天龙喘咳灵治疗哮喘186例疗效观察

应用自拟方天龙喘咳灵治疗哮喘１８６例，并与西药治疗组作比较。结果治疗组痊愈率为３１％，总有效率为９４．４６％，对照组痊愈率为０．９％，总有效率为５３．７０％。痊愈率及总有效率治疗组均明显高于西药对照组（Ｐ〈０．００１）。认为本病的发生乃为“外有非时之感，内有壅塞之气，膈有胶固之痰”而成，其标在肺，其本在肾。治疗关键在于宣肺、健脾、平喘。     

天龙喘咳灵胶囊治疗喘息型慢性支气管炎368例

应用自拟方天在喘咳灵胶囊为主治疗喘息型慢支炎患者３６８例,并与１００例西药组作比较,结果治疗组监控率６７．１％,总有效率为９７．４％;对照组监控率为３０．０％,总有效率为７０．０％,临床率及总有效率治疗组明显高于西药对照组（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５）,有显著性差异。认为本病的发生乃肺脾肾功能失调与痰瘀相互为患,肺脾肾功能失调为本,痰瘀壅阻气道为标,治疗以宣肺平喘为主,兼以化瘀祛痰。     

天龙喘咳灵治疗慢性阻塞性肺疾病疗效观察

目的观察天龙喘咳灵治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效.方法将97例COPD迁延期患者随机分为两组,治疗组予天龙喘咳灵,对照组予西医常规处理.观察两组患者症状及肺功能的变化.结果治疗组症状、体征的改善及对肺功能的保护作用均优于对照组.结论天龙喘咳灵治疗COPD疗效满意.     

天龙喘咳灵对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者生存质量的影响

目的:观察天龙喘咳灵对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者生存质量的影响。方法:将67例慢性阻塞性肺疾病(COPD)病情为I~IIA级患者随机分为对照组与治疗组,对照组32例用可必特气雾剂雾化治疗,治疗组35例在对照组基础上加用天龙喘咳灵(青天葵、款冬花、法半夏、熟附子、五味子等药物组成)治疗,疗程共6个月,采用St George’s呼吸问卷评分标准对两组患者进行生存质量评估。结果:治疗组治疗后总评分、活动能力及症状等评分较观察前下降,差异有显著性意义(P<0.01);对照组总评分、活动能力及症状等评分均较观察前升高,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05);两组社交心理影响评分与观察前比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:长期口服天龙喘咳灵可以改善COPD稳定期患者的临床症状,提高生活质量。     

呼吸道合胞病毒感染诱发哮喘大鼠模型的建立与评价

目的:探讨用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导鸡卵白蛋白(OVA)致敏,建立病毒感染哮喘大鼠模型的方法,并评价其效果。方法:40只SD大鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、OVA组、RSV组、和OVA/RSV组4组。应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化吸入结合RSV滴鼻激发复制病毒性哮喘模型,PBS组不造模。观察大鼠哮喘发作症状;动物体描箱法测定乙酰甲胆碱(Mch)激发条件下气道反应性(以Penh值表示);H.E染色观察肺组织病理变化,以地高辛多标记点原位杂交检测肺组织中RSV RNA。结果:RSV组和OVA/RSV组肺组织中可见明显的RSV的阳性信号(棕黄色),PBS组、OVA组则未见RSV的阳性信号。与PBS组相比,除在浓度为0mg/ml(PBS)时OVA组无显著性差异(P>0.05),余各组在各浓度Penh值均增高(P<0.05,P<0.01);与OVA/RSV组相比,各组Penh值均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:运用OVA致敏、激发,以RSV连续滴鼻的方法制备大鼠病毒性哮喘模型,病理生理特征更符合哮喘定义;且用有活力的RSV感染诱发的哮喘与临床病毒性哮喘的实际发病情况相近,该模型的建立可以为哮喘研究提供更好的选择工具。     

