WT1基因在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC）组织中的Wilms’tumor gene 1（WT1）基因在mRNA及蛋白水平的表达情况，分析其与各临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR法检测46例HNSCC组织及20例正常咽部黏膜组织中的WT1 mRNA表达情况，同时应用免疫组织化学法检测两组石蜡切片中的WT1蛋白表达情况。结果① 46例HNSCC组织WT1mRNA表达均值为9.61×10-3，较正常咽部黏膜组均值1.18×10-4 显著增高(P<0.05)；② WT1mRNA表达与肿瘤的分化程度显著相关，分化越差表达越高(P<0.05)，且WT1表达在下咽癌组织及嗜酒人群中表达亦显著增高(P<0.05)；③ WT1蛋白在HNSCC组织中阳性率为76.09%，而正常咽部黏膜组织无表达，两者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HNSCC组织中WT1在mRNA及蛋白水平均有异常过表达，可能扮演癌基因的角色，参与了肿瘤的发生和发展。     

TrKB与VEGF在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、酪氨酸激酶B(TrKB)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达并比较两者表达的相关性及分析与肿瘤临床特征的关系。方法采用免疫组化方法检测经活检确诊为NPC的患者55例及鼻咽炎组织30例中VEGF、TrKB蛋白表达水平,比较二两者表达差异。根据患者年龄和性别、肿瘤临床分型、原发灶大小、淋巴结转移和有无远处转移将病例分组,应用双变量相关Pearson检验分析研究VEGF、TrKB表达与肿瘤临床病理特征之间的关系。结果①VEGF蛋白于肿瘤细胞浆及血管内皮细胞浆中均表达,TrKB蛋白阳性表达绝大多数位于细胞浆内。在55例NPC患者中,45例TrKB阳性表达,阳性表达率为81.8%;47例VEGF阳性表达,阳性表达率为85.4%。30例鼻咽炎中,只有3例TrKB阳性表达,阳性表达率为10.0%;5例VEGF阳性表达,阳性表达率为16.7%。肿瘤组织中TrKB、VEGF阳性表达率明显高于鼻咽炎组织（P<0.05）,NPC组织中VEGF与TrKB表达有明显相关性（R=0.716,P<0.01）;②VEGF蛋白表达与NPC的临床分期(P=0.002)、肿瘤的直径大小(P=0.009)及有无淋巴结转移(P=0.001)明显相关,与患者性别、年龄、有无远处转移无关（P＞0.05）。TrKB蛋白表达与临床分期(P=0.00)、肿瘤的直径大小(P=0.00)、有无淋巴结转移（P=0.006）明显相关,与患者性别、年龄、有无远处转移无关（P＞0.05）。结论VEGF、TrKB在NPC组织中表达增加,可能与NPC的发生发展有关。TrKB可能与NPC血管形成有关。 （     

钙电压门控通道辅助亚基蛋白作为喉鳞状细胞癌预后指标的临床相关分析

目的 探讨钙电压门控通道辅助亚基α2δ1作为喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）预后评价指标的可能性。方法 选取2017年1月～2020年12月在沧州市人民医院接受诊治的LSCC患者80例作为研究对象。应用蛋白质印迹技术、免疫组织化学技术和免疫荧光染色技术检测喉癌组织、癌旁组织和正常喉黏膜组织样本中α2δ1蛋白的表达量。结果 α2δ1蛋白在LSCC中高表达,在癌旁组织和正常喉黏膜组织中低表达（P<0.001）。LSCC患者癌组织中α2δ1蛋白表达在性别（P=0.559）、年龄（P=0.950）和是否存在吸烟史（P=0.314）的比较,差异无统计学意义。病理学分级中低分化肿瘤的α2δ1蛋白表达明显高于中高分化（P<0.05）;T3、T4肿瘤组织中α2δ1蛋白值显著高于T1、T2肿瘤组织（P=0.005）;存在淋巴结转移的病理组织中,α2δ1蛋白表达高于未发生淋巴结转移的组织（P<0.05）;临床分期越高的患者,其肿瘤组织中α2δ1蛋白表达越高（P=0.0001）。患者生存分析曲线显示α2δ1高表达组患者预后较低表达...     

