补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ的影响

目的：研究CaMPKⅡ在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用,方法：通过液体闪烁仪测定γ-^32P-ATP参入反应底物的摩尔数,用来表示蛋白激酶的活性。结果：肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织中CaMPKⅡ显著升高,补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织升高的CaMPKⅡ活性具有下调作用。结论：下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ活性的改变,与肾阳虚的发病密切相关。补肾中药可通过调整下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ的活性而发挥作用。     

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调素mRNA表达的影响

目的：从分子水平探讨肾阳虚证的本质以及补肾中药的作用机理。方法：用醋酸可的松造成肾阳虚模型,以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）半定量法,测定肾阳虚大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴CaMmRNA的表达,以及补肾中药右归饮对其的影响。结果：肾阳虚大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高,垂体组织CaMmRNA水平没有显著变化,右归饮能够降低下丘脑组织CaMmRNA水平,但对肾上腺影响不显著。结论：下丘脑中CaMmRNA水平升高与肾阳虚证有关,下丘脑CaMmRNA水平的降低是补肾中药右归饮改善肾阳虚症状的作用机理之一。     

补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴、血淋巴细胞Ca2+和血清钙的影响

目的：研究细胞内Ca^2 信号在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用。方法：用流式细胞仪及钙荧光探针Flou-3/AM对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴，血淋巴细胞胞内Ca^2 ([Ca^2 ]i)和血清钙进行测定。结果：肾阳虚大鼠下丘脑和血淋巴细胞[Ca^2 ]i及血清钙显著升高，补肾中药能够显著抑制下丘脑，血淋巴细胞内[Ca^2 ]i和血清钙的升高，结论：肾阳虚时下丘脑，血淋巴细胞[Ca^2 ]i和血清钙的显著升高，导致Ca^2 信号的异常，使下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱，免疫功能低下，出现肾阳虚的症状，补肾中药可能通过调整下丘脑，血淋巴细胞[Ca^2 ]i及血清钙而起作用。     

补肾中药对雌性青春期大鼠垂体GnRH受体mRNA及其受体蛋白表达的影响

目的：观察补肾中药对垂体促性腺激素释放激素（GnRH)受体及其基因表达的影响,探讨补肾中药调整下丘脑－垂体－性腺轴功能的作用环节及作用机理。方法：将青春期大鼠分为对照组、滋阴泻火组和益肾填精组,采用免疫组织化学方法检测GnRH受体的蛋白表达水平,采用原位杂交组织化学方法检测GnRH受体mRNA表达水平。结果：给予滋阴泻火中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著下调,GnRH受体蛋白合成减少;而给予益肾填精中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著上调,GnRH受体蛋白合成增多。结论：不同补肾中药可通过改变垂体GnRH受体及其mRNA表达水平,调节下丘脑－垂体－性腺轴的功能。     

补肾益气中药对肾阳虚大鼠垂体-甲状腺超微结构的影响

目的探讨肾阳虚的本质及益气补肾中药的作用机理。方法以大剂量醋酸可的松造成大鼠肾阳虚模型,取其垂体、甲状腺制成超薄切片,进行电镜观察。结果１．肾阳虚大鼠垂体促甲状腺激素（ＴＳＨ）细胞、甲状腺滤泡上皮细胞出现内质网、高尔基体扩张,线粒体空化,细胞变形,核的形态改变等超微结构的损伤。２．益气补肾中药能够减轻肾阳虚大鼠垂体超微结构的损伤,但对甲状腺细胞超微结构损伤的保护作用甚微。结论肾阳虚大鼠垂体ＴＳＨ细胞、甲状腺细胞超微结构存在着不同程度的破坏,提示肾阳虚证与垂体－甲状腺轴功能密切相关,益气补肾中药可能通过减轻垂体的超微结构损伤,调节垂体－甲状腺轴的功能,而达到纠正肾阳虚证的效应。     

