基于PERK/eIF2α信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对脂多糖诱导大鼠退变软骨细胞凋亡的作用机制

目的：观察龟鹿二仙胶含药血清对脂多糖（LPS）诱导的大鼠退变软骨细胞中蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）/真核起始因子2α(eIF2α)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨龟鹿二仙胶治疗KOA的作用机制。方法：制备龟鹿二仙胶含药血清及空白血清。采用4周龄SD大鼠膝关节软骨提取软骨细胞并进行体外培养,用甲苯胺蓝染色法对软骨细胞进行鉴定。采用CCK-8法筛选最佳含药血清浓度进行后续实验。用10μg/mL LPS诱导F2代软骨细胞复制退变软骨细胞模型,将细胞分为空白组、模型组、龟鹿二仙胶组、PERK抑制剂组,干预24 h后,分别采用CCK-8法检测软骨细胞活性;TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况;RT-qPCR法检测软骨细胞PERK、eIF2α、前凋亡基因C/EBP同源蛋白（CHOP）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）mRNA的表达;Western Blot检测软骨细胞p-PERK、p-eIF2α、CHOP、Bax、活化的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Bcl-2蛋白的表达情况。结果：与空白组比较...     

益气化瘀补肾方血清对兔关节软骨细胞增殖与Caspase3/7酶活性的影响

目的观察益气化瘀补肾方含药血清对体外培养的兔关节软骨细胞增殖与Caspase3/7酶活性的影响。方法取兔的膝关节软骨,将软骨细胞分离传代后,取第三代细胞,用10μg/L的IL-1β诱导正常软骨细胞退变,制备益气化瘀补肾方含药血清作为干预措施。益气化瘀补肾方组分别加入IL-1β及不同溶度（5%,10%,20%）益气化瘀补肾方含药血清培养液,对照组分别加入IL-1β及不同溶度（5%,10%,20%）空白血清培养液,分别培养24h、48h后,采用MTT比色法检测软骨细胞增殖。另取对数生长期第三代软骨细胞分为4组：正常软骨细胞＋20%空白血清;正常软骨细胞＋20%益气化瘀补肾方含药血清;IL-1β诱导软骨细胞＋20%空白血清;IL-1β诱导软骨细胞＋20%益气化瘀补肾方含药血清。每组6个复孔,每孔100μl,各组分别用相应的血清培养24h、48h后进行检测,采用Caspase3/7试剂盒检测各组软骨细胞的Caspase3/7酶活性变化情况。结果不同浓度的益气化瘀补肾方血清均能拮抗IL-1β抑制软骨细胞增殖;与正常软骨细胞＋20%空白血清组比较,IL-1β诱导软骨细胞＋20%空白血清组Caspase3/7酶活性升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与IL-1β诱导软骨细胞＋20%空白血清组比较,IL-1β诱导软骨细胞＋20%益气化瘀补肾方血清组Caspase3/7酶活性降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;正常软骨细胞＋20%益气化瘀补肾方血清组的Caspase3/7酶活性与正常软骨细胞＋20%空白血清组和IL-1β诱导软骨细胞＋20%益气化瘀补肾方血清组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论益气化瘀补肾方血清能拮抗IL-1β抑制软骨细胞增殖,下调软骨细胞Caspase3/7酶活性,从而抑制软骨细胞的凋亡。     