p-eIF4E和p-Mnk1在头颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨磷酸化真核细胞翻译起始因子4 E （ p- eukaryotic translation initiation factor 4 E, p-eIF4 E ）和磷酸化MAPK作用激酶1（ p- MAP kinase integrating kinase, p-Mnk 1 ）在头颈鳞状细胞癌（ head and neck squamous cell cancer, HNSCC）中的表达及其临床意义。方法HNSCC组织芯片结合免疫组化S．P法检测P-eIF4E和P—Mnkl在60例HNSCC和35例癌旁组织中的蛋白表达，分析两者表达与HNSCC临床病理特征的相关性。结果p-elF4E和P—Mnkl在HNSCC中的阳性表达率显著高于癌旁组织（P〈0．01），P-eIF4E的阳性表达率与HNSCC的分化程度、临床分期显著相关（P〈0．05）；有淋巴结转移HNSCC的P．Mnkl阳性表达率显著高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。HNSCC组织中P-eIF4E和P-Mnkl表达呈显著正相关（r=0．375，P=0．005）。结论HNSCC组织中P-eIF4E和P—Mnkl异常表达与HNSCC的临床进展和浸润转移相关，两者在肿瘤发生发展过程中有协同作用。     

Tiam1蛋白在喉癌中的表达及其临床意义

目的检测T淋巴细胞侵袭转移诱导因子1（Tiam1）蛋白在喉癌组织中的表达,并探讨其表达水平与喉癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用免疫组织化学染色技术检测Tiam1蛋白在98例喉癌石蜡组织切片中的表达,并统计分析Tiam1蛋白表达水平与喉癌临床病理特征和预后之间的关系。结果Tiam1蛋白的表达与喉癌的淋巴结转移（P<0.001）、临床分期（Ⅰ期、Ⅱ期/Ⅲ期、Ⅳ期）（P=0.027）、组织病理学分级（P=0.020）及复发（P=0.003）密切相关;Kaplan Meier生存曲线分析结果显示Tiam1高表达组的5年无复发生存率（P=0.001）和5年总生存率（P<0.001）均明显低于Tiam1低表达组;而且通过Kaplan Meier生存曲线分析Tiam1蛋白表达和淋巴结转移情况与头颈鳞癌患者预后之间的关系,发现Tiam1高表达并有淋巴结转移组的5年无复发生存率和5年总生存率明显低于其它（Tiam1低表达或无淋巴结转移）组（P均<0.001）;多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结转移（P=0.001）及Tiam1表达水平（P=0.020）为喉癌的独立预后因素。结论Tiam1在喉癌组织中表达显著升高,且其高表达与喉癌患者的淋巴结转移、复发及预后密切相关。Tiam1可能在喉癌的发生、发展中起重要作用,其表达水平对喉癌的复发及预后具有评估价值。     

GSK-3β和MIF蛋白在下咽癌组织中的表达及意义

目的研究糖原合成酶激酶-3β（giycogen syntlase kinase 3β,GSK 3β）和巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）蛋白在下咽癌组织中的表达,探讨二者在下咽癌发生、发展中的作用及二者相关性。方法应用免疫组织化学方法检测46例下咽癌组织、癌旁组织及20例下咽正常黏膜组织中GSK 3β和MIF蛋白表达情况。结果①GSK 3β蛋白在下咽癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常下咽黏膜组织（P<0.05）;② MIF蛋白在下咽癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常下咽黏膜组织（P<0.05）;③GSK 3β蛋白在下咽癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性（P<0.05）;④MIF蛋白在下咽癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期有相关性（P<0.05）;⑤GSK 3β和MIF蛋白在下咽癌组织中表达无相关性。结论GSK 3β和MIF蛋白表达与下咽癌的发生、发展可能有关。     

