性者1、5、10年人存活率为96.8%、89.4%、78.6%,阳性者为93.5%、81.6%、65.4%,而术前PRA阴性者1、5、10年肾存活率为95.9%、84.8%、63.1%,阳性者为92.3%、74.1%、51.9%,两组移植人/肾间生存曲线均有统计学差异（人/肾log-rank检验χ²=9.623/11.019,P=0.002/0.001）。Cox多因素回归分析显示PRA水平是影响人/肾存活的重要因素（P<0.001）,PRA与术后急性排斥反应发生相关（OR=8.25,95% CI=2.86-5.72, P）。术前PRA阴性受者术后5年、10年血肌酐均较术前PRA阳性者低,具有统计学差异（P<0.05）,而两者术后1年血肌酐无统计学差异。此外,PRA与术后抗供体特异性抗体（DSA）出现相关（OR=6.89,95% CI=4.52-9.17, P）。结论：PRA是肾脏移植术前筛选致敏受者的重要指标,术后更应注重PRA阳性受者急性排斥反应及DSA的监测和诊断。<0.05<0.001     

再次免疫应答导致肾移植后早期严重急性体液排斥反应

背景：国内外有关预防高致敏受者肾移植后发生超急性、急性排斥反应提高人肾存活率取得满意效果,然而临床对群体反应性抗体检测阴性既往致敏受者肾移植后发生再次免疫应答研究则罕见报道。 目的：探讨群体反应性抗体阴性的既往致敏受者肾移植后早期发生严重急性体液性排斥反应机制,为其早期诊断和治疗既提供参考依据。 方法：选择21例群体反应性抗体阴性术后早期发生严重急性体液性排斥的首次肾移植患者,动态分析移植后14 d内反映急性体液性排斥的相关指标,包括IgG型抗HLA抗体,病理苏木精-伊红染色、C4d及细胞表面分子原位检测。 结果与结论：21例患者既往均有输血或妊娠史;18例患者移植后第7天抗HLAⅠ类IgG抗体阳性率>80%,11例于移植后第7天抗HLA Ⅱ类IgG抗体> 80%;5例女性患者于移植后第5~8天发生移植肾破裂,抗HLAⅠ类和Ⅱ类IgG抗体均>96%;21例受者均检出抗供者特异性抗体(DSA),13例(61.90%)供、受者存在HLA-A2和HLA-A11的错配并产生对应DSA,包括5例移植肾破裂受者;病理组织形态学均有不同程度急性损伤,免疫组化可见管周毛细血管区(PTC)C4d沉积,原位染色CD34(+)、CD68(+)、CD4(+)。提示移植前群体反应性抗体监测不能完全反映受者的预致敏状态;移植后早期监测群体反应性抗体可预测和诊断既往致敏受者急性体液性排斥的发生;C4d、CD68(+)作为其的辅助诊断指标,可提高诊出率;HLA-A2和HLA-A11在既往致敏受者是高危致敏基因。     

CHRONIC REJECTION: PROSPECTS FOR THERAPEUTIC INTERVENTION IN FIBROPROLIFERATIVE VASCULAR DISEASE

The graft survival rates of sensitized kidney recipients have been shown to be lower than those of nonsensitized patients. Therefore, panel reactive antibody (PRA) and cross-match determination is accepted as mandatory screening for renal transplantation candidates. Our recent previous study showed that simvastatin has a significant immunosuppressive effect in PRA-positive and/or crossmatch-positive patients. We present the long-term pre and post-transplantation outcomes of simvastatin treatment in highly sensitized dialysis patients. Thirty patients were followed for a mean period of 22 months. The PRA and flow cytometric measurements were performed at monthly intervals. Ten patients underwent successful kidney transplantation (eight living-related and two cadaveric). None of the patients developed hyperacute or acute rejection, and there was no graft loss during the 16.1±8.2 months of post-transplantation follow up. Of the 18 patients who stayed on dialysis throughout the study with PRA-positivity, six were lost to follow up and three spontaneously stopped taking the simvastatin. In the latter three cases, the PRA levels rose significantly after the drug was discontinued. Eight of the remaining nine PRA-positive patients showed significant drops in mean PRA level over the study period, and entered the range considered acceptable for transplantation. Only one patient showed persistently high PRA levels throughout the study. In one patient, the drug had to be discontinued because of acute toxic hepatitis. In conclusion, the results indicate that long-term continuous simvastatin therapy is effective in immunized and highly sensitized dialysis patients. Meanwhile, it has a beneficial effect on 1-year graft survival rates in sensitized renal transplantation patients.     

Ten years experience with plasma exchange in renal transplantation

Plasma exchange has been used in our renal transplantation programme for over ten years to treat 86 patients divided into four groups. Five patients had preformed cytotoxic antibodies before transplantation (group A); 13 sensitized patients (greater than 60% PRA) underwent prophylactic plasma exchange in the immediate post-operative period (group B); 62 patients were treated for acute vascular rejection (group C); six patients had chronic graft rejection (group D). Plasma exchange is a valid tool for the treatment of acute vascular rejection, provided that it is started before irreversible graft damage occurs: 75% rejection crises were reversed by plasma exchange and the actuarial graft survival from the rejection episode was 75% at one year, 66% at two and 50% at five years. Serum creatinine before treatment and glomerular thrombosis at graft biopsy correlated with the response to plasma exchange. In sensitized patients and in those with chronic rejection the results were disappointing and suggest that in these clinical conditions plasma exchange should be used only in selected cases.     

老年与青年尿毒症患者群体反应性抗体产生频率的比较

背景：目前众多研究证实,肾移植前患者体内群体反应性抗体的存在与否及该抗体的致敏程度对于是否发生排斥反应及移植物存活率的高低、移植后器官功能的实现都有着重要意义。 目的：对比分析老年和青年尿毒症患者移植前产生群体反应性抗体的频率。 方法：选择402例待做肾移植的尿毒症患者,其中青年组尿毒症患者226例,男179例,女47例;高龄组尿毒症患者176例,男88例,女88例。凡是年龄小于35岁以下和大于50岁以上的尿毒症患者均在统计之内。通过酶联免疫吸附实验筛查受者移植前血清中HLA-IgG抗体。 结果与结论：青年组尿毒症患者群体反应性抗体阳性14例;老年组尿毒症患者群体反应性抗体阳性32例,两组间比较差异有显著性意义(P < 0.005)。青年组中男性群体反应性抗体阳性10例,女性群体反应性抗体阳性4例,男女间群体反应性抗体阳性率比较差异无显著性意义(P < 0.05);老年组中男性群体反应性抗体阳性10例,女性群体反应性抗体阳性22例,男女间比较差异有显著性意义(P< 0.05)。说明老年尿毒症患者群体反应性抗体产生的频率高于青年尿毒症患者,并且老年女性患者群体反应性抗体产生的频率高于老年男性患者。