加味四妙方通过调控蛋白多糖降解治疗大鼠痛风性关节炎的机制研究

目的：基于蛋白多糖降解探讨加味四妙方对单钠尿酸盐（MSU）诱导的大鼠痛风性关节炎（GA的作用及其作用机制。方法：将6只SD大鼠随机分为空白组和模型组，每组3只，模型组向关节腔内注射0.1 mL MSU溶液（100 mg/mL）建立GA模型，对照组注射等体积生理盐水。24 h后对两组大鼠的滑膜组织进行转录组测序，筛选出差异表达基因。体外培养家兔膝关节软骨细胞，甲苯胺蓝染色、RT-PCR法检测不同代数软骨细胞中蛋白多糖（PGs）的表达。采用Western blot与qRT-PCR法检测不同浓度MSU(200、500、1 000μmol/L)处理后MMP-3的蛋白及mRNA表达。将33只SD大鼠随机分为空白组、模型组、给药组，每组11只。膝关节注射0.1 mL MSU溶液（100 mg/mL）制备大鼠痛风性关节炎模型，免疫组化检测滑膜组织中MMP-3的表达，番红固绿染色法检测大鼠关节软骨细胞蛋白多糖的表达。结果：MMP-3是显著上调的差异表达基因，与Jak/STAT信号通路、TGF-β信号通路、趋化因子信号通路、IL-17信号通路等密切相关。体外验证发现，与空白组比较，经250、500、1 000μmol/L MSU刺激24 h后，MMP-3蛋白表达水平明显升高（P <0.05）；与空白组比较，MMP-3 mRNA表达水平经250μmol/L MSU刺激后明显升高（P <0.01），经500、1 000μmol/L MSU刺激后其表达显著升高（P <0.001）。与空白组比较，经250、500μmol/L MSU刺激后，各组软骨细胞蛋白多糖表达均显著降低（P <0.05）；与250μmol/L MSU组比较，10%和20%加味四妙方含药血清（MSM）组均能有效逆转上述结果（P <0.001）。与500μmol/L MSU组比较，20%MSM能够有效上调蛋白多糖的表达（P <0.05）。与空白组比较，模型组软骨细胞蛋白多糖mRNA表达显著降低（P <0.001）；与模型组相比，10%MSM与20%MSM均能有效增加其mRNA表达（P <0.001,P <0.05）。与空白组比较，模型组大鼠膝关节肿胀明显（P <0.05,P <0.01）；与模型组比较，各给药组能明显抑制其关节肿胀（P <0.05,P <0.01）。与空白组比较，模型组MMP-3表达增加且关节软骨表层蛋白多糖丢失；与模型组相比，各给药组对上述现象均有明显改善作用。结论：加味四妙方通过抑制MMP-3生成调控蛋白多糖降解从而治疗痛风性关节炎。     

补虚化浊方对缺氧诱导ARPE-19细胞自噬及血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨补虚化浊方含药血清对氯化钴(CoCl₂)诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬标志蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 将体外培养ARPE-19细胞分为正常组、缺氧组、康柏西普组、补虚化浊方组，正常组加入不含FBS的血清培养，缺氧组加入含CoCl₂ 100μmol/L的培养液+空白血清培养，康柏西普组加入含CoCl₂ 100μmol/L的培养液+20μg/mL康柏西普+空白血清培养，补虚化浊方组加入含CoCl₂ 100μmol/L的培养液+20%补虚化浊方含药血清培养。分别于培养24 h、48 h、72 h后，MTT法检测细胞增殖活性，ELISA法检测细胞上清液中VEGF含量；培养72 h后，Wester blot法检测细胞中自噬标志蛋白LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin-1表达情况。结果 缺氧组细胞培养24 h、48 h、72 h的细胞活力吸光度值、上清液中VEGF含量和培养72 h后细胞中LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin-1蛋白相对表达量均明显高于其他组(P均<0....     