三类中药复方对侧脑室内注射IL-1大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应状态的影响

目的：探索补肾、健脾、活血三类中药复方对免疫因子引起下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴反应状态的不同影响。方法：采用侧脑室注射白细胞介素－1β（IL－1β），观察大鼠下丘脑单胺类神经递质、血浆促肾上腺皮质激系（ACTH）、皮质酮（CORT）的含量，建立下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴对免疫因子的反应状态，以此来观察三类中药对这一反应状态是否有不同的影响。结果：侧脑室内注射IL－1β能使下丘脑去甲肾上腺素（NE）含量明显下降；血浆ACTH、CORT浓度明显升高，与国外文献报道相似。补肾的右归饮能使因侧脑室注射IL－1β而降低的下丘脑NE含量进一步降低、能使升高的血浆ACTH、CORT含量进一步明显升高；健脾的四君子汤也有这一作用趋势；活血的桃红四物汤则无明显差异。结论：补肾中药能提高机体下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴对免疫因子的反应性或反应能力，活血中药则无这一作用。     

补肾中药对肾阳虚大鼠垂体—睾丸超微结构的影响

目的：探讨肾阳虚与正丘脑－垂体－睾丸轴功能的关系及补肾中药的调整作用。方法：以醋酸可的松造成肾阳虚大鼠模型,取其垂体、睾丸进行透射电镜样品制备和观察。结果：可的松致肾阳虚大鼠垂体促性腺激素分泌细胞内分质网、高尔基体严重扩张,线粒体空化,细胞核固缩。睾丸曲细精管生精上皮细胞血睾屏障扩张,细胞中出现许多大小不等的空泡。补肾中药能够改善垂体超微结构的损伤,但却不能改善睾丸超微结构的损伤,结论：补肾中药补肾温阳的作用与其对垂体促性腺激素分泌细胞超微结构损伤的改善有关。     

肝肾阴虚证大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的变化及中药对其调节作用

目的：探讨肝肾阴虚证大鼠下丘脑－垂体－甲状腺轴的变化及中药对其调节作用。方法;以激怒法制造大鼠肝肾阴虚模型,研究下丘脑－垂体－甲状腺轴（HPT）各项指标的变化。结果;肝肾阴虚模型大鼠下丘脑TRH增高,血清TSH、FT3、FT4水平均降低（P＜0．05）,而血清rT3浓度升高（P＜0．05）;运用滋补肝肾方能够减轻这种激怒应激反应,滋补肝肾方药组各指标与模型组比差异显著（P＜0．05）,与正常组比较无显著差异,而柴胡疏肝散无明显作用。结论：下丘脑－垂体－甲状腺轴的部分抑制是肝肾阴虚证形成的关键。     

肾阳虚大鼠下丘脑神经元型NOS mRNA表达及补肾药的调整作用

目的：研究补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑组织中NO/cAMP信号传导系统的影响。以探讨肾阳虚的发病机制。方法：用醋酸可的松肌肉注射法建立大鼠肾阳虚模型。采用放射免疫分析法测定cGMP含量,用反转录PCR半定量法测定nNOSmRNA水平,观察补肾药复方对肾阳虚大鼠血清NO水平及下丘脑组织中组分别增加175%和223%,下丘脑组织NOS活性升高,nNOS表达增强,血清和下丘脑组织cGMP水平升高。补肾药对上述指标有不同程度的下调。肾阳虚证时下丘脑NOS/cGMP信号传导系统作用增强,补肾药对其具有调整作用。结论：实验结果揭示NO/cAMP系统在肾阳虚证发病机制中起一定作用。这也为下丘脑在肾阳虚发病中的重要地位提供了理论依据。     

消疲怡神口服液对应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺—胸腺轴？…

目的：探讨消疲怡神口服液抗应激的作用机理。方法：观察了消疲怡神口服液对强制冷水游泳大鼠模型血清单胺类物质、肾上腺抗坏血酸和下丘脑垂体单胺类递质含量及胸腺指数的影响。结果：消疲怡神口服液可以拮抗应激所致血清多巴胺、５－羟色胺含量升高和肾上腺抗坏血酸含量降低,使降低的下丘脑垂体去甲肾上腺素、５－羟色胺含量回升,但对胸腺旨数无明显影响。结论：消疲怡神口服液的作用机制与其对机体下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴     

