用ELISA法快速检测病毒性脑炎患儿脑脊液中单纯疱疹病毒特异性抗原

用单纯疱疹病毒单克隆抗体（ＨＳＶ－ＭｃＡｂ）ＥＬＩＳＡ法检测了６２例病毒性脑炎患儿脑脊液中ＨＳＶ特异性抗原（ＨＳＶ－Ａｇ），２０例其他脑神经系统疾患者。３２例脑炎患儿同时取脑脊液和血清作ＨＳＶ－ＩｇＧ抗体水平测定比较。病毒性脑炎患儿的ＨＳＶ－Ａｇ阳性检出率为２０．６％，与血清／脑脊液的ＨＳＶ－ＩｇＧ测定比较，灵敏性８４．６％，特异性９４．７％。用ＥＬＩＳＡ法检测脑脊液中ＨＳＶ－Ａｇ是一种简便、快速、灵敏、特异的方法，对疱疹性脑炎具有早期诊断价值。     

检测IL-8的ELISA间接夹心法的建立

利用抗IL-8的单克隆抗体4C3(包被抗体)和免抗IL-8多克隆抗体(第二抗体)建立了检测IL-8的间接夹心法ELISA,当包被抗体浓度为0.5μg/ml、第二抗体浓度为2μg/ml时,其检测下限可达1ng/ml。初步应用此法在部分感染病人血清中检测到明显高于正常人水平的IL-8。     

用ELISA方法检测胰岛细胞抗体

自1974年Bottazzo首次发现胰岛细胞抗体(ICA)以来,人们在这方面做了不少工作。现在普遍认为,胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)的发病和胰岛细胞抗体的产生有着密切的关系,甚至认为IDDM是一种自身免疫性疾病,它的发生与以下三个因素有关。首先,是遗传易感性,现已表明和HLA有关;共次,是一些激发因素的刺激,如病毒感染;最后,是机体免疫功能的失调,导致胰岛细胞自身抗体的生成,继之以胰岛细胞的破坏,体内胰岛素缺     

一个简单敏感的检测IL-2活性的生物学方法

本文介绍了一种简单一次定量的检测IL-2生物活性的方法。它以培养纯CD3~+T细胞为基础,CD3~+T 细胞是从血液的单个核细胞中,用微球(M450)结合CD3McAb 筛选的。培养时,经抗CD3活化的T 细胞将表达IL-2受体而不产生IL-2。加入IL-2后,可引起增殖反应,IL-2浓度在0.01～20U/ml时,可以得到一个线性剂量-反应曲线。细胞对IL-1、IL-4、TNF-α、IFN-α、INF-γ、PHA、ConA 不反应。IL-2的反应性可为TNF-α增强,被IFN-α抑制。试验用的促分裂素不影响增殖反应。抗IL-2和抗IL-2受体的抗体可以抑制IL-2反应,并有一定的剂量依赖关系。本法既简单又特异,不用长期培养实验用的细胞。     

用ELISA检测溶菌酶

溶菌酶测定过去常规采用溶菌试验法(比浊法).其原理主要是利用溶菌酶溶解溶壁微球菌的活性,观察其溶菌后混悬液的清浊度来间接表示溶菌的多少.由于溶菌试验缺乏一定的敏感性,加之受样本采集处理及保存时间的限制,因而,准确性不高.首次采用ELISA法检测溶菌酶.本法主要是测定溶菌酶特异性蛋白,而不是测定其溶     

用单克隆抗体检测人IL-2分泌细胞

<正> IL-2在免疫应答的发生、发展中起重要的调节作用。IL-2活性的异常与一些疾病的发生、发展有关。因而,测定生理状态下IL-2的水平有助于了解机体的免疫状态,但它在体液内(如血浆)含量极微,很难用     

用于检测可溶性人IL-2R的一种竞争性的ELISA

一种用于可溶性人IL-2R的定量检测的固相竞争性ELISA已建立。从固相开始,试剂的连接顺序为(1)源于重组DNA的纯化IL-2R,(2)含有可溶性IL-2R的样品以及与异硫氰酸连接的抗IL-2R的抗体7G7/B6,(3)碱性磷酸酶连接的兔抗FIFC,(4)底物。将此法与检测可溶性IL-2R的夹心ELISA相比,竞争性ELISA没有夹心法     

