应用FQ-PCR及ELISA技术诊断孕妇巨细胞病毒感染的研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及ELISA检测孕妇血清的CMV-DNA、抗CMV-IgM、抗CMV-IgG在诊断CMV感染中的意义.方法用FQ-PCR和EISA同时检测168例孕妇血清标本的CMV-DNA、抗CMV-IgM、抗CMV-IgG.结果CMV-DNA阳性57例(33.9%),CMV-IgM阳性11例(6.6%),CMV-IgG阳性152例(90.5%),三种检测结果间比较有显著性差异(P＜0.01).结论FQ-PCR检测CMV-DNA灵敏度高,可作为CMV感染的筛选指标.ELISA检测抗CMV-IgM的灵敏度低,仍是CMV现症感染的指标.因此,联合FQ-PCR、ELISA测CMV-DNA、抗CMV-IgM及抗CMV-IgG对筛选CMV感染及判断是否现症感染意义较大.     

巨细胞病毒感染与胆道闭锁发病的关系

目的研究胆道闭锁患儿巨细胞病毒的感染率,探讨巨细胞病毒感染与胆道闭锁发病之间的关系.方法对15例经过手术或者胆道造影等证实为胆道闭锁的患儿进行血清学的CMV-IgM以及CMV-IgG检测;同时应用实时荧光定量PCR法对此15例患儿的肝脏活检标本以及9例尸检婴儿的肝脏组织进行CMV DNA检测,检测巨细胞病毒的感染率.结果15例胆道闭锁患儿中,应用ELISA法对血液标本进行检测,仅CMV-IgG阳性3例(20%),CMV-IgG及CMV-IgM均阳性者7例(46.7%);应用实时荧光PCR法对肝脏活检组织进行检测,CMV DNA阳性病例6例(40%),其中CMV-IgM(ELISA法)与CMV DNA(RT-PCR法)均阳性4例,均阴性6例.在9例同期尸检婴儿肝脏组织中,1例CMV DNA阳性,阳性率为11.1%,明显低于胆道闭锁患儿的巨细胞病毒感染率.结论巨细胞病毒感染可能在部分胆道闭锁的发病机制中起重要作用.     

联合检测CMV-IgM及CMV-DNA对婴幼儿巨细胞病毒肝炎的诊断价值

目的 探讨联合检测巨细胞病毒(CMV)-IgM及CMV-DNA对婴幼儿巨细胞病毒肝炎的诊断意义.方法 采用化学发光法检测聊城市人民医院122例确诊巨细胞病毒肝炎患儿(病例组)的血清CMV-IgM,同时用荧光探针PCR法检测患儿血清与尿液的CMV-DNA;另选择该院同期186例无感染症状健康儿童为对照组.分析各组肝炎患儿CMV-IgM和CMV-DNA的阳性率差异,并通过受试者工作特征(ROC)曲线比较单独及联合检测CMV-IgM、CMV-DNA在诊断婴幼儿巨细胞病毒肝炎中的价值.结果 病例组CMV-IgM和CMV-DNA的阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).根据年龄分组,1d至6个月组CMV-IgM及CMV-DNA联合检测的总阳性率最高;在以临床特征分组中,黄疸组CMV-IgM及CMV-DNA联合检测的总阳性率最高,以上差异均有统计学意义(P＜0.05).经ROC曲线分析病例组CMV-IgM及CMV-DNA联合检测的曲线下面积最大,灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均最大,诊断价值最高.结论 联合检测CMV-IgM、CMV-DNA比单独检测对婴幼儿巨细胞病毒肝炎有更好的诊断价值.     

