侵袭性肺炎链球菌148株血清型、耐药性及分子分型研究

目的 研究临床分离的侵袭性肺炎链球菌血清型分布、耐药性及分子流行病学特点,为抗生素的应用和免疫预防提供参考依据.方法 收集2005年1月至2008年8月全国15个地区148株来自血液、脑脊液等侵袭性感染部位的肺炎链球菌.采用琼脂稀释法测定青霉素等抗生素对148株肺炎链球菌的最低抑菌浓度(MIC);采用简易棋盘式肺炎链球菌分型系统和荚膜肿胀实验进行血清分型;多位点序列分型(MIST)技术对53株19群菌株进行基因分型,了解其与国际流行株的关系.结果 血清分型共检出20个血清型/群,主要集中在19A、19F、3、23F、5、6、14和9血清型/群,共计105株,占70.9%,以19A(22.3%,33/148)、19F(16.9%,25/148)最常见,其次为3群(7.4%,11/148)和23F(6.8%,10/148).7价疫苗(PCV7)在2岁以下儿童中的覆盖率为33.3%(12/36).PCV7相关血清型肺炎链球菌对阿莫西林/克拉维酸、红霉素等耐药率均明显高于非疫苗相关血清型菌株(P<0.05).53株19群肺炎链球菌MIST分析共检出9种序列型(ST),其中以ST320(28/53,52.8%)和ST271(12/53,22.6%)为主.结论 我国侵袭性肺炎链球菌血清分型以19A、19F、3和23F血清型为主.侵袭性肺炎链球菌耐药情况严重.     

临床标本肺炎链球菌红霉素耐药表型分型研究

目的:分析186例肺炎链球菌的红霉素耐药率及耐药表型.方法:参照全国临床检验操作规程,所有菌株均采用温州康泰微生物分析鉴定系统BIO-KONT STREP试验条进行鉴定,根据美国国家临床实验室标准委员会(CLSI)标准,采用双纸片法,测定肺炎链球菌红霉素耐药性测试及耐药表型分型测试.结果:分离的186株肺炎链球菌中,有125株肺炎链球菌为红霉素耐药,耐药率为67.2%;红霉素耐药表型分布为:敏感型(S表型)61株,占32.8%;结构性耐药表型(CMLSB表型)19株,占10.2%;诱导MLSB表型(iMLSB表型)43株,占23.1%M表型63株,占33.9%.结论:监测结果显示肺炎链球菌的红霉素耐药率呈逐年上升趋势,耐药表型以M表型为主,占33.9%,与加拿大和美国的分型一致.需加强肺炎链球菌的分离鉴定并准确测定其耐药性,为临床合理应用抗生素提供重要依据.     

肺炎链球菌对红霉素耐药机制的研究

目的了解武汉地区肺炎链球菌的红霉素耐药机制。方法收集152株肺炎链球菌，琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度，红霉素-克林霉素双纸片扩散法检测耐药表型，聚合酶链式反应检测红霉素耐药基因ermB和mefA。结果152株肺炎链球菌红霉素耐药率达84．21％（128／152），耐药表型主要为cML SB（98．44％），2抹菌（1．56％）为M表型耐药。128株红霉素耐药肺炎链球菌ermB基因总检出率98．44％（126／128），其中40株菌（31．25％）同时检出ermB和mefA基因，2株菌（1．56％）仅检出mefA基因。结论武汉地区红霉素耐药肺炎链球菌的发生率高，ermB基因是最主要的耐药机制，介导cMLSa表型耐药，双纸片扩散法对此耐药表型的检测有很好的预见性。     

2009～2011年武汉大学人民医院感染肺炎链球菌的耐药性分析

目的监测武汉大学人民医院肺炎链球菌的耐药趋势,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用K-B法和E-test法对137株肺炎链球菌进行药敏试验,用K-B法测定耐红霉素菌株的耐药表型,并分析药敏结果。结果 137株肺炎链球菌对红霉素、复方磺胺甲口恶唑的耐药率较高,分别为94.2%(129/137)和74.5%(102/137),且有逐年升高的趋势。129株红霉素耐药株中,内在型耐药(cMLSB)占70.5%,诱导型耐药(iMLSB)占19.4%,M型耐药占10.1%。红霉素耐药株对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑共同耐药率及多重耐药率分别为66.7%、74.4%、60.5%,显著高于红霉素敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2009～2011年武汉大学人民医院分离的肺炎链球菌对红霉素耐药率较高,对克林霉素及复方磺胺甲口恶唑的耐药率呈逐年上升趋势,尤其是儿童对这两种抗菌药物的耐药性明显高于成人,耐药表型以cMLSB为主,且多重耐药现象严重。     