下咽鳞状细胞癌中Slit2的表达及其与微血管密度关系的临床研究

目的研究下咽鳞状细胞癌组织中神经迁移蛋白Slit2的表达及其与微血管密度的关系,探讨两者对下咽鳞状细胞癌的生物学行为的影响。方法免疫组织化学法检测Slit2蛋白的表达及微血管密度（MVD）,并应用RT PCR法检测新鲜组织中Slit2 mRNA的表达。研究其表达与肿瘤临床特征的关系。结果Slit2蛋白在下咽鳞状细胞癌和癌旁组织中的表达率分别为65.2%和40.5%,两者表达差异有统计学意义（χ2=6.329,P<0.05）;Slit2 mRNA在下咽鳞状细胞癌和癌旁组织中的表达,差异亦具有统计学意义（t=8.230,P<0.05）。Slit2蛋白的表达与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移显著相关;MVD计数与肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和淋巴节转移显著相关,两者与肿瘤的发病年龄、部位、临床病理分化程度均无关。肿瘤组织中Slit2阳性表达者MVD计数高于Slit2阴性表达者,其差异具有统计学意义（t=2.273,P<0.05）;并且两者表达呈正相关（rs=0.430,P<0.05）。结论下咽鳞状细胞癌组织中Slit2表达和MVD计数,与肿瘤的侵袭和淋巴结转移密切相关,其机制可能为Slit Robo信号系统介导了肿瘤新生血管的形成,从而影响了肿瘤的生物学行为。     

差异蛋白在脑胶质瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨脑胶质瘤中的差异蛋白的表达并筛选有临床价值的生物标志物。方法应用蛋白组学检测10对脑胶质瘤及配对瘤旁组织差异表达的蛋白,并采用免疫组织化学法验证差异蛋白在66例脑胶质瘤组织及正常脑组织中的表达情况。χ2检验差异蛋白的表达水平与脑胶质瘤患者临床、病理特征之间的关系;Kaplan Meier回归模型分析差异蛋白与患者预后的关系,并绘制生存曲线。结果蛋白组学分析发现与瘤旁组织相比,有22个蛋白质在脑胶质瘤组织明显表达异常（上调13个,下调9个）。筛选差异表达最明显的4个蛋白GLUD1、VIM、PRDX1及MAT1A,采用免疫组织化学验证4种蛋白在脑胶质瘤组织及正常脑组织中的表达情况。结果显示与正常脑组织相比,胶质瘤组织中GLUD1（P=0.006）与PRDX1（P<0.001）表达明显上调,而MAT1A表达明显下调（P=0.001）,VIM的表达无统计学差异（P=0.118）。与临床病理特征相关性分析显示,PRDX1表达水平与胶质瘤病理分级(P=0.008)及患者生存情况(P=0.004)明显相关,而与年龄、性别及胶质瘤直径无明显相关性(P>0.05)。GLUD1及MAT1A的表达与年龄、性别、病理分级、胶质瘤直径及生存率无明显相关性(P>0.05)。PRDX1高表达组和低表达组3年生存率分别为27.4%及57.1%,两组比较差异具有统计学意义(P=0.011)。结论差异蛋白中PRDX1在人脑胶质瘤组织中表达上调,并与病理分级、不良预后显著相关,可能是胶质瘤潜在的标志物。     

AKT和HK2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

摘要：目的探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT(the serine/threonine kinase, also known as protein kinase B, PKB)、己糖激酶2（hexokinase 2, HK2）在喉鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达，分析其与喉癌发病诸病理因素间的相互关系。方法采用免疫组化Streptavidian perosidase(SP)法检测30例喉癌患者的癌组织中AKT和HK2蛋白的表达情况，同期选取其癌旁组织作为对照。结果AKT、HK2蛋白在喉癌组织中高表达，与肿瘤的分化程度和有无淋巴结转移密切相关，差异具有统计学意义（P＜0.05）；AKT、HK2蛋白的阳性表达与患者的年龄、肿瘤发生部位以及临床分期无关（P＞0.05）；喉鳞癌组织中AKT与HK2的表达呈正相关（r=0.424,P=0.019）。结论喉鳞癌组织中AKT、HK2蛋白高表达与肿瘤的侵袭和转移密切相关，可提示预后不良。     