天龙喘咳灵对人气道上皮细胞增殖和迁移的影响

目的观察天龙喘咳灵含药血清对损伤气道上皮细胞增殖和修复性迁移作用的影响,探讨其在治疗支气管哮喘气道高反应中的可能机制.方法常规制备SD大鼠药物组血清和生理盐水组血清,按照浓度梯度加入对数生长期人气道上皮细胞(16HBE)共培养24h, CCK-8试剂盒计数16HBE生长抑制/增殖率.待16HBE生长融合成单细胞层至过密状态时,给予机械划伤处理,用刀片将单细胞层刮开一片边缘整齐的距形区域,并且从划伤起始部位留出一条清晰的切迹作为修复迁移的起始线.按照上述浓度梯度加入药物组和对照组血清,分别于0、24、48h在倒置显微镜下观察并摄片,并测量每组各浓度下迁移的最远距离.结果与对照组血清相比天龙喘咳灵药物血清促进了16HBE的增殖,但与药物血清浓度梯度负相关,对照组也呈现出这一趋势.药物血清增强了16HBE划伤后的修复迁移,作用最强的是含药物血清为10%的培养基,在此浓度下16HBE的迁移速度为(58.33 ±10.04)um/h,对照组迁移速度最大的是含血清为10%的培养基,速度为(38.68±13.07)μm/h.结论天龙喘咳灵含药血清能促进16HBE的增殖和损伤区域的迁移修复.天龙喘咳灵治疗慢性气道炎症性疾病,是通过药物人血后的代谢成分对受损上皮的修复来起作用的.     

平喘I号对呼吸道合胞病毒哮喘小鼠TNF-a ET-1影响的研究

目的：观察平喘Ⅰ号对呼吸道合胞病毒（RSV）感染引起BALB/c小鼠哮喘模型血清中肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、内皮素-1（ET-1）含量的影响,探讨其治疗哮喘发作的作用机制。方法：72只BALB/c小鼠随机分成6组,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、平喘Ι号低、中、高剂量组,每组12只。予RSV致敏,除正常对照组和模型对照组用等量生理盐水外,其余各组用相应药物干预。末次激发48h后取血清采用ELISA法测定各组TNF-a和ET-1含量。结果：与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠血清TNF-a、ET-1含量明显增高（P〈0.01）。与模型对照组比较,平喘I号各剂量组和地塞米松组均可降低哮喘小鼠血清中TNF-a和ET-1水平（P〈0.01或P〈0.05）,其中平喘I号高剂量组与地塞米松组水平接近。结论：平喘Ⅰ号能降低哮喘小鼠血清TNF-a、ET-1含量,并具有量效关系。由此推测,通过降低血清中TNF-a和ET-1水平,从而减轻气道炎症反应和气道组织的重构,是平喘Ⅰ号治疗哮喘的作用机制之一。     

肝纤灵对肝纤维化大鼠血清细胞因子水平的影响

目的 :研究肝纤灵的抗肝纤维化作用与血清中肿瘤坏死因子 (TNF)、白细胞介素 - 1(IL - 1)、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )的关系。方法 :CCl4皮下注射造成大鼠肝纤维化 ,治疗组同时口服肝纤灵水煎液 ,分别于灌胃后第 3、6、9、12w ,分批分组自眼眶静脉丛取血 ,分离所得血清 ,用相应的放免试剂盒检测TNF、IL - 1,IL - 6。结果 :从第 3w开始 ,模型组大鼠血清中TNF水平出现升高 ,并在第 6w出现峰值 ,6～ 9w时与空白对照组相比有显著差异 (P <0 0 1)。肝纤灵高、低剂量组与空白对照组TNF水平相近 ,6、9w值均显著低于模型组。模型组大鼠血清中IL - 6水平明显低于正常对照组 ,IL - 1水平明显高于正常对照组 ,不同剂量治疗组则能显著改善上述趋势。结论 :肝纤灵抗肝纤维化作用与TNF、IL - 1和IL - 6等细胞因子直接相关     

