间接血凝试验在囊虫病诊断中的应用

囊虫病是人畜共患疾病,严重损害人民健康。本文报道用间接血凝试验检测人血清中囊虫抗体,具有较高的特异性和敏感性。 1 囊虫抗原致敏血球的制备 1·1 囊虫抗原的制备,选取新鲜的含猪囊蚴的猪肉,用消毒空针抽取囊液,经3000rpm/分离心10min,上清即为囊液抗原。用分光光度计测量蛋白     

上海市特殊人群弓形虫病血清流行病学调查

<正> 本文对上海地区特殊人群应用IHA和ELISA进行了弓形虫病的血清流行病学调查。 一、抗原制备 IHA抗原和致敏血球,小白鼠接种弓形虫后第四天抽取腹水,生理盐水洗涤3次。0.25胰酶37℃水浴消化20min盐水继续离心洗涤同上重复消化1次,得到纯净的弓形虫于蒸馏水内,一20℃反复冻融5次,3000rpm30分钟,上清加等量1.7％NaCl为抗原液。用该抗原液致敏已经丙酮醛、甲醛双固定的绵羊红血球,则为致敏血球。ELISA抗原,纯净的弓形虫混悬于0.01％硫柳汞盐水内冻融2次,超声粉碎。振幅85～90,功率70。10000rpm3min离心,上清即为酶标抗原原液。福林酚法测定蛋白含量为800μg～1000μg/ml。     

微量间接血凝诊断猪肉绦虫病的初步报告

1979年起,我们用微量间接血凝法诊断猪肉绦虫病,结果简报于下。 材料和方法 抗原的制备:从新鲜猪囊尾蚴中抽取囊液,加等量饱和硫酸铵溶液,混匀,置4℃过夜,4,000rpm离心10分钟,弃上清,加生理盐水     

棘球蚴囊液、头节和囊壁抗原的多肽图谱初步研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶卧式平板二维电泳和银染色法对棘球蚴囊液、头节和囊壁抗原进行了初步分析,以期对抗原的进一步纯化有所裨益。 抗原样品液取自羊肝的细粒棘球蚴。囊液抗原由吸出的囊液经离心、透析后,用聚乙二醇10000浓缩而成。将包囊内壁用生理盐水清洗三次,收集清洗液,经离心清洗出头节,再经冻融、超声粉碎、离心、透     

家兔感染猪蛔虫卵后血清抗体水平的变化

为了寻找能准确反映蛔虫感染情况和流行动态的调查方法,我们用ELISA试验定期检测实验感染猪蛔虫卵的家兔的血清抗体水平。 材料和方法 1 抗原 从刚屠宰的猪肠管内收集活的雌蛔虫,用自来水和无菌生理盐水反复洗涤后,收集体腔液,10000rpm离心沉淀30min。上清液经硫酸铵     

从粪悬液中提取甲型肝炎病毒方法的改进

本文报告用超速差迷离心方法从甲肝潜伏期病人粪便悬液中提取甲肝病毒方法代替PEG提纯法,即将粗提的粪悬液40000rpm/min超迷离心沉淀病毒,以适量缓冲液重新悬浮后再8000—10000rpm/min,离心30分钟,去除大颗粒,用这种方法获得的HAV悬液,免疫电镜观察可以看到大量HAV颗粒,结构清楚,图象清晰,背景较干净,再进一步用CsCL密度梯度离心方法提纯,在     

几种猪囊尾蚴抗原用于斑点-ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液10000g上清、囊液100000g上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗原等5种囊尾蚴抗原，对124份各类血清进行斑点-ELISA试验，结果除2种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。2种囊液抗原中以100000g离心者为优，检测70例囊虫病患者，阳性率为82．8％；30例正常人，假阳性率为6．7％；5例血吸虫、5例华支睾吸虫及5例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但9例包虫病患者血清均出现交叉反应。     

用囊尾蚴囊液抗原诊断猪肉绦虫囊尾蚴病的可靠血清学方法:ELISA和IHA

本文报道以囊尾蚴囊液作抗原用于ELISA和IHA检测人血清中抗囊尾蚴抗体具有高度的重现性和敏感性。囊尾蚴取自猪骨胳肌后浸于冰冷却的pH 7.4PBS中,尽快取囊液,每ml囊液加50μl 0.3M草酸铵和25μl 1:3稀释的氨水,离心去钙离子,上清液即为可溶性囊液抗原,分装后置液氮保存。ELISA采用平底反应板,酶显色系统为生物素化A蛋白-抗生物素过氧化物酶结合物-OPD,被检血清作1:5稀释。用囊液抗原致敏戊二醛醛化的羊红细胞,     

