5-氮杂-2’-脱氧胞苷联合古曲霉素A对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞增殖、凋亡及DLC-1基因表达的影响

本研究旨在探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-cdR）联合组蛋白去乙酰化抑制剂古曲霉素A（TsA）对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞的生物学活性及DLC-1基因表达调控的影响。5-Aza-cdR及TsA单独或联合作用于RPMI8226细胞系,用CCK-8法检测细胞增殖活性,实时定量PCR（RT-PCR）检测药物作用后DLC-1基因表达情况,EusA检测药物作用后RhoA及Racl蛋白表达水平。结果表明,5-Aza-cdR及TsA对多发性骨髓瘤细胞具有明显生长抑制作用并呈剂量依赖性（P〈0．05）;与5-Aza-cdR及TSA单药组比较,联合用药组对细胞的抑制作用更强,细胞凋亡率明显升高（P〈0．05）;对照组RPMI8226细胞DLC-1基因微弱表达,5-Aza-cdR组DLC-1基因表达增强,且呈剂量依赖性重新表达（P〈0．05）,TsA虽不能诱导基因重新表达,但两药联合应用时可明显增强细胞DLC-1基因的表达;实验组与对照组多发性骨髓瘤细胞相比,rhoA及Racl蛋白表达明显下降（P〈0．05）。结论：5-Aza-cdR及TsA能有效的逆转RPMI8226细胞DLC-1基因的表达,并明显增强对多发性骨髓瘤细胞的生长抑制及促凋亡作用。这种抑制作用可能与其抑制Rh0／R0cK信号途径有关。     

5-氮-2’-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45a表达及细胞凋亡的影响

目的探讨去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Oadd45a表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养A431细胞,采用10／μmol／L5-氮-2-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A43l细胞Gadd45amRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率。结果药物处理48h后,A431细胞Gadd450ttuRNA及蛋白表达均高于处理前（P〈0．05）;A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前（P〈0．05）。结论DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45a基因的表达,5-氮-2＇-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用。     

γ-干扰素协同5-杂氮-2’脱氧胞苷对神经母细胞瘤作用的基因表达谱研究

目的 运用基因芯片技术研究γ-干扰素（Interferon-γ, INF-γ）与5-杂氮-2’脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycitydine, 5-aza-2dC）协同作用后神经母细胞瘤（neuroblastoma, NB）细胞株SH-SY5Y（SY5Y）基因表达谱的变化,探讨其协同作用的效果及其分子机制。方法 100ng/ml INF-γ与5μmol/L 5-aza-2dC联合作用于SH-SY5Y细胞5d后,提取对照组和实验组总RNA,合成cRNA并分别用cy3和cy5标记,与Agilent Human 1B寡核苷酸基因芯片杂交,研究基因表达谱的变化。结果 INF-γ与5-aza-2dC共同处理SH-SY5Y细胞后共有234个基因表达发生变化,与对照组SH-SY5Y细胞比较,表达上调的基因有218个,表达下调的有16个。差异基因的功能主要涉及细胞凋亡通路,细胞周期、细胞信号转导,转录活化因子通路、免疫防御功能相关、细胞增殖及分化等。采用RT-PCR技术验证了STAT1,BCL6,SOCS3,CCNE2四个基因表达的变化,Western-Blot检测caspase-8蛋白处理前后表达量的变化。 结论 INF-γ与5-aza-2dC联合处理SH-SY5Y细胞后,影响了细胞内一系列基因的表达,在体外对NB细胞的分化、凋亡和生长抑制能产生明显的协同作用,为其联合应用于临床提供了理论依据和指导。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷联合紫杉醇对中分化胃腺癌细胞株SGC-7901的作用

目的：探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）联合紫杉醇对中分化胃腺癌细胞SGC-7901作用,及对抑癌基因PTEN和E—cadherin（E—cad）表达的影响。方法：应用MTT、流式细胞术、RT-PCR方法检测5-Aza-CdR和紫杉醇单用和联用后对细胞的增殖抑制、周期分布、凋亡率．以及对抑癌基因PTEN和E—cad mRNA表达的改变。结果：紫杉醇和5-Aza—CdR可抑制胃腺癌细胞的生长,呈浓度依赖性。联合作用后,协同效应明显。紫杉醇可以使细胞阻滞在G2／M期．而5-Aza—CdR可以使细胞阻滞在S期,联合作用后,细胞同时阻滞在S和G2／M周期,凋亡率也增加。紫杉醇对抑癌基因PTEN,E—cad mRNA的表达与对照组相比差异无显著性,5-Aza—CdR可使其重新表达,两药联合作用后．PTEN和E—cad的表达量增多。结论：5-Aza—CdR可增强紫杉醇对胃癌细胞的增殖抑制作用;5-Aza-CdR可以使胃癌细胞阻滞在S期．而紫杉醇使细胞阻滞在G2／M期．两药联合应用后．胃癌细胞在这两个周期的分布以及凋亡率都明显高于单药的应用;5-Aza-CdR可以使胃癌细胞中的抑癌基因PTEN mRNA和E—cad mRNA重新表达。而紫杉醇则不能．但能促进5-Aza—CdR对抑癌基因的重新表达作用。     