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞的影响

目的：探讨肾阳虚证的本质及补肾中药右归饮的作用机理。方法：以大剂量醋酸可的松造成大鼠肾阳虚模型,取其下丘脑进行扫描电镜观察。结果：1.肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞超微结构发生改变,细胞出现孔洞。2.右归饮能够逆转肾阳虚所致下丘脑正中隆起室管膜超微结构的改变。结论：肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞存在着超微结构的改变和损伤,右归饮对这种超微结构的改变和损伤具有逆转作用,说明肾阳虚证与下丘脑正中隆起室管膜细胞的结构和功能改变密切相关。     

补肾药对肾阳虚大鼠下丘脑组织蛋白激酶活性的影响

目的：研究蛋白激酶A和蛋白激酶C在肾阳虚发病中的作用及补肾药对其调整作用。方法：用长期大量糖皮质激素造成肾阳虚大鼠模型,用^32P—ATP参入反应底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性,用放免法测定cAMP,cGMP含量。结果：肾阳虚大鼠血浆中cAMP水平下降,cGMP水平升高,cAMP／cGMP比值降低,下丘脑组织中PKA和PKC活性在胞液和胞膜中的活性较正常组明显降低。补肾方药对PKA和PKC的活性均有不同程度的调整作用。结论：PKA和PKC可能参与了肾阳虚大鼠的发病机制,补肾方药可部分调整PKA和PKC的活性,从而改善肾阳虚症状。     

老年期肾阴阳虚损大鼠的线粒体能量代谢及其调控机制的研究

目的：观察老年期肾阴阳损大鼠的线粒体能量代谢变化及其调控机制。方法：将24月龄大鼠按掌温高低区分为老年“肾阴虚”（掌温高）、老年对照（常温）和老年“肾阳虚”（掌温低）三组,采用氧电极法和放免法等技术观察各组老年鼠肝线粒体呼吸功能、氧化酶活性、游离钙、MDA浓度、肝Na^ -K^ -ATP酶活性和血清FT3、FT4、T、下丘脑NE含量以及心率等变化。结果：老年“肾阳虚”鼠RCR、P／O、OPR、细胞色素C氧化酶、Na^ -K^ -ATP酶活性、线粒体游离钙和血清T、FT3、FT4及下丘脑NE含量均低于“肾阴虚”鼠,而“肾阳虚”组MDA含量却明显升高。结论：老年“肾阳虚”鼠线粒体能量代谢低下,氧化损伤加剧,可能与神经内分泌调控及线粒体微观失调有关。     

扶正固本胶囊对肾阳虚动物的影响

目的:研究扶正固本胶囊对大、小鼠肾阳虚模型的治疗作用。方法:采用雄性大、小鼠氢化可的松所致肾阳虚模型,将造模成功的大、小鼠随机分为模型组、阳性组和扶正固本胶囊低(2.5g/kg)、中(5g/kg)、高(10g/kg)剂量组,另设空白对照组。小鼠连续灌胃给药8d,大鼠连续灌胃给药21d,并在相应的时间称量动物的体重,测量低温游泳存活时间,取出肾上腺、胸腺、脾脏、包皮腺、睾丸、前列腺和精液囊,称湿重,进行统计分析。结果:扶正固本胶囊内服给药,在2.5g/kg,5g/kg的剂量可显著延长肾阳虚小鼠冰水游泳的时间,在5g/kg,10g/kg的剂量可显著延长肾阳虚大鼠冰水游泳的时间,且10g/kg剂量对肾阳虚大、小鼠肾上腺、脾脏萎缩有显著改善作用;对肾阳虚大、小鼠的胸腺指数和性器官无明显影响。结论:扶正固本胶囊对氢化可的松所致的大、小鼠肾阳虚模型有明显的治疗作用。     

张建平治疗下肢动脉硬化闭塞症

张建平主任认为下肢动脉硬化闭塞症病因主要为外感风寒,寒凝血瘀,脾肾阳虚,病机为虚实夹杂,以邪风和瘀血为标,脾肾阳虚为本。治则为标本兼顾,扶正祛邪,治疗方法为祛风散寒、活血化瘀、养阴补血、温阳通络。将归经理论作为治疗的基本理论,运用引经药、虫类药及风药,妙用神曲、三七粉,神曲,淫羊藿。     

