缺氧缺血性脑损伤新生大鼠磷酸化真核翻译起始因子2α和激活转录因子4表达的变化

目的:了解新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后磷酸化真核翻译起始因子2α[eIF2α(p)]?激活转录因子4(ATF4)表达的变化?方法:7日龄新生SD大鼠80只,随机分为2组:假手术组和HIBD组,每组各40只?HIBD组采用Rice方法建立新生大鼠HIBD模型,分别于缺氧缺血(HI)后6?12?24和72 h取其脑组织切片,采用免疫组织化学方法检测病变侧大脑皮质eIF2α(p)?ATF4蛋白的表达?假手术组不行缺氧缺血处理,采用同样方法检测其eIF2α(p)?ATF4蛋白的表达?结果:假手术组eIF2α(p)?ATF4蛋白少量表达,各时间点无明显变化(P > 0.05);HIBD组6 h可以观察到较多eIF2α(p)?ATF4蛋白,12 h达到高峰,72 h明显减少,但仍高于假手术组?HIBD组与假手术组比较,差异有统计学意义(P < 0.01)?HIBD组各时间点比较,差异有统计学意义(P < 0.01)?结论:eIF2α(p)?ATF4参与了新生大鼠HIBD病理生理过程?HIBD可能诱发了内质网应激反应,启动了PKR样内质网激酶(PERK)介导的未折叠蛋白应答(UPR)通路?     

蛋白翻译起始因子C2在结、直肠癌中表达的意义

目的　研究C2基因在结、直肠癌中的表达、分布及意义 .方法　用免疫组化方法检测C2基因在 6 2例结肠癌及其4 6例癌旁组织、4 6例直肠癌及其 30例癌旁组织中蛋白水平的表达 .结果　结肠癌 6 2例中C2蛋白阳性率为 4 1.9% (2 6 /6 2 ) ,4 6例其癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率为 82 .6 % (38/46 ) .C2蛋白在结肠癌组织中表达明显低于其癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,且与结肠癌组织的浆膜浸润、淋巴结转移有明显的相关性 (P <0 .0 5 ) .直肠癌 4 6例中C2蛋白阳性率为 4 3.5 % (2 0 /46 ) ,30例其癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率为 73.3% (2 2 /30 ) .C2蛋白在直肠癌及其癌旁组织中的表达无明显差异(P >0 .0 5 ) .结论　C2基因表达缺失及突变可能与大肠癌的发生、发展有关 .     

未折叠蛋白反应通过自噬抑制顺铂诱导的肝癌细胞凋亡

目的：研究未折叠蛋白反应对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法：在采用二硫苏糖醇和衣霉素诱导未折叠蛋白反应的基础上,利用流式细胞和免疫印迹技术分析未折叠蛋白反应对顺铂诱导的肝癌细胞凋亡的影响及其机制。结果：二硫苏糖醇和衣霉素预处理促进顺铂诱导的自噬反应并抑制顺铂介导的肝癌细胞凋亡,抑制自噬反应明显削弱二硫苏糖醇和衣霉素预处理对顺铂作用下肝癌细胞的保护作用。结论：未折叠蛋白反应能够通过促进自噬抵抗顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。     

雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制

[目的]研究雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制.[方法]MTT法检测雷公藤红素对MDA-MB-453的细胞毒作用;Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变;PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白变化;免疫荧光检测HER2蛋白在细胞中的定位变化.[结果]雷公藤红素对MDA-MB-453有强大的细胞毒作用,IC50为(5.22±0.29)μmol/L;该化合物可浓度依赖性地诱导MDA-MB-453细胞发生凋亡,出现典型的凋亡小体、sub-G1改变及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Parp的裂解活化.值得一提的是,雷公藤红素作用后,Western Blot检测到HER2蛋白明显降低,并且原先主要表达在细胞膜上的HER2蛋白发生了异位.[结论]雷公藤红素浓度依赖性地诱导MDA-MB-453细胞发生凋亡,并且促进HER2蛋白降解,这可能与改变了HER2蛋白在细胞中的定位有关系.     

