云芝多糖对实验性动脉粥样硬化家兔血浆氧化型低密度脂蛋白含量的影响

用本室制备的两株单克隆抗体（ＨＯＬ２和ＨＯＬ５）比较了经与未经云芝多糖治疗的实验性动脉粥样硬化家兔血浆氧化型低密度脂蛋白的含量。发现血浆氧化型低密度脂蛋白以低、中修饰度低密度脂蛋白为主；血浆氧化型低密度脂蛋白水平与主动脉粥样硬化斑块面积成正相关；云芝多糖能降低血浆氧化型低密度脂蛋白水平。提示利用单克隆抗体检测血浆氧化型低密度脂蛋白含量可初步预测动脉粥样硬化严重程度；云芝多糖降低血浆氧化型低密度脂蛋白水平可能是其减轻动脉粥样硬化斑块面积的机理之一。     

云芝多糖防止氧化型低密度脂蛋白所致巨噬细胞泡沫样变和预防实验性动脉粥样硬化形成

云芝多糖防止氧化型低密度脂蛋白所致巨噬细胞泡沫样变和预防实验性动脉粥样硬化形成陈瑗，周玫（第一军医大学自由基医学研究室，广州５１０５１５）动脉粥样硬化（Ａｓ）的发生发展与低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受到氧化修饰有关已为越来越多的研究所证实［１～９］。体内与...     

云芝多糖对受氧化型低密度脂蛋白攻击的小鼠腹腔巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响

以氧化修饰低密度脂蛋白攻击小鼠腹腔巨噬细胞为损伤模型，观察了云芝多糖对巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响的时效和量效关系。腹腔注射云芝多糖的小鼠腹腔巨噬细胞在体外与１０、５０、１００ｍｇ·Ｌ－１等三种浓度的氧化型低密度脂蛋白共同培养２４、４８和７２ｈ后，细胞形态未有较大改变，用ＭＴＴ比色法计数各时间点细胞存活数，受云芝多糖保护的巨噬细胞存活数较高。结果表明，云芝多糖能抑制巨噬细胞泡沫样变性，以及巨噬细胞泡沫样变性后，云芝多糖能延长其生存时间，防止其死亡，这对抑制动脉粥样硬化的进程有益处。     

云芝多糖对受氧化型低密度脂蛋白攻击的小鼠腹腔巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响

以氧化修饰低密度脂蛋白攻击小鼠腹腔巨噬细胞为损伤模型,观察了云芝多糖对巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响的时效和量效关系。腹腔注射云芝多糖的小鼠腹腔巨噬细胞在体外与10、50、100mg·L-1等三种浓度的氧化型低密度脂蛋白共同培养24、48和72h后,细胞形态未有较大改变,用MTT比色法计数各时间点细胞存活数,受云芝多糖保护的巨噬细胞存活数较高。结果表明,云芝多糖能抑制巨噬细胞泡沫样变性,以及巨噬细胞泡沫样变性后,云芝多糖能延长其生存时间,防止其死亡,这对抑制动脉粥样硬化的进程有益处。     

芥菜籽提取物抗氧化及下调巨噬细胞清道夫受体CD36

目的 探讨芥菜籽提取物抗氧化、调节CD36的表达及预防动脉粥样硬化的作用.方法 将C57/BL6小鼠随机分为对照组和芥菜籽组,分别经腹腔给予1.5％的生理盐水、1.5％芥菜籽提取物溶液,连续3天,第4天停止注射,第5天经眼眶取血并处死老鼠,取腹腔巨噬细胞培养.将培养的巨噬细胞给予氧化型低密度脂蛋白刺激,观察腹腔巨噬细胞氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞呼吸爆发和脂质过氧化物含量,清道夫受体CD36表达水平以及中性脂肪蓄积情况,并观察血浆超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量.雄性载脂蛋白E-/-小鼠30例,随机分为对照组、高脂组和高脂+7.5％芥菜籽组进行饲养,25周后处死,分离并观察主动脉脂质斑块面积.结果 芥菜籽提取物明显增加机体血浆超氧化物歧化酶水平和降低脂质过氧化物水平;降低氧化型低密度脂蛋白诱导的呼吸爆发;降低氧化型低密度脂蛋白诱导的脂质过氧化物升高及CD36的表达水平,减少细胞中性脂肪蓄积泡沫细胞形成;降低高脂引起的脂质斑块面积.结论 芥菜籽提取物可有效地提高机体的抗氧化能力,提高巨噬细胞的抗氧化性,减少脂质的摄取,预防动脉粥样硬化早期病变.     

