沙苑子总黄酮和百草酸的体内外抗肿瘤作用

目的观察沙苑子总黄酮和百草酸的体内外的抗肿瘤作用。方法 110只接种S180肉瘤腹水昆明鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、羟基喜树碱组、沙苑子总黄酮组和百草酸组,MTT法观察沙苑子总黄酮和熊果酸对S180肉瘤和人结肠癌细胞SW620的体外抑制作用,RT-PCR法测定百草酸对凋亡基因Bax、Bcl-2及P53的mRNA表达。结果沙苑子总黄酮和百草酸对S180肉瘤小鼠均有抑制作用,百草酸的抑制作用更加明显。两者对胸腺和脾脏均无明显抑制作用;沙苑子总黄酮对人结肠癌细胞SW620无明显抑制作用,而熊果酸却能明显的抑制该肿瘤细胞;熊果酸显著上调促凋亡基因P53和Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论百草酸在体内和体外均有抗肿瘤作用,沙苑子总黄酮的抗肿瘤作用尚需进一步研究。     

漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响

目的 观察漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT比色法研究漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布.结果 MTT实验结果表明较高浓度的漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,200 μmol·L-1 的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2细胞72 h后,对细胞生长的抑制率最高可达53.78%,同对照组相比(P<0.01);流式细胞术实验结果表明,不同浓度的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2 12 h后,可使G1期肿瘤细胞增多,引起G1期阻滞,作用时间为24 h、48 h时,则可引起S期阻滞;同时,不同浓度的漆树黄酮在不同的时间点都可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰.结论 漆树黄酮具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞和诱导凋亡有关.     

扶正柔肝颗粒对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、克隆形成及凋亡的影响

目的:观察扶正柔肝颗粒对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、克隆形成及凋亡的影响。方法:分别采用MTT法、划痕实验法、平板克隆形成和Annexin V/PI双染法实验,观察扶正柔肝颗粒体外对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、克隆形成和凋亡的影响。结果:扶正柔肝作用于HepG2细胞48h后,其对细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(21.0±1.3)mg/mL,当用药浓度为10mg/mL时HepG2细胞没有发生迁移;用药浓度为5mg/mL时,HepG2细胞集落基本无法形成;浓度为20mg/mL时,其早期凋亡率与5-Fu组无显著性差异(P0.05),扶正柔肝颗粒有显著抑制细胞增殖、抑制细胞迁移、抑制集落形成及诱导HepG2细胞早期凋亡的作用,且这种作用会随其给药浓度的增加、给药时间的延长而随之增强。结论:扶正柔肝颗粒可以明显抑制人肝癌HepG2细胞的增殖、集落形成和迁移,其作用呈明显的剂量-效应关系,并能显著诱导该细胞早期调亡,为肝癌治疗提供新的药物研究方向。     

复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨复方白花蛇舌草(HDWF)抑制肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402和SK-Hep-1,用不同浓度的HDWF干预,采用MTT法检测肝癌细胞的活力,计算HDWF对细胞增殖的抑制率。采用倒置显微镜观察肝癌细胞形态,细胞计数仪计算肝癌细胞数,集落形成实验观察肝癌细胞的集落形成能力,Annexin-V/PI染色实验检测肝癌细胞凋亡情况。结果 MTT法检测结果显示HDWF对抑制肝癌细胞增殖有显著抑制作用(P0.01),形态观察和细胞计数显示HDWF可减少肝癌细胞的密度及细胞数量,HDWF可显著抑制肝癌细胞的集落形成及促进肝癌细胞凋亡(P0.05)。结论 HDWF具有抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡的作用。     

复方木鸡冲剂抑制HepG2细胞增殖及诱导分化的作用

目的：探究复方木鸡冲剂在体外对人肝癌细胞株HepG2的抗增殖作用及其机制。方法：光镜观察细胞形态的变化。MTT法检测木鸡冲剂对肿瘤细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。全自动生化分析仪检测培养上清液中GGT、ALP浓度的变化；免疫细胞化学法检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子P21^WAFI的表达。结果：复方木鸡冲剂对HepG2有明显的抑制生长作用．细胞凋亡率明显增高，培养上清中ALP浓度升高，AFP浓度降低,P21^WAFI表达呈强阳性，而GGT没有明显变化。结论：复方木鸡冲剂明显抑制HepG2细胞的生长，其抗肿瘤的机制与诱导肿瘤细胞凋亡和促分化有关。     

