组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A联合全反式维甲酸诱导PLZF-RARα阳性U937细胞分化

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)和全反式维甲酸(ATRA)对PLZF-RARα阳性细胞的作用.方法:稳定转染PLZF-RARα基因的U937细胞(U937/PLZF)经TSA, ATRA作用一段时间后,Wright-Giemsa染色观察细胞形态,MTT法检测细胞生长和增殖状态,流式细胞仪检测细胞周期和细胞表面分化抗原CD11b,CD64,CD14等的表达,荧光免疫细胞化学染色检测融合蛋白表达,细胞化学染色和硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验观察细胞功能分化情况.结果:U937/PLZF细胞在去除四环素条件培养后,PLZF-RARα表达明显增加.TSA (30 μg/L)联合ATRA (1 μmol/L)使U937/PLZF细胞核质比缩小,生长增殖受抑,S期细胞减少,CD11b表达增高,PLZF-RARα蛋白表达减弱,分布以胞核弥漫细小颗粒为主,细胞功能上的分化可能尚不成熟.结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA联合ATRA可使U937/PLZF细胞发生部分分化.     

曲古菌素A和ATRA合用对PLZF-RARα转基因阳性发病鼠骨髓细胞的诱导分化作用

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)和ATRA对PLZF-RARα转基因发病鼠骨髓细胞的作用. 方法:分子克隆技术构建hCG-PLZF-RARα转基因构件. 显微注射建立仅在髓系细胞中表达PLZF-RARα的转基因小鼠模型. DNA-PCR,Southern blot,RT-PCR,免疫荧光,血象,骨髓象,脾细胞形态,病理等检测分析基因整合表达及发病情况. 取PLZF-RARα转基因发病鼠骨髓细胞体外培养,经TSA和ATRA作用一段时间后,Wright-Giemsa 染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期、细胞表面分化抗原CD11b和CD117等的表达,荧光免疫细胞化学染色检测融合蛋白表达,硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验观察细胞功能分化情况. 结果:TSA(30 μg/L)联合ATRA(1 μmol/L)使发病鼠骨髓细胞核质比缩小,幼稚细胞比例减少,细胞生长增殖受抑,S期细胞减少,PLZF蛋白的表达呈局部聚集的趋势,但NBF还原试验变化尚不明显. 结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA联合ATRA可使PLZF-RARα转基因发病鼠骨髓细胞发生部分分化.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在肾脏疾病中的研究进展

组蛋白去乙酰化酶(HDAC)可以诱导组蛋白和非组蛋白去乙酰化,在基因表达的表观遗传调节方面发挥重要作用.越来越多的证据表明HDAC参与各种肾脏疾病的发生、发展,强调抑制其活性可作为肾脏疾病的一种重要治疗策略.该文综述了组蛋白去乙酰化酶抑制剂在肾小管间质纤维化、糖尿病肾病、多囊肾病、急性肾损伤和狼疮性肾炎等肾脏疾病中的作...     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在脓毒症及急性肺损伤中的作用研究进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HADCIs)具有干扰组蛋白去乙酰化酶的功能,可通过提高细胞内组蛋白的乙酰化程度,调控基因转录,在恶性肿瘤的治疗中发挥重要作用。在脓毒症及其相关肺损伤中,HDACIs可发挥抑制炎症反应以及组织器官保护等多重作用,组蛋白乙酰化调控可能成为有价值的脓毒症治疗靶点,其机制包括抑制Toll样受体4-髓样细胞分化因子88-核因子κB/促分裂原活化的蛋白激酶信号通道,下调炎症相关因子释放;通过调控微RNA转录水平抑制炎症相关基因表达;抑制肺泡上皮细胞凋亡等。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗卵巢癌的研究进展

卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤,其发病机制的探讨是肿瘤研究领域的难点,近年研究发现卵巢癌的发生与表观遗传学改变密切相关,针对影响表观遗传的重要分子靶标组蛋白去乙酰化酶的研究成为新热点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC Is)可以明显地抑制卵巢癌细胞生长,诱导细胞周期阻滞、分化和凋亡,抑制卵巢癌相关致癌基因的表达,具有抗肿瘤活性且无明显不良反应,提示HDACIs为卵巢癌的治疗提供了一种新策略。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在甲状腺癌治疗中的进展

