凋亡相关基因Bax、Bcl-2在大鼠急性胰腺炎中的表达

1　引言　　近年来在急性胰腺炎动物实验研究中发现 ,腺泡细胞死亡存在两种不同的方式 :坏死和凋亡。凋亡很少甚至完全不引起炎症反应[1] ,而坏死则伴随剧烈的炎症反应。细胞凋亡对胰腺具有保护作用 ,与急性胰腺炎的严重程度呈负相关 [2 ] 。我们用大鼠制作两种不同程度的急性胰腺炎模型 ,检测凋亡调控基因 Bax、Bcl- 2蛋白的表达程度 ,进一步探讨细胞凋亡在急性胰腺炎发生发展中的作用和地位。2　材料和方法2 .1　材料雄性 S- D大鼠 30只 ,体重 30 0～ 40 0 g,购自南方医院动物所 ;蛙皮素 ( Caerulein)、牛磺胆酸钠( sodium taurocholate…     

大鼠脑损伤后脑组织Bcl-2、Bax基因的表达及血清NO、SOD变化动态研究

目的 观察大鼠颅脑损伤后脑组织中Bcl-2、Bax表达和血清一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）的变化,探讨大鼠颅脑损伤后神经细胞凋亡机制。方法 选用大鼠48只,按时间段随机分为8组,采用自由落体法建立大鼠脑损伤模型,分别于伤后2、6、12、24、48小时及7、14天采取血清,制备脑组织切片,采用TUNEL法检测神经细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax,并测定血清中NO含量和SOD活性。结果 颅脑损伤后,TUNEL（＋）细胞和Bcl-2、Bax表达均明显升高,分别在伤后12、48小时达到高峰;NO含量迅速上升,12小时达到高峰;而SOD降低,48小时达最低点,随着时间的延长,各值均逐步恢复至对照组水平。结论 颅脑损伤后,NO可促使Bcl-2、Bax表达升高,但对Bax的影响更明显,引起细胞凋亡。相反,SOD降低了Bcl-2、Bax表达,抑制了细胞的凋亡。颅脑损伤后SOD的降低也是引起细胞凋亡的主要因素。     

高压氧治疗对大鼠脑挫裂伤后细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响

目的探讨高压氧(HBO)对创伤性脑损伤的治疗作用与对细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响之间的关系。方法制作SD大鼠自由落体脑挫裂伤动物模型,设立HBO治疗组和对照组,分别应用透射电镜、原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞技术对各组动物脑挫伤灶旁和海马结构的细胞凋亡情况进行检测;使用WesternBlot和免疫组化方法,检测bcl-2和Bax蛋白在脑组织中的表达情况。结果脑外伤后存在细胞凋亡,细胞凋亡的发生在伤后24h达到高峰,HBO治疗组在伤后24h和48h细胞凋亡发生率低于相应的对照组(P<0.05);脑挫裂伤灶和海马结构bcl-2蛋白的表达均增强,HBO治疗组bcl-2的表达强于对照组(P<0.05),而Bax的表达在各组间差异无统计学意义。结论HBO治疗对创伤性脑损伤后细胞凋亡的发生及凋亡相关蛋白的表达有影响,抑制细胞凋亡很可能是HBO对创伤性脑损伤治疗作用的重要机制。     

Bcl-2基因在一氧化碳暴露大鼠脑中的表达

目的 观察一氧化碳(CO)暴露后大鼠脑中Bcl-2基因的分布。方法 用Wistar大鼠制成CO暴露动物模型，随机分组，分别在染毒后第3天、第2天和当天处死，取脑制成切片，用地高辛Bcl-2探针原位杂交，观察Bcl-2的信号分布。结果 Bcl-2 mRNA的表达在海马、大脑皮层和胼胝体比较明显，其中海马的表达信号最强，大脑皮层次之，胼胝体最弱。其他部位呈散在的弱信号。相应区域在各个时间点无明显的差异。对照组未见表达。结论 CO暴露后，Bcl-2在海马、大脑皮层和胼胝体的表达较为明显；Bcl-2在上述部位的表达可能部分的解释CO中毒迟发性神经损伤的发生。     