平喘Ⅰ号对呼吸道合胞病毒哮喘小鼠NF-κB、TGF-β影响的研究

目的:观察平喘Ⅰ号对呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起BALB/c小鼠哮喘模型肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β(TGF-β)含量的影响,探讨其治疗哮喘发作的作用机制。方法:72只BALB/c小鼠随机分成6组,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、平喘Ⅰ号低、中、高剂量组,每组12只。予RSV致敏,除正常对照组和模型对照组用等量生理盐水外,其余各组用相应药物干预。末次激发48h后取肺组织病理切片采用免疫组化法测定各组NF-κB和TGF-β含量。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠肺组织中NF-κB、TGF-β含量明显增高(P0.01)。与模型对照组比较,平喘Ⅰ号各剂量组和地塞米松组均可降低哮喘小鼠肺组织中NF-κB和TGF-β水平(P0.01或P0.05),其中平喘Ⅰ号高剂量组与地塞米松组水平接近。结论:平喘Ⅰ号能降低哮喘小鼠肺组织中NF-κB、TGF-β含量,并具有量效关系。由此推测,通过降低肺组织中NF-κB和TGF-β水平,从而减轻气道炎症反应和气道组织的重构,是平喘Ⅰ号治疗哮喘的作用机制之一。支气管哮喘(简称哮喘)是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞等)和细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾病。本病反复发作,可产生气道不可逆性狭窄和气道重塑,致使病情缠绵难愈。平喘Ⅰ号是治疗哮喘急性发作的经验方,经过长期的临床治疗和观察,证实对小儿哮喘发作有良好的治疗作用。本研究的主要目的是观察哮喘小鼠肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β(TGF-β)的含量变化,探讨平喘Ⅰ号治疗哮喘的可能作用机理。     

小青龙汤对哮喘大鼠血清及BALF中IL-6、IL-8及GM-CSF的作用研究

目的探讨小青龙汤治疗哮喘大鼠的作用机制.方法观察了小青龙汤对哮喘大鼠模型血清及肺泡灌洗液中IL-6、IL-8及GM-CSF水平的影响.结果小青龙汤能有效降低大鼠哮喘模型血清及BALF中IL-6、IL-8及GM-CSF等细胞因子水平,与模型对照组相比具有统计学意义(P＜0.05或0.01).结论对抗过量细胞因子,减缓对炎性细胞(EOS、Neu)的趋化与激活,可能是该方治疗支气管哮喘的作用机制之一.     

金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠肺组织TLR4及TAK1表达的调控作用

目的通过观察金欣口服液(炙麻黄、苦杏仁、生石膏、黄芩等)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染肺组织TOLL样受体4(TLR4)及转化生长因子β活化激酶(TAK1)表达的调控趋势,探讨金欣口服液抗病毒机制以及TLR4信号通路途径。方法 RSV滴鼻感染BALB/c小鼠,金欣口服液给药进行干预,并于首次滴鼻后24 h取各组小鼠肺组织,Western Blot法检测小鼠肺组织TLR4、TAK1蛋白表达。结果 RSV感染BALB/c小鼠后24h,TLR4﹑TAK1蛋白表达明显升高(P<0.01),而金欣口服液组较RSV感染组TLR4﹑TAK1表达明显下调(P<0.01);金欣组蛋白表达量最低,与利巴韦林组相比,P<0.01,利巴韦林组与RSV感染组相比P<0.01。结论金欣口服液能抑制TLR4信号转导通路中TLR4/TAK1蛋白的表达,TLR4的蛋白表达与TAK1的蛋白表达呈正相关,金欣口服液抗RSV作用机制中的TLR4信号通路途径可能是通过TAK1实现的。     

BALB/c小鼠胶原诱导关节炎模型的建立方法及特征分析

目的:建立BALB/c小鼠胶原诱导关节炎CIA(Collagen-induced Arthritis)模型及主要特征评价方法。方法 :鸡Ⅱ型胶原溶于0.1 M冰醋酸中,使其终浓度2 mg/ml,4度过夜,次日,取鸡Ⅱ型胶原与等体积完全弗氏佐剂充分乳化,将乳化后浓度为1mg/mlⅡ型胶原50μl注射于BLAB/c鼠足跖皮内进行初次免疫。第15天,在相同部位将1mg/mlⅡ型胶原25μl进行再次免疫。采用临床症状评分评价小鼠关节肿胀外观,测量小鼠肿胀厚度和小鼠体重并计算脾脏指数。对踝关节进行病理切片,采用HE染色观察滑膜增生,炎性细胞浸润及血管翳形成情况,甲苯胺蓝染色观察软骨损伤状况并评分,TRAP染色观察破骨细胞对骨侵蚀的影响。免疫组化法检测踝关节CD68蛋白的表达并计算平均光密度。结果:初次免疫第3天关节出现轻微肿胀,第18天肿胀最为明显,模型组小鼠体重下降,脾脏指数增加。病理学结果显示:模型组出现滑膜增生,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨损伤等一系列典型RA特征,模型组CD68高表达。结论:采用BALB/c小鼠在其足趾皮内注射鸡II型胶原可成功建立CIA模型,重现性好,周期短。病理学分析和临床症状评分评价了该模型具有典型的RA特征。     