野西瓜总生物碱诱导HepG2细胞凋亡与[Ca2+]i变化的相关性

目的 探讨野西瓜总生物碱(Capparis spinosa alkaloid,CSA)对人肝癌HepG2细胞的杀伤和诱导凋亡的作用机制.方法 MTT法研究CSA对人肝癌HepG2的杀伤作用;荧光显微镜观察HepG2细胞形态;流式细胞仪研究CSA对HepG2细胞的凋亡诱导作用;激光共聚焦显微镜检测CSA对HepG2细胞内[Ca~(2+)]i的影响.结果 CSA对人肝癌HepG2有明显细胞毒性作用,并且有剂量依赖性,IC_(50)为142.82 μg/mL;HepG2细胞在CSA作用后出现特征性凋亡形态特征,凋亡细胞比率明显高于自然凋亡率;且阻断细胞由S期向G_2期的移行,CSA明显升高HepG2细胞[Ca~(2+)]i,并与药物质量浓度呈量效正相关.结论 CSA对人肝癌HepG2有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能与CSA造成肿瘤细胞内钙离子超载有关.     

Protobioside抑制肿瘤细胞增殖作用的机制研究

目的:通过体外实验研究Protobioside对人肝癌细胞株HepG2的细胞增殖抑制作用,并进一步研究其作用机制.方法:采用噻唑兰(MTT)比色法测定Protobioside对3种肿瘤细胞生长增殖的影响;采用Hoechst33528染色观察Protobioside对HepG2细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪技术检测Protobioside对HepG2细胞周期的影响;采用蛋白质电泳技术检测Protobioside对HepG2细胞的细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白表达的影响.结果:Protobioside对HepG2细胞的生长抑制作用最强,IC_(50)为20 μmol·L~(-1);形态学观察可见Protobioside处理36 h时细胞核发生皱缩扭曲、胞膜完整.细胞周期分析显示,Protobioside将HepG2细胞抑制在G2/M期,具有良好的时效、量效关系;蛋白质电泳结果表明Protobioside下调了周期蛋白Cyclin B1、上调了促凋亡蛋白Bax、下调了抑凋亡蛋白Bcl-2.结论:Protobioside通过下调周期蛋白Cyclin B1将人肝癌细胞HepG2细胞阻滞在G_2/M期,通过上调促凋亡蛋白Bax、下调抑凋亡蛋白Bcl-2诱导HepG2细胞凋亡,从而抑制HepG2细胞的增殖.     

壁虎粗多肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的机制研究

目的:体外实验研究壁虎粗多肽(Gecko Crude Peptides,GCPS)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的机制。方法:采用MTT法检测GCPS对肝癌细胞HepG2增殖的影响;采用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变,western-blot检测BAX和BCL-2蛋白的表达,观察壁虎粗多肽对人肝癌细胞凋亡的影响。结果:GCPS可以抑制肝癌细胞HepG2增殖,作用呈浓度和时间依赖性,其IC50为1.2 mg/mL;在GCPS的作用下,HepG2呈凋亡形态学改变,且GCPS(1.6 mg/mL、0.8 mg/mL)可以降低bcl-2的表达,升高蛋白bax的表达。结论:GCPS对HepG2细胞有增殖抑制作用,诱导其凋亡是其作用机理之一。     

叶下株复方Ⅱ号对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用及机制

目的 观察叶下珠复方Ⅱ号肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。 方法 建立BALB/C裸鼠肝癌HepG2细胞皮下移植瘤模型,随机分为模型组,叶下株复方Ⅱ号高、中、低剂量组（17.28、8.64、4.32 g·kg-1）和5-Fu组（25mg·kg-1）,给药6周后处死裸鼠,剥离瘤组织称重。体外观察叶下株复方Ⅱ号对HepG2细胞增殖、集落形成、细胞周期和细胞凋亡的影响,观察药物作用后Wnt1和β-catenin基因mRNA表达的改变。结果 叶下株复方Ⅱ高、中、低剂量组对裸鼠HepG2肝癌细胞移植瘤生长的抑制作用明显,与模型组比较,肿瘤重量均明显减轻(P<0.01),但与5-Fu对照组比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。叶下株复方Ⅱ号体外在10mg·mL-1以上浓度能明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖,呈明显的量-效关系和时-效关系;叶下株复方Ⅱ号在2 mg·mL-1以上浓度, 对HepG2细胞集落形成呈明显的抑制作用;叶下株复方Ⅱ号以15、20 mg·mL-1浓度作用HepG2细胞48h后,G0/G1期细胞比例明显降低,S期细胞比例显著增加,与细胞对照组比较,差异均具有统计学意义（P<0.01）;叶下株复方Ⅱ号在10、15、20 mg·mL-1浓度,作用于HepG2细胞48h,细胞早期凋亡率和总凋亡率明显增加,与细胞对照组比较,差异均具有统计学意义（P<0.01）。叶下株复方Ⅱ号高、低剂量组(20、10 mg·mL-1) 作用于HepG2细胞48h后,Wnt1和β-catenin基因mRNA的表达量均明显低于细胞对照组（P<0.01、0.05）。结论 叶下株复方Ⅱ号对BALB/C裸鼠肝癌HepG2细胞皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,作用机制与抑制Wnt1/β-catenin基因表达和信号通路活化,从而阻滞细胞周期、抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