甲状腺癌(thyroid carcinoma,TC)是最常见的内分泌系统肿瘤.占人类所有恶性肿瘤发病率的1%～2%.死亡率较低,不同种族、地区、性别及年龄间存在较大差别.近20年来,甲状腺癌发病率增加20%,尤以女性明显.其中最多见的是乳头状癌.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂Chidamide抑制C2C12骨骼肌细胞分化及其机制

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达苯胺（Chidamide）对C2C12小鼠骨骼肌细胞分化作用及其分子机制。方法:CCK-8（cellcountingKit-8）法检测0、0.5、1、2、4μmol/LChidamide处理后C2C12细胞的活力;将C2C12骨骼肌细胞分为对照组（control）和Chidamide组,Western印迹检测Chidamide处理后组蛋白H3乙酰化（Pan-acetylH3）水平,细胞免疫荧光染色肌管细胞分化成熟标志蛋白肌球蛋白重链（MyHC）,检测肌细胞分化,Western印迹和qPCR检测MyHC、成肌分化抗原（MyoD）、肌细胞生成素（MyoG）的表达及肌原纤维Ⅰ型（Myh7）、Ⅱa型（Myh2）、Ⅱb型（Myh4）和Ⅱx型（Myh1）的表达。结果:0、0.5、1、2、4μmol/L的Chidamide均不影响细胞活力。Chidamide升高Pan-acetylH3蛋白水平（t=3.22,P<0.05）。细胞免疫荧光结果显示,与对照组相比,Chidamide处理后肌细胞融合受损,分化程度降低。Western印迹和qPCR结果显示,与对照组相比,Chidamide下调MyHC、MyoD和MyoG蛋白水平（t=5.71、6.05、7.37,均P<0.01）和mRNA水平（t=26.87、5.81、4.86,均P<0.01）;降低Myh7蛋白（t=3.93,P<0.01）和mRNA水平（t=4.85,P<0.01）;降低Myh1、Myh2蛋白（t=14.13、5.05,均P<0.01）和mRNA水平（t=15.48、16.82,均P<0.001）,但不影响Myh4的蛋白（t=2.19,P>0.05）和mRNA水平（t=1.50,P>0.05）。结论:Chidamide可能通过下调MyoD和MyoG的表达抑制C2C12骨骼肌细胞分化,且主要抑制Ⅰ型、Ⅱa和Ⅱx型肌原纤维,不影响Ⅱb型肌原纤维。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对缺血缺氧性脑损伤后神经保护的研究进展

 组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)是一类调控组蛋白乙酰化水平的关键酶,能催化组蛋白(histone)脱乙酰基,引起相应基因表达下降。目前大量研究表明,HDAC抑制剂(HDAC inhibitor,HDACI)可以抑制 HDAC 的催化活性,改变染色体结构,从而激活并启动基因转录,纠正中枢神经病理条件下的染色体从“封闭”转变成“开放”状态,最终起到神经保护的作用,如抑制神经元凋亡,促进少突胶质细胞增生、调控小胶质细胞/巨噬细胞的极化、减轻炎性反应、促进神经血管再生及减弱细胞兴奋性毒性等。本文就 HDACI 对缺血缺氧性脑损伤发挥的神经保护功能作一详细阐述。     

全反式维甲酸治疗急性早幼粒白血病的临床观察

目的:观察全反式维甲酸(all transretinoicaidATRA)治疗36例急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocytic leukemia,APL)的效果及毒副作用。方法:全反式维甲酸(ATRA)40mg/d分次口服。结果:完全缓解(CR)20例,部分缓解(PR)2例,总有效率(CR PR)61.1%。结论:ATRA治疗APL有较高的缓解率,毒副作用小,适用于临床推广应用。     