Immuno-enhancement effects of ethanol extract from Cyrtomium macrophyllum (Makino) Tagawa on cyclophosphamide-induced immunosuppression in BALB/c mice

Ethnopharmacological relevance

Cyrtomium macrophyllum (Makino) Tagawa has been traditionally used as a herbal medicine for the treatment of various infectious diseases such as tapeworm infestation, colds, and viral diseases. However, no systematic study of the immunity of Cyrtomium macrophyllum ethanol extracts (CM) has yet been reported. The present work evaluates these traits.

Materials and methods

120 male BALB/c mice were divided into 6 groups of 20 mice each: (1) normal group (sterile physiological saline), which served as a blank control; (2) model group (Cyclophosphamide, CY) group (sterile physiological saline), which served as a negative control; (3) low-dose CM (50 mg/kg BW); (4) intermediate-dose CM (100 mg/kg BW); (5) high-dose CM (200 mg/kg BW); (6) CM group (200 mg/kg BW). CY (0.2 ml) was administered via intraperitoneal injection. The other regimens were administered via gavage in 0.2 ml solution. Phytochemical of CM was characterized by HPLC–LTQ-Orbitrap. The acute toxicity effect of the ethanol extract of Cyrtomium macrophyllum was also investigated.

Results

The spleen and thymus indices of mice receiving low, intermediate, and high doses of CM recovered more quickly than those of CY mice, and they did so in a dose-dependent manner. These mice also showed higher T cell and B cell proliferation responses and macrophage function than those of CY mice, and their serum levels of interleukin-6 and interferon-γ had become normal. In acute toxicity test, CM exhibited no mortality and behavioral changes in mice. Quantitative phytochemical analysis showed flavonoids, polyphenols, and tannins to be the major compounds present in the extract, at 27.64%, 30.87%, and 11.22%, respectively. We found that 16 compounds were characterized by the interpretation of their mass spectra obtained by the MS/MS.

Conclusion

The current study demonstrates that Cyrtomium macrophyllum ethanol extract improved immune function in CY-treated mice.     

辛夷精油对BALB／c小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响

目的：探讨辛夷精油对BALB／c小鼠过敏性哮喘气道炎症的作用。方法：采用卵蛋白（OVA）配合福氏佐剂致敏诱发BALB／c小鼠哮喘,观察辛夷精油对其支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）数与分类计数、蛋白含量、肺组织病理改变及肺细支气管黏膜浸润的嗜酸性粒细胞（Eos）数的影响。结果：辛夷精油能明显减少BALF中Eos数（P〈0．05）、蛋白含量及肺组织Eos（P〈0．05）等炎症细胞浸润,且量效关系以辛夷精油大剂量作用较强。结论：辛夷精油防治过敏性哮喘的作用,可能是通过抑制肺组织Eos的炎性浸润来实现的。     

Effect of some bisbenzylisoquinoline alkaloids on American Leishmania sp. in BALB/c mice

Four bisbenzylisoquinoline alkaloids, antioquine, berbamine, gyrocarpine and isotetrandrine were tested in BALB/c mice infected with Leishmania amazonensis (IFLA/BR/67/PH8 or MHOM/GF/84/CAY-H-142) or L. venezuelensis (VE/74/PM-H3). The treatments were initiated 1 day after the parasitic infection, with alkaloid at 100 mg/kg/day for 14 days and the reference compound, meglumine antimonate (Glucantime^R) at 200 mg/kg/day. Antioquine, berbamine and gyrocarpine were less potent than Glucantime against L. amazonensis (PH8). Only isotetrandrine exhibited activity approximately equal to or greater than Glucantime in BALB/c mice infected with L. amazonensis (PH8 or H-142) and showed significant activity against L. venezuelensis. Experiments with a single local treatment on the footpad, 2 weeks after parasitic infection with L. amazonensis (PH8), showed that isotetrandrine at 200 mg/kg was less active than Glucantime at 400 mg/kg.     

