术中美蓝染色及抗细胞角蛋白20检测淋巴结及其微转移在直肠癌患者中的临床应用

目的探讨术中经直肠上动脉注射美蓝行直肠系膜及淋巴结染色检测淋巴结及其微转移方法的临床意义。方法对30例行根治性手术治疗的直肠癌患者,术中经直肠上动脉插管注射美蓝6ml(美蓝染色组),使直肠系膜及各组淋巴结染色以统计淋巴结数目,同时行抗细胞角蛋白20(CK20)免疫组织化学(免疫组化)染色,检测其微转移情况;并与同期32例行直肠癌根治术患者术中常规手检法(常规手检组)检出的淋巴结数目进行对比。结果美蓝染色组肠旁淋巴结、肠系膜淋巴结、肠系膜根部淋巴结检出数目均明显多于常规手检组(P均=0.000)。美蓝染色组淋巴结常规病理检查阴性者,经CK20免疫组化染色,其转移阳性率增加17.7%;14例DukesB期患者(46.7%)经淋巴结CK20免疫组化染色需重新确定为DukesC期,11例患者(36.7%)出现跳跃淋巴结微转移现象。结论术中经直肠上动脉注射美蓝行淋巴结染色能提高淋巴结检出率。对常规病理检查阴性的淋巴结行CK20免疫组化染色检查其微转移灶,能提高淋巴结阳性检出率,使病理分期更准确。     

逆转录聚合酶链反应扩增细胞角蛋白20 mRNA诊断胃癌淋巴结微转移的研究

目的探讨逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增细胞角蛋白（CK）20 mRNA法检测胃癌淋巴结微转移的可行性。方法用RT-PCR方法扩增CK20 mRNA,检测胃癌患者的淋巴结及胃溃疡患者的淋巴结,与常规病理切片法检测淋巴结微转移进行比较,并分析与病理组织学类型的关系。结果受检132枚淋巴结中54枚CK20 mRNA表达阳性,常规病理结果38枚阳性,微转移检出率为17%,胃溃疡患者16枚淋巴结均阴性;6例黏液腺癌10枚淋巴结,病理结果8枚有转移,而无1枚CK20 mRNA表达。结论扩增CK20 mRNA的RT-PCR法是检测胃癌病人淋巴结微转移敏感而较特异的方法,其假阴性结果与病理组织学类型有关。     

结直肠癌前哨淋巴结体外标本定位及其微转移免疫组化研究

目的探讨结直肠癌前哨淋巴结（SLN）体外定位技术方法及其可行性、准确性和临床价值。方法选择2003年3月至2003年10月间中山大学肿瘤防治中心腹科住院行根治手术的结直肠癌患者60例,62个肿瘤（2例患者为多原发）,进行体外SLN定位。标本离体后尽早进行异硫蓝SLN定位,传统病理检查阴性的SLN进行细胞角蛋白免疫组化检查。结果62例肿瘤成功检出SLN的59例,检出率95．2％。59例患者总共获得并检测1114枚淋巴结,平均每人18．9（4～46）枚。其中SLN157枚（14．9％）,平均每人2．7（1～9）枚。SLN敏感性39．1％（9／23）,假阴性率23．7％（14／59）,准确率76．3％（45／59）。50例SLN阴性的中有12例（24％）细胞角蛋白免疫组化检测阳性。36例HE和细胞角蛋白免疫组化检查全阴性者中4例（11．1％）SLN发现微转移灶。14例仅非SLN阳性中8例SLN发现微转移灶。结论结直肠癌异硫蓝SLN体外定位活检技术是可行的,结合免疫组化检测微转移可以提高术后分期,可以提高送检淋巴结个数,结合免疫组化技术,可以减少淋巴结转移漏诊发生率。但该方法假阴性率较高,不能完全取代常规淋巴结病理检查。     

结直肠癌淋巴结微转移的临床研究

目的 探讨结直肠前哨淋巴结(SLN)的定位方法及检测淋巴结微转移的有效方法,并分析其临床意义.方法 对60例结直肠癌患者采用亚甲蓝染色法淋巴结示踪,寻找染色的SLN,切除后的SLN行HE染色和细胞角蛋白CK20免疫组化检测;并与前期直接行淋巴结清扫的60例患者对比.结果 亚甲蓝组中可识别SLN者54例(90.0%),高于前期直接清扫组的24例(40.0%)(P＜0.05);54例中行常规HE染色检出36例阳性,18例阴性.18例SLN阴性者行免疫组化检测,6例(33.3%)检出有微转移灶.结论 联合应用亚甲蓝和细胞角蛋白CK20进行结直肠癌SLN定位优于单用其中之一种方法;免疫组化是检测淋巴结微转移的敏感方法.     