5-氮-2'-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响.方法 体外培养A431细胞,采用10 μmol/L 5-氮-2’-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48 h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A431细胞Gadd45α mRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率.结果 药物处理48 h后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达均高于处理前(P＜0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前(P＜0.05).结论 DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45α基因的表达,5-氮-2’-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用.     

5-杂氮脱氧胞苷对人膀胱癌细胞株T24增殖作用的影响

目的:探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-dc)对人膀胱癌细胞株T24增殖、凋亡的影响.方法:应用不同浓度(0.1、0.5、2.5、12.5μmol/L)的特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dc,于不同作用时间(6、12、24、48 h)处理人膀胱癌细胞株T24,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度的5-aza-dc在不同时间作用下T24细胞株的生长抑制率:采用流式细胞仪检测不同浓度的5-aza-dc在处理T24细胞24 h后的凋亡率变化情况.结果:MTT提示各浓度的5-aza-dc对细胞生长均有抑制作用.流式细胞分析结果示,不同浓度5-aza-dc处理24 h后T24细胞凋亡率均明显增加.不同药物浓度组在同一作用时间下,T24细胞生长抑制率及凋亡率的差异有统计学意义(P<0.01);同一药物浓度在不同作用时间组之间的细胞生长抑制率差异也有统计学意义(P<0.01),且浓度为12.5 μmol/L的5-aza-dc作用24 h时对T24细胞的生长抑制及凋亡作用最明显.结论:5-aza-dc有抑制人膀胱癌细胞株T24生长及促进其凋亡的作用,其抑制作用呈时间依赖性及浓度依赖性.     

5-杂氮脱氧胞苷去甲基化作用对白血病细胞株HL-60中SHP-1和C-kit基因表达的影响

本研究旨在探讨SHP-1及C-kit基因在急性白血病HL-60细胞中的表达情况及5-杂氮脱氧胞苷（5-azaCdR）去甲基化作用对SHP-1及C-kit表达的影响。用RT-PCR方法检测药物处理组HL-60细胞与对照组SHP-1、C-kit基因的mRNA的表达水平。用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测HL-60细胞中SHP-1、C-kit基因的甲基化状态改变。结果表明,在原本不表达SHP-1 mRNA的HL-60细胞中,经过5-aza-CdR的去甲基化作用后,SHP-1可以重新表达,而使原来高表达的C-kit mRNA水平下降。当0.5、1、2μmol/L 5-aza-CdR分别作用于白血病细胞株时,去甲基化作用增强,SHP-1 mRNA的表达水平呈上升趋势,C-kit mRNA的表达水平呈下降趋势,两两比较表明差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：HL-60细胞株中SHP-1 mRNA表达缺如,经去甲基化作用后表达恢复,说明SHP-1基因高度甲基化与白血病发生有关;白血病形成中可能存在C-kit mRNA表达的异常增高。5-aza-CdR对SHP-1与C-kit的表达水平的影响呈剂量依赖性,浓度越高,SHP-1平均表达水平越高,C-kit mRNA表达水平越低,在特定的一个浓度下,呈现时间依赖性。SHP-1 mRNA与C-kit mRNA表达呈负相关,提示白血病细胞中SHP-1表达的降低或缺如消弱了对C-kit信号通路的负调控而在白血病形成中发挥作用。     

5-氮杂-2＇-脱氧胞苷对人红白血病K562细胞系生物学活性及DNA结合抑制因子4基因表达的影响

本研究探讨5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人慢性髓系白血病（CML）急红变细胞系K562细胞生物学活性和DNA结合抑制因子4（ID4）基因表达的影响,探寻白血病基因治疗的新靶点。应用甲基化特异性PCR方法检测K562细胞中ID4基因甲基化情况;实时荧光定量PCR检测5-Aza-CdR处理K562细胞后ID4 mRNA的表达水平;流式细胞术分析5-Aza-CdR处理后细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果表明,K562细胞中存在ID4基因的甲基化;5-Aza-CdR处理后K562细胞ID4 mRNA表达增加,并具有浓度依赖性,不同浓度药物处理组之间差异具有统计学意义（p〈0.01）。5-Aza-CdR可使K562细胞凋亡率增加,并且作用呈时间剂量依赖性。且细胞凋亡率与ID4 mRNA的相对表达水平呈高度相关（r=0.95）。5-Aza-CdR处理K562细胞48小时后,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期。结论：甲基化转移酶抑制剂5-Aza-CdR能促使CML急红变细胞系K562细胞中沉默的ID4基因重新表达,可能进而参与K562细胞凋亡和细胞周期阻滞的调控。     