276例产妇及新生儿巨细胞病毒感染的分析

用酶联免疫吸附试验和免疫荧光试验对276例产妇及新生儿脐血巨细胞病毒(CMV)特异性抗体进行了检测。结果表明,产妇血清 CMV-IgG 阳性率为98.91%,CMV-IgM 为11.96%,CMV-IgA 为15.94%。脐血 CMV-IgM、CMV-IgA 阳性率分别为3.99%和6.52%。产妇 CMV 活动性感染与新生儿体重、身长及早产的发生有明显关     

尿巨细胞病毒定量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染诊治中的应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法在婴幼儿巨细胞病毒感染诊治中的应用价值。方法以住院的130例巨细胞病毒感染患儿为观察组,同期80例正常体检婴幼儿为对照组,检测尿CMV-DNA、血细胞pp65抗原、血清CMV-IgM,同时观察临床表现。结果①210例标本FQ-PCR、CMV-IgM法的阳性符合率为92.0%,FQ-PCR、CMV-IgM法的阴性符合率为64.9%。FQ-PCR、pp65、血清CMV-IgM方法检测的灵敏性分别是93.8%,90.8%,80.0%,特异性分别为97.5%,96.3%,60.0%,与其他两种方法比较,FQ-PCR法灵敏性和特异性高(均P<0.05);②对照组婴幼儿尿液标本中也存在尿CMV-DNA阳性;③观察组患儿治疗后2周复查,130例患儿FQ-PCR、pp65法的阳性符合率为94.7%,FQ-PCR、CMV-IgM法的阳性符合率为81.8%。结论FQ-PCR法检测尿CMV-DNA可广泛用于CMV感染诊治过程的动态观察。     

新生儿高胆红素血症与巨细胞病毒感染的关系

目的 探讨巨细胞病毒(CMV)感染在新生儿高胆红素血症发病机制中的意义.方法 采用ELISA法和实时荧光PCR法分别检测315例高胆红素血症新生儿和152名健康新生儿血清CMV-IgM和尿液PCR-CMV-DNA,并用常规方法 测定巨细胞病毒感染新生儿及健康新生儿肝功能状况.结果 高胆红素血症新生儿血清CMV-IgM及尿液CMV-DNA阳性率较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).CMV感染阳性的高胆红素血症患儿与CMV感染阴性的高胆红素血症患儿黄疸水平的差异无统计学意义(P>0.05),但前者消退时间显著长于后者,且肝功能存在明显的受损情况,差异有高度统计学意义(P<0.01).结论 巨细胞病毒感染是新生儿高胆红素血症的重要病因,可引起肝功能损害及黄疸消退延迟.     

病理性黄疸新生儿巨细胞病毒感染的临床研究

目的 分析病理性黄疸患儿巨细胞病毒(CMV)感染情况,探讨母乳CMV-DNA检测的临床意义。方法 选取庆阳市人民医院住院的病理性黄疸新生儿300例,用FQ-PCR方法检测患儿血浆、外周血单个核细胞(PBMC)、尿液和母乳的CMV-DNA,ELISA法检测患儿血清CMV-IgM和IgG,分析CMV感染患儿的临床数据。结果 300例病理性黄疸新生儿中,CMV感染的阳性率为13.33%(40例),其中患儿血清CMV-IgM阳性率为4.33%(13例),CMV-IgG阳性率为80.85%(228例)。母乳CMV-DNA阳性率为46.00%(138例),患儿血浆CMV-DNA阳性率为4.00%(12例),PBMC CMV-DNA阳性率为6.67%(20例),患儿尿液CMV-DNA阳性率为10.00%(30例)。患儿尿液CMV-DNA的阳性率与乳汁CMV-DNA的阳性率有显著相关性(P<0.01)。40例CMV感染患儿中,婴儿肝炎综合症为13例(32.50%),新生儿肺炎12例(30.00%),缺血缺氧性脑病6例(15.00%),听力损伤5例(12.50%),腹股沟斜疝2例(5.00%)。结论 CMV感染是新生儿病理性黄疸主要原因之一;检测产妇母乳中CMV-DNA对母乳喂养具有临床指导意义,有助于预防CMV感染。     