MTT法检测牛黄参胶囊对HepG2细胞增殖影响的实验研究

观察牛黄参胶囊对体外培养的人肝癌细胞HepG2的影响。方法制备牛黄参胶囊含药血清（NHS）,MTT法检测不同浓度含药血清对肝癌细胞HepG2的影响。结果 20%浓度含药血清能明显抑制HepG2细胞增殖。结论 NHS含药血清对体外培养的人肝癌细胞HepG2具有抑制作用,能促进肝癌细胞HepG2的凋亡。     

马蹄金素衍生物体外抗肿瘤实验研究

目的：研究马蹄金素衍生物的体外抗肿瘤活性.方法：采用MTT法检测3个马蹄金素衍生物对人肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞L02细胞的生长增殖影响.结果：3个化合物对肝癌细胞株HepG2的细胞毒性IC50分别为51.59、29.51、6.37μg/mL,而对正常肝细胞L02细胞的细胞毒性IC50分别为247.0、191.6、60.6μg/mL.3个化合物在给药质量浓度≥10μg/mL时,对这两种细胞增殖影响差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论：3个化合物对正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2均有抑制作用,对L02细胞毒性较低,而对肝癌细胞HepG2具有较强的增殖抑制作用,并且呈现出剂量-效应关系.其中Y26对肝癌细胞HepG2的细胞毒性最高,IC50为6.37μg/mL.     

ERK/FoxO3a信号轴在牡荆脂素VB-1抑制肝癌HepG2细胞系增殖中的作用

目的： 探讨ERK/FoxO3a信号轴是否介导牡荆脂素（VB-1）对人肝癌HepG2细胞系增殖的抑制作用。方法：MTT法观察不同浓度VB-1对人肝癌HepG2细胞系和永生化人胚肝L-02细胞系增殖的影响,集落形成法检测细胞生长,Western blot检测ERK1/2,FoxO3a蛋白磷酸化水平。结果：VB-1以浓度依赖方式抑制HepG2细胞增殖活性,对L-02细胞作用微弱。VB-1有效抑制HepG2细胞锚定依赖生长,并降低p-ERK1/2,p-FoxO3a表达水平,呈浓度依赖性。MEK抑制剂PD98059增强VB-1抑制HepG2细胞增殖和ERK1/2,FoxO3a磷酸化的作用。结论：VB-1通过阻断ERK/FoxO3a信号轴抑制肝癌HepG2细胞增殖活性。     

青蒿琥酯抑制人肝癌细胞株HepG2细胞生长及其机制的初步研究

目的：研究青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和survivin表达的影响,探讨青蒿琥酯影响肝癌细胞增殖的可能机制.方法：常规培养人肝癌细胞株HepG2,设立空白对照组;青蒿琥酯不同浓度组（3.125μg/ml、6.25μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml）,作用不同时间后用MTT法检测青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响,应用RT-PCR检测细胞survivin在mRNA水平的表达.结果：青蒿琥酯作用人肝癌细胞株HepG2后,与对照组比较细胞生长明显受到抑制（P〈0.05）,当青蒿琥酯浓度在12.5μg/ml时,survivin的表达（相对表达量为（0.75＋0.01）显著降低（P〈0.05）.结论：青蒿琥酯可通过下调survivin的表达来抑制肝癌细胞HepG2的生长.     

预知子、白花蛇舌草抑制肝癌细胞恶性增殖的研究

目的:在中医药常用治法方药中筛选最具抑制肝癌细胞恶性增殖的药物。方法:采用MTT法和细胞形态学检查,观察中药行气活血方、清热解毒方及其各组成药物乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。结果:清热解毒方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖均具有不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/ml白花蛇舌草对肝癌细胞的增殖抑制作用最强(P<0.05)。行气活血方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖也多具不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/mL预知子的作用尤为突出,强于阳性对照G418 0.6 mg/mL(P<0.01)。2.5mg/mL预知子联合0.3 mg/mL G418用药,其对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用接近0.6 mg/mL G418,提示有减量增效作用。无论是单独用药还是联合G418,预知子对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著于白花蛇舌草(P<0.01)。结论:预知子、白花蛇舌草是抑癌扶正行气活血方中抑制肝癌细胞恶性增殖的主要药物,其中预知子的作用最显著。预知子联合细胞毒抗生素,具有减少细胞毒抗生素用量且增效的作用。     