5-杂氮脱氧胞苷预处理致敏百草枯对PC12细胞的毒性效应

目的探讨DNA甲基化调控在多巴胺能神经元易感性变化中的作用。方法应用DNA甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5’-aza-dC)对PC12细胞进行预处理24 h,然后给予百草枯作用12 h,光学显微镜观察细胞形态,采用MTT法、台盼蓝染色法定量检测各实验组中细胞存活情况。结果与百草枯单独处理组相比较,5’-aza-dC对PC12细胞进行预处理后再给予百草枯作用,细胞形态发生明显损伤性变化,细胞活力下降至(61±7.4)%,死亡细胞增加至(55±9.0)%(P<0.05)。结论抑制PC12多巴胺能神经元的DNA甲基化促进百草枯的损伤效应。     

5′-杂氮-2′-脱氧胞苷对高危组骨髓增生异常综合征细胞作用的体外研究

本研究探讨 5′ 杂氮 2′ 脱氧胞苷 (5 aza 2′ deoxycytidine ,5 Aza CdR ,Decitabine)对高危组骨髓增生异常综合征 (MDS)细胞体外作用的机制。以人MDS RAEB细胞株MUTZ 1细胞为研究对象 ,采用细胞培养技术、MTT增殖抑制实验测定细胞存活率及抑制率 ;用细胞形态学、流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸 (PS)转位及细胞凋亡 ;用RT PCR检测 p15INK4B基因、甲基转移酶 (DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表达 ;用甲基化特异PCR(MSP)方法检测 p15INK4B基因甲基化程度。结果表明 :5 Aza CdR对MUTZ 1细胞有生长抑制作用 ;作用后的细胞显示凋亡细胞的特征性改变。p15INK4B基因甲基化程度随 5 Aza CdR剂量增加而减弱 ,伴随 p15INK4B基因mRNA表达增加。经 3.2mmol/L 5 Aza CdR作用 4 8小时后 ,MUTZ 1细胞DNMT3A mRNA表达水平较未加药组明显下降 (灰度比为 0 .385∶0 .6 5 4 ,P <0 .0 5 ) ,DNMT1、DNMT3B mRNA表达水平与未加药组相比无明显改变。结论 :在 0 .4 - 6 .4mmol/L浓度范围 5 Aza CdR通过诱导MUTZ 1细胞凋亡而抑制该细胞生长 ,这可能是其抗肿瘤的主要机制之一。 5 Aza CdR可能通过下调DNMT3A mRNA表达使p15INK4B基因甲基化程度下降 ,从而恢复其表达。     

5-杂氮-2'-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响

目的:探讨5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响及可能的机制.方法:将MCF-7细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR,SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测两组细胞的CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)的mRNA表达与启动子区甲基化状况.然后分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射到BALB/c nu/nu裸鼠体内,5周后,用荧光定量RT-PCR(fluorescent quantitative RT-PCR,FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT mRNA丰度.结果:处理组CXCR4 mRNA表达明显上调(P＜0.05),5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化;两组BRMS1 mRNA表达无明显差异(P＞0.05),BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变.处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度高,转移癌组织较多.结论:5-Aza-CdR通过去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4的表达,从而增强了MCF-7细胞实验性肺转移能力.     

5-氮-2-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响

目的探讨去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养A431细胞,采用10μmol/L 5-氮-2-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A431细胞Gadd45αmRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率。结果药物处理48h后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达均高于处理前(P<0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前(P<0.05)。结论 DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45α基因的表达,5-氮-2-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷联合5-杂氮脱氧胞苷对K562细胞SHP-1、JAK3、TYK2基因表达的影响

