Epstein—Barr病毒,化学致癌物与鼻咽癌

有关鼻咽癌(NPC)的病因学及发病学的研究资料甚多,近几年来,应用先进的分子生物学方法进行纵深的及横向的研究,其中包括Epstein-Barr病毒(EBV)的研究、致癌物的研究、以及致癌物和EBV的协同作用的横向研究。作者试图介绍这方面的研究进展,供读者参考。一、NPC的EBV病因学说(一)EBV的靶细胞:1964年Epstein等从Burkitt氏淋巴瘤(BL)活检组织中分离出EBV,Epstein认为只有B-淋巴细胞才有EBV     

镍促进EB病毒转化人B淋巴细胞的研究

本文报道１０－４０μｇ／ｍｌＮｉＳＯ４６Ｈ２Ｏ（Ｎｉ）在试管中能使ＦＡ细胞株的ＥＢ病毒核抗原表达增强１０．９９－３９％、２９μｇ／ｍｌＮｉ有明显促进ＥＢＶ转化人脐血Ｂ淋细胞的作用，当多次加Ｎｉ时促进效应更，前者转化促进率为１３．３１－４６．６１，后者达２２．７０－５７．０４％。最佳浓度为１０μｇ／ｍｌ。     

Ge—132抑制Epstein—Barr病毒抗原表达的研究

本文是接免疫荧光技术，研究无细胞毒性浓度的Ｇｅ－１３２在试管内对Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）抗原表达的影响。结果表明Ｇｅ－１３２明显地抑制ＥＢＶ相关抗原的表达，抑制程度随药物逍度增加而加强；５０－２００μｇ／ｍｌＧｅ－１３２对Ｂ９５－８细胞的ＶＣＡ，ＭＡ抗原抑制率为３９．２４－５２．２７％和１５．４２－３４．１５％，５－４０μｇ／ｍｌＧｅ－１３２共培育和预处理Ｒａｊｉ细胞均能非常异著抑制     

Epstein—Barr病毒潜伏膜蛋白1的研究进展

ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ病毒(ＥＢ病毒)是1种全球性分布、人群感染率较高的人致瘤性疱疹病毒。大量的血清学、流行病学及分子生物学等方面的研究,发现ＥＢ病毒的感染与Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤、鼻咽癌、传染性单核细胞增多症以及霍奇金病等密切相关,其中ＥＢ病毒与鼻咽癌的关系尤     

鼻咽癌细胞EB病毒早期抗原（EA—R）的表达：采用单克隆抗体BAE—5的观察

以正丁酸和巴豆油诱导的Raji细胞为免疫原,应用杂交瘤技术制备一种抗EB病毒(EBV)早期R型抗原(EA-R)的鼠IgM单克隆抗体,命名为BAE-5。以BAE-5为一抗应用APAAP免疫组织化学技术检测34例鼻咽癌和29例非鼻咽癌,结果表明,所有的鼻咽癌(34例)和29例非鼻咽癌肿瘤中的9例能与BAE-5显阳性反应。与已进行EB病毒DNA原位杂交的34例鼻咽癌结果对比认为:大多数鼻咽癌细胞不仅可检测出EBV-DNA,而且这些细胞中的一部分还可表达EA-R。说明这些细胞中的EBV-DNA处于激活状态。一些非鼻咽癌肿瘤能与BAE-5起阳性反应,可能是由于这些肿瘤细胞中也有EB病毒早期抗原存在或者可能存在与EA-R抗原决定簇相类似结构的多肽而引起交叉反应。作者认为这些结果对了解EB病毒有关的多肽,特别是EA复合物在鼻咽癌和一些含EBV-DNA的非鼻咽癌肿瘤的发生和发展中的作用具有理论意义。     

Epstein-Barr病毒转化人已免疫的B淋巴细胞,制备人源性单克隆抗体技术路线的研究

自从１９７５年Ｋｏｈｌ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ建立杂交瘤技术以来，单克隆抗体的研究与应用，已充满医学的各个领域。但制备人源性单克隆抗体现仍面临着较大困难。主要因为１）免疫人的淋巴细胞有困难。２）免疫人Ｂ－淋巴细胞长期建株难以存活。３）产生抗体的细胞株难以长...     