杜仲苷对炎性环境下软骨细胞的增殖和Ⅱ型胶原蛋白分泌的影响

目的：观察杜仲苷对IL-1β刺激大鼠体外软骨细胞的增殖及Ⅱ型胶原蛋白分泌的影响。方法：利用IL-1β刺激建立体外大鼠软骨细胞炎性模型,实验分为空白组、IL-1β组、10μM杜仲苷组、100μM杜仲苷组、500μM杜仲苷组、1000μM杜仲苷组;空白组加入10%FBS培养液,IL-1β组加入10ng/mL IL-1β＋10%FBS培养液,4个不同浓度杜仲苷组分别加入10μM、100μM、500μM、1000μM杜仲苷＋10ng/mL IL-1β＋10%FBS培养液,分别培养48小时,采用CCK8检测软骨细胞增殖活力及Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结果：IL-1β组的OD值低于空白组（P〈0.05）;4个不同浓度杜仲苷组的OD值均高于IL-1β组（P〈0.05）,且存在一定的量效关系;4个不同浓度杜仲苷组的Ⅱ型胶原蛋白表达均高于IL-1β组（P〈0.05）,且存在有一定的量效关系。结论：杜仲苷可以提高体外大鼠软骨细胞炎性环境下的增殖活力,促进Ⅱ型胶原蛋白的分泌,表明杜仲苷对体外大鼠软骨细胞有一定的抗炎保护作用。     

基于lncRNA MGC-Mirg与PERK通路探讨荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎小鼠软骨退变

目的 基于长链非编码RNA(lncRNA) MGC-Mirg与PRKR样内质网激酶（PERK）通路探讨荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎模型小鼠软骨退变的机制。方法 48只8周龄小鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为空白组12只和造模组36只,造模组采用改良Hulth法诱导建立KOA模型,将造模成功的小鼠分为模型组、荣筋拈痛方组和阳性对照组各12只。荣筋拈痛方组按9 g/（kg·d）给予荣筋拈痛方药液灌胃;阳性对照组按500 mg/（kg·d）给予特异性内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸溶液灌胃;空白组和模型组按10 mL/（kg·d）给予生理盐水灌胃,均连续灌胃8周。采用HE染色与番红O-固绿染色观察小鼠关节软骨组织病理改变;Western blot检测膝关节软骨组织PERK、激活转录因子4(ATF4)、结合免疫球蛋白（BIP）、ER降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1(EDEM1)、生长停滞与DNA损伤诱导蛋白（GADD153）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达量;qPCR检测膝关节软骨组织lncRNA MGC-Mirg RNA相对表达水平。结果 与空白组比较,模型...     

六味地黄汤含药血清对软骨细胞增殖、凋亡影响的体外实验研究

目的:研究六味地黄汤含药血清对软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:取1月龄新西兰兔关节软骨经胶原酶Ⅱ消化,建立软骨细胞体外培养体系,随机分为3组,分别加入培养液、空白血清和中药血清继续培养72小时后,用MTT比色法检测其OD值变化,采用流式细胞仪检测软骨细胞凋亡及细胞周期的变化。结果:中药血清组的OD值显著高于正常对照组、空白血清组(P<0.05);流式细胞仪细胞周期检测显示中药血清能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,并呈现时间的依赖性,其G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与空白血清组对比有显著性差异(P<0.05)。结论:六味地黄汤能有效促进软骨细胞增殖、抑制软骨细胞凋亡。     

尼古丁对血管内血栓形成的影响

目的研究不同条件尼古丁介导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）表达组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）的影响。方法选用第4代～6代HUVECs,接种于24孔培养板中,随机分为5组。实验组分别于培养液中加入不同体积的尼古丁,使其终浓度分别为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L及100μmol/L;对照组以相同体积的PBS液代替尼古丁同步培养,孵育12h后收集各组细胞的上清液,采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析（ELISA）法测定各组上清液中TFPI-2的含量。结果 10μmol/L、100μmol/L尼古丁组TFPI-2蛋白表达较对照组明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;0.1μmol/L、1μmol/L尼古丁组TFPI-2蛋白表达与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;100μmol/L尼古丁组较10μmol/L尼古丁组TFPI-2蛋白表达减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论尼古丁可以损伤血管内皮细胞,引起TFPI-2蛋白表达降低,影响其凝血功能,从而增加血栓的发生几率。     