Claudin-1与cyclinB1在下咽鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究Claudin 1与 cyclinB1在下咽鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达情况,分析它们与下咽鳞状细胞癌各临床因素及患者预后之间的关系。方法①选取97例下咽鳞状细胞癌组织学标本及90例癌旁正常黏膜组织标本,采用免疫组化的方法比较Claudin 1和cyclinB1在下咽鳞状细胞癌及正常黏膜组织中表达的差异,分析两者在下咽鳞状细胞癌中的表达与临床因素及患者预后之间的关系;②选取30位下咽鳞状细胞癌患者术后的癌组织及癌旁正常黏膜,采用RT PCR方法,检测Claudin 1和cyclinB1的表达并定量分析,探讨两者的相关性。结果①Claudin 1与cyclinB1在下咽鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（P<0.05）;②Claudin 1蛋白表达与肿瘤的分化程度(P=0.004)和淋巴结转移(P=0.026)有关,与患者的生存率相关(P=0.003);③CyclinB1蛋白表达与肿瘤的分化程度(P<0.001)有关;④Claudin 1与cyclinB1呈明显正相关关系(r=0.482,P<0.001)。结论Claudin l和cyclinB1具有协同作用,二者的高表达可能促进了下咽癌的发生与发展。     

Identification of Genes Overexpressed in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Using a Combination of Complementary DNA Subtraction and Microarray Analysis

Objectives/Hypothesis To discover unique genes specific for squamous cell carcinoma of the head and neck for eventual development as tumor markers and vaccine candidates. Study Design Molecular biological analysis of fresh‐frozen head and neck squamous cell cancer (HNSCC). Methods A subtractive library was made from two HNSCC and six normal tissues using a polymerase chain reaction (PCR)–based approach. Genes from this library were PCR amplified and placed on a microarray glass slide. RNA was prepared or obtained from 16 fresh‐frozen HNSCC and 22 normal tissue sources. Fluorescent probes were made from the polyA+ RNA derived from the tumor and normal tissues. The probes were hybridized to the glass slides and excited by a tuneable laser. One hundred seven of the genes showing the highest differential fluorescence value between tumor and normal tissue were identified by sequence analysis. Results Thirteen independent genes were found to be overexpressed in tumor tissues. Of these, nine were previously known: keratins K6 and K16, laminin‐5, plakophilin‐1, matrix metalloproteinase‐2 (MMP), vascular endothelial growth factor, connexin 26, 14–3‐3 sigma, and CaN19. The level of polyA+ RNA of these genes in the tumors was significantly different from the levels in normal tissue (P < .05). Four previously unidentified genes were also discovered to have increased expression in tumor tissue. Comparing the total tumor group (n = 16) to the normal group (n = 22), only one of these genes showed significant overexpression. Conclusion We report the identification of nine known genes that are significantly overexpressed in HNSCC as compared to normal tissue using subtractive and microarray technology. In addition, we present four previously unidentified genes that are overexpressed in a subset of tumors. These genes will be developed as tumor markers and vaccine candidates.     