Epstein—Barr病毒潜伏状态与鼻咽癌的关系

应用非同位素原位杂交和图像分析法，研究鼻咽癌和慢性鼻咽炎活检标本中，Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ的分布以及ＥＢ病毒潜伏基因ＢＮＬＦ１和ＢａｍＨ１Ｗ序列的表达。结果显示，高拷贝数的ＥＢ病毒基因组和ＢａｍＨ１Ｗ序列的表达，后者与ＥＢ病毒核抗原１的转录和病毒复制的启动有关，几乎都发生于低分化或未分化鼻咽癌。此外，潜伏基因ＢＮＬＦ１的转录产物即ＬＭＰｍＲＮＡ，在非典型增生的鼻咽上皮中也有表达。以上结果提示，ＥＢＶ游离体的大量复制发生于鼻咽癌演进过程，可能由于低分化或未分化鼻咽癌中病毒启动子的激活；ＬＭＰ的不适当表达可能具有启动鼻咽上皮细胞异型增生的作用。     

抗EBV—EA（R）单克隆抗体的制备及特性

在用正丁酸或IudR诱导过的Raji细胞(n—Raji和IudR—Raji)内能测定到表达EB病毒早期抗原复合物(EA+)的细胞。本文以n-Raji细胞为免疫原制备出四种抗EA单抗BAE4、5、6、7,它们均属小鼠IgM。该组单抗对丙酮固定的EA(+)细胞有反应,抗体定位于胞质,但对甲醇固定的EA(+)细胞呈阴性反应。免疫萤光染色显示,其中BAE5抗体能与检测过的15例鼻咽癌冰冻切片中的癌细胞起阳性反应。上述结果提示,该组单抗识别的抗原决定簇存在于EBV—EA(R)型抗原中,其中之一能被鼻咽癌细胞表达。     

鼻咽癌细胞系SUNE中EBV—LMP1基因对永生化人胚肾上皮细胞生长 …

研究鼻咽癌细胞系ＳＵＮＥ中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１基因对上皮细胞生长特性的影响、探索ＬＭＰ１在鼻咽癌发生中所起的作用。方法 用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞,检测ＬＭＰ１的表达,观察细胞的生长状态,生长速率,在软琼脂中的集落形成能力及对裸鼠的致瘤能力。     

EB病毒在SCID小鼠体内诱发人B淋巴细胞肿瘤

目的:通过动物体内试验研究EB病毒(EBV)对人正常细胞的致瘤性,并检测我国正常人群对EBV的易感性,试图建立EBV诱发人淋巴细胞肿瘤模型。方法:在严重联合免疫缺陷动物即SCID小鼠体内移植健康成人外周血淋巴细胞(PBL),每鼠腹腔接种1×108个PBL。对接种VCA/IgA阴性献血员PBL的动物,移植后1周内经腹腔注射B95-8标准株EBV悬液作为实验感染,而接种VCA/IgA阳性献血员PBL的动物不再进行实验感染。结果:在接受12名健康成人PBL移植并感染EBV的19只SCID小鼠中,肿瘤诱发率分别为91.7%(11/12名)和84.2%(16/19只鼠)。诱发瘤常见于小鼠腹腔后壁和纵隔,具有侵袭性和致死性,患瘤小鼠平均存活时间65.5天。EBV诱发瘤是结节状实体瘤,显微镜下观察肿瘤细胞呈大裂—无裂混合细胞。组织病理学和免疫病理学研究表明,肿瘤类型是人源B细胞性恶性淋巴瘤。诱发瘤原位分子杂交显示肿瘤细胞核内存在EB病毒小核酸分子EBER-1和人类基因组Alu序列。电子显微镜观察肿瘤细胞核内存在EB病毒颗粒。肿瘤细胞表达EB病毒BZLF1蛋白阳性。结论:SCID/人淋巴细胞嵌合体是研究EBV感染和致瘤性的敏感动物模型,且获得了EBV引起人类正常细胞在体内发生肿瘤的直接依据。因而证实了EBV对人类细胞的致瘤作用,进一步明确机体免疫缺陷因素在肿瘤发生中起重要作     