蛋白翻译起始因子C2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的：研究C2 mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达及意义。方法：用原位杂交检测C2 mRNA在21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C2蛋白60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果：21例HCC及其癌旁组织中,C2 mRNA阳性率分别占23.8%（5/21）和85.7%(18/21)。60例HCC及42例癌旁组织中,C2蛋白阳性分别占27.3%(17/60)和83.3%（35/42）。27例肝硬变中,C2蛋白阳性率为77.8%(21/27)。χ^2检验：C2 mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织（P＜0.001);C2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织（P＜0.001);C2的表达与患年龄、HBsAg及AFP有明显关系（P＜0.001);碉与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无并;Western bolt与免疫组化结果一致。结论：C2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断。     

多发性骨髓瘤患者血清β2微球蛋白和高敏C反应蛋白检测的临床意义

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清β2微球蛋白(β2-MG)和高敏C反应蛋白(hsCRP)的变化及其临床意义.方法 采用胶乳增强免疫透射比浊法检测对150例MM患者(MM组)和50例正常体检者(对照组)的血清β2-MG和hsCRP水平,对比分析不同临床分期及治疗前后的血清β2-MG和hsCRP的变化.结果 MM组血清[32-MG和hsCRP水平明显高于对照组,且随临床分期的增加依次增高,差异有统计学意义,均P<0.01.与治疗前相比,MM治疗有效组血清β-MG和hsCRP水平明显下降,差异有统计学意义,均P<0.01(t=8.448,18.390).而治疗无效组则差异无统计学意义,均P>0.05(t=1.525,1.495).结论 血清β2-MG和hsCRP检测可用于MM患者的临床分期、疗效监测和预后判断.     

多发性骨髓瘤患者血清β_2微球蛋白和高敏C反应蛋白检测的临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清β2微球蛋白(β2-MG)和高敏C反应蛋白(hsCRP)的变化及其临床意义。方法采用胶乳增强免疫透射比浊法检测对150例MM患者(MM组)和50例正常体检者(对照组)的血清β2-MG和hsCRP水平,对比分析不同临床分期及治疗前后的血清β2-MG和hsCRP的变化。结果MM组血清β2-MG和hsCRP水平明显高于对照组,且随临床分期的增加依次增高,差异有统计学意义,均P&lt;0.01。与治疗前相比,MM治疗有效组血清β2-MG和hsCRP水平明显下降,差异有统计学意义,均P&lt;0.01(t=8.448,18.390),而治疗无效组则差异无统计学意义,均P&gt;0.05(t=1.525,1.495)。结论血清β2-MG和hsCRP检测可用于MM患者的临床分期、疗效监测和预后判断。     

C-反应蛋白抑制缺氧状态下人脐静脉内皮细胞表达低氧诱导因子-1α

目的 研究C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。方法 利用COCl₂(浓度为100μmol/L)模拟缺氧环境,使其分别与4个试验组的CRP(浓度分别为5,10,50,100μg/ml)同时作用于脐静脉内皮细胞,以仅加CoCl₂(100μmol/L)组为对照;同时设空白对照组。刺激24h后提取蛋白。用Western-blotting半定量检测HIF-1α的蛋白表达量,数据用SPSS11.0软件进行统计分析。结果 CRP在5μg/ml水平即减少HIF-1α表达(P<0.001),在100μg/ml水平达到最大作用,其作用效果呈剂量反应关系(P<0.001)。结论 CRP抑制缺氧状态下人脐静脉内皮细胞表达HIF-1α。此结果证实CRP直接作用于血管,抑制缺氧组织血管新生。     

血清β2-微球蛋白和C-反应蛋白水平检测在多发性骨髓瘤患者诊断、疗效监测和预后判断中的临床意义

目的测定β2-微球蛋白和C-反应蛋白在多发性骨髓瘤（MM）患者血清中含量的变化,探讨β2-微球蛋白和C-反应蛋白水平对多发性骨髓瘤患者临床诊断、疗效检测和预后判断的意义。方法分别测定我院收治的42例MM患者血清β2-微球蛋白和C-反应蛋白治疗前后的水平,以50例体检健康者为对照组。结果多发性骨髓瘤患者其血清β2-微球蛋白和C-反应蛋白水平明显高于对照组;化疗显效后血清β2-微球蛋白和C-反应蛋白水平比化疗前明显下降;低水平β2-微球蛋白和C-反应蛋白患者的存活时间相对较长。结论血清β2-微球蛋白和C-反应蛋白水平检测可作为多发性骨髓瘤患者诊断、疗效监测和预后判断的重要指标。     