淫羊藿苷抑制内质网应激改善缺氧/缺糖诱导H9C2细胞损伤的研究

目的观察淫羊藿苷(icariin, ICA)对H9C2心肌细胞缺氧/缺糖(OGD)诱导细胞损伤的作用及其与内质网应激的关系。方法将培养的H9C2细胞随机分为6组:正常培养对照组、缺氧/缺糖模型组(OGD组)、ICA(10μmol/L)+OGD组、ICA(20μmol/L)+OGD组、ICA(40μmol/L)+OGD组、4-苯基丁酸(4-PBA 5mmol/L)+OGD组。正常培养对照组采用正常培养基培养至实验结束,OGD组采用缺糖培养基并在缺氧培养箱中培养6h, ICA(10,20,40μmol/L)+OGD组和4-PBA+OGD组分别按组于缺氧/缺糖前1h给予相应浓度的药物培养再行缺氧/缺糖过程。实验后MTT法检测细胞存活率;测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,采用DCFH-DA测定细胞中ROS产生量;Western blot测定GRP78和CHOP的表达。结果与正常培养组比较,OGD组细胞存活率显著下降(P0.01),LDH漏出量和ROS产生量增加,GRP78和CHOP表达上调(P0.01);给予不同浓度ICA和4-PBA干预后,ICA不同剂量组细胞存活率较OGD组明显升高,LDH和ROS产生明显降低,GRP78和CHOP蛋白表达较OGD组显著下降(P0.05),与4-PBA组结果相似。结论 OGD可诱导内质网应激,引起细胞存活率降低;而淫羊藿苷可通过减少ROS,抑制内质网应激发挥保护作用,减少缺氧/缺糖诱导的细胞损伤。     

基于IHH-Gli信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清调控大鼠膝关节软骨细胞肥大分化作用机制

目的 基于IHH-Gli信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对大鼠膝关节软骨细胞肥大分化的调控机制。方法 取4周龄SPF级SD大鼠膝关节软骨细胞进行传代培养，将第三代生长良好的软骨细胞，设为空白组；采用含10 ng/mL IL-1β的10%FBS/DMEM培养上述第三代软骨细胞12 h后制备大鼠膝关节肥大软骨细胞模型，模型鉴定成功后随机分为模型组、龟鹿组、抑制剂组。空白组、模型组均采用含10%大鼠空白血清DMEM进行培养，龟鹿组和抑制剂组分别采用含10%龟鹿二仙胶大鼠含药血清和含10 nmol/L环巴胺的10%大鼠空白血清DMEM进行培养。培养72 h后在光镜下观察4组软骨细胞形态变化，qRT-PCR法检测4组印度刺猬（IHH）、膜受体Smoothened(Smo)、胶质细胞瘤转录因子（Gli）、Runt相关转录因子2(Runx2)、X型胶原α1(Col10A1)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA相对表达水平，采用Western blot检测等4组IHH、Smo、Gli蛋白表达量。结果与空白组比较，模型组细胞不规则形态增加，细胞间隙变大、数量变少，细胞碎片、悬浮死细胞增多；与模型组...     

参麦注射液对IL-1β体外诱导兔软骨细胞增殖的影响

目的：观察参麦注射液对白细胞介素-1β（IL-1β）体外诱导兔软骨细胞增殖的影响。方法：采用IL-1β体外诱导兔软骨细胞的方法,建立变性软骨细胞模型,将其分为空白组、模型组、1％参麦组、5％参麦组和10％参麦组。空白组采用含10％胎牛血清的DMEM培养液培养;模型组采用含10ng／mLIL-1β的DMEM培养液培养;1％、5％、10％参麦组采用含10ng／mg/mLIL-1βDMEM培养液培养24h,再分别采用含1％、5％、10％参麦注射液的DMEM培养液培养。采用MTT比色法检测软骨细胞的增殖情况。结果：模型组吸光度值（OD值）低于空白组,2组比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）,说明IL-1β可抑制软骨细胞的增殖,建立变性软骨细胞模型。模型组及不同浓度参麦组间的OD值比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）,不同浓度的参麦注射液均可明显促进变性软骨细胞的增殖,其增殖作用与参麦注射液浓度呈正相关。结论：参麦注射液能够明显促进IL-1β体外诱导兔软骨细胞的增殖,这可能是参麦注射液防治关节退变的机理之一。     