本研究旨在探讨甲基化抑制剂三氧化二砷（As2O3）及5-杂氮脱氧胞苷（5-aza-CdR）对JAK-STAT信号转导通路中JAK家族成员JAK3、TYK2和造血细胞磷酸酶SHP-1在慢性髓系白血病细胞株K562中表达的影响及它们在白血病发病中的作用。K562细胞分为单药组、联合用药组及不加药物组（空白对照）。5-aza-CdR单用浓度为0．5、1、2μmol/L,As2O3单用浓度为1、2．5、5μmoL／L,As2O3 1μmol/L＋5-aza-CdR0．5μmol/L、As2O3 2．5μmoL／L＋5-aza-CdR1μmol/L。As2O3联合用药浓度为5μmol/L＋5-aza-CdR2μmol/L。对细胞分别处理24、48、72h后提取细胞总RNA,应用荧光实时定量PCR（Real-timequantitativepolymerasechainreaction,RQ-PCR）检测JAK3、TYK2及SHP-1的表达。结果表明,As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,SHP-1 mRNA在K562细胞中的表达呈剂量及时间依赖性升高,JAK3mRNA的表达呈剂量及时间依赖性降低,TYK2mRNA的表达呈剂量及时间依赖性降低,sHP-1与MK3、TYK2呈负相关,JAK3所受影响较TYK2更为显著。结论：As2O3 和5-aza-CdR单独及联合应用时,随着浓度增高和作用时间延长,SHP-1 表达上调,JAK3和TYK2表达下调,且两药有协同去甲基化作用;SHP-1基因可能通过抑制JAK／STAT通路发挥作用,以船所受影响较TYK2更为显著。在JAK／STAT通路中,JAK3可能发挥更为重要的作用。     

5-杂氮-2''-脱氧胞苷对宫颈癌细胞生长及其甲基化转移酶和甲基结合蛋白DNA转录的影响

目的:检测5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的宫颈癌HeLa细胞中DNA甲基化转移酶(DNMT)及甲基CpG结合蛋白(MeCP)的DNA转录水平的影响,探索其对肿瘤细胞生长的抑制作用.方法:5-Aza-CdR(终浓度为5.0umol·L-1)与肿瘤细胞共培养72 h后,用PI染色及流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞的细胞周期;利用qRT-PCR鉴定药物组与空白组细胞DNMT及MeCP的mRNA浓度.吖啶橙(AO)细胞荧光染色法鉴定药物组与空白组细胞形态学上的差异及凋亡的程度.结果:FCM检测结果显示两组肿瘤细胞的细胞周期呈现明显差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期阻滞,sub-G1峰明显.AO染色表明药物组细胞有明显凋亡迹象且伴随少量的细胞坏死现象.qRT-PCR结果显示,空白对照组和药物组中均有一定量DNMT及MeCP的mRNA产物,但其mRNA表达量无显著差异(P>0.05).结论:5-Aza-CdR能够诱导体外培养的HeLa肿瘤细胞凋亡,而对于肿瘤细胞中甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的DNA转录无显著的影响.     

5''''-杂氮-2''''-脱氧胞苷对高危组骨髓增生异常综合征细胞作用的体外研究

本研究探讨5'-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR,Decitabine)对高危组骨髓增生异常综合征(MDS)细胞体外作用的机制.以人MDS-RAEB细胞株MUTZ-1细胞为研究对象,采用细胞培养技术、MTT增殖抑制实验测定细胞存活率及抑制率;用细胞形态学、流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸(PS)转位及细胞凋亡;用RT-PCR检测p15INK4B基因、甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表;用甲基化特异PCR(MSP)方法检测p15INK4B基因甲基化程度.结果表明5-Aza-CdR对MUTZ-1细胞有生长抑制作用;作用后的细胞显示凋亡细胞的特征性改变.p15INK4B基因甲基化程度随5-Aza-CdR剂量增加而减弱,伴随p15INK4B基因mRNA表达增加.经3.2mmol/L 5-Aza-CdR作用48小时后,MUTZ-1细胞DNMT3AmRNA表达水平较未加药组明显下降(灰度比为0.3850.654,P＜0.05),DNMT1、DNMT3BmRNA表达水平与未药组相比无明显改变.结论在0.4-6.4 mmol/L浓度范围5-Aza-CdR通过诱导MUTZ-1细胞凋亡而抑制该细胞生长,这可能是其抗肿瘤的主要机制之一.5-Aza-CdR可能通过下调DNMT3AmRNA表达使p15INK4B基因甲基化程度下降,从而恢复其表达.     