间接ELISA法检测轮状病毒

本文报道检测急性小儿腹泻患者粪便中轮状病毒的间接 ELISA 法。分别用兔抗 SA_(11)轮状病毒血清和正常兔血清的粗提 IgG 包板,检测抗体为豚鼠抗 SA_(11)抗体。酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的抗豚鼠 IgG 抗体。根据正常人标本结果为阴性,阻断试验成立,以及阳性标本用正常豚鼠血清检测为阴性,说明本试验具特异性。分析比较50份标本的电镜检查结果和间接 ELISA 试验结果,说明本试验的敏感性好。初步比较了抗牛轮状病毒(NCDV)抗体和抗 SA_(11)抗体检测的结果,两者基本一致。用硫酸铵粗提的 IgG 代替兔全血清,可减少非特异性显色。     

用ELISA微板法检测乙型肝炎病毒核心抗原

以双抗体包被的抗体夹心法，用微板ＥＬＩＳＡ检测血清乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢＣＡｇ），确定双包被工作浓度ＭＣ－抗－ＨＢｃ（效价１０００）为０．０４μｌ／孔，ＭＣ－抗－ＨＢｓ（１ｍｇ／ｍｌ）为３～４μｌ／孔；最佳裂解剂及其工作浓度为７％ＮＰ－４０巯基乙醇溶液。分别用不同的酶标记抗体检测，均证明双包被具有特异性。加入抗－ＨＢｃ进行阻断试验，其阻断率为７９．３％。对８４４例ＨＢｓＡｇ阴性的血清及１１４例ＨＢＶ－ＤＮＡ探针阴性血清用本法进行ＨＢｃＡｇ检测，均为阴性。在临床应用上，本法的阳性率明显高于试管法的，与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的阳性符合率为９１．４％，并且特异性与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的一致。     

用ELISA法检测IgM、IgA型抗-LSP

以往对肝病患者血清抗-LSP的研究,多限于检测IgG型抗-LSP。近来有人报告,病毒性肝炎患者血清中还存在着IgM和IgA型抗-LSP(抗-LSP IgM、IgA)。为了进一步了解肝炎患者对LSP体液免疫反应的情况,我们建立了检测抗-LSP IgM、IgA的ELISA。现报告如下。     

脑脊液和血清TNF-α、IL-6及IL-2检测对HIE的临床价值

目的探讨脑脊液和血清TNF-α、IL-6及IL-2水平检测对新生儿缺血缺氧性脑病诊治和预后评估的临床价值。方法回顾性分析本院接生的缺血缺氧性脑病患儿60例,按照发病程度分为轻度33例,中度15例,重度12例;分别于患儿治疗前后进行NBNA评分,并取患儿脑脊液和外周血,以ELISA试剂盒检测TNF-α、IL-6及IL-2含量。结果不同发病程度的患儿在NBNA评分,以及TNF-α、IL-6、IL-2三种细胞因子的脑脊液与血清含量等方面均有显著性差异(P0.05),表现为随着发病程度的加重,NBNA评分及IL-2在脑脊液与血清中含量呈降低趋势,而TNF-α及IL-6在脑脊液与血清中含量呈上升趋势;且治疗后NBNA评分及IL-2的脑脊液与血清含量整体水平有所升高,而TNF-α及IL-6在脑脊液与血清中含量整体水平有所降低,其差值与治疗前相比,均有统计学意义(P0.05或P0.01);线性相关分析结果显示,IL-2的脑脊液含量与新生儿的NBNA评分呈显著正相关,TNF-α、IL-6的脑脊液含量与新生儿的NBNA评分呈显著负相关。结论 TNF-α、IL-6及IL-2的脑脊液和血清水平能够反映缺血缺氧性脑病患儿的发病程度及治疗结局,可作为其临床诊断和不良预后的重要筛查指标,且脑脊液水平较血清水平更具预测价值。     

用ELISA方法检测埃可病毒感染的特异性IgM抗体

目的 研究埃可病毒感染的无菌性脑膜炎的诊断方法。方法 采用埃可病毒混合抗原包被酶标板，用抗人γ链处理人脑脊液标本，通过酶标二抗及底物显色，建立了抗埃可病毒IgM的间接ELISA检测方法；并用特异性试验、对照和重复性试验证实方法的可靠性和实用性。结果 在临床诊断为无菌性脑膜炎的78例患者脑脊液中有14例阳性（17.9%)，而细菌性脑膜炎的36例患者脑脊液中仅有1例阳性（2.8%)，28例脑外伤患者脑脊液均为阴性，ELISA阳性的5份脑脊液中和试验4例阳性，而ELISA阴性的5份脑脊液中和试验均为阴性；该方法与脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A组病毒7型和柯萨奇B组病毒1-6型无交叉反应；ELISA阳性的6份标本经特异性IgM破坏和阻断试验均全部转为阴性。结论 本方法快速，简便、可靠、适合于临床早期特异性诊断。     