多发性骨髓瘤患者血清β2-微球蛋白、TNF-α、CRP及IL-6水平检测

目的探讨检测多发性骨髓瘤(MM)患者血清β_2-微球蛋白(β_2-MG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)的临床价值。方法选择2016年12月～2017年12月我院血液科收治的93例MM患者为研究组,根据Durie-Salmon分期将研究组分为D-SⅠ期组(24例),D-SⅡ期组(39例),D-SⅢ期组(30例),所有MM患者均经VTD或CTD方案化疗。并选择60例健康志愿者为对照组,比较研究组和对照组、不同D-S分期组、研究组化疗前后血清β_2-MG、TNF-α、CRP、IL-6的差异。结果与健康对照组相比,研究组患者血清β_2-MG、CRP、IL-6水平明显增高[(9.21±3.62)mg/L vs (1.62±0.51) mg/L、(25.14±5.02)mg/L vs (3.05±0.02)mg/L、(66.15±10.35)pg/L vs (22.11±9.36)pg/L],TNF-α明显降低[(268.52±31.73)ng/L vs (339.85±33.95)ng/L],差异有统计学意义(P0.05)。不同D-S分期MM患者血清β_2-MG、CRP、IL-6水平依次为:D-SⅢ期D-SⅡ期组D-SⅠ期组,组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。经化疗后MM患者血清β_2-MG、CRP、IL-6水平显著下降,TNF-α水平显著上升,差异均有统计学意义(P0.05)。结论检测血清β_2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平有助于MM诊断、判断病情程度及临床治疗效果。     

白细胞介素-6与其受体及急性期蛋白反应因子在多发性骨髓瘤病人外周血中的表达

目的:探讨白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)及可溶性IL-6受体在多发性骨髓瘤(multiple myleoma, MM)病人外周血细胞中的表达及作用。方法:取多发性骨髓瘤患者(缓解27例,未缓解19例)及正常对照者(29例)血清,利用`7TD1细胞检测患者血清中IL-6的生物学活性,双抗体夹心ELISA法测定其中的sIL-6R水平。采用DNA结合蛋白的凝胶阻滞电泳检测MM患者的外周血单个核细胞中急性期蛋白反应因子(acute phase reaction factor, APRF)活性。结果:MM患者血清中IL-6及sIL-6R水平均显著高于正常对照,且其水平与骨髓瘤负荷量呈正相关。DNA结合蛋白的凝胶阻滞电泳结果表明:MM患者外周血单个核细胞中急性期反应因子APRF活性表达增强,而健康人外周血单个核细胞中无APRF活性的表达。结论:在MM条件下,IL-6信号转导途径中的某些调控机制(如蛋白激酶等)发生改变,从而使得核内的APRF激活转录,提示IL-6可能通过APRF在MM的发病机制中起作用。     

siRNA沉默肿瘤坏死因子α诱导蛋白2表达对胶质瘤细胞侵袭及增殖的影响*

目的 探讨沉默肿瘤坏死因子α诱导蛋白2（TNFAIP2）表达对胶质瘤细胞侵袭及增殖的影响。方法 使用Lipofectamine 2000介导siRNA转染胶质瘤细胞U87和U251下调TNFAIP2 mRNA的表达;运用细胞划痕及Transwell实验检测沉默TNFAIP2表达对U87及U251细胞迁移、侵袭的影响;通过CCK-8实验检测沉默TNFAIP2表达对胶质瘤细胞U87及U251增殖的影响。结果 Lipofectamine 2000介导si-TNFAIP2转染U87及U251细胞可下调TNFAIP2 mRNA的表达;沉默TNFAIP2表达可降低胶质瘤细胞U87和U251迁移侵袭的能力;沉默TNFAIP2表达可抑制U87及U251细胞的增殖。结论 siRNA沉默TNFAIP2表达可抑制胶质瘤细胞的侵袭和增殖。     