5-氮-2’脱氧胞苷对人卵巢癌细胞RUNX3基因启动子区甲基化状态的影响

目的研究抑癌基因RUNX3启动子区在人卵巢癌细胞系（3AO、SKOV3）及正常卵巢细胞系（NOEC）中的甲基化状态,以及5-氮-2’脱氧胞苷（5-aza-2＇-deoxycytidine）对人卵巢癌细胞3AO及SKOV3增殖与凋亡及RUNX3mRNA表达的影响,探讨RUNX3基因甲基化与卵巢癌发生及发展的关系。方法用甲基化特异性PCR（MSP）法检测经特异性甲基转移酶抑制剂5-氮-2’脱氧胞苷处理前后卵巢癌细胞3AO、SKOV3以及NOEC中RUNX3基因启动子区的甲基化状态;并用0．5、5、50μmol／L 5-氮-2’脱氧胞苷处理人卵巢癌细胞株3AO及SKOV3共3d,继续常规培养5d后,采用四唑盐（MTT）比色观察细胞经药物处理前后的生长活性,以半定量RT-PCR检测细胞经药物处理前后抑癌基因RUNX3mRNA的表达,应用流式细胞仪进行细胞凋亡率的检测。结果正常卵巢细胞中未见RUNX3启动子甲基化,卵巢癌细胞3AO及SKOV3均发现RUNX3启动子甲基化现象;卵巢癌细胞3AO、SKOV3均可见RUNX3mRNA表达,但与正常卵巢细胞比较表达较弱,经药物处理癌细胞后其RUNX3mRNA的表达较前明显增强,且其表达强度与5-氮-2’脱氧胞苷的浓度存在剂量依赖关系;与加药前比较,5-氮-2’脱氧胞苷在0．5、5、50μmol／L浓度时均能明显抑制肿瘤细胞生长,随5-氮-2’脱氧胞苷浓度增加,细胞生长速率下降,加药前细胞凋亡率SKOV3为（2．71±0．81）％;3AO为（3．23±0．68）％,经5-氮-2’脱氧胞苷0．5、5、50μmol／L处理细胞后,细胞凋亡率SKOV3为（2．71±0．81）％、（15．43±1．33）％、（25．55±1．61）％;3AO为（10．66±2．09）％、（16．51±1．42）％、（25．46±1．55）％。与加药前比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）,且凋亡率与5-氮-2’脱氧胞苷浓度呈剂量依赖关系（F=138．7;142．3,均P〈0．05）。结论特异性甲基转移酶抑制剂5-氮-2’脱氧胞苷可逆转、恢复并增强人卵巢癌细胞系3AO及SKOV3中RUNX3基因表达,抑制癌细胞生长及诱导部分癌细胞凋亡。     

干扰素α-2b对HL-60细胞抑增殖与促凋亡的影响

为了研究干扰素α-2b （IFNα-2b）对HL-60细胞增殖与凋亡的影响，采用瑞氏染色观察HL-60细胞的形态变化．吖啶橙／溴化乙锭双染色观察细胞凋亡，通过CDl3测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化，MTT实验观察增殖活性。结果显示：加入IFNα-2b 48小时后，HL-60细胞凋亡率升高，增殖活性下降，而且随着IFNα-2b浓度的升高，抑制作用更加明显。CD13表达逐渐下降，细胞形态逐渐向成熟转化。结论：IFNα-2b能促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟。     

吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达的影响及其诱导细胞凋亡作用

本研究探讨吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达及细胞凋亡的影响及吉西他滨应用于白血病治疗的可行性。体外培养人白血病细胞系HL-60细胞,以不同浓度吉西他滨作用于HL-60细胞,用RT-PCR方法检测细胞c-myc mRNA表达的变化;以Western blot方法检测细胞C-MYC蛋白表达水平;原位酶标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡情况。结果表明,1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞12、24、36、48小时后,不同程度地抑制HL-60细胞c-myc mRNA的表达,并具有时间依赖性,其最适作用时间为24小时,与阿糖胞苷(Ara-C)组及空白对照组比较,抑制作用差异有统计学意义(p0.05)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24、48、72小时后,C-MYC蛋白表达水平明显下降,于48小时抑制作用最明显,抑制率为94.16%,方差分析显示,各时间点吉西他滨组与空白对照组和Ara-C组比较,差异均有统计学意义(p0.01);吉西他滨作用24小时组、48小时组及72小时组组间比较,也有显著性差异(p0.01)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24小时后,出现明显的诱导细胞凋亡作用,阳性率83.67%,与空白对照组(阳性率3.00%)和Ara-C组(阳性率10.67%)比较差异均有统计学意义(p0.01)。结论:吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因及C-MYC蛋白表达有显著的抑制作用,能够诱导HL-60细胞凋亡,其抑制及诱导凋亡作用强于阿糖胞苷,提示吉西他滨可能作为白血病治疗的新选择。