自然流产妇女巨细胞病毒感染的调查

采用酶联免疫吸附法(ELISA),对早孕自然流产的255例妇女血清进行了巨细胞病毒(CMV)IgG,IgM的检测,并和正常妊娠妇女作比较。结果:显示流产组CMV-IgG、CMV-IgM、CMV-IgG及CMV-IgM两项均阳性的阳性率分别为84.7%、14.51%、13.73%。其中CMV-IgM、CMV-IgG及CMV-IgM两项均阳性的阳性率与正常妊娠妇女相比,差异有显著性(P<0.01),说明CMV可通过胎盘传染给胎儿,引起流产。     

荧光定量PCR技术在白血病化疗后患者巨细胞病毒感染检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR检测在白血病化疗后患者巨细胞病毒感染中的诊断价值。方法对50例白血病化疗后患者,取静脉血用FQ-PCR检测CMV-DNA,ELISA法检测CMV-IgM。结果50例标本中19例CMV-DNA阳性。阳性率为38%。阳性标本CMV-DNA在1.30×10^3～4.21×10^5拷贝/ml之间,平均6.43×10^4拷贝/ml。CMV-IgM阳性12例,阳性率为24%。2种方法阳性检出率差异有统计学意义（χ^2=8.01,P〈0.01）。结论在连续动态CMV检测多种指标时,结合DNA检测具有更高的临床应用价值,尤其是FQ-PCR方法可快速、灵敏、特异、定量地检测CMV,在CMV感染的诊断、治疗方案选择和疗效观察方面必将有广泛的应用前景。     

60例儿童巨细胞病毒感染相关性肺炎临床分析

目的 分析儿童巨细胞病毒（CMV）感染相关性肺炎临床特点、诊断方法及治疗,提高临床医生对此病的认识。方法 回顾性分析2017年1~12月中国科技大学附属第一医院儿科确诊的60例巨细胞病毒感染相关性肺炎患儿的临床资料,统计分析其一般资料、临床表现、实验室检查及治疗效果。结果 60例患儿中,年龄<6月的患儿46例（71.81%）;临床表现主要有咳嗽52例（46.43%）、喘息30例（26.32%）、发热15例（13.16%）,同时有2个及以上症状的患儿50例（83.33%）;55例患儿（91.67%）肺部听诊可闻及啰音;所有患儿血清CMV-IgG/IgM均为阳性,CMV-DNA的阳性率血液中为35.00%、尿液中为33.33%、母亲乳汁中为71.88%;存在肝功能损害的患儿18例（30.00%）,头颅MRI及脑干听觉诱发电位检查（BAEP）异常患儿34例,占56.67%;所有患儿均接受更昔洛韦正规治疗,治疗总有效率达95.00%。结论 儿童巨细胞病毒感染相关性肺炎临床症状以咳嗽、喘息、发热为主,血清学（CMV-IgG/IgM）及病毒学（CMV-DNA）检查可帮助确诊,对诊断明确者还需完善头颅MRI及BAEP相关检查,更昔洛韦治疗疗效肯定。     

巨细胞病毒宫内感染的初步研究

目的：寻找巨细胞病毒宫内感染产前诊断的途径。方法：应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对２４例妊娠患有巨细胞病毒（ＣＭＶ）活动性感染的产妇，分娩的新生儿脐血抗ＣＭＶ－ＩｇＭ型抗体和羊水及尿液ＣＭＶ－ＤＮＡ进行检测。结果：２４例ＣＭＶ活动性感染孕妇中有１４例发生宫内感染，宫内感染率５８．３％，与对照组比较有高度显著性差异。宫内感染儿羊水ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率７８．６％，显著高于脐血ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率．孕妇尿液排毒状态与宫内感染的发生无明显关系。结论：宜将ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇视为有宫内感染潜在危险的对象；羊水ＰＣＲ－ＣＭＶ检测可望成为产前诊断ＣＭＶ宫内感染的有效手段。     