细胞角蛋白与泌尿系肿瘤微转移检测

肿瘤的浸润和转移是恶性肿瘤的重要特征，也是肿瘤患者死亡的主要原因，因此，寻找一种敏感特性的肿瘤标志物以早期发现肿瘤，对肿瘤的治疗和预后有着重要的临床意义。细胞角蛋白（cytokeration,CK)就是近年来研究较多的一类肿瘤标志物。本文主要就细胞角蛋白18，19，20在泌尿系肿瘤中的临床应用价值作一综述。     

大肠癌患者淋巴结微转移与肿瘤复发转移和预后

淋巴转移是人肠癌术后复发的主要原因，早期判断大肠癌有无淋巴结受累，尤其是对常规病理无法检出的Dukes B期大肠癌是否存在淋巴结微转移非常重要。本组以细胞角蛋白20（cylokeratin 20,CK20）为肿瘤微转移标志，应用免疫组化技术检测大肠癌淋巴结微转移（lymph node micrometastases,LNMM），并探讨其临床意义。     

检测细胞角蛋白19和20对结直肠癌微转移的诊断意义

目的探讨检测细胞角蛋白19（CK19）和CK20的表达对结直肠癌微转移的诊断意义。方法采用RT-PCR方法检测44例结直肠癌患者（结直肠癌组）及18例非恶性病变腹部手术患者（良性病变组）门静脉血和外周血CK19和CK20的表达。结果良性病变组患者门静脉血和外周血均无CK19或CK20阳性表达。结直肠癌组患者外周血和门静脉血中CK19和（或）CK20均阳性表达者34例（77．3％）。与良性病变组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组外周血CK19和CK20的阳性表达率分别为36．4％和52．3％．门静脉血则分别为59．1％和72．7％,高于外周血的阳性表达率（P〈0．05）：Ⅲ期结直肠癌患者CK19和（或）CK20的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）。外周血CK19和（或）CK20阳性表达者术后转移或复发率61．5％,明显高于仅在门静脉血中CK19和（或）CK20阳性者的25．0％（P〈0．05）。结论外周血和门静脉血中CK19和CK20的RT—PCR检测是判断结直肠癌患者有无血行微转移的敏感和特异性诊断方法之一。     

细胞角蛋白20在Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌淋巴结微转移患者中的表达及意义

目的通过免疫组化方法检测Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌患者细胞角蛋白20（CK20）的表达对淋巴结微转移及预后的影响。 方法选择2010年1月至2011年12月中山市人民医院收治的137例Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌患者,获取根治性手术切除的淋巴结组织学标本945枚,采用免疫组织化学SP法和单克隆抗体检测淋巴结标本中CK20表达情况,结合临床和随访资料进行生存分析。 结果（1）10例（7.3%）结直肠癌的15枚（1.6%）淋巴结出现微转移,CK20表达阳性。（2）淋巴结CK20的表达情况与Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、手术方式、原发灶CEA表达情况、组织学类型、有无脉管神经浸润无相关性。（3）5年内复发转移的患者淋巴结CK20的阳性率为16.7%（4/24）,远高于未发生复发转移患者的5.3%（6/113）,但差异无统计学意义（χ²=2.282,P=0.131）。生存分析发现,CK20表达阴性组5年生存率高于表达阳性组（84.3% vs 60.0%,P=0.025）。（4）COX回归分析结果显示性别（P=0.359）、年龄（P=0.917）、肿瘤大小（P=0.547）、组织学类型（P=0.106）、原发灶CEA表达情况（P=0.069）、肿瘤位置（P=0.760）、分期（P=0.069）、手术方式（P=0.350）与Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌患者预后无明显的相关性;而CK20表达与患者预后密切相关（P=0.033）,存在淋巴结微转移的患者死亡的风险是无转移的3.224倍（95% CI=1.100~9.451）。 结论CK20检测结直肠癌淋巴结微转移可以改善结直肠癌患者的临床分期,影响治疗方案,且与患者预后相关。     