肺炎链球菌临床菌株Tn1545和Tn917介导的大环内酯类耐药性研究

目的探讨上海地区大环内酯类耐药肺炎链球菌ermB基因表达及传播特性。方法收集上海地区对红霉素耐药的肺炎链球菌共86株，用E试验和K—B纸片扩散法检测其对12种抗生素的敏感性；用双纸片法（D试验）确定大环内酯类耐药表型；用PCR扩增检测耐药基因ermB、mefE和Tn1545、Tn917中ermB基因调控序列，经测序、BLAST比对分析调控序列多态性并按菌株携带Tn1545和Tn917的不同分为Tn1545组和Tn917组，分析二者介导的耐药表型的不同；用BOX—PCR分析不同菌株遗传背景。结果（1）86株红霉素耐药肺炎链球菌中ermB、mefE、Tn1545、Tn917检出率分别为94％、46％、87％、7％，基因型为ermB^- mefE^＋的5个菌株未检出Tn1545和Tn917。（2）Tn1545组和Tn917组Sp大多对红霉素高度耐药（最低抑菌浓度MIC50 256μg／ml），Tn917组对β内酰胺类抗生素的MIC低于Tn1545组，对四环素、复方磺胺及左氧氟沙星耐药率前者亦低于后者。（3）Tn917组中三株菌发生ermB基因启动子区194bp片段的删除和前导肽N末端TAAA认插入，可能导致ermB基因由诱导型转变成组成型表达；Tn1545组菌株主要表现为cMLSB表型。（4）BOX—PCR图谱呈散发性，未发现单一的耐药克隆株流行。结论上海地区大环内酯类耐药肺炎链球菌主要是由ermB基因介导的高水平、组成型耐药，ermB基因大多由Tn1545携带并水平转移传播。     

侵袭性肺炎链球菌血清型和耐药性分析

目的 了解河北省侵袭性肺炎链球菌血清型变迁和耐药情况,为病原菌监测及抗生素应用提供依据。方法 针对实验室收集到的2017—2018年监测菌株,使用多重聚合酶链式反应对菌株进行血清分型,使用微量营养肉汤稀释法进行药敏试验,对结果综合分析。结果 位于前三位的血清型是14型15株(20.27%)、6型11株(14.86%)、19F型10株(13.51%),19A和23F型并列第四位均为6株(8.11%)。12种抗生素中,万古霉素和左氧氟沙星未发现耐药菌株,其余抗生素均有耐药菌株出现。耐药率>90.00%的抗生素为红霉素和克林霉素;敏感率>80.00%的抗生素包括利福平、头孢吡肟、头孢噻肟、美罗培南、氯霉素;青霉素敏感率为50.00%。87.84%的菌株为多重耐药菌株。相对于整体水平,14型对多西环素耐药率较低,19F型对头孢噻肟和美罗培南耐药率较高。结论 本地区肺炎链球菌的优势血清型由早期报道的19F、19A、6、14和1型转变为14、6、19F、19A和23F型。建议制定动态监测方案,及时预警。治疗由肺炎链球菌引起的感染首选头孢噻肟、头孢吡肟、美罗培南、利福平。红霉素、克林霉素...     

肺炎链球菌对大环内酯类耐药性分析

目的 探索郯城县区肺炎链球菌分离株对大环内酯类耐药性及其治疗情况.方法 收集郯城县社区和临床分离的肺炎链球菌 ,根据CLSI标准,用K-B法、Etest法检测肺炎链球菌对红霉素和克林霉素的耐药性及对红霉素的耐药表型.结果 493株肺炎链球菌中红霉素不敏感菌株489株 ,对克林霉素不敏感菌株482株,其中 ermB基因介导的红霉素耐药菌株482株 ,占98.6% , mefE基因介导的红霉素耐药菌株7株,占1.4%.结论 郯城县区对红霉素和克林霉素近乎全部耐药 ,ermB基因介导的靶位改变是郯城县区肺炎链球菌对大环内酯类抗菌药物的主要耐药机制.     