血红素加氧酶/一氧化碳系统对家兔动脉粥样硬化发病的影响

为探讨血红素加氧酶／一氧化碳系统对动脉粥样硬化发病的影响,采用高胆固醇饮食建立了动脉粥样硬化家兔模型,并检测了血清总胆固醇,血浆氧化型低密度脂蛋白浓度及主动脉血红素加氧酶活性、一氧化碳生成量和主动脉内膜斑块面积。     

刺梨汁对金黄地鼠的抗动脉粥样硬化作用

为寻找有效抗脂蛋白氧化剂防治动脉粥样硬化 ,在建立金黄地鼠的动脉粥样硬化模型过程中 ,分别补充维生素C、维生素E及刺梨汁 ,分析血浆脂质、抗氧化剂水平 ,低密度脂蛋白氧化易感性及动脉粥样硬化发生程度的变化。结果发现 ,高胆固醇饲料喂养 10周后 ,各组实验动物血脂水平均升高 ,且伴有主动脉粥样硬化斑块的形成 ;各抗氧化干预组血浆中相应的抗氧化剂水平均显著升高 ,低密度脂蛋白抗氧化性增强 (维生素C组、维生素E组、刺梨汁组和对照组的低密度脂蛋白氧化延迟时间分别为 2 2 1± 5 6min、2 2 2± 6 0min、2 48± 48min和 181± 47min ,组间比较P <0 .0 5 ) ,动脉粥样硬化斑块面积均显著减少 (维生素C组、维生素E组、刺梨汁组和对照组粥样硬化斑块程度分别为 2 .6 3%± 1.35 %、2 .44 %± 1.47%、1.43%± 0 .92 %和 5 .6 2 %± 1.2 8% ,组间比较P <0 .0 0 1) ,以刺梨汁组减少最明显。相关分析表明 ,主动脉粥样硬化面积程度与低密度脂蛋白氧化延迟时间呈显著负相关 (r =- 0 .42 ,P <0 .0 5 ) ,低密度脂蛋白氧化延迟时间与血浆维生素E水平呈正相关 (r=0 .36 ,P <0 .0 5 )。结果提示 ,抗氧化剂改善低密度脂蛋白氧化易感性 ,降低动脉粥样硬化的发生。     

一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的作用及调控研究

通过给小鼠腹腔注射云芝多糖，并用干扰素γ，脂多糖及佛波酯醇刺激细胞，观察细胞一氧化氮的产量，测定脂氢过氧化物和硫代巴比妥酸反应物质，以反应低密度脂蛋白的氧化程度，从而部分揭示巨噬细胞氧化低密度脂蛋白的机制，探讨一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的作用和云芝多糖的抑制效果。     

脑梗死并高脂血症患者血浆P-选择素水平的变化及降脂干预

为研究动脉粥样硬化性脑梗死患者动脉粥样硬化病变的炎症反应以及降脂干预对其产生的影响 ,以酶标多克隆抗体夹心法及硝酸还原酶比色法测定 36例健康对照组、30例急性脑梗死并高胆固醇血症组及 2 8例急性脑梗死并高甘油三酯血症组患者应用辛伐他汀治疗前后血浆P 选择素、氧化型低密度脂蛋白和血清一氧化氮的水平。结果发现 ,两组脑梗死患者血浆P 选择素和氧化型低密度脂蛋白水平较对照组明显增高 ,血清一氧化氮水平明显减低。急性脑梗死并高胆固醇血症组患者的血浆P 选择素水平与血浆氧化型低密度脂蛋白和低密度脂蛋白水平呈显著正相关 ,与血清一氧化氮水平呈显著负相关 ;急性脑梗死并高甘油三酯血症组患者的血浆P 选择素水平与氧化型低密度脂蛋白和甘油三酯水平呈显著正相关。辛伐他汀治疗 6周后 ,两组脑梗死患者的血浆P 选择素和氧化型低密度脂蛋白水平明显减低 ,血清一氧化氮水平明显回升。以上提示 ,急性脑梗死并高胆固醇血症和高甘油三酯血症患者均存在着动脉粥样硬化病变的炎症反应 ,其炎症反应的发展与血浆P 选择素水平的变化及血浆氧化型低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯和血清一氧化氮水平的变化相一致 ,降脂干预可阻止动脉粥样硬化病变炎症反应的发展     