肿瘤坏死因子-α诱导的蛋白-8样分子2促进热损伤小鼠CD4阳性T细胞凋亡

目的探讨肿瘤坏死因子-α诱导的蛋白-8样分子2（TIPE2）对重度烫伤小鼠模型脾脏CD4+T淋巴细胞的凋亡的影响。方 法140只成年雄性BALB/C小鼠分为6组,应用小RNA干扰技术制作siTIPE2/过表达慢病毒,复制小鼠重度烫伤模型。分离 BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞,检测各组CD4+T淋巴细胞凋亡,Smad2/Smad3、磷酸（P）-Smad2/P-Smad3以及B淋巴细胞瘤-2 （Bcl-2）家族蛋白Bcl-2/Bim的表达。检测各组小鼠CD4+T内线粒体膜电位改变情况及细胞色素C的变化和各组小鼠CD4+T内 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase-3)、（caspase-8)、（caspase-9)的活化情况。结果siTIPE2-burn组CD4+T淋巴细胞凋 亡率为12.33%,较sham组外其余组减少,P-smad2/P-Smad3蛋白表达（灰度值）显著降低（P<0.01）。siTIPE2-burn组Bcl-2的蛋 白表达较其余组升高（P<0.05）,Bim的表达则降低（P<0.05）。siTIPE2-burn组线粒体膜电位细胞色素C水平均较sham组外其 余组降低（P<0.05）,caspase-3 活性较TIPE2-burn 组降低（P<0.01）,caspase-8、caspase-9 活性较其余组降低（P<0.05）。TIPE2- burn组凋亡率最高,TIPE2-burn组Smad2/Smad3蛋白表达较sham组明显升高（P<0.05）,P-smad2/P-Smad3蛋白表达较其余组 显著升高（P<0.05）;CD4+T内线粒体膜电位较其余组降低（P<0.01）,细胞色素C水平升高,caspase-3、caspase-8、caspase-9活性 较其他组均升高（P<0.05）。结论TIPE2作为一种重要的负向调控分子,可通过促进转化生长因子β即TGF-β/Smads信号传导 通路、线粒体相关凋亡途径加速T淋巴细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2在T细胞发育过程中的表达及其对哮喘发病的潜在作用

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)在T细胞发育过程中的表达及作用,分析其在哮喘发病中的潜在作用。方法 选择C57BL/6J雌性野生型(WT)小鼠、C57BL/6J雄性TIPE2基因敲除(Tipe2^-/-)小鼠、C57BL/6J雄性绿色荧光蛋白敲入(Tipe2^gfp/+)小鼠为研究对象。取WT和Tipe2^gfp/+小鼠结肠组织和胸腺组织,获取肠道固有层淋巴细胞(LPLs)和胸腺细胞,采用流式细胞术检测结肠组织CD45^-细胞、CD45⁺细胞及双阴性(DN)T细胞、双阳性(DP)T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺ T细胞中TIPE2的表达。取WT和Tipe2^-/-小鼠外周血、脾脏和肠系膜淋巴结,采用流式细胞术检测外周血、脾脏和肠系膜淋巴结中CD4⁺和CD8⁺T细胞水平。将10只Tipe2^gfp/+小鼠随机分为对照组和哮喘组,每组5只。...     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白2对非小细胞肺癌细胞株H1299的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α诱导蛋白2（TNF-α-induced protein 2,TNFAIP2）在非小细胞肺癌（non-small cell lung can－cer,NSCLC）中的表达以及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法：RT-PCR检测NSCLC中TNFAIP2 mRNA表达情况;免疫组化检测NSCLC中TNFAIP2蛋白表达情况。构建TNFAIP2基因短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）干扰慢病毒载体（shRNA-TNFAIP2）和阴性对照慢病毒载体（shRNA-NC）分别感染H1299细胞后采用RT-PCR和Western blot检测感染效率。用Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力;用CCK-8检测细胞的增殖能力;用流式细胞术检测细胞的凋亡能力;用Western blot检测细胞蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的变化。结果：TNFAIP2 mRNA和蛋白质在NSCLC癌组织中的表达明显高于癌旁组织中的表达。慢病毒下调TNFAIP2表达后,shRNA-TNFAIP2组细胞迁移数（170±11）较shRNA-NC组（329±31）明显减少（P=0.001）;侵袭细胞数（75±10）较shRNA-NC组（135±8）明显减少（P=0.001）。CCK-8结果提示,shRNA-TNFAIP2组的吸光度值明显低于shRNA-NC组（P=0.000）;流式细胞术结果显示,shRNA-TNFAIP2组的凋亡率（18.730±0.490）%明显高于shRNA-NC组（6.570±0.870）%（P=0.000）;Western blot结果显示,shRNA-TNFAIP2组较shRNA-NC组细胞蛋白N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达增加。结论：TNFAIP2在NSCLC中存在高表达,下调能够抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,逆转上皮间质转化。     

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2信号通路抑制剂对乳腺癌细胞缺氧诱导因子-2α表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2(MEK/ERK1/2)信号通路抑制剂对缺氧诱导的乳腺癌MCF-7细胞中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达的影响.方法 乳腺癌MCF-7细胞常规培养24 h后,分为常氧组、缺氧组、缺氧+低剂量LY294002组...