广西玉林市住院患者肺炎链球菌的血清型分布及耐药性分析

目的 分析住院患者肺炎链球菌分离株的血清型分布、耐药率及耐药基因携带,评估疫苗对本地区肺炎链球菌血清型的覆盖率,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法 收集2015年1月—2019年12月广西玉林市第一人民医院住院患者送检标本分离的非重复肺炎链球菌150株,进行血清分型及抗菌药物敏感性试验。用PCR方法检测pbp2b、ermB、tetM三种耐药基因的携带率。结果 150株肺炎链球菌经PCR技术分型率为93.1%,经荚膜肿胀试验分型率为100%,共分出19种血清型,以19F和6B为主。儿童血清型以19F、6B和15A为主;成人血清型以19F、14和23F为主。PCV7、PCV10、PCV13和PPV23疫苗的覆盖率依次分别为36.8%、42.1%、57.9%和68.4%。血清型为19F、6B、3和23F的菌株对抗菌药物的耐药率较高。肺炎链球菌对青霉素的敏感率大于96.0%。侵袭性与非侵袭性菌株中耐药率有显著差异的抗菌药物为青霉素、莫西沙星和左氧氟沙星。菌株同时携带ermB和tetM两种耐药基因占96.0%,pbp2b、ermB、tetM三种耐药基因与耐药表型的一致率>98.0%。共检...     

2004—2009年益阳市中心医院临床分离肺炎链球菌的血清型/群分布及耐药性监测

目的 了解近5年益阳市中心医院临床分离肺炎链球菌的血清型/群分布及耐药趋势,为临床合理使用抗生素提供参考。方法 以2004—2009年期间临床分离的822株肺炎链球菌为研究对象,采用荚膜肿胀试验进行血清分型/群,E-test检测菌种对青霉素、头孢呋辛、头孢地尼、头孢克罗、红霉素、四环素、左氧氟沙星、万古霉素等8种抗生素的敏感性。结果 2004年青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）的分离率为49.4%,并呈逐年上升趋势,至2006年PNSP分离率高达67.8%,2009年下降至51.5%。822株肺炎链球菌最常见的型/群是19群,其次是23、6、14、3群和其他。PNSP在6种血清型/群中所占的比例在2004—2009年期间无显著性变化（P＞0.05）。肺炎链球菌对其他β内酰胺类抗生素的非敏感趋势类似青霉素,对红霉素、四环素的非敏感率始终在60%以上,其中青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）对红霉素和四环素几乎100%耐药,对左氧氟沙星、万古霉素的非敏感率均＜3%。结论 临床分离肺炎链球菌以19、23、6、14、3群常见;对β内酰胺类抗生素的非敏感率自2007年呈下降趋势,且对左氧氟沙星、万古霉素始终具有较高的敏感性。     

广州地区老年人肺炎链球菌临床分离株的青霉素耐药研究与分子分型

目的调查广州地区老年患者肺炎链球菌分离株对青霉素的敏感性,并分析其亲缘关系。方法K-B纸片法对33株分离自老年住院病人的肺炎链球菌进行青霉素药敏试验;应用PCR技术检测青霉素结合蛋白基因pbp1a,pbp2x,pbp2b;用盒式PCR(BOX-PCR)分析菌株间亲缘关系。用多位点测序分型技术(multilocus sequence typing,MLST)检测青霉素耐药菌株的分子分型。结果青霉素的耐药率为3.03%(1/33);用PCR方法鉴定PSSP的准确率为68.75%;BOX-PCR可将这33株肺炎链球菌分为21型。MLST分型显示,青霉素耐药菌株属ST271型。结论广州地区老年患者肺炎链球菌对青霉素耐药率较低,用PCR方法检测PSSP有一定的可行性。BOX-PCR显示了较高的分辨率,能快速可靠地检测菌株间的亲缘关系。广州地区流行的耐药克隆与Taiwan19F-14株同源。     

Characterization of erythromycin-resistant Streptococcus pneumoniae isolates causing invasive diseases in Chinese children

Background  Erythromycin-resistant Streptococcus pneumoniae isolates that causing invasive pneumococcal diseases (IPD) in Chinese children remain uncharacterized. This study aims to identify the resistance genes associated with erythromycin resistance and to determine the genetic relationships of IPD isolates in Chinese children.

Methods  A total of 171 S. pneumoniae strains were isolated from 11 medical centers in China from 2006 to 2008. All the isolates were characterized via serotyping and antibiotic susceptibility determination. The erythromycin-resistant isolates were further characterized via ermB and mefA gene detection, multi-locus sequence typing analysis, and pulsed-field gel electrophoresis.

Results  A total of 164 (95.9%) isolates showed resistance to erythromycin, of which 162 strains with high high-level resistance (MIC ≥ 256 μg/ml). A total of 104 (63.4%) isolates carry the ermB gene alone, whereas 59 (36.0%) harbor both ermB and mefA genes. Of the 59 strains, 54 were of serotypes 19A and 19F and were identified as highly clonal and related to the Taiwan^19F-14 clone.

Conclusions The erythromycin resistance rate in IPD isolates is significantly high and is predominantly mediated by the ermB gene. Isolates that carry both ermB and mefA genes are predominantly of serotypes 19A and 19F.