CDR1as在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨环状RNA ciR 7(CDR1as)在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）中的表达及临床意义,并分析CDR1as与miR 7的相关性。方法收集2011—2013年手术切除并病理确诊为鳞状细胞癌的标本61例,同期选取病理确诊为炎症或正常黏膜的癌旁组织（距肿瘤切缘大于0.5 cm）标本48例,采用实时荧光定量PCR方法检测喉癌及癌旁组织中CDR1as、miR 7的转录表达水平。结果Real time PCR显示,在LSCC组织中,CDR1as mRNA表达水平均显著高于癌旁组织（P＜0.001）;miR 7 mRNA表达水平均显著低于癌旁组织（P＜0.0001）; CDR1as在淋巴结转移患者的LSCC组织中表达水平较无淋巴结转移患者的LSCC组织中显著增高(P＜0.01);CDR1as在不同TNM分期患者的喉癌组织中表达水平差异具有统计学意义(P＜0.05);CDR1as在LSCC组织中表达水平与患者的预后相关 (P=0.02);同时,CDR1as表达水平与miR 7表达呈负性相关(r=-0.643,P=0．001)。结论CDR1as参与LSCC的发生和发展,其表达可以作为判断预后的一项指标,CDR1as与miR 7呈现出的一定的相关性,CDR1as可能通过靶向调控miR 7的表达影响喉癌进展。     

High expression levels of COX-2 and P300 are associated with unfavorable survival in laryngeal squamous cell carcinoma

In order to provide a basis for clinical treatment decisions, we explored whether there was a correlation between the expression of COX-2 and P300 and clinical factors in a group of patients with laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). A retrospective analysis of clinicopathological data was conducted in 80 patients with LSCC who presented between January 1997 and December 1998. An immunohistochemistry tissue microarray was conducted of 80 surgically resected LSCC and 20 adjacent normal tissue specimens. Survival analysis and Kaplan–Meier curves were used to compare the effects of clinicopathological factors on survival. The Cox model was applied for multivariate analysis. The expression level of COX-2/P300 in LSCC tissues and adjacent normal tissues were 47.5/50.0 versus 0.0/15.0 %. The expression of COX-2 and P300 was correlated with higher T category, N category, clinical staging, histological grade and recurrence (P < 0.05). P300 expression was correlated with COX-2 expression (P < 0.05). Univariate survival analysis showed that P300, COX-2, N category, clinical staging and recurrence factors were closely correlated with unfavorable survival (P < 0.05). Multivariate analysis showed that COX-2 expression, histological grade and recurrence were independent prognostic factors for LSCC. High expression levels of COX-2 and P300 indicated poor survival outcomes for patients with LSCC.     

Notch-1、NF-kB和β-catenin在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的 通过观察Notch-1、NF-kB和β-catenin在口腔鳞状细胞癌中的表达情况,探讨Notch-1、NF-kB及Wnt/1β-catenin信号传导系统与口腔鳞状细胞癌发生、发展的相关性。方法 应用免疫组织化学染色方法检测58例口腔鳞状细胞癌组织及30例癌周组织中Notch-1、NF-kB和β-catenin蛋白表达情况并分析其与临床病理特征的关系。 结果 ①Notch-1、NF-kB蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达明显高于在癌周组织,并且两者染色积分间的差异有统计学意义(P<0.01)。两种蛋白的表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤原发部位和组织学分级之间无相关性,但是与肿瘤TNM分期以及有无淋巴结转移密切相关(P<0.01);②在58例口腔鳞状细胞癌组织中β-catenin异位表达23例(79.31％),β-catenin异位表达与肿瘤TNM分期(P<0.01)以及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05);③Spearman等级相关分析口腔鳞状细胞癌组织中Notch-1、NF-kB表达和β-catenin异位表达之间的相关性,Notch-1和NF kB表达二者表达有显著关联性 (P<0.05);Notch-1表达和β-catenin异位表达差异有统计学意义(P<0.05);而NF kB蛋白表达和β catenin异位表达未见明显相关性 (P>0.05)。结论 Notch-1、NF-ΚB高表达和β-catenin异位表达在口腔鳞状细胞癌中属常见现象,并且三者表达情况均与肿瘤TNM分期以及有无淋巴结转移密切相关。Notch-1表达分别和NF-kB表达及β-catenin异位表达差异有统计学意义,但NF-kB表达和β-catenin异位表达差异无统计学意义。     