22例婴儿巨细胞病毒感染的临床分析

目的 探讨婴儿巨细胞病毒感染的临床特点、检测手段及治疗。方法 对22例经尿CMV－DNA PCR及血清CMV－IgM ELISA测定确诊为巨细胞病毒感染的婴儿患者的临床资料进行分析。结果 尿CMV－DNA PCR阳性14例，血清CMV－IgM ELISA阳性22例，两者均阳性9例，患儿母血清CMV－IgM阳性20例。肝肿大19例，黄疸15例，脾肿大10例，咳嗽、气促8例，抽搐1例，小头畸形1例。所有的病例均应用更昔洛韦治疗。结论 巨细胞病毒感染以肝脏损害最多见，CMV－感染的母亲是小儿CNV感染的重要来源。用PCR检测尿中CMV－DNA和用EUSA检测血清中CMV－IgM是诊断CMV感染的常用方法。更昔洛韦治疗CMV感染效果好。     

两种蛋白变性剂检测巨细胞病毒IgG抗体亲和指数对孕期原发感染诊断的探讨

目的探讨测定巨细胞病毒IgG抗体(CMV-IgG)亲和指数(AI)的方法对诊断孕期巨细胞病毒(CMV)原发性感染的可行性.方法以35mmol/L二乙胺和8mol/L脲素作为温和蛋白变性剂,采用间接ELISA方法检测CMV-IgG AI.结果检测111份血清标本,其中68例为CMV既往感染,43例为CMV近期原发或近期再感染.CMV-IgM阳性、CMV-IgG AI＜45%作为近期原发感染;AI＞55%作为既往感染.脲素和二乙胺方法的敏感性分别为50%和64.3%,特异性分别为97.1%、91.2%.结论用35mmol/L二乙胺洗脱一次10min的简易快速的方法检测CMV-IgGAI是可行的.CMV-IgG AI和CMV-Ig M联合检测可能是目前用血清学方法区分近期原发与既往感染的较好方法之一.     

小儿喘息性疾病与巨细胞病毒抗体关系研究

目的了解小儿喘息性疾病与巨细胞病毒(CMV)感染之间有无相关性。方法对194例小儿喘息性疾病的住院患儿在发作期间采用固相酶联免疫吸附试验方法检测呼吸道合胞病毒-Ag、MP-DNA、CMV-IgM和痰CMV-DNA。结果单项CMV-IgM阳性率为34.02%,其中93.94%的患者痰CMV-DNA亦阳性,与对照组CMV-IgM阳性率为5.49%相比,差异有统计学意义(χ2=26.94,P<0.01)。结论 CMV是引起本地区小儿喘息性疾病的病原微生物之一,防治CMV感染对控制小儿喘息性疾病的发病率有一定意义。     

孕妇的HBV-DNA含量与分娩方式对其新生儿2h HBV感染的分析

目的探讨孕妇的HBV-DNA含量与分娩方式对其新生儿出生后2hHBV感染的关系。方法以PCR荧光定量法检测孕妇及新生儿血清HBV—DNA定量,采用电化学免疫发光法检测新生儿血HBsAg定量。结果 1075例HBsAg阳性的孕妇中610例HBV-DNA阳性的孕妇,剖宫产组501例,阴道分娩组109例,其新生儿生后2h内静脉血HBsAg和（或）HBV-DNA阳性率分别为7.19%（36/501）,11.01%（12/109）,组间阳性率差异有统计学意义。另465例HBV-DNA阴性的孕妇,剖宫产组368例,阴道分娩组97例,其新生儿生后2h内静脉血HBsAg和（或）HBV—DNA阳性率分别为2.17%（8/368）,4.12%（4/97）,组间阳性率差异无统计学意义。结论孕妇所产新生儿生后2h内HBV感染与孕妇的HBV-DNA含量及分娩方式有关,孕妇HBV-DNA阳性其阴道分娩较剖宫产的感染率高;孕妇HBV-DNA阴性其阴道分娩与剖宫产无明显差异。     