几种猪囊尾螺抗原用于斑点—ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液１００００ｇ上清、囊液１０００００ｇ上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗在等５种囊尾蚴抗原，对１２４份各类血清进行斑点－ＥＬＩＳＡ试验，结果除２种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。２种囊注抗原中以１０００００ｇ离心者为优，检测７０例囊虫病患者，阳性率为８２．８％；３０例正常人，假阳性率为６．７％；５例华支睾吸虫及５例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但９例包虫病患者血清均出现交     

ELISA在脑囊虫病免疫学诊断中的应用

我室从1987年开始应用ELISA检测脑囊虫病人血清中的抗囊虫抗体,现将结果报告如下:1 材料和方法1.1抗原收集新鲜猪囊尾蚴液,56℃ 30min灭活,以4000rpm离心30min,取其上清液作抗原,Folin-酚试法测蛋白含量(2.89mg/ml),冰盒内保存。1.2 试验血清1.2.1 待测血清经IHA和病理检查及CT等综合方法明确诊断的脑囊虫病人血清172份.皮肌囊虫病人血清59份,脑囊虫病人脑脊液(CSF)71份。1.2.2 阳性对照血清经CT和手术证实的脑囊虫病人混合血清。1.2.3 阴性对照血清输血员混合血清。     

几种猪囊尾蚴抗原用于EITB法诊断囊尾蚴病的观察

本研究对囊液10000g和100000g离心后的上清、头节抗原、全囊抗原及头节尿素溶解性抗原等5种抗原进行SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。考马斯亮蓝染色依次出现10、10、13、14和5条显色带，银染结果依次出现20、20、21、21和13条显色带。分子量范围为＜6.6kDa－＞116kDa。选择囊液100000g（以下简称囊液）、全囊和头节尿素等3种抗原对105份各类血清进行酶联免疫电转移印斑（EITB）检测。结果囊尾蚴病患者血清与3种抗原反应可出现1－13条反应带，分子量范围6.6kDa－＞116kDa。如以≤21.5kDa条带作为判断标准，则囊液抗原、全囊抗原和头节尿素抗原的阳性率依次为54％、48％及58％，假阳性率依次为6％、10％及0％。头节尿素抗原对血吸虫、华支睾吸虫和肺吸虫病患者血清未出现交叉反应，10例包虫病患者血清中有2例出现交叉反应。     

阴道毛滴虫病间接荧光抗体试验的初步观察

阴道毛滴虫病的确诊,目前主要依据从阴道分泌物中检出活动的毛滴虫,此法简便快速,但冬天常因天气过冷,影响检出率。1987年以来,我们应用间接荧光抗体试验(IFAT),对阴道毛滴虫病患者和健康人进行了初步观察。一、材料与方法 (一)抗原制备:将阴道毛滴虫病人宫颈阴道分泌物,接种于含青霉素的猪肝、味精、蛋白陈培养基内(pH6.0～6.4),置37℃温箱中进行无菌培养72h(中间转种一次)。以500～1000rpm离心三次共10min,其间用洛克氏液洗涤虫体,将离心的虫体沉淀物置37℃温箱中30min,     

固相金斑免疫试验检测包虫病血清抗体技术的初步建立

包虫病在我国有广泛的流行区，是重要的人畜共患病。对包虫病的快速诊断，是防治工作的迫切需要。胶体金标记技术建立的固相金斑免疫试验对包虫病的血清抗体检测，具有操作简单，稳定性好和诊断快速，适合于流行区的调查和诊断，是目前对包虫病检测较为满意的方法，现报告如下。l材料及方法1．l包虫抗原来源采集青海地区藏系羊肝脏细粒棘球拗（HCF）、无菌方法抽取囊液一20C贮存。1．2抗原制备1．2．1囊液原抗囊液15ml4000Xg离心15min，吸取上清液用聚乙M醇（WM6000）浓缩3倍。75—2型紫外分光光度计测定蛋白量，即为抗原1，一20oC贮存…     