组蛋白去乙酰化酶8选择性抑制剂的研究进展

组蛋白去乙酰化酶8(HDAC8)属于Ⅰ类锌离子依赖性的组蛋白去乙酰化酶,与人类病理生理学密切相关。HDAC8参与体内多种关键信号通路,是多种疾病的治疗靶点。随着对HDAC8晶体结构研究的不断深入,多种结构类型的HDAC8抑制剂被报道,主要分为苯基氧肟酸类、吲哚类、邻芳基N-羟基肉桂酰胺类和氮杂环丁酮类等。寻找比泛HDAC抑制剂不良反应小的高效选择性HDAC8抑制剂是目前研究的热点。本文综述了HDAC8的结构、功能及选择性抑制剂的研究进展。     

Histone deacetylase inhibitor trichostatin A induced caspase- independent apoptosis in human gastric cancer cell

Background Histone deacetylase inhibitors （HDACIs） have been reported to induce apoptosis in cancer cells. The effects of trichostatin A （TSA） on gastric cancer cells have not been well characterized. This study was aimed to explore the effects and mechanisms of TSA on human gastric cancer SGC-7901 cells. Methods The cells were treated with TSA and analyzed by cell proliferation assay, Western blot, TUNEL assay, flow cytometry by fluorescein isothiocyanate （FITC） conjugated with Annexin V and PI staining, immunofluorescence analysis, analysis of subcellular fractionation, gene chips and real time polymerase chain reaction （PCR）. Results TSA could inhibit cell growth and induced apoptosis in gastric cancer SGC-7901 cells through the regulation of apoptosis-related genes, such as Bcl-2, Bax and survivin. Further study indicated that the pan-caspase inhibitor z-VAD-fmk did not inhibit the apoptosis induced by TSA, and we did not observe the cleavage of poly ADP ribose polymerase （PARP） after TSA treatment too. In addition, apoptosis inducing factor （AIF） and EndoG were found to translocate from mitochondria to nucleus in the immunofluorescence assay and the Western analysis of subcellular fractionation confirmed the result of immunofluorescence assay. Conclusions The apoptosis induced by TSA in gastric cancer SGC-7901 cells involves a caspase-independent pathway.     

全反式视黄酸对新生大鼠纹状体神经干细胞向神经元样细胞分化的作用

目的观察全反式视黄酸（atRA）体外对神经干细胞（NSCs）的诱导分化作用及其可能的分子机制。方法分离培养新生大鼠纹状体NSCs；以免疫组织化学染色观察不同浓度atRA对NSCs分化的影响；RT-PCR分析视黄酸受体表达情况：结果atRA诱导NSCs向神经元方向分化，其作用在一定范围内呈剂量依赖性，诱导剂量以1．0pmol／L较为适宜。NSCs的RARβ基因的表达对atRA存在剂量依赖性和时间依赖性。结论atRA诱导NSCs向神经元方向分化，此作用与atRA上调细胞的RARβ基因转录水平有关。     

全反式视黄酸对新生大鼠纹状体神经干细胞向神经元样细胞分化的作用

目的 观察全反式视黄酸(atRA)体外对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用及其可能的分子机制。方法 分离培养新生大鼠纹状体NSCs;以免疫组织化学染色观察不同浓度atRA对NSCs分化的影响;RT-PCR分析视黄酸受体表达情况。结果 atRA诱导NSCs向神经元方向分化,其作用在一定范围内呈剂量依赖性,诱导剂量以1.0μmol/L较为适宜。NSCs的RARβ基因的表达对atRA存在剂量依赖性和时间依赖性。结论 atRA诱导NSCs向神经元方向分化,此作用与atRA上调细胞的RARβ基因转录水平有关。     

急性早幼粒细胞白血病经全反式维甲酸治疗达缓解后分层治疗的探讨

目的 探索急性早幼粒细胞白血病(APL)经全反式维甲酸(ATRA)治疗达完全缓解(CR)后更佳的治疗方案.方法 选择2000年1月至2007年10月新疆医科大学第一附属医院经ATRA诱导分化达CR的32例初治APL患者,巩固治疗选择标准的化疗方案,并根据患者年龄＜50岁使用中剂量阿糖胞苷(IDAra-C)而≥50岁不使用IDAra-C进行分层治疗.维持治疗则所有患者均采用ATRA、三氧化二砷(As2O3)及6-巯基嘌呤(6-MP)+甲氨蝶呤(MTX)3方案序贯交替治疗,并逐渐延长3方案之间的间歇期,持续3年结束治疗.观察患者治疗的效果.结果 中位随访72(40～124)个月,巩固方案采用分层治疗后＜50岁患者及≥50岁患者预期5年无病生存率分别为94.7%、92.3%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).32例患者中1例在巩固治疗中复发,1例在维持治疗中复发,其余患者仍持续缓解,其中16例已停止治疗且无病生存5年以上.32例患者经治疗后总的预期5年无病生存率为93.8%.结论 APL患者经ATRA诱导达CR后,经年龄分层进行治疗后长期生存率较高,不良反应轻微,表明此分层治疗方法是可行的.