抗光敏合剂对BALB/C小鼠急性光损伤所致表皮细胞炎症损伤干预作用的研究

目的:观察抗光敏合剂对急性UVB辐射后BALB/c小鼠皮肤炎症细胞损伤的影响,以探讨抗光敏合剂对皮肤光损伤的作用机理。方法:以300mJ/cm2UVB辐射BALB/c小鼠建立急性光损伤模型,在预防性应用中药抗光敏合剂后,与正常小鼠、预防性应用生理盐水及羟氯喹小鼠进行平行对照研究。HE染色法观察炎症变化程度,并以病理图片处理系统观察小鼠表皮厚度。结果:动物实验研究结果显示,中药抗光敏合剂可以缓解急性UVB辐射损伤造成的细胞炎症反应,保护角质形成细胞,发挥对急性光损伤保护的作用机制。结论:抗光敏合剂治疗可明显缓解紫外线引起的表皮角质形成细胞的炎性损害,从而发挥其治疗作用。     

欧前胡素通过Nrf2/HO-1抗氧化途径对哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的探究欧前胡素对哮喘模型小鼠气道炎症的影响及其作用机制。方法将50只雄性BALB/c小鼠随机分成5组,即对照组、模型组及欧前胡素低、中、高剂量(15、30、60 mg/kg)组。采用HE、Masson、PAS染色观察小鼠肺组织病理学改变;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中免疫球蛋白E(Ig E)及白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13、γ-干扰素(IFN-γ)水平;双氢罗丹明(DHR)-123法检测小鼠BALF中活性氧(ROS)的含量;检测小鼠肺组织中蛋白羰基含量及丙二醛(MDA)水平;抗氧化酶试剂盒检测小鼠BALF中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)水平及总抗氧化能力(TAOC);免疫组织化学法和Western blotting法检测小鼠肺组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果与模型组比较,欧前胡素能够减少哮喘小鼠肺组织炎症细胞的渗出、杯状细胞的增生和胶原沉积;减少BALF中ROS、总Ig E和卵清蛋白(OVA)特异性Ig E的表达;降低IL-4、IL-5、IL-13、蛋白羰基、MDA的量并增加IFN-γ、SOD、GSH水平及TAOC;提高肺组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平。结论欧前胡素对OVA诱导的哮喘模型小鼠具有治疗作用,其作用机制可能与Nrf2/HO-1通路活化有关。     

蒿甲醚与补铁剂合用对小鼠结直肠癌抑瘤效果的实验研究

目的：探讨蒿甲醚（Artemether）与不同剂量硫酸亚铁补铁剂合用对BALB／c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤效果。方法：BALB／c小鼠皮下接种CT-26结直肠癌细胞（2106个／mL）72只小鼠，雌、雄各半；随机分为2个大实验组[蒿甲醚治疗剂量（50mg／kg）＋不同剂量硫酸亚铁组；蒿甲醚维持剂量（33．3113g／kg）＋不同剂量硫酸亚铁组]，每个大组再随机分为4组，每组8只，分别为I组：蒿甲醚50mg／kg组、Ⅱ组：蒿甲醚50mg／kg＋3mg／kg硫酸亚铁组、Ⅲ组：蒿甲醚50mg／kg＋1．5mg／kg硫酸亚铁组、Ⅳ组：蒿甲醚50mg／kg＋0．75mg／kg硫酸亚铁组；V组：蒿甲醚33．3mg／kg组、Ⅵ组：蒿甲醚33．3mg／kg＋3mg／kg硫酸亚铁铁组、Ⅶ组：蒿甲醚33．3mg／kg＋1．5mg／kg硫酸亚铁组、Ⅷ组：蒿甲醚33．3mg／kg＋0．75mg／kg硫酸亚铁组；IX组：空白对照组为等体积生理盐水。结果：各实验组对BALB／c小鼠CT-26结直肠癌具有显著的抑制作用，I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组对BALB／c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤率分别为：52．0％、56．3％、53．5％、51．2％；V、VI、VI、Ⅷ组对BALB／c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤率分别为：41．8％、44．0％、43．6％、42．2％，各实验组间比较，差异无显著性（P〉0．05），与Ⅸ组比较，有显著性差异（分别P〈0．01）。结论：在一定剂量范围内，口服蒿甲醚（Artemether）对BALB／c小鼠CT-26结直肠癌具有显著的抑瘤效果，与不同剂量硫酸亚铁补铁剂合用，能明显增强蒿甲醚的抑瘤作用。