巨细胞病毒核酸和抗体检测在不同特征患者中的一致性分析及临床指导意义

目的: 探讨巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)脱氧核糖核酸(deoxyribo nucleic acid,DNA)检测和免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)抗体检测在不同特征患者中的一致性及对临床工作的指导价值。方法: 2014年12月至2019年11月期间,北京大学国际医院检验科同时进行CMV-IgM抗体和CMV-DNA检测的患者共计507例,收集患者性别、年龄一般资料,同时收集患者的诊断、用药及转归等临床资料。根据患者CMV-DNA阴性或阳性、CMV-IgM抗体阴性或阳性,以及年龄、性别和是否接受免疫抑制治疗进行分组和分层,组别之间率的比较采用Pearson卡方检验或Fisher精确经验,P<0.05为差异有统计学意义。结果: 507例送检患者中,CMV-DNA阳性患者55例(10.85%),CMV-IgM抗体阳性患者74例(14.60%),CMV-DNA和CMV-IgM抗体同时阳性患者20例(3.94%)。55例CMV-DNA阳性患者中,男性37例(67.27%),60岁以上者25例(45.45%),接受免疫抑制治疗者33例(60%),均高于CMV-DNA阴性组的47.35%(P=0.005)、31.86%(P=0.043)和46.02%(P=0.050)。CMV-DNA和IgM抗体双阳性患者中45%接受免疫抑制治疗,低于CMV-DNA阳性但IgM抗体阴性患者(68.57%,P=0.086),也低于CMV-DNA阴性但IgM抗体阳性患者(68.52%,P=0.064)。CMV-DNA和IgM抗体双阳性患者接受更昔洛韦治疗后91.67%出现好转,而CMV-DNA阳性但IgM抗体阴性患者的好转率仅为60%(P=0.067)。结论: CMV-IgM抗体检测受到年龄、性别、免疫状态等影响,不推荐对存在免疫抑制状态和年龄大于60岁的患者单独采用CMV-IgM抗体检测判断CMV感染;CMV-DNA和CMV-IgM抗体联合检测可能有助于预判患者的免疫状态和抗病毒治疗的结局转归。     

CMV感染病儿实时荧光定量PCR检测及意义

目的 探讨实时荧光定量PCR法检测病儿尿液中巨细胞病毒(CMV)-DNA含量在诊断和动态监测CMV感染中的意义.方法 应用PE 5700全自动PCR扩增分析仪,检测35例临床高度怀疑有CMV感染病儿(病儿组)尿液中的CMV-DNA拷贝数,随机选择45例同年龄段患非感染性疾病病儿作为对照组,比较两组CMV阳性标本中CMV-DNA含量,并测定治疗后的病毒载量.同时与血清CMV-IgM抗体检测结果进行比较.对部分病儿进行临床观察和随访.结果 病儿组CMV感染27例,阳性检出率为77.14%;对照组CMV感染12例,阳性检出率为26.67%.治疗后两组病儿尿液中CMV-DNA拷贝数下降幅度均较大,与治疗前比较, 差异有显著性(t=4.159、5.438,P<0.01).实时荧光定量PCR法CMV阳性检出率高于血清CMV-IgM检测方法.9 例病儿随访2年,1例胆管闭锁病儿手术后CMV病毒载量仍在较高水平,1年后发展为肝硬化;4例CMV 肝炎经治疗后, 1 例CMV-DNA转阴,3例仍阳性;4例无症状性感染病儿CMV-DNA转阴或降至低水平.结论 实时荧光定量PCR技术检测CMV感染具有快捷、灵敏度高、特异度高等优点,量化结果便于对治疗过程进行连续监测,为病儿治疗和随访提供有效帮助.