改良三甲散含药脑脊液对Аβ诱导的海马神经元细胞损伤相关基因的影响

目的：探讨改良三甲散对β淀粉样蛋白（Аβ25-35）所致海马神经元细胞损伤时凋亡基因bax、bcl-2和caspase-3表达的调控作用。方法：将原代培养的神经元细胞分空白组、模型组、脑复康组和改良三甲散低、高剂量组。选择性培养7d后吸去培养液,分别加入空白培养液、正常脑脊液（盐水组）、脑复康脑脊液和中药脑脊液低、高剂量,加培养液补至等量,37℃孵育2h。然后除空白组之外的各组加入经老化处理的Аβ25-35（终浓度为5μmol/L）,建立AD细胞模型。空白组加入等量的培养液,继续孵育24h后离心收集细胞,提取总RNA。应用半定量RT-PCR法测定bax、bcl-2和caspase-3基因的表达。结果：模型组bcl-2基因表达降低、bcl-2/bax比值明显降低,bax、caspase-3基因表达显著增加;改良三甲散组bcl-2基因表达明显升高,bax、caspase-3基因表达显著降低。结论：改良三甲散脑脊液能有效降低bax、caspase-3基因表达,提高bcl-2的表达,从而抑制细胞凋亡,促进海马神经元细胞存活。     

内质网应激相关蛋白GADD153/CHOP在系膜增生性肾炎肾组织中的表达及中药干预研究

目的:研究系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏组织内质网应激相关蛋白生长停滞及DNA损伤基因153(GADD153)/C-EBP同源蛋白(CHOP)的表达、中药保肾颗粒对GADD153/CHOP表达的干预效果,探讨保肾颗粒治疗系膜增生性肾小球肾炎的作用机制。方法:大鼠随机分为中药组、对照组、模型组、空白组,中药组给予保肾颗粒、对照组给予雷公藤多甙片灌胃、空白组和模型组以等量生理盐水灌胃,连续14周。于造模后给药前1 d及实验结束后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr),TUNEL检测大鼠肾脏细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)及Western blot法检测肾组织GADD153/CHOP的表达。结果:与模型组比较,对照组和中药组SCr均显著下降(P0.05)。空白组肾组织细胞凋亡不明显,模型组有大量的肾组织细胞凋亡,中药组及对照组凋亡较轻。与模型组比较,中药组及对照组GADD153/CHOP及GADD153/CHOPmRNA表达水平下降(P0.05)。结论:Ms PGN大鼠肾组织GADD153/CHOP表达增高,提示内质网应激可能参与了肾脏损害;而保肾颗粒对Ms PGN大鼠肾组织GADD153/CHOP过度表达有较好的抑制作用,且作用与雷公藤多甙片相当,是减轻肾脏损害的重要机制之一。     

地黄饮子含药脑脊液对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用

目的:探讨古方地黄饮子对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用。方法:把离体培养的进入对数生长期的PC12细胞分为6组:空白对照组、模型对照组、VitE脑脊液组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组。待24h细胞贴壁后吸去培养液,分别加入空白培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、中药脑脊液低、中、高剂量,加培养液补至等量,37℃孵育2h。然后除空白组之外的各组加入经老化处理的Aβ25-35(终浓度为10μmol/L),建立AD细胞模型。空白组加入等量的培养液,继续孵育24h后收集培养液,对培养液进行MTT法和LDH法检测细胞生存活力。结果:地黄饮子能升高MTT代谢率,降低LDH释放。结论:地黄饮子能改善Aβ25-35损伤后的PC12细胞生存状态,提高细胞生存活力。     