高原大鼠严重烧伤后氧化应激反应对小肠凋亡相关基因Bax,Bcl-2表达的影响

高原地区严重烧伤具有不同于平原地区的病理生理特点,在缺氧性损害的基础上加上再灌注损伤可造成机体各器官组织损伤加重。作者以海拔3840m（甘肃马晗山）和1517m（兰州）为背景,以大鼠为研究对象,建立大鼠严重烧伤后即时复苏与延迟复苏模型,检测不同海拔高度肠黏膜组织匀浆液中丙二醛（MDA）和总巯基（TSH）含量的变化,并采用免疫组化法观察肠黏膜上皮细胞Bax,Bcl-2基因表达情况,旨在探讨高海拔地区严重烧伤延迟复苏后氧化应激反应对肠黏膜Bax基因表达的影响,探讨有关高原地区严重烧伤延迟复苏后肠黏膜屏障损伤的防治对策。选取Wistar大鼠132只,雌雄各半,体质量（200±20）g。将其分为兰州组（1517m）和高原组（3840m）,兰州组包括兰州即时复苏组（LIFR,n=30）、兰州延迟复苏组（LDFR,n=30）、假伤组（LCG,n=6）,高原组包括高原即时复苏组（HIFR,n=30）、高原延迟复苏组（HDFR,n=30）、假伤组（HCG,n=30）。大鼠背部30%TBSA（总体表面积）Ⅲ度烫伤后,立即或伤后6h液体复苏,观察伤后肠黏膜中MDA和TSH变化及凋亡相关基因Bax,Bcl-2表达变化。     

移植胰腺冷缺血后细胞凋亡与Bcl-2Bax表达的研究

目的：探讨胰腺移植后供胰冷缺血损伤后细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的关系。方法：建立小型猪胰腺移植冷缺血再灌注模型，根据供胰冷缺血时间（CIT）分为：CIT 0h组、CIT 3h组、CIT 6h组、CIT 9h组。切除受体猪胰腺制作成糖尿病模型，胰腺移植完成30min后观察胰腺病理变化及TUNEL法检测胰腺细胞凋亡、免疫组织化学法进行Bcl-2、Bax测定。结果：CIT 3h、CIT 6h、CIT 9h组供胰细胞凋亡指数（AI）明显高于冷缺血时间0h组，随着冷缺血时间的延长Bcl-2表达及Bcl-2／Bax比率逐渐下降，Bax表达则逐渐增强。结论：冷缺血时间越长，胰腺细胞凋亡程度越重，细胞凋亡不仅与Bcl-2、Bax自身表达水平有关，也与Bcl-2／Bax比率失衡有关。     

创伤性脑损伤后细胞凋亡及Bcl-2基因治疗

目的 研究创伤性脑损伤（TBI）后的细胞凋亡情况，并探讨Bcl-2基因治疗对凋亡的作用。方法 60只SD大鼠随机分成TBI组（15只）、假处理组（15只）、基因治疗组（15只）和空载体对照组（15只）。除了假处理组外，所有大鼠均用Feeney自由落体致伤装置制成TBI模型。通过RT—PCR法克隆Bcl-2基因cDNA，并利用重组真核表达载体转染受损的脑细胞。用免疫荧光法检测Bcl-2基因的表达。原位末端标记法和电镜检测细胞凋亡情况。结果 与假处理组相比，TBI组的伤灶周围可以发现更多凋亡细胞，并且两者之间的凋亡指数差异有统计学意义（P〈0．01）。通过脂质转染，Bcl-2基因成功在体内表达。基因治疗组的Bcl-2（＋）细胞的标记指数为（8．3±0．7）％，而在空载体对照组中仅为（0．9±0．2）％（P〈0．01）。结论 细胞凋亡存在于损伤的脑组织中，而Bcl-2基因治疗能抑制这种凋亡的发生，后者为TBI后早期干预促进脑细胞存活提供了一种可行的方法。     

Bcl-2及 Bax 蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制基因(bcl-2 )及凋亡促进基因(bax)的表达与胃癌生物学行为的关系.方法应用免疫组化 LSAB 法,分别检测胃癌组60例和正常对照组24例胃组织的 bcl-2及 bax 表达水平.用阳性切片作阳性对照,以 PBS 代替一抗作阴性对照.结果bcl-2在胃癌组的表达阳性率为86.7%,对照组为20.8%,两组间比较差异显著(P＜0.05);bcl-2 及 bax 蛋白的表达与胃癌的组织学类型及预后相关,而与胃癌的分期、淋巴结是否转移等无关.结论bcl-2及 bax 蛋白参与了胃癌的发生及发展;bcl-2蛋白的表达对胃癌的预后判定有一定意义.     