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目的 探讨大肠癌区淋巴结微转移的检测和临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术,扩增角蛋白１９（Ｋ１９）,１２例病人大肠癌肿瘤组织和９５个区域淋巴结进行检测。结果 １２例病人大肠癌组织均有Ｋ１９ｍＲＮＡ表达,良性病人的２１个淋巴结均无表达。大肠癌区域淋巴结１１个经病理检查有转移,其Ｋ１９ｍＲＮＡ表达阳性。８４个病理检查未发现转移的淋巴结中有８个Ｋ１９ｍＲＮＡ表达阳性。结论 Ｋ１９ｍ     

胃癌淋巴结微转移的临床意义

目的 探讨淋巴结微转移与胃癌生物学行为及预后的关系。方法 采用免疫组织化学方法,用细胞角蛋白单抗ＭＮＦ．１１６检测淋巴结微转移。结果 ６０例患者淋巴结微转移的阳性率为５８．３％,微转移与肿瘤浸润深度及淋巴管侵犯密切相关（Ｐ〈０．０５）。临床病理分期Ⅱ、Ⅲ期患者微转移的阳性率明显高于Ⅰ期（Ｐ〈０．０５）。在Ⅰ期,阳性组的５年生存率明显低于阴性组（Ｐ〈０．０５）。多变量分析表明淋巴结微转移是独立的预后     

462例中下段直肠癌淋巴转移规律与淋巴清扫范围的分析

目的 探讨中下段直肠癌的淋巴转移规律和淋巴清扫范围。方法 对1990－1999年行传统直肠癌根治术的373例和行传统直肠癌根治术加盆腔侧方淋巴清扫术（简称侧方清扫术）的89例中下段直肠癌患者进行回顾性分析。结果 全组淋巴转移率为41．8％,患者年龄、癌灶浸润深度、大体分型、癌灶大小是影响淋巴转移率的重要因素（P＜0．05）。89例侧方清扫术的盆腔侧方淋巴转移率为15．7％,其中85．7％位于癌灶同侧。有盆腔侧方淋巴结转移者均为浸润深度T3、T4者;癌灶＞3cm、溃疡型或浸润型、年龄＜60岁者盆腔侧方淋巴结转移较高。侧方清扫术组的盆腔复发率为5．6％,明显低于传统直肠癌根治术组的17．7％（P＜0．05）;侧方清扫术组和传统直肠癌根治术组的5年生存率分别为46．7％和47．9％（P＞0．05）。结论 应提高对中下段直肠癌淋巴转移规律的认识,对怀疑或证实有淋巴结转移、癌灶侵犯浆膜或穿透肠壁、癌灶＞3cm、溃疡型或浸润型、年龄＜60岁者建议行侧方清扫术。     

颈部超声评价胸段食管癌颈部淋巴结转移

目的　探讨提高胸段食管癌颈部淋巴结转移诊断正确率的方法。　方法　 42例胸段食管鳞癌患者 ,术前行双侧颈部超声检查 ,转移淋巴结判定标准包括淋巴结的大小 (长径≥ 1 0mm)和形态 (短径 /长径 >0 5)。　结果　术前超声发现颈部淋巴结肿大 (短径≥ 5mm) 1 6例 ,触诊可扪及 5例。其中根据超声检查结果 9例判定为转移淋巴结 (cM1 LN) ,触诊可扪及 4例。本组 5例无法行肿瘤根治性切除者行非手术治疗 ;37例手术切除肿瘤的患者中 ,术后病理证实 6例颈部淋巴结转移(pM1 LN) ,其中 4例肿瘤侵犯食管外膜 (pT3)、2例术中发现肿瘤外侵 (pT4 ) ,并且均同时伴纵隔淋巴结转移 ,其中 4例还伴有腹腔淋巴结转移 ;1 1例pT1 、pT2 患者中无一例发现颈部淋巴结转移 (P =0 0 2 0 )。根据病理及临床治疗结果 ,超声判定颈部淋巴结转移的准确率显著高于触诊 (40 / 4 2 ,95 %比34/ 4 2 ,81 % ,P =0 0 4 3) ,敏感性亦明显高于触诊 (82 %比 36 % ,P =0 0 81 )。全组病例中 ,有 5例 (5/ 39,1 3 % )因颈部超声检查结果而改变治疗方式。　结论　超声检查判断颈部淋巴结转移的敏感性及准确率明显高于体检触诊 ,有助于提高食管癌术前分期的准确性     