不同浓度的Chir99021对软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响

目的:探讨不同浓度的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021对体外培养的大鼠软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响。方法:新生24hSD大鼠8只(雌雄不限),取出关节软骨进行软骨细胞培养,细胞培养48h后进行软骨细胞免疫荧光鉴定。以不同药物浓度将软骨细胞分为四组,分别加入浓度为0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021进行干预。24h后分别观察不同浓度组细胞形态的变化,蛋白印迹分析法(Western blot)检测Ⅱ型胶原、β-catenin和PCNA蛋白的表达情况。结果:在0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021干预下,各组细胞数量明显逐渐增加,与对照组相比较,各加药组β-catenin和PCNA蛋白的表达逐渐上调(P0.05),而Ⅱ型胶原蛋白的表达逐渐下降(P0.05)。结论:不同浓度的Chir99021激活Wnt/β-catenin信号通路后明显促进了软骨细胞的增殖,却抑制了软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原。     

当归、丹参和川芎嗪注射液对腹膜透析腹腔巨噬细胞功能的干预作用

目的：研究当归、丹参和川芎嗪注射液（简称中药）对腹膜透析（PD）腹腔巨噬细胞（MC）功能的影响。方法：（1）将MC置于含当归、丹参和川芎嗪的腹膜透析液（CDS）的培养液中培养24h，测定3个中药组、CDS组和对照组MC的一氧化氮（NO）含量和对四甲基偶氮唑盐（MTT）还原能力。（2）MC分别置于含2、10、100μg/ml的3个中药的CDS中培养24h，观察不同浓度中药对MC吞噬能力、NO含量和MTT还原能力的影响，对照组为等量培养液代替CDS。结果：CDS组MC的NO含量和MTT还原能力均明显低于对照组（P＜0．01）；与CDS组比较，川芎嗪组的MC NO含量和3个中药组MC MTT还原能力均有明显提高（P＜0．01），并随着培养液中的中药浓度的提高，3个中药组MC吞噬能力和NO含量均有显著增加。结论：在CDS中加中药能改善腹膜腔MC的防御功能，降低腹膜炎的发生率，对提高PD疗效有重要意义。     

川芎嗪含药血清干预软骨细胞周期作用机制的研究

目的：探讨川芎嗪含药血清干预软骨细胞周期的作用机制。方法：取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第三代软骨细胞随机分为3组,分别加入培养液、空白血清、含药血清继续培养24h、48h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果：流式细胞仪细胞周期检测显示川芎嗪含药血清能够刺激软骨细胞由G0／G1期进入S期和G2／M期,并呈现时间的依赖性,干预48h后G0／G1期细胞比例降低,S期与G2／M期细胞之和增加,与正常组、空白组有显著性差异（P〈0．05）。结论：川芎嗪含药血清能有效推动软骨细胞周期的进程。     

地黄饮子含药脑脊液对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤凋亡基因bax bcl-2和caspase-3表达的影响

目的：探讨古方地黄饮子对B淀粉样蛋白（Aβ25-35）所致PC12细胞损伤时凋亡基因bax、bcl-2和caspase-3表达的调控作用。方法：把离体培养的进入对数生长期的PC12细胞分为6组：空白对照组、模型对照组、VitE脑脊液组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组。待24h细胞贴壁后吸去培养液，分别加入空白培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、中药脑脊液低、中、高刺量，加培养液补至等量，37℃孵育2h。然后除空白组之外的各组加入经老化处理的AB25—35（终浓度为10μmol／L），建立AD细胞模型。空白组加入等量的培养液，继续孵育24h后离心收集细胞，提取总RNA。应用RT-PCR二步法和琼脂糖凝胶电泳方法测定bax、bcl-2和easpase-3基因的表达。结果：地黄饮子能下调bax、easpase-3基因的表达，对bcl-2基因的表达有上调作用。结论：地黄饮子脑脊液能有效降低bax、easpase-3基因表达，提高bcl-2的表达，从而抑制、延迟细胞凋亡过程，阻止细胞凋亡，促进PC12细胞存活。