透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的:探讨透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞体外增殖的影响。方法:用不同浓度的透骨草提取物分别处理肿瘤细胞,采用MTT法和集落形成试验观察透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果:3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P<0.05)。3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞集落形成率与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌胞Hela细、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞增殖有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性。     

半边旗提取物5F-Na盐溶液对三种肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用

目的:评估半边旗提取物5F-Na盐溶液对肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用。方法:采用MTT法,观察不同浓度的半边旗提取物物5F-Na盐溶液分别作24、48、72h对三种不同类型肝细胞癌细胞株(HepG2,Hep3B,BEL-7402)生长增殖的影响。结果:不同浓度的半边旗提取物5F-Na盐溶液分别对3种肝癌细胞作用24、48、72h后,所有的肝癌细胞株生长增殖均受到不同程度的抑制(P<0.05),5F-Na盐溶液对HepG2,Hep3B,BEL-7402作用72h后的IC50分别是20.67,16.74,16.09mg/L。结论:半边旗提取物5F-Na盐溶液能有效抑制肝细胞癌细胞株的体外增殖。     

肝癌细胞系HepG2中侧群细胞的生物学特性观察

目的:分选肝癌细胞系HepG2中侧群细胞并观察其生物学特性。方法:利用流式细胞荧光激活分选技术分选肝癌细胞系HepG2中的侧群细胞(SP)。实验细胞分为SP细胞、非侧群细胞(NSP)以及未分选细胞(Total组)3群,分别采用细胞生长曲线法比较3群细胞的增殖能力,平板克隆形成实验和裸鼠成瘤实验观察其体内外成瘤能力。结果:HepG2细胞中分选出的SP细胞比例为(3.1±0.2)%,细胞生长曲线表明SP细胞的增殖速度快于NSP细胞和未分选细胞(P0.05),SP、NSP和未分选细胞软琼脂平板克隆形成率分别为66%、16%和32%;裸鼠体内成瘤率分别为100%(10/10)、30%(3/10)和70%(7/10),同时3组肿瘤平均质量分别为0.728g、0.185g及0.452g(P0.05)。结论:肝癌细胞系HepG2中SP细胞的成瘤性和增殖能力强于非SP细胞和未分选细胞,表明SP细胞在肝癌的发生、发展中具有重要作用。     

NQO1介导的丹参酮IIA的代谢转化与细胞毒(英文)

目的:确证丹参酮 IIA 的细胞毒依赖于 NAD(P)H 醌氧化还原酶 (NQO1)这一假设。方法:首先进行 MTT试验考察丹参酮 IIA 在一系列具有不同 NQO1 酶活的细胞株的细胞毒, 并考察 NQO1 的特异性抑制剂双香豆素对丹参酮 IIA 细胞毒的逆转来确证丹参酮 IIA 的细胞毒是依赖于 NQO1 的。然后在具有较强丹参酮 IIA 细胞毒的 HepG2 细胞中考察了丹参酮 IIA的生物转化情况, 并考察了双香豆素对丹参酮 IIA 生物转化情况影响。结果:丹参酮 IIA 的细胞毒与细胞株的 NQO1 酶活呈正相关。双香豆素能够逆转丹参酮 IIA 的细胞毒作用, 同时也能抑制丹参酮 IIA 在 HepG2 细胞毒的生物转化。结论:NQO1 是丹参酮 IIA 发挥抗肿瘤效应的首要靶点, 通过抑制 NQO1 双香豆素能够减少丹参酮 IIA 向儿茶酚中间体的转化, 从而打破丹参酮 II在 NQO1 介导下发生还原-自氧化-还原循环, 减少活性氧自由基的产生, 而减少丹参酮 IIA 的细胞毒作用。由此证明, 丹参酮 IIA的细胞毒是由 NQO1-介导其生物转化过程而产生的。     

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的:研究辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果,初步探讨其体内抑瘤作用机制。方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜、电镜等方法进行形态学观察,是否产生凋亡小体。结果:辽东楤木叶总皂苷对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,形态学观察显示,治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显。电镜下可见凋亡小体形成,其中以总皂苷组最明显。结论:辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞分裂、增殖及能够诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

二脱甲氧基姜黄素对体外培养宫颈癌Hela细胞Caspase-8的影响

目的:观察二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌Hela细胞Caspase-8的作用。方法:MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌细胞Hela的抑制作用;分光光度计检测其对Caspase-8酶活性的影响;免疫组化法检测其对人宫颈癌细胞Hela Caspase-8蛋白表达的影响。结果:二脱甲氧基姜黄素对人宫颈癌细胞Hela有明显的抑制作用(P0.001),且呈剂量关系,与姜黄素有显著差异(P0.001);二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-8酶活性,增强Caspase-8蛋白的表达。结论:二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-8蛋白活性,这可能也是其体外抑制宫颈癌细胞Hela生长的机理之一。