云芝多糖防止氧化型低密度脂蛋白所致巨噬细胞泡沫样变和预防实验性动脉粥样硬化形成

云芝多糖防止氧化型低密度脂蛋白所致巨噬细胞泡沫样变和预防实验性动脉粥样硬化形成陈瑗,周玫(第一军医大学自由基医学研究室,广州510515)动脉粥样硬化(As)的发生发展与低密度脂蛋白(LDL)受到氧化修饰有关已为越来越多的研究所证实[1～9]。体内与As发生有关的内皮细胞(EC)、平滑肌细胞以及巨噬细胞(MP)等都能对LDL进行氧化修饰。氧化的LDL(OLDL)是造成早期内皮细胞损伤和进一步病理变化的关键性因子,它不但直接损伤EC,而且诱导....     

多聚ADP核糖合成酶抑制剂降低高同型半胱氨酸血症诱发ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块面积

目的:检测多聚ADP核糖合成酶[Poly (ADP-ribose) polymerase,PARP]抑制剂3-aminobenzamide (3-AB)是否能够降低由高同型半胱氨酸血症(Hyperhomocysteinemia, Hhcy)诱发ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的斑块面积.方法:健康6周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为普通饮食组(n=30)或高甲硫氨酸饮食组(n=30),每组再分别给予隔天腹腔注射10 mg/kg 3-AB(n=20)或0.9%氯化钠(n=20),持续12周.12周末,检测血脂及血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)含量,分离心脏及主动脉,测量斑块面积,检测斑块局部NADPH氧化酶亚单位p47phox含量、PARP活性及表达.结果:高甲硫氨酸饮食诱导ApoE-/-小鼠产生Hhcy,促进氧化应激相关p47phox表达及PARP活化,显著增加斑块面积;PARP抑制剂3-AB虽然对普食组ApoE-/-小鼠抑制效果不明显,却能在不影响血浆Hcy和脂质含量的情况下,抑制Hhcy诱导的PARP活化,显著降低其粥样斑块面积达40%.结论:PARP抑制剂3-AB显著降低Hhcy诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块面积,可作为有效抑制粥样斑块进程的治疗方法之一.     

氧化低密度脂蛋白与内皮素在促进血管平滑肌细胞增生中的内在联系

本实验用培养的家兔血管平滑肌细胞探讨了在促进细胞增生过程中，氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＬＤＬ）和内皮素之间的联系，发现二者都可刺激血管平滑肌细胞增生，内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３可显著抑印制ＯＬＤＬ的促细胞增生作用，￣３Ｈ－ＴｄＲ的掺入量较单纯ＯＬＤＬ组减少１３．３％；细胞培养液内皮素放射免疫测定表明，应用ＢＱ１２３能使内皮素释放量较单纯ＯＬＤＬ组降低２８．９％。免疫细胞化学检测结果亦与上述完全符合，提示在动脉粥样硬化发生中，ＯＬＤＬ促血管平滑肌细胞增生的作用可能部分是通过内皮素来实现的。     

家兔颈总动脉不稳定斑块模型的建立

目的 建立家兔颈总动脉斑块模型。方法 选取60只雄性纯种的新西兰大白兔,随机分为3组,即球囊损伤+高脂组、高脂喂养组及普通饲料喂养组,每组20只。喂养12周后,分别给予中国斑点蝰蛇毒和组胺药物触发,诱发斑块破裂及血栓形成。结果 球囊损伤+高脂组存活17只白兔中,有38处病变狭窄程度超过50％,并且脂质核心较大、纤维帽的厚度小于65 μm,故判定以上38处病变为易损斑块。高脂喂养组中的19只白兔仅8处可判定为易损斑块;普通饲料喂养组中未见易损斑块。结论 高脂饮食饲养后,进行颈总动脉球囊拉伤制作兔易损斑块模型是切实可行的方法。     

氧化低密度脂蛋白与内皮素在促进血管平滑肌细胞增生中的内在联系

本实验用培养的家兔血管平滑肌细胞探讨了在促进细胞增生过程中,氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,OLDL)和内皮素之间的联系,发现二者都可刺激血管平滑肌细胞增生,内皮素A受体拮抗剂BQ123可显著抑印制OLDL的促细胞增生作用,￣3H-TdR的掺入量较单纯OLDL组减少13.3%;细胞培养液内皮素放射免疫测定表明,应用BQ123能使内皮素释放量较单纯OLDL组降低28.9%。免疫细胞化学检测结果亦与上述完全符合,提示在动脉粥样硬化发生中,OLDL促血管平滑肌细胞增生的作用可能部分是通过内皮素来实现的。     