Bcl-2基因家族与细胞凋亡

目前已知在多细胞生物体中细胞有两种不同的死亡形式:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis).细胞凋亡是指细胞在一定生理或病理条件下,由基因调控的主动而有序的自我消亡过程,在形态学、生化和分子水平上与细胞坏死有明显区别.     

自噬相关因子 LC3、Bnip-3和凋亡相关因子Bcl-2、Bax在实验性糖尿病大鼠脑组织中的表达

目的：探讨自噬相关因子LC3、Bnip-3及凋亡相关因子Bcl-2、Bax在实验性糖尿病大鼠脑组织损伤中的作用。方法30只SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组。糖尿病组一次性腹腔注射1％链脲佐菌素（60 mg／kg体质量）,对照组一次性腹腔注射柠檬酸缓冲液,饲养12周后活杀大鼠,留取脑组织标本。经HE染色观察其病理学改变,采用免疫组化S-P法检测大鼠脑组织中LC3、Bnip-3、Bcl-2及Bax的表达。结果与对照组大鼠相比,糖尿病大鼠脑组织病理学显示细胞排列紊乱,分布不均,胞体缩小,胞质淡红色,正常形态神经细胞数减少;LC3、Bnip-3及Bax阳性数较对照组明显升高,差异有统计学意义（ P＜0．05）;Bcl-2阳性数较对照组明显降低,差异有统计学意义（P＜0．001）;LC3与Bnip-3呈弱正相关（P＜0．05）,与Bcl-2及Bax不相关;Bnip-3与Bax呈正弱相关（P＜0．05）,与Bcl-2无相关;Bcl-2与Bax无相关。结论糖尿病大鼠脑组织中LC3、Bnip-3及Bax存在过度表达,Bcl-2呈弱表达,表明自噬因子与凋亡因子参与了糖尿病大鼠脑组织损伤的过程,可能是脑组织损伤的机制之一。     

胃癌组织线粒体基因组不稳定与Bcl-2和Bax mRNA表达的关系

目的　探讨胃癌及其癌前病变线粒体DNA微卫星不稳定 (mtMSI)与Bcl 2、BaxmRNA表达的关系。方法　采用PCR SS CP方法检测mtMSI,并采用RT PCR方法检测了Bcl 2和BaxmRNA的表达。结果　胃黏膜肠化 (5 3 3% )、异型增生 (70 % )组织Bcl 2mRNA表达率显著高于浅表性胃炎组(10 % ) (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎 (5 0 % )和胃癌 (30 % )Bcl 2mRNA表达率与浅表胃炎组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;胃黏膜异型增生组织Bcl 2mRNA表达率显著高于胃癌组织 (P <0 0 5 )。异型增生 (6 0 % )组BaxmRNA表达率显著高于浅表胃炎组 (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎(5 0 % )、肠化 (4 6 7% )和胃癌 (33 3% )的BaxmRNA表达率与浅表性胃炎组 (10 % )比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。mtMSI( )组Bcl 2mRNA表达率为 5 0 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ;mtMSI( )组BaxmRNA表达率为 4 4 4 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ,mtMSI( )组Bcl 2和BaxmRNA表达率与mtMSI(- )组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　mtMSI可能在部分胃癌的发生中起重要作用 ;胃癌发生过程中出现的mtMSI与Bcl 2、BaxmRNA的异常表达可能无关     

血管平滑肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达在自发性高血压大鼠颈动脉血管间质胶原重构及逆转中的意义