应用不同抗原作皮内试验诊断华支睾吸虫病的比较观察

在华支睾吸虫病调查中,常用皮内试验作为初筛,为提高试验的特异性和敏感性,我们比较了采用两种不同抗原的皮内试验结果。一、材料与方法(一)华支睾吸虫抗原1.硫酸铵提取抗原:采用前文制备的“C”抗原。2.成虫培养代谢抗原:取华支睾吸虫成虫数条,以生理盐水洗涤,将成虫分装试管内,每管7～8条,加5m11640培养液,37℃培养,每24h 换液一次,15d 后终止培养。将每次换下的培养液超滤浓缩,然后用 PB(pH7.2)透析72h,用生理盐水平衡12h,以18000rpm 离心30min,测蛋白含量为1.05ms/ml,放4℃冰箱保存备用。     

神经部位囊尾蚴病的血清学诊断:以猪肉绦虫囊尾蚴的囊液及其它成份为抗原的ELISA法

作者从重感染的猪中取得囊尾蚴,制备囊液抗原(CFAg)、原头节抗原(CSAg)和囊壁抗原(CWAg)。囊尾蚴刺破后收集囊液,并从囊壁取下头节,均加 pH7. 2PBS,经超声获 CSAg 和 CWAg。新鲜囊液抗原     

肯尼亚人体包虫病诊断Ⅱ.用耐热抗原做酶联免疫吸附试验

抗原取自牛棘球蚴液,经离心、过滤、浓集,并在加热至110℃10分钟后再离心,所得的上清液即为抗原。受检血清82份,来源于肯尼亚,其中经超声波扫描有棘球蚴囊者52例,未发现棘球蚴囊样肿块者30例。试验按Engvall等所述的方法进行。抗原(含蛋白175μg/ml)用pH7.2、0.01M的磷酸缓冲液(尚含2% PEG、0.4M氯化钠和0.02%叠氮钠)稀释500倍,在微量反应板每井中加入100μl,置湿盒中室温下孵育48小时,     

猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

本文应用琼脂双向扩散(DID)、免疫电泳(IEP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对猪囊尾蚴的各部分抗原,即完整幼虫、囊液、头节和囊壁抗原进行分析。实验结果表明,四种抗原间存在相同的抗原成分。囊液中含有糖蛋白和脂蛋白。囊液、头节和囊壁蛋白质的主要分子量均在100KD以下。囊液与头节有     

快速酶联免疫吸附试验检测脑囊虫病人血清抗体的实验观察

1986年我们在常规ELISA基础上进行改进,建立块速ELISA方法,一次试验仅需1h。在脑囊虫病临床诊断中,取得了满意结果。 材料和方法 一、抗原 抽取猪囊尾蚴囊液,经透析、离心、收集上清液,置低温冰箱保存备用。 二、试验血清 脑囊虫病人血清选择病史及临床症状可疑,间接血凝试验阳性者。阳性对照血清是用囊液抗原感染健康家兔制备出兔抗囊血清。阴性对照血清采自血库献血员。 三、酶结合物(一)酶标羊抗人IgG:自制。     

人体囊尾蚴抗原在临床试验中应用价值的探讨

目前 ,在囊虫病的临床血清学诊断试验中所用的抗原均采自猪体囊尾蚴。为探讨人体囊尾蚴抗原在临床试验中的应用价值 ,我们进行了下列试验。材料和方法1　抗原的制备　在无菌条件下 ,切除已确诊的人体皮下囊虫结节 ,置生理盐水中 ,洗涤数次。用 1ml的皮试针吸取囊液放入离心管中 ,2 0 0 0 r/min离心 2 0 m in后收集上清液 ,放入透析囊内置 4℃ ,以生理盐水透析 48h。然后测其蛋白含量(4 0 2 μg/ml) ,放 - 2 0℃ ,保存备用。2　试验血清　囊虫病病人血清 10 1份 ,均经囊虫血凝和囊虫酶标反复筛选。正常人血清 145份 ,采自济宁师专学生。3　结…     

细粒棘球蚴致过敏反应小白鼠模型复制的初步报告

本实验研究利用细粒棘球蚴囊内容物及其提纯抗原复制过敏反应模型。将１００只昆明种小白鼠，根据决定性注射致敏原的不同，随机分为羊源囊液抗原组，羊源囊液部分纯化抗原组，人源囊液抗原组和人源囊液部分纯化抗原组，并设立生理盐水对照组。以腹腔注射方式进行攻击，复制出小白鼠过敏反应模型。