BE病毒特异牛脾转移因子对鼻咽癌症者外周血T细胞亚群的影响

应用ＥＢ病毒特异牛脾转移因子配合＾６０Ｃｏ放疗鼻咽癌，观察其对患者外周血Ｔ细胞亚群的影响。鼻咽癌患者外周血Ｔ细胞亚群的分布表现为ＣＤ４、ＣＤ８和ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，除性别影响之外，与年龄分组及临床分析无关。经单纯放疗之后，其ＣＤ４明显上升；当同时使用ＥＢ病毒特异牛脾转移因子后，其ＣＤ４上升更为显著，ＣＤ４／ＣＤ８比值恢复正常。可见，ＥＢ病毒特异牛脾转移因子配合＾６０Ｃｏ放疗鼻咽癌，能有效地提     

免疫酶法检测血清EB病毒—IgA／VCA对鼻咽癌诊断的价值

应用免疫酶法对放疗前鼻咽癌病人９９０例、放疗后临床缓解鼻咽癌病人１１６８例、放疗后复发的鼻咽癌病人７６例、头颈部其它恶性肿瘤病人９６例、鼻咽部非癌疾病２１９２例和正常人２３２１名血清的ＥＢ病毒ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体进行了检测，阳性率分别为９５．９５％、７７．３９％、９８．６８％、３２．２９％、１２．５４％和０．１７％。结果提示免疫酶法检测ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体对鼻咽癌诊断及监测病情有重要的临床价值。     

鼻咽癌高危人群,癌前病变的确立

１９８６￣１９９５年广东省鼻咽癌高发区对近１０万人，以鼻咽部间接鼻咽镜检查，ＥＢ病毒多种抗体检测，鼻咽光导纤维镜检查，活检组织病理检查及ＥＢ病毒ＤＮＡ、ＥＢＥＲｓ检测等手段进行前瞻性研究。具有下列条件之一者为处于癌前状态；（１）ＥＢ病毒ＶＣＡ／ＩｇＡ≥１：８０；（２）ＥＢ病毒ＥＤＡｂ≥６０％；（３）病毒ＶＣＧ／ＩｇＡ、ＥＡ／ＩｇＡ、ＥＤＡｂ三项中任何单项持纽高滴度或滴度持续升高。经病理检查；鼻咽粘     

Bcl—2和EB病毒与B细胞淋巴瘤关系的研究进展

Bcl-2蛋白能抑制细胞凋亡，与肿瘤的发生，转化及转移有关，50－80％的滤泡性淋巴瘤，10－25％的弥漫性大细胞性B细胞淋巴瘤中有Bcl-2蛋白的表达，EB病毒（EBV）与免疫缺陷相关性BCL密切相关，而与非免疫缺陷相关性BCL的相关性较小，EBV在体外可以诱导B淋巴细胞表达Bcl-2蛋白。该病毒可能通过LMP－1诱导Bcl-2的表达参与了免疫缺陷相关性BCL的发病。     

人源性抗肝癌单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的建立产生人源性抗肝癌单克隆抗体的人-鼠杂交瘤.方法用IL-2和美洲商陆(PWM)体外刺激肝癌病人外周血淋巴细胞,再与小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合,待杂交瘤生长进行筛选、克隆化及特性分析.结果建立了3株产生人源性抗肝癌单克隆抗体的人-鼠杂交瘤-AF3,CB7、CH1.三种单抗均识别肝癌细胞表面抗原,并具有显著的补体依赖的细胞毒活性.其中AF3的效价最高.结论通过人-鼠杂交瘤技术获得了产生人源性抗肝癌单克隆抗体的杂交瘤细胞系.抗体效价高,是一种较理想的单克隆抗体.