用ELISA法检测丙型肝炎病毒IgM抗体试剂盒的研究

市售丙型肝炎检测试剂盒仅能检测丙肝ＩｇＧ抗体，本工作建立的丙型肝炎病毒ＩｇＭ抗体检测方法稳定性强，重复性好，检出率高，具有高度特异性，与甲、乙、丁型肝炎及ＣＭＶ、ＥＢＶ患者无交叉反应。健康人血中不含丙肝ＩｇＭ抗体，我们用该方法检测了１０９例输血后肝炎患者，发现３７例急性肝炎中３６例丙型肝炎病毒ＩｇＭ抗体阳性（９７％），其中１６例患者在起病后４个月内随病情好转而ＩｇＭ抗体阴转，７２例慢性输血后肝炎患者中４３例ＡＬＴ明显异常，４３例中有３６例（８３７％）丙肝ＩｇＭ抗体阳性，而２９例ＡＬＴ正常患者仅有５例阳性，Ｐ＜０．０１，说明慢性肝炎丙肝ＩｇＭ抗体阳性多伴有肝病活动。     

脑脊液和血清TNF-α、IL-6及IL-2检测对HIE的临床价值

目的探讨脑脊液和血清TNF-α、IL-6及IL-2水平检测对新生儿缺血缺氧性脑病诊治和预后评估的临床价值。方法回顾性分析本院接生的缺血缺氧性脑病患儿60例,按照发病程度分为轻度33例,中度15例,重度12例;分别于患儿治疗前后进行NBNA评分,并取患儿脑脊液和外周血,以ELISA试剂盒检测TNF-α、IL-6及IL-2含量。结果不同发病程度的患儿在NBNA评分,以及TNF-α、IL-6、IL-2三种细胞因子的脑脊液与血清含量等方面均有显著性差异(P0.05),表现为随着发病程度的加重,NBNA评分及IL-2在脑脊液与血清中含量呈降低趋势,而TNF-α及IL-6在脑脊液与血清中含量呈上升趋势;且治疗后NBNA评分及IL-2的脑脊液与血清含量整体水平有所升高,而TNF-α及IL-6在脑脊液与血清中含量整体水平有所降低,其差值与治疗前相比,均有统计学意义(P0.05或P0.01);线性相关分析结果显示,IL-2的脑脊液含量与新生儿的NBNA评分呈显著正相关,TNF-α、IL-6的脑脊液含量与新生儿的NBNA评分呈显著负相关。结论 TNF-α、IL-6及IL-2的脑脊液和血清水平能够反映缺血缺氧性脑病患儿的发病程度及治疗结局,可作为其临床诊断和不良预后的重要筛查指标,且脑脊液水平较血清水平更具预测价值。     

用ELISA检测白色念珠菌单克隆抗体

本文介绍了用于检测白色念珠菌单克隆抗体的ELISA方法与实验结果。采用戊二醛固定菌细胞而不用离心的方法,调整了抗原抗体反应时间,采用HRP-OPD酶底物反应显示系统,能大批量处理标本,成功地应用于白色念珠菌单克隆抗体的筛选检测及鉴定。本法在定性水平上与凝集试验结果一致。若稍加改进,可能适用于临床念珠病患者血清特异性抗体水平的检测,以达到辅助诊断目的。     

应用双夹心ELISA检测脑脊液中纤维结合蛋白

<正> 纤维结合蛋白(Fibronectin,Fn)是一组大分子糖蛋白,广泛存在于细胞表面、细胞外液、结缔组织及大都份基膜上。近年来国内外学者已从医学各分支学科角度做了大量的基础和临床研究工作。神经系统疾病时,血液及脑脊液中纤维结合蛋白量的变化及与疾病愈合和转归的可能关联更是神经病学学者所关注的。然而由于测定灵敏度的限制,至今尚未见到应用ELISA方法检测脑脊液中Fn的报告。     

用RIA法检测血清与脑脊液HBV标志的结果分析

近二十年来由于免疫学、病毒学和分子生物学的迅速发展，病毒性乙型肝炎无论在病源学、流行病学，临床诊断，治疗和防预等方法，不断有新的认识和重大突破，乙型肝炎标志物的检测技术日新月异，乙型肝炎血清学研究提供了可靠的依据，在肝炎患者的血液中和其它体液(包括脑脊液)中只要有Dane颗粒，就可能有传染性。