甲状腺乳头状癌Ⅵ区淋巴结的归属

目的 评价临床颈侧区淋巴结阴性(cN0)的甲状腺乳头状癌(PTC)患者行选择性颈侧淋巴结清扫的价值。方法 通过分析139例PTC患者(初治时为cN0)的复发和(或)转移部位(甲状腺,Ⅵ区,颈侧区,远处),把Ⅵ区淋巴结转移归入原发灶复发,明确与颈侧区淋巴结转移的区分,逆向分析评价cN0 PTC患者选择性颈侧清扫的临床价值。结果 PTC患者甲状腺复发83％(73／88),Ⅵ区转移76％(67／88),17例为已作选择性颈侧淋巴结清扫,占65％(17／26)。颈侧区淋巴结转移为17％(17／98),其中5例发生于已作选择性颈侧淋巴结清扫,占19％(5／26)。结论 支持对cN0 PTC患者行患侧腺叶切除加Ⅵ区清扫,不支持颈侧区(Ⅱ-V)的选择性颈侧淋巴结清扫。而对初治时为cN0,但术前超声和CT为N 的患者,则支持行颈侧区淋巴结的选择性清扫。在甲状腺癌诊治中,CT检查是必要的。     

中国胰十二指肠切除精准淋巴结清扫范围与注意事项

胰腺癌为高致死率的消化道恶性肿瘤,早期即可发生区域淋巴结和远处转移,5年生存率不到6%,其首要转移途径为经淋巴结转移。淋巴结转移是导致胰腺癌患者极差预后的重要因素之一,如何有效的处理胰腺癌淋巴结转移已成为胰腺外科的热点与难点。目前标准淋巴结清扫已得到多数学者的认可,但是否行扩大淋巴结清扫以及清扫范围仍存较大争议。由于尚缺乏统一标准且各中心执行标准不一致,故目前尚无确切证据表明扩大淋巴结清扫的价值。我们团队总结回顾过去13年我中心行扩大淋巴结清扫的胰腺癌患者相关数据,我们认为扩大淋巴结清扫可清除可能残留的肿瘤组织和已有转移的阳性淋巴结,减少复发,延缓病情进展,延长患者总体生存时间。     

DNA修复基因XRCC1多态与食管癌TNM分期及区域淋巴结转移的相关性研究

目的 研究DNA修复基因XRCC1 Arg194Trp和Arg399Gln多态与食管鳞状细胞癌临床病理TNM分期及区域淋巴结转移的相关性,探讨其对食管癌临床表型的影响.方法 以PCR和PCR-RFLP方法分析了182例食管癌病人的上述基因多态,比较不同TNM分期及区域淋巴结转移的食管癌病人各基因型频率分布的差异.结果 食管癌Ⅱb～Ⅳ期及有区域淋巴结转移病人XRCC1Arg194Trp基因型及Arg399Gln基因型频率与0～Ⅱa期及无区域淋巴结转移病人虽有差别,但无统计学意义.食管癌区域淋巴结转移病人携带XRCC1194Arg/Trp杂合型和399Arg/Arg野生型基因型频率为32.3%,显著高于携带XRCC1194Arg/Arg基因型的20.0%（P=0.01）.结论 DNA修复基因XRCC1多态中携带194变异型基因型和399野生型基因型的病人区域淋巴结转移率较高,病变进展较快,因此与食管癌TNM分期和区域淋巴结转移存在相关型,两者对食管癌病人的预后有影响.     