Abstract：

Objective To explore an efficacious protocol for the patients with acute promyelocytic leukemia (APL) after a complete remission (CR) by all-trans retinoic acid (ATRA).Methods A total of 32 APL patients with an induction of CR by ATRA at our hospital from January 2000 to October 2007 received conventional standard chemotherapy as a consolidation regimen.Stratified according to age, those under 50 years old received an intermediate dose of cytarabine(IDAra-C) and over 50 years old non-IDAra-C regimen.Maintenance regimen:all patients received ATRA, arsenic trioxide (As2O3) and 6-mercaptopurine (6-MP) + methotrexate (MTX) alternately and sequentially for 3 years.The efficacy and side effects of these chemotherapies were observed.Results The median follow-up was 72 (40 - 124 )months.The 5-year disease-free survival (DFS) rates of under 50 years old and over 50 years old were 94.7% and 92.3% respectively.The difference was statistically insignificant ( P ＞ 0.05 ).One patient relapsed after a consolidation therapy and so did another on a maintenance regimen.Thirty patients achieved a constant CR.And 16 of 30 patients completed chemotherapy beyond 5 years and survived disease-free.The 5-year DFS rate of 32 patients was 93.8 %.Conclusion After the achievement of CR with ATRA, all APL patients have a higher rate of DFS after stratification.The side effects are generally mild.Thus a stratification therapy is both feasible and efficacious.     

泰克地那林对四氯化碳诱导小鼠急性肾损伤的治疗作用

目的 观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂泰克地那林（CI994）对四氯化碳（CCl4）诱导小鼠急性肾损伤的治疗作用。方法 将40 只8 周龄雄性小鼠随机分为对照组、药物对照组、CCl4 造模组和CI994 治疗组,每组10只;对照组腹腔注射生理盐水;CCl4 造模组一次性腹腔注射CCl4 ;药物对照组腹腔注射生理盐水,CI994 治疗组腹腔注射CCl4,在注射CCl4 后6 和24 h 分别给予药物对照组和CI994 治疗组腹腔注射CI994。检测各组小鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Src）和胱抑素C（Cys C）水平;对肾组织进行HE 染色并检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和细胞色素2E1（CYP2E1）mRNA 表达水平。结果 与CCl4 造模组比较,CI994 治疗组小鼠血清BUN、Scr、Cys C 水平下降（P <0.05）;肾组织MDA 含量下降,SOD 活性上升（P <0.05）;HE染色显示CCl4 造模组呈现典型急性肾损伤症状,CI994 治疗组肾脏损伤均较CCl4 造模组轻;肾组织CYP2E1mRNA 表达水平下降（P <0.05）。结论 CI994 可减轻CCl4 介导的小鼠急性肾损伤,可能与I 相毒物代谢蛋白CYP2E1 的表达下调有关。     