Physical training and metabolic supplementation reduce spontaneous atherosclerotic plaque rupture and prolong survival in hypercholesterolemic mice

Moderate physical exercise (PE) combined with metabolic treatment (MT) (antioxidants and l-arginine) are well known to reduce atherosclerotic lesion formation in hypercholesterolemic mice. However, the long-term beneficial effects on unstable atheroma remain poorly understood. We started early PE training in large groups of 6-week-old hypercholesterolemic mice (by graduated swimming) alone or in combination with nutritional supplementation (1.0% vitamin E added to the chow and 0.05% vitamin C and 6% l-arginine added to the drinking water). Inactive controls did not receive PE. The spontaneous development of atherosclerotic plaque rupture (associated with advanced atherosclerosis) and survival rates were evaluated. Moderate PE elicited an increase in plasma levels of nitric oxide. Early combined treatment with PE and MT in the hypercholesterolemic mice significantly reduced lesions (also detected noninvasively at 10 months) and spontaneous atherosclerotic plaque rupture and prolonged survival more effectively than each intervention alone. Thus, early concerted actions of MT and PE improve the natural history of atherosclerotic lesions and reduce the plaque instability in hypercholesterolemic mice.     

Vascular angiotensin-converting enzyme activity in cholesterol-fed rabbits: effects of enalapril

Many reports have shown inhibitory effects of angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors on the progression of atherosclerotic plaque lesions in vascular tissue of experimental models. However, no report has shown alterations of ACE activity in vascular tissue during the process of atherosclerosis. We measured ACE activity in plasma and aortic tissue in rabbits fed a cholesterol-rich (1%) or normal diet for 10 weeks. We also evaluated the blood pressure response to angiotensin (Ang) I and II. These data were compared in untreated rabbits and in rabbits receiving chronic treatment with an ACE inhibitor, enalapril (3 mg/kg/day for 10 weeks). ACE activity in aortic tissue, but not in plasma, in cholesterol-fed rabbits was gradually but significantly increased compared with that in noncholesterol-fed rabbits even after the 4-week feeding period, when no atherosclerotic lesion was observed in the aortic tissue. Treatment with enalapril for 10 weeks, but not 4 weeks, significantly reduced the ACE activity in aortic tissue in association with the reductions in the elevated Ang II level and the atherosclerotic plaque area of the aortic tissue. These results indicated that ACE activity in aortic tissue was increased during the early phase of atherosclerotic process.     

S18886, a selective TP receptor antagonist, inhibits development of atherosclerosis in rabbits

OBJECTIVE: To investigate the effect of S18886, a novel TP (thromboxane A2 and prostaglandin endoperoxide) receptor antagonist, on the development of aortic fatty streaks and advanced lesions in a rabbit model of atherosclerosis and restenosis. METHODS AND RESULTS: The right iliac artery of 96 rabbits (8 groups, n=12/group) was balloon injured, then the animals were fed a cholesterol-enriched diet for 6 weeks. In Groups 1-4, concomitant oral administration of S18886 at 5 mg/kg/day over the 6-week-period reduced the intima to media ratio of lesions in the uninjured aorta and injured iliac artery, the accumulation of macrophages and the expression of ICAM-1 compared with 1 mg/kg/day S18886, 30 mg/kg/day aspirin and placebo, with no effect on body weight or plasma cholesterol levels. In Groups 5-8, 2 weeks of treatment with 5 mg/kg/day S18886 reduced the intima to media ratio of restenosing lesions when pre-formed iliac artery lesions underwent a second balloon injury at week 6. The smaller lesions resulting from S18886 treatment correlated with a significant decrease in the neointimal area occupied by macrophages, as well as in ICAM-1 expression, with no effect on the smooth muscle component. Aspirin treatment had no significant effect on the neointimal smooth muscle component, but partially inhibited macrophage infiltration, without inhibiting ICAM-1 expression. CONCLUSION: Inhibition of the TP receptor using S18886 causes a significant decrease in the recruitment of monocyte/macrophages within fatty streaks in the uninjured aorta and within primary and restenosing atherosclerotic lesions in the iliac artery of rabbits. Since TP receptor agonists, such as thromboxane A2, prostanoid endoperoxides and isoprostanes participate in vessel wall inflammation and are localized and increased in atherosclerotic plaques, treatment with S18886 may enhance atherosclerotic lesion stability by attenuating inflammatory processes that ultimately lead to plaque rupture.