目的　探讨血管平滑肌细胞及Bcl 2和Bax蛋白表达在自发性高血压大鼠 (SHR)颈动脉血管间质胶原重构及逆转中的意义。方法　选择 16周龄雄性SHR各 12只分别为厄贝沙坦组 (30mg·kg- 1·d- 1 )和非厄贝沙坦组 ,另选同龄雄性Wistar大鼠 12只为正常对照组 ;颈总动脉切片采用HE染色、苦味酸一天狼星红 (PSR)染色、免疫组化法染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUIP缺口末端标记法分别检测颈动脉壁厚 腔径比值、胶原面积百分比、Bcl 2和Bax蛋白表达和血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡率(APOI)。结果　非厄贝沙坦组颈动脉壁厚 腔径比值较正常对照组高 2 5 0 .11%± 15 .6 3% (P <0 .0 1) ,厄贝沙坦组治疗 2 0周后 ,较非厄贝沙坦组下降了 4 3.2 4 %± 8.6 2 % (P <0 .0 1) ;非厄贝沙坦组胶原面积百分比较正常对照组SBP高 2 0 1.6 7%± 16 .73% (P <0 .0 1) ,厄贝沙坦组治疗 2 0周后 ,较非厄贝沙坦组仅仅下降了 17.70 %± 6 .4 5 % (P <0 .0 1) ;非厄贝沙坦组的VSMC率APOI较正常对照组显著增高 ,经药物治疗后下降 ;非厄贝沙坦组的VSMCBcl 2蛋白表达阳性率明显高于正常对照组 ,用厄贝沙坦治疗后 ,VSMCBcl 2阳性率较非厄贝沙坦组明显减少 ;非厄贝沙坦组和正常对照组的VSMCBax蛋白表达阳性率无明显差别 ,用厄贝沙坦治疗后 ,VS     

创伤性脑损伤后脑组织c-fos表达及细胞凋亡

目的研究创伤性脑损伤（TBI）后脑组织c-fos表达及神经细胞凋亡,探讨神经细胞凋亡在脑继发性损害中的作用,及c-fos基因表达与凋亡的关系。方法雄性Wistar大鼠,随机分为假手术对照组和脑创伤后3、12、24、72小时和7天组,采用自由落体撞击致重型颅脑损伤。应用TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组化法观测c-fos的表达。结果TBI后3小时创伤组各组脑组织即出现c-fos表达和神经细胞凋亡,随伤后时间逐渐增强,至伤后72小时达高峰,伤后7天仍有明显的c-fos表达和神经细胞凋亡。其分布区域为脑挫伤区、挫伤周围皮质和海马,累及细胞类型包括神经元和胶质细胞。c-fos表达与神经细胞凋亡在时序空间分布上基本一致,两者呈正相关。结论创伤性脑损伤可引起脑组织明显的c-fos表达和神经细胞凋亡,c-fos表达增加在神经细胞凋亡和修复中可能起重要作用。     

大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的实验研究

探讨创伤性脑损伤后神经细胞凋亡机制及其时序空间分布。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜、流式细胞术、凋亡调节蛋白免疫组织化学方法检测大鼠轻、重度脑损伤不同脑域神经细胞凋亡的动态变化。     

红芪多糖诱导肺腺癌细胞凋亡与Bax/Bcl-2表达的研究

目的:探讨红芪多糖对A549细胞凋亡及Bax/Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:MTT法检测红芪多糖对A549细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测红芪多糖对A549细胞凋亡的影响,RT-PCR法检测红芪多糖对A549细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的影响。结果:不同浓度的红芪多糖对肺腺癌细胞生长均有抑制作用,抑制率与浓度呈正相关;不同浓度红芪多糖均可诱导A549细胞凋亡,并呈现浓度依赖性;不同浓度红芪多糖均可降低Bcl-2蛋白的表达,相应提高Bax蛋白的表达,呈浓度依赖性。结论:红芪多糖可抑制A549细胞生长,并诱导其凋亡,且可能通过调节细胞内Bax和Bcl-2的表达从而诱导A549细胞凋亡。     