膝骨关节炎肾阳虚动物模型的建立与评价

目的:建立和评价膝骨关节炎(KOA)肾阳虚大鼠模型。方法:24只大鼠随机分成正常组、KOA组、KOA去势组、KOA腺嘌呤组,每组6只。Hulth法建立KOA模型,去势法与腺嘌呤灌胃建立肾阳虚模型。通过Mankin’s和OARSI评分评价KOA模型;通过肾阳虚症状体征评价表及甲状腺轴、性腺轴、肾上腺轴激素水平等评价肾阳虚模型。结果:KOA组、KOA去势组、KOA腺嘌呤组均符合KOA病理表现,OARSI分级分别为2级、3级和4级。与其余3组比较,KOA腺嘌呤组肾阳虚症状体征积分最高(P<0.01,P<0.05),体质量增长最少(P<0.05),肛温最低(P<0.05),T3、T4、FSH、LH、T水平最低(P<0.05),E2水平最高(P<0.05);各组间CORT水平差异无统计学意义。结论:相较于Hulth+去势法,Hulth+腺嘌呤灌胃是构建KOA肾阳虚病证结合模型的更适宜方法。     

慢性再生障碍性贫血患者内分泌激素及其受体中医证型的分布特点

目的：观察慢性再生障碍性贫血（chronicaplasticanemia,CAA）肾阳虚和肾阴虚患者外周血单个核细胞的雄激素受体（androgenreceptor,AR）、糖皮质激素受体（glucocorticoidreceptor,GR）水平及相关内分泌激素与正常人群之间是否存在差异;并探讨CAA患者中医证型与上述指标的相关性。方法：（1）采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测CAA肾阳虚和肾阴虚患者治疗前AR和GR水平及肾阳虚患者治疗后3个月和6个月的AR和GR水平;（2）应用化学发光免疫法及放射免疫法检测CAA患者治疗前后外周血血浆中甲状腺激素类、性激素类及皮质醇、促肾上腺皮质激素等垂体-肾上腺轴激素水平。结果：（1）CAA肾阳虚和肾阴虚患者治疗前的AR、GR水平显著低于正常组（P〈0．01或P〈0．05）。CAA肾阳虚患者治疗前AR、GR表达水平显著低于肾阴虚患者（P〈0．05或P〈0．01）。肾阳虚患者治疗后3个月和6个月AR、GR表达水平均高于治疗前（P〈0．05）;（2）CAA患者FT3、FT4、睾酮水平较正常组均有下降（P〈0．01或P〈0．05）,经治疗后,有明显上升趋势,统计学无差异（P〉0．05）;肾阳虚患者FT4、皮质醇、睾酮水平显著低于肾阴虚患者（P〈0．05）。结论：检测CAA患者外周血AR、GR表达水平及相关内分泌激素等水平可能成为中医证型的客观依据,有利于动态监测病情及指导临床治疗。     

附子多糖的药理作用研究进展

附子是临床常用的有毒中药,具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛功效,用于亡阳虚脱及阳虚诸证,被誉为“百药之长”。附子多糖是其有效成分之一,研究发现附子多糖具有调节免疫、抗肿瘤、保护心肌细胞、降血脂等作用。     

从整体论到系统生物学进行肾虚和衰老的研究

中医学对世界医学的贡献之一就是整体观,我们从整体观出发研究了肾阳虚证与下丘脑－垂体－靶腺轴功能紊乱的联系;采用基因芯片技术研究老年大鼠（肾虚证）及中药干预后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（HPAT）轴的分子网络调控规律;通过基因芯片也揭示存在于老年大鼠下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨骼、肝脏、肾脏等与“肾”相关组织的神经－内分泌－免疫以及神经－内分泌－骨代谢两大基因网络路线,从而推进“证”的整体性研究。近年按照系统生物学的动态、干预、多层面整合的要求,在全基因组转录水平、代谢组和单个衰老相关信号通路3个不同层面揭示衰老在不同层面的共同规律;揭示出基因的时空关联随着衰老进程逐渐弱化;并且中药淫羊藿总黄酮能有效改善衰老在上述两方面的系统改变。因此从整体观到系统生物学的转变可能促进中医学进入现代生命科学领域。