     

武汉地区健康儿童肺炎链球菌带菌状况及耐药性研究

目的 研究武汉地区健康儿童肺炎链球菌带菌状况及药物敏感性。方法 收集武汉地区某大型幼儿园297名健康儿童的鼻咽拭子标本，分离鉴定肺炎链球茼，琼脂稀释法测定9种抗菌药物对肺炎链球菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果 297份鼻咽拭子标本共分离出78株肺炎链球菌，分离率为26．3％。其中，青霉素敏感率为48．7％，红霉素、克林霉素、四环素、复方新诺明的敏感率分别为14.1％、14．1％、14．1％、10．3％，头孢克洛和头孢曲松的敏感率分别为34．6％和89．7％。未发现左氧氟沙星耐药株。结论 武汉地区健康儿童肺炎链球菌的携带率高，耐药性亦较高，且多为多重耐药菌株，除左氧氟沙星、头孢曲松和氯霉素外，大多数口服抗菌药物对肺炎链球菌的敏感性差。     

揭阳地区妊娠期妇女定植无乳链球菌分子流行特征及耐药特点

目的 了解揭阳地区妊娠期妇女无乳链球菌的分子流行特征和耐药特征,为其引起感染的防控提供依据。方法收集揭阳地区妊娠35~37周妇女的阴道直肠拭子,对分离到的无乳链球菌进行多位点序列分型（multilocus sequence type, MLST）、分子血清分型、进行药敏试验并检测红霉素和克林霉素耐药基因（ermA、ermB、ermA/E和linB基因）。结果无乳链球菌检出率为9.6%（103/1 076）,共发现21个序列型（sequence type, ST）,来源于8个克隆群(clonal complexes,CCs),CC103占16.6%。共检出5个血清型,以Ⅲ（49.5%）、Ia（24.3%）和Ib（12.6%）为主。红霉素、克林霉素耐药率及多重耐药率分别为：71.8%、60.2%和62.1%。红霉素耐药菌均检出耐药基因,ermA、ermB和mefA/E阳性率为16.2%、83.8%和25.7%;linB基因阳性率为54.8%。共检出cMLSB、iMLSB和M型等3种红霉素耐药表型,分别占73.0%、8.1%和18.9%。结论揭阳地区的定植无乳链球菌具有较高的遗传多样性,其多重耐药率高,红霉素耐药以ermB基因介导的cMLSB型为主,部分克林霉素耐药由linB基因介导。CC103已成为该地区流行的主要CC之一;ST17/血清学Ⅲ型为该地区流行的主要定植菌株之一。      

肺炎链球菌临床分离株耐药性及红霉素耐药相关基因的研究

目的了解本院临床肺炎链球菌感染状况、耐药性以及耐药基因流行情况。方法2004年1月~2005年12月从患者不同标本分离鉴定肺炎链球菌,采用NCCLS标准K-B法对临床常用抗生素进行耐药分析、PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA。结果分离129株肺炎链球菌,其中青霉素敏感率为42.4%,红霉素耐药率为80.6%。104株红霉素耐药肺炎链球菌中,ermB基因检出率为97.1%,mefA基因检出率为41.3%,41株同时含有ermB和mefA基因。结论本院临床分离肺炎链球菌耐药性高,红霉素耐药基因主要为ermB。     

Molecular epidemiology of serotype 19A Streptococcus pneumoniae isolated from children in Beijing, 1997–2006

Background  Despite the prevalence of Streptococcus pneumoniae serotype 19A, the molecular characteristics of this serotype are yet to be fully elucidated. The aim of this study was therefore to determine the homology of the serotype 19A in China.

Methods  Pulsed-field gel electrophoresis and multilocus sequence typing were done to these forty-nine serotype 19A isolates to investigate the relationship between the strains prevalent in Beijing and other regions.

Results  From 1997 to 2006, the percentage of serotype 19A isolates increased. The susceptibility rate to penicillin and amoxicillin decreased and the resistance rate to cefuroxime increased. ST320 was the most prevalent ST, followed by ST3546. There were six new STs identified in our study. The serotype 19A strains were classified into six different pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) patterns. ST320, which was associated with two different PFGE patterns (A and D), accounted for 32 isolates, and ST3546, which was associated with two PFGE patterns (B and E), accounted for eight isolates.

Conclusions  From 2003 onwards, ST320 was the most common ST and the rate of resistance to cefuroxime increased significantly. Further long-term surveys of Streptococcus pneumoniae serotype 19A are required to monitor ST prevalence and antimicrobial resistance in this important human pathogen.