三氧化二砷联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病疗效的系统综述和meta分析

背景：研究证明三氧化二砷（arsenic trioxide, ATO）联合全反式维甲酸（all-trans retinoic acid, ATRA）在急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia, APL）的治疗中通过不同的分子机制发挥作用,奠定了ATO和ATRA协同或相加作用的分子学基础,并且ATO联合ATRA方案在临床上也广为应用,但目前尚无明确的高级别循证医学证据证明其疗效和安全性。 目的：评价ATO联合ATRA方案治疗APL的疗效。 检索策略：检索Cochrane图书馆及其对照试验注册资料库（Cochrane Central Register of Controlled Trials, CENTRAL）、MEDLINE、EMBASE、中国生物医学文献数据库、中国期刊网专题全文数据库和中国医学学术会议论文数据库,并辅以手工检索和附加检索,检索时间截至2009年3月。 纳入标准：纳入研究ATO联合ATRA方案治疗APL疗效的随机对照试验文献。干预措施包括：（1）ATO联合ATRA方案与ATO单药比较;（2）ATO联合ATRA方案与ATRA单药比较;（3）ATO联合ATRA方案与ATRA联合化疗比较;④ATO联合ATRA方案与ATO＋ATRA＋化疗比较。 资料提取与分析：提取完全缓解率、总生存率、无病生存率、开始治疗到完全缓解的时间、复发率、病死率及相关副反应等结局评价指标的数据,按不同数据类型采用相应的统计方法,使用Cochrane协作网RevMan 5.0软件进行meta分析。 结果：共纳入9项随机对照试验,合并同类研究后,共7项研究纳被入分析,包括392例受试者。其中6项研究存在中度偏倚风险,1项研究存在高度偏倚风险。研究方案包括ATO联合ATRA方案与ATO单药、ATRA单药和ATO＋ATRA＋化疗方案的比较,未能检索到与目前的首选方案（ATRA联合蒽环类药物）比较的随机对照试验。Meta分析结果示,与ATO单药比较,ATO联合ATRA方案能够改善初治APL病人开始治疗到完全缓解的时间和复发率,对其余结局指标影响的差异无统计学意义,以受试者疾病状态（初治或复发）为划分标准对完全缓解率、无病生存率、病死率和肝功能异常发生率进行的敏感性分析结果与总的meta分析结果一致;与ATRA单药比较,ATO联合ATRA方案能够改善初治APL病人开始治疗到完全缓解的时间、无病生存率和复发率,但有可能导致水肿的发生率增加;与ATO＋ATRA＋化疗方案相比,ATO联合ATRA方案对初治APL患者完全缓解率、复发率、病死率及治疗相关副反应等结局指标均有一定的改善。 结论：针对初治APL病人,ATO联合ATRA方案疗效优于ATO单药、ATRA单药和ATO＋ATRA＋化疗方案,但是由于缺乏与目前初治APL病人标准疗法（ATRA＋蒽环类药物）比较的数据,尚不足以推荐ATO联合ATRA方案应用于初治APL病人的治疗中。针对复发APL病人,ATO联合ATRA方案并不优于ATO单药,即目前证据尚不支持在ATO单药治疗的基础上加用ATRA。由于纳入研究的质量、病例数等的限制,对该结论的解析需持谨慎的态度,并亟需进一步的研究来检验。     

曲古菌素A联合全反式维甲酸对宫颈癌HeLa细胞株杀伤机制的研究

目的探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌HeLa细胞株的杀伤作用及其作用机制。方法 TSA联合ATRA或单独处理HeLa细胞,CellTiter 96AQueous法检测细胞增殖抑制情况;7-AAD荧光染色法观察细胞凋亡改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测p21、p53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果 TSA联合ATRA对HeLa细胞具有明显的生长抑制作用,诱导细胞凋亡,出现核碎裂等典型凋亡改变,细胞凋亡率明显升高,与对照组和单独用药组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,TSA联合ATRA组中p21、p53、活化性Caspase-3蛋白的表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论 TSA联合ATRA在体外对HeLa细胞有明显的杀伤作用,推测其机制可能是上调p21、p53、活化性Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平有关。     

Mechanism of trichostatin A combined with all-trans retinoic acid on HeLa cells

目的 探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌HeLa细胞株的杀伤作用及其作用机制.方法 TSA联合 ATRA 或单独处理HeLa细胞,CellTiter 96 Aqueous 法检测细胞增殖抑制情况;7-AAD荧光染色法观察细胞凋亡改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot 法检测p21、p53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化.结果 TSA联合ATRA对HeLa细胞具有明显的生长抑制作用,诱导细胞凋亡,出现核碎裂等典型凋亡改变,细胞凋亡率明显升高,与对照组和单独用药组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,TSA联合ATRA组中p21、p53、活化性Caspase-3蛋白的表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05).结论 TSA联合ATRA在体外对HeLa细胞有明显的杀伤作用,推测其机制可能是上调p21、p53、活化性Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平有关.