+Gz重复暴露大鼠海马细胞凋亡及相关基因bcl-2和p53表达的观察

目的 探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用。方法20只SD大鼠随机分成对照组,＋Gz重复暴露后30min,6h,24h和48h5组,每组4只,对照组大鼠G值为＋1Gz,实验组大鼠在动物离心机上经历了3次＋14Gz/45s(两次间间隔30min)作用,分别于暴露后30min,6h,24h,48h处死大鼠取脑,固定包埋,用原位末端标记法TUNETL检测大鼠海马细胞凋亡及用免疫组化方法检测调亡相关基因bcl-2和p53表达变化,6h组海马CA1区可见部分细胞凋亡和明显的bcl-2,p53表达变化,但在24h组和48h组基本恢复正常。结论 ＋Gz重复暴露可引起大鼠海马细胞凋亡及凋亡相关基因 bcl-2,p53的表达变化,细胞凋亡是反复高Gz暴露致脑操作的机制之一。     

葡多酚对辐射引发胰腺细胞Bcl-2和Bax蛋白异常表达的影响

目的探讨葡多酚（GPC）对亚慢性辐射引发的小鼠胰腺细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白异常表达的抑制作用.方法给口服GPC的小鼠用60Co γ射线进行亚慢性辐照（每周5次,连续4周）,末次照射后第2天处死动物,取胰腺组织用免疫组化染色试剂盒测定Bcl-2和Bax表达水平、透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果GPC保护组Bcl-2表达率为51.1%,较辐射对照组升高;而Bax表达率则低于辐射对照组;细胞超微结构损伤较辐射对照组减轻.各项差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论GPC可抑制亚慢性辐射诱发的小鼠胰腺细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白异常表达,对亚慢性辐射损伤有一定防护作用.     

U-74389G对大鼠脑创伤后细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨脂质过氧化反应与脑损伤后细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系。方法在大鼠液压颅脑损伤模型中,观察其运动神经功能;脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征;伤后bcl-2基因表达情况;比较伤前给予U-74389G对上述指标的影响。结果治疗组的颅脑伤大鼠伤后行走功能、平衡功能障碍程度明显低于未治疗组（P<0.01）。治疗组大鼠不同脑区各个时间点凋亡细胞数均显著减少,DNA电泳未见凋亡带谱。Bcl-2免疫反应阳性细胞主要位于伤侧大脑半球皮质、皮层下白质、海马及齿状回的神经细胞。表达Bcl-2蛋白的神经细胞很少见到凋亡或坏死的形态特征。Bcl-2早期改变出现在伤后6h,比细胞凋亡出现早。注射U-74389G能阻止bcl-2蛋白下调。结论U-74389G能阻止大鼠液压脑损伤后bcl-2基因表达下调,抑制脑创伤所致细胞凋亡,具有明显的神经保护作用。     

利多卡因对大鼠缺血脑损伤后Bax蛋白表达及细胞凋亡的影响

 目的 探讨利多卡因对缺血脑损伤后Bax蛋白表达和细胞凋亡的影响,为临床中复合病症选择用药积累实验性资料.方法 制作大鼠脑栓塞动物模型.分组手术后24 h开颅取脑,分离右侧海马,做HE染色、免疫组化染色测定Bax蛋白的表达、TUNEL法检测细胞凋亡.结果 模型组与对照组相比,凋亡阳性细胞数明显增多, Bax蛋白阳性细胞的计数明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).利多卡因处理组与模型组比较,凋亡阳性细胞数及Bax蛋白阳性细胞数明显降低,两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利多卡因降低脑缺血损伤后神经细胞Bax蛋白的表达(P＜0.05);抑制脑缺血损伤后神经细胞的凋亡(P＜0.05).     

前列腺癌中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达及意义

采用免疫组化染色方法检测４０例前列腺癌、２２例前列腺增生症（ＢＰＨ）及１４例正常前列腺（ＮＰ）组织中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂｃｌ－２及Ｂａｘ的表达。结果表明：①Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂａｘ表达于所有被检测的组织中；Ｂｃｌ－２表达于７５．０％Ｐｃａ组织、５４．５％ＢＰＨ组织、３５．７％ＮＰ组。Ｆａｓ在Ｐｃａ中表达强度最弱（Ｐ〈０．０５）。Ｐｃａ与ＢＰＨ及ＮＰ组织比较，Ｂｃｌ－２表达差异有显著性意义（Ｐ〈０．