中下段直肠癌淋巴结微转移的临床研究

目的探讨淋巴结微转移与中下段直肠癌生物学行为的关系,以及淋巴结微转移对淋巴结分期的影响。方法应用CK-20免疫组化技术对56例中下段直肠癌共计661枚淋巴结微转移进行检测。结果20例(36%)67枚(10%)淋巴结检出微转移。肿瘤直径≥5 cm的中下段直肠癌淋巴结微转移检出率为61%(11/18),而肿瘤直径<5 cm的淋巴结微转移检出率仅为24%(9/38) (x~2=7.452,P=0.006)。高分化和中分化直肠癌淋巴结微转移检出率分别为1/5和24%(9/37),明显低于低分化直肠癌的71%(10/14)(x~2=10.406,P=0.005)。Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期中下段直肠癌淋巴结微转移检出率分别为0、23%(5/22)和52%(15/29)(x~2=7.361,P=0.022)。中下段直肠癌淋巴结微转移检出率与性别、年龄、肿瘤浸润肠壁周径、Ming分型以及浸润深度无关(x~2=1.701,P= 0.192;x~2=0.271,P=0.602;x~2=1.748,P=0.626;x~2=0.278,P=0.870;x~2=1.840,P=0.399)。20例检出淋巴结微转移者中10例TNM分期提高:Ⅰ→ⅢA 3例,Ⅰ→ⅢC 2例,ⅡA→ⅢB 3例,ⅢA→ⅢC 2例。结论CK免疫组化技术可以显著提高中下段直肠癌淋巴结转移的检出率,有助于更准确地进行临床病理分期。淋巴结微转移与肿瘤直径、肿瘤分化程度和分期密切相关。     

中低位直肠癌系膜内淋巴结微转移的临床病理学研究

目的 探讨中低位直肠癌全直肠系膜切除术（TME）后系膜内淋巴结微转移及其与临床病理因素的相关性。方法 31例中低位直肠癌患者接受了TME手术,应用脂肪清除技术获取全部淋巴结。将HE染色无转移的淋巴结标本进一步行抗CK抗体免疫组化染色,检测淋巴结内肿瘤微转移情况,并分析其与临床病理因素之间的相关性。结果 31例标本检出1007枚淋巴结。常规病理发现105枚淋巴结转移,直径为（5．5±3．1）mm;未见癌转移的淋巴结其直径为（2．8±1．5）mm,两组直径差异显著（P〈0．05）。在HE染色无转移的902枚淋巴结中,26枚发现微转移,其直径为（3．3±1．2）nq／n,显著小于常规病理有转移的淋巴结[（5．5±3．1）mm,P〈0．05],与常规病理无转移淋巴结直径差异不明显。有微转移的淋巴结其直径大部分〈5mm（88．5％）。31例患者中14例（38．7％）发现微转移;HE染色淋巴结无转移病例中微转移率为14．3％（2／14）。直肠系膜内淋巴结微转移与病理分期、血清癌胚抗原水平及肿瘤分化程度相关（P〈0．05）。结论 脂肪清除技术综合微转移的检测方法可使TME标本得到更多淋巴结,并能更加准确地判断淋巴结转移情况,有助于对直肠癌患者进行更加准确的临床分期并指导个体化治疗。     

盆腔侧方淋巴结转移对低位直肠癌预后的影响

目的 探讨盆腔侧方淋巴结转移对低位直肠癌预后的影响.方法 对1994年至2005年行根治性切除联合盆腔侧方淋巴结清扫的176例低位直肠癌患者的资料进行回顾性分析.探讨低位直肠癌患者盆腔侧方淋巴结转移对其预后的影响.结果 全组盆腔侧方淋巴结转移33例(18.8%),其中髂内及直肠中动脉根部淋巴结转移占51.5%,闭孔淋巴结转移占39.4%.年龄≤40岁、浸润型癌、T3-4期、上方淋巴结转移患者的盆腔侧方淋巴结转移率较高(P＜0.05).全组5年生存率为64.1%,TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者5年生存率分别为94.1%、79.1%、42.1%.癌灶大小、浸润深度、上方淋巴结转移、盆腔侧方淋巴结转移是影响低位直肠癌患者预后的重要因素(P＜0.05).盆腔侧方淋巴结阴性患者5年生存率为73.6%,而侧方淋巴结转移患者为21.4%,两组差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 盆腔侧方淋巴结转移是影响低位直肠癌预后的重要因素.