PD-L1蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的探讨PD L1在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术对收集的162例鼻咽癌组织进行PD L1蛋白的表达检测,并结合患者临床病理参数及预后信息,探讨其临床价值。结果PD L1蛋白表达水平与性别、年龄、PS评分、临床分期、吸烟情况等临床病理参数之间无显著差异(P>0.05)。PD L1阳性组与阴性组3年总生存率分别为92.3%与80.0%,差异具有统计学意义(P=0.026)。结论PD L1蛋白阳性鼻咽癌患者预后较好,有望成为鼻咽癌患者预后评估的生物标志物。     

谷胱甘肽S 转移酶A1在鼻咽癌中的异常表达

 目的比较谷胱甘肽S 转移酶A1（glutathione S transferase A1,GSTA1）在鼻咽癌组织与正常鼻咽上皮组织中转录和表达的差异，并探究其与鼻咽癌患者临床特征的相关性。方法通过GCBI（gene cloud of biotechnology information）在线分析平台分析鼻咽癌表达谱芯片数据（GSE12452，GSE64634），探索GSTA1基因在鼻咽癌组织与正常对照组织中的转录水平差异；分别通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色验证和检测GSTA1在鼻咽癌组织和正常鼻咽上皮中转录和表达差异；通过人类肿瘤基因组（the cancer genome atlas, TCGA）数据库，分析GSTA1的转录水平与头颈肿瘤临床分期的相关性。 结果GSTA1基因在鼻咽癌中转录和表达均显著下调，且GSTA1的mRNA水平在头颈肿瘤不同分期有显著差异。 结论GSTA1转录和表达下调是鼻咽癌的分子特征，提示其可能通过影响细胞代谢参与鼻咽癌的发生和演进。     

MicroRNA-107抑制喉癌细胞的迁移及侵袭能力的临床分析

目的通过观察microRNA 107（miR 107）在喉癌及癌旁组织中的表达,并且在喉癌细胞系选择性上调及敲减miR 107,检测其对喉癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法收集40例喉癌及其邻近癌旁组织标本,运用RT qPCR检测miR 107的表达,并分析其在喉癌中的临床意义。在人喉癌细胞TU212及TU686中过表达或敲减miR 107,通过Transwell法检测其对喉癌细胞迁移及侵袭能力的影响。结果MiR 107在喉癌组织中的表达显著低于癌旁组织,差异具有统计学意义（P<0.05）,miR 107的表达水平与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移及原发部位相关（P<0.05）。细胞实验显示,过表达miR 107后喉癌细胞迁移及侵袭能力明显下降（P<0.05）,而敲减miR 107后细胞迁移及侵袭能力明显增强（P<0.05）。结论MiR 107在喉癌中表达显著下调,它能够抑制喉癌细胞的迁移和侵袭能力。     

凋亡抑制蛋白XIAP在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床病理学意义

目的:探讨调亡抑制蛋白XIAP在喉癌中的表达情况,了解其与喉癌临床生物学行为的关系。方法:选择喉鳞状细胞癌患者50例,术前均未进行化学和放射治疗。采用免疫组织化学方法染色(SP法),检测XI-AP蛋白在喉癌和喉正常黏膜组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。结果:XIAP蛋白主要表达在肿瘤细胞细胞质和细胞核,为粗细不一的棕黄至棕黑色颗粒。XIAP在喉鳞状细胞癌中的表达与正常喉黏膜比较,前者表达显着增高,差异有统计学意义(P<0.01)。XIAP蛋白阳性表达与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤生长部位及有无淋巴结转移无相关性,而与临床分期、T分期及病理分级有关(均P<0.05)。结论:XIAP蛋白在喉正常组织中低表达,而在喉癌中高表达。XIAP蛋白的表达程度与肿瘤临床病理特征有关。XIAP在喉癌发